Study on the Synthesis and Bioactivity of Thiosemicarbazones

酪氨酸酶（EC.1.14.18.1）是一种含铜的氧化还原酶，广泛存在于微生物、动植物以及人体内，能将酪氨酸转化成多巴醌，进而形成黑色素；过量的黑色素形成能产生色素沉着性疾病以及能使果蔬褐变，因此，研究酪氨酸酶抑制剂具有十分重要的意义。 本论文设计合成了7种缩氨基硫脲类化合物，并且研究了合成抑制剂对单酚酶和二酚酶的抑制作用机理。再以粗提的小鼠B16细胞的酪氨酸酶为研究对象，筛选该酶的抑制剂。以小鼠B16黑色素瘤细胞为研究对象，研究了合成的缩氨基硫脲类化合物对细胞增殖率、酪氨酸酶活性、黑色素含量以及酪氨酸酶、TRP-1、TRP-2蛋白的mRNA转录水平的影响。研究结果和内容如下： 采用乙醇与水...Tyrosinase (EC. 1. 14. 18. 1), a copper-containing redoxidase enzyme, is widely distributed in microorganisms, animals, plants and hunman beings. It is responsible for transforming of L-tyrosine to DOPAquinine, which can produce melanin in a series steps. The abnormal formation of melanin may bring out serious diseases in human beings and browning in fruits and vegetables, so, it’s of great intere...学位：理学硕士院系专业：生命科学学院生物学系_生物化学与分子生物学学号：2172006115223

缩氨基硫脲化合物的合成及对菜青虫酚氧化酶抑制作用研究

菜青虫是危害农作物的主要害虫,酚氧化酶在昆虫的生长发育过程中起着重要的调节作用,高效的酚氧化酶抑制剂对于发展新型"环境友好"杀虫剂有着重要的意义.设计合成了4种缩氨基硫脲类化合物,采用红外光谱、质谱和核磁共振谱对其进行结构鉴定,进一步研究了它们对菜青虫酚氧化酶的抑制作用,结果表明,4种化合物均有显著的抑制作用,其半抑制率IC50分别为2.88,0.93,3.60和0.22μmol/L,有可能进一步开发成为以酚氧化酶为靶点的新型生物农药.同时,为基于缩氨基硫脲母核的酚氧化酶抑制剂的设计提供了数据基础

变性剂对重组牛肠激酶活性的影响

肠激酶(EK,EC 3.4.21.9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-萘胺为底物,采用荧光跟踪法研究了变性剂盐酸胍、硫脲、尿素对重组牛肠激酶(rEK)活力的影响及抑制动力学.结果表明:盐酸胍、硫脲、尿素均对该酶的活性有较强的抑制作用,它们对该酶的半抑制浓度(IC50)分别为0.025,0.080和0.750 mol/L.研究的3种变性剂对该酶的抑制均显示可逆抑制机理;抑制类型也均为竞争性类型,测定它们对酶的抑制常数KI分别为0.015,0.060和0.553 mol/L

4-氨基苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用机理研究

报道了4-氨基苯甲酸(4-aminobenzoic acid)对蘑菇酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响和抑制效应.结果表明,4-氨基苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用.导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为0.35和0.30 mmol/L.4-氨基苯甲酸对单酚酶的迟滞时间有明显的延长效应,1.0 mmol/L可使单酚酶的迟滞时间从30.5 s延长到155.1 s,增加了4.4倍.4-氨基苯甲酸对二酚酶的抑制作用表现为混合型可逆抑制作用,抑制常数(KI和KIS)分别为0.259和1.46 mmol/L

Wheel-track combined transformable mobile robot

一种具有自适应能力的轮-履复合变形移动机器人,属于机器人研究和工程技术领域。包括控制箱、两个分别安装在控制箱1两侧的轮-履复合移动模块、安装在控制箱尾端的尾轮机构,所述的轮-履复合移动模块包括履带移动装置和置于履带移动装置外侧的运动轮装置,所述控制箱内对称设置有履带驱动装置,其输出轴伸出控制箱外,且其上设有第一齿轮,与履带移动装置上的第二齿轮配合连接。本实用新型既能以轮式运动模式在平坦硬路面运动,也能以履带式运动模式在粗糙、陡峭、崎岖的复杂地形上行走,能够以合理的运动模式在不同复杂地面高效地运动。其履带几何形状可根据所遇障碍物的形状及大小而进行自动调节,对复杂地面具有较强的自适应性

The Inhibition of Mushroom Tyrosinase by Glycolate

通讯作者:chenqx @xmu. edu. cn[中文文摘]在蘑菇酪氨酸酶抑制剂的筛选实验中,发现甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,可以导致酪氨酸酶的单酚酶活力和二酚酶活力下降,实验结果表明,甘醇酸抑制蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为29.74和1.80 mmol/L.对单酚酶活力的迟滞时间也有明显的延迟效应,30 mmol/L的甘醇酸可以使迟滞时间延长了250%.甘醇酸对二酚酶的抑制作用是可逆过程,抑制类型为混合型.通过动力学分析,测得甘醇酸对游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的抑制常数分别为0.72和5.05 mmol/L,通过研究甘醇酸对酪氨酸酶的抑制作用机理,为进一步研究设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定基础. [英文文摘]Tyrosinase(EC 1.14.18.1),a key enzyme for melanin-biosynthesis,is widely distributed in nature.It contains both monophenolase activity and diphenolase activity.In this paper,it is reported that glycolate can inhibit activity of mushroom tyrosinase,and glycolate evidently affects the lag time of the monophenolase.With the increase of concentration of glycolate,the lag time of the enzyme for oxidation of L-tyrosine greatly extended and the steady-state rate of monophenolase decreased.The inhibitory concentration leading to 50% activity lost(IC50) was estimated to be 29.74 mmol/L for monophenolase,and the concentration for diphenolsae was estimated to be 1.80 mmol/L.When the concentration reaches 30 mmol/L,the lag time is almost extended by 250%.The inhibition kinetics and mechanism of the diphenolase activity of the enzyme by glycolate also have been studied.The results showed that glycolate was a reversible inhibitor of mushroom tyrosinase.Lineweaver-Burk plots indicated that glycolate was a mixed type inhibitor,and its inhibition constants were KI=0.721 mmol/L,KIS=5.049 mmol/L respectively.Together these results provide a basis for the design and development of new inhibitors in the future.国家自然科学基金( 30570408 ) , 福建省科技项目 (2007N0051) ,化学生物学福建省重点实验室开发课题 基金资

Inhibition Effect of Protocatechuik Acid on Tyrosinase Acitivity and Melanin Content in Mouse Melanoma B16 Cell

酪氨酸酶是生物体内黑色素合成的关键酶,其抑制剂有着广泛的应用前景.从天然药物的有效成分中筛选安全的酶抑制剂具有重要意义.以小鼠黑色素瘤b16细胞为模型,研究了天然药物有效成分原儿茶酸对黑色素生成和酪氨酸酶活力的影响.实验结果显示:原儿茶酸可显著降低细胞的黑色素含量,浓度为10μMOl/l时使黑色素含量降低60%.进一步研究发现,原儿茶酸对小鼠黑色素瘤b16细胞粗提取和共培养体系中的酪氨酸酶均有较强的抑制作用.对粗提酪氨酸酶的活力半抑制浓度(IC50)约为160μMOl/l,与共培养体系中酪氨酸酶活力的抑制、抑制剂浓度和作用时间有关,10μMOl/l作用54H可使酪氨酸酶活力下降88%.本研究为原儿茶酸作为酪氨酸酶抑制剂的开发应用奠定了基础.Tyrosinase(EC 1.14.18.1)plays an important role in melanogenesis,thus tyrosinase inhibitors have multiple potential applications.Screening safe inhibitors from natural herbal medicines is of important significances.In this study,the inhibitory effect of protocatechuik acid,an activite ingredient of Chinese traditional Medicinces,on melanin content and tyrosinase activity from mouse melanoma cell(B16cell)were studied.The results showed that protocatechuik acid can decrease 60% of melanin content in mouse B16cell.Further research demonstrated that protocatechuik acid has significant inhibitory effect on crude tyrosinase from both mouse B16cell and co-culture system.It can significantly decrease tyrosinase activity.The IC50of protocatechuik acid on crude tyrosinase is about 160μmol/L.The inhibition effects were related with time of duration and concentration.The inhibition rate was about 88%after treated with 10μmol/L protocatechuik acid for 54h.The study provided a fundamental framework for the research and application of protocatechuik acid as tyrosinase inhibitor.国家自然科学基金项目(31071611); 福建省科技计划项目(2010N5013

Electrochemical Surface-Enhanced Raman Spectroscopy—Current Status and Perspective

通讯作者，Tel: (86-592)2186532， E-mail: bren@xmu．edu．cn[中文文摘]许多和能源、生命相关的过程都强烈依赖于电化学荷电界面的结构和性能.自从表面增强拉曼光谱效应发现后,就很快地被应用于电化学界面的原位研究,即从分子水平上深入表征各种表面(或界面)的结构和过程,如鉴别物种在表面的键合、构型和取向等.最近十年,纳米科技的飞速发展为SERS技术提供了丰富的基底以及检测和表征方法,从而推动了与纳米科学密切相关的电化学SERS领域令人瞩目的发展.本文系统介绍Au和Ag的SERS、过渡金属薄层SERS、纯过渡金属SERS、核壳结构SERS和已经可以应用于单晶表面研究的gap-modeSERS、TERS和SHINERS,其中穿插着介绍电化学SERS的历史发展、现状和存在的问题及其展望,为电化学SERS研究提供较为全面的详细的参考.[英文文摘]Electrochemical interface is a very important interface closely related to various energy and life processes. Surface-enhanced Raman scattering was widely used in electrochemistry soon after its discovery to understand the surface bonding,configuration,and orientation of the surface species. In recent 10 years,the fast development of nanoscience and nanotechnology has offered SERS with abundant substrates and characterization methods,which has allowed impressive development of electrochemical SERS. This articles will follow the time line to make systematically overview of SERS on Au and Ag， thin-layer transition-metal SERS，pure transition metal SERS，core-shell SERS and those methods for studying single crystal surfaces， including gap-mode SERS， TERS and SHINERS． Emphasis will be put on the history，present status and existing problems and perspectives of electrochemical SERS． We hope the present article will provide a comprehensive overview of the electrochemical SERS．国家自然科学基金(20825313和20827003); 科技部973项目(2009CB930703和2007CB935603)资

珠蛋白水解产物的二维液相色谱分析

本文以强阳离子交换色谱(SCX)作第一维，反相色谱(RP)作第二维，以一个10通阀直接连接两支色谱柱，构建正交的SCX／RP二维液相色谱系统，并以珠蛋白水解产物的分析对其加以评价。样品首先由第一维阳离子交换色谱(Hyperil SCX，100mm×4．6mmI．D．)在pH4．0的磷酸盐缓冲体系中以0．5mL／min的低流速洗脱分离，洗脱产物通过10通阀直接富集在反相分析柱(Hypersil BDS C18，250mm×4．6mmI．D．)顶端，切换10通阀后进一步进行反相分析。阳离子交换色谱采用不连续的逐步增加盐浓度的19步台阶梯度方式洗脱，切割转移样品组份后再进行第二维分析。二维液相色谱系统的分辨率、峰容量都得到提高，出峰数量达到690多个，系统峰容量达到5643。二维液相色谱系统均采用常规尺寸的色谱柱，可以处理大进样量的样品，对生物样品的制备纯化有一定的指导意义

L-半胱氨酸作为化妆品美白添加剂的作用机理

酪氨酸酶(EC 1.14.18.1)是黑色素形成的关键酶,其抑制剂的研究是当前美白添加剂研究的热点.研究了L-半胱氨酸(L-Cys)对蘑菇酪氨酸酶和小鼠B16黑色素瘤细胞粗提的酪氨酸酶的抑制效应,实验结果表明,L-Cys对2种来源的酪氨酸酶有较强的抑制作用,其半效抑制浓度分别为1.75,15μmol/L.对小鼠B16黑色素瘤细胞粗提的酪氨酸酶的抑制主要表现为显著延长酶促反应的迟滞时间,同时显著降低酶的活力.进一步对L-Cys在细胞毒性方面进行了研究,结果表明,在200μmol/L浓度下,L-Cys对小鼠黑素瘤细胞B16的生长未显示出明显影响,对细胞状态、代谢MTT的能力、细胞增殖率等均无影响,无明显细胞毒性,是一种有潜力的增白剂,为L-Cys作为美白添加剂提供了依据