Specific Quantification of S-Nitrosothiols

Stickstoffmonoxid (NO) ist als einer der bedeutendsten physiologischen Mediatoren an zahlreichen Regulationsvorgängen beteiligt. Während NO sehr rasch abgebaut wird, stellen die aus einer Reaktion von NO mit Thiolen im Organismus entstehenden S-Nitrosothiole stabilere Verbindungen dar. Nachdem S-Nitrosothiole zunächst als mögliche Transport- und Speicherformen des kurzlebigen NO angesehen wurden, kann die S-Nitrosierung von Proteinen eine posttranslationale Modifikation darstellen und intrazelluläre Signalwege beeinflussen. Zur Untersuchung dieser postulierten Abläufe ist letztendlich der analytische Nachweis der S-Nitrosierung von Proteinen notwendig, was üblicherweise mit Hilfe der sogenannten „Biotin-Switch“-Technik erfolgt. Hierbei werden die S-Nitrosothiole zum korrespondierenden Thiol reduziert, das im Weiteren mit einem Antikörper nachgewiesen wird. Diese Reduktion bestimmt die Spezifität und Sensitivität des Nachweises. Als Reagenz für diesen entscheidenden Schritt ist auschließlich Ascorbinsäure etabliert, obwohl hiermit nur suboptimale, nicht stöchiometrische Ausbeuten möglich sind. Im Rahmen dieser Arbeit wird gezeigt, dass der Raketentreibstoff Methylhydrazin als spezifisches und effektives Reduktionsmittel für die Reduktion von S-Nitrosothiolen eingesetzt werden kann. Die Reaktion generiert ausschließlich die korrespondierende Thiol-Funktion, ohne unspezifisch andere Verbindungen, wie insbesondere Disulfide, zu reduzieren. Die Ergebnisse konnten mit niedermolekularen S-Nitrosothiolen wie auch mit S-nitrosierten Proteinen bestätigt werden; es war möglich, durch Optimierung der Reaktionsbedingungen eine hohe Reaktionsausbeute (>90%) zu erzielen. Der zugrunde liegende chemische Reaktionsmechanismus wurde aufgeklärt. Durch ein angepasstes Färbeprotokoll mit Einsatz des neuen Reduktionsmittels konnte erstmals fluoreszenzmikroskopisch ein Signal für native S-Nitrosothiole auf histologischen Schnitte nachgewiesen werden. Schließlich gelang es, in der „Biotin-Switch“-Technik die Überlegenheit von Methylhydrazin zu demonstrieren.Reduction of S-nitrosothiols to the corresponding thiol function is the key step in analyzing S-nitrosocysteinyl residues in proteins. Though it has been shown to give low yields, ascorbate-dependent reduction is commonly performed in the frequently used biotin-switch technique. We demonstrate that the compound methylhydrazine can act as a specific and efficient reducing agent for S-nitrosothiols. The corresponding thiol function is exclusively generated from low molecular weight and proteinaceous S-nitrosothiols while methylhydrazine failed to reduce disulfides. It was possible to optimize the experimental conditions so that thiol autoxidation is excluded, and high reaction yields (>90%) are obtained for the thiol function. The biotin-switch technique performed with methylhydrazine-dependent reduction shows remarkably improved sensitivity compared to the ascorbate-dependent procedure

Ökonomische Analyse des Europäischen Emissionshandels als Teil globaler Klimapolitik

Ein Handel mit verbrieften Verschmutzungsrechten gilt als treffsicher, als kosteneffizient und darüber hinaus als geeignet, umwelttechnischen Fortschritt zu induzieren. Das Europäische Emissionshandelssystem weist einige Besonderheiten auf, welche zu Wirkungsbrüchen führen können, die dessen Funktionsweise und damit auch dessen positive Beurteilung beeinflussen können. In der vorliegenden Arbeit geht es um eine Analyse der Teilmengenproblematik, möglicher Lösungsansätze und dem Umgang mit dieser Teilmengenproblematik in der institutionellen Ausgestaltung des Europäischen Emissionshandelssystems. Hierzu wird die existierende Literatur in Hinblick auf ökonomische Bewertungskriterien strukturiert, mögliche Lösungsansätze analysiert sowie potenzielle trade offs zwischen verschiedenen Zielen aufgezeigt. Ferner werden zentrale mit der Teilmengenproblematik in Verbindung stehende theoretische Analysen auf die aktuelle Ausgestaltung des Europäischen Emissionshandelssystems angewendet

Pathogenic and targetable genetic alterations in 70 urachal adenocarcinomas

Urachal cancer (UrC) is a rare but aggressive malignancy often diagnosed in advanced stages requiring systemic treatment. Although cytotoxic chemotherapy is of limited effectiveness, prospective clinical studies can hardly be conducted. Targeted therapeutic treatment approaches and potentially immunotherapy based on a biological rationale may provide an alternative strategy. We therefore subjected 70 urachal adenocarcinomas to targeted next-generation sequencing, conducted in situ and immunohistochemical analyses (including PD-L1 and DNA mismatch repair proteins (MMR)) and evaluated the microsatellite instability (MSI) status. The analytical findings were correlated with clinicopathological and outcome data and Kaplan-Meier and univariable/multivariable Cox regression analyses were performed. The patients had a mean age of 50 years, 66% were male and a 5-year overall survival (OS) of 58% and recurrence-free survival (RFS) of 45% was detected. Sequence variations were observed in TP53 (66%), KRAS (21%), BRAF (4%), PIK3CA (4%), FGFR1 (1%), MET (1%), NRAS (1%), and PDGFRA (1%). Gene amplifications were found in EGFR (5%), ERBB2 (2%), and MET (2%). We detected no evidence of MMR-deficiency (MMR-d)/MSI-high (MSI-h), whereas 10 of 63 cases (16%) expressed PD-L1. Therefore, anti-PD-1/PD-L1 immunotherapy approaches might be tested in UrC. Importantly, we found aberrations in intracellular signal transduction pathways (RAS/RAF/PI3K) in 31% of UrCs with potential implications for anti-EGFR therapy. Less frequent potentially actionable genetic alterations were additionally detected in ERBB2 (HER2), MET, FGFR1, and PDGFRA. The molecular profile strengthens the notion that UrC is a distinct entity on the genomic level with closer resemblance to colorectal than to bladder cancer. This article is protected by copyright. All rights reserved

Zugang beruflich Qualifizierter zur Hochschule im Dritten Bildungsweg:Perspektiven für die Studienvorbereitung

Diese Arbeit beleuchtet den Dritten Bildungsweg aus verschiedenen Perspektiven: 1. Es wird ein Überblick über den aktuellen Forschungsstand zum Dritten Bildungsweg gegeben. 2. Die aktuelle Rechtslage sowie die Verwaltungsrealität (auf Basis einer qualitativen Studie) wird näher betrachtet. 3. Basierend auf der Evaluation des Modellprojekts „Dritter Bildungsweg“ der Hans-Böckler-Stiftung werden Perspektiven für die Studienvorbereitung im Dritten Bildungsweg aufgezeigt. Abschließend werden Implikationen für den hochschulpolitischen Diskurs zur Öffnung der Hochschulen für beruflich Qualifizierte sowie für die Durchführung studienvorbereitender Programme im Dritten Bildungsweg diskutiert

The Tolerability and Effectiveness of Marine-Based Ingredients in Cosmetics: A Split-Face Clinical Study of a Serum Spray Containing <i>Fucus vesiculosus</i> Extract, <i>Ulva lactuca</i> Extract, and Ectoin

Introduction: Marine-derived compounds, such as seaweed extracts, fucoidan and ulvans, and ectoin, have gained attention in recent years due to their unique structural and functional characteristics, which make them attractive ingredients for skincare products. In this study, we developed a serum spray based on fucoidan, Ulva lactuca extract, and ectoin and evaluated its efficacy on facial skin. Materials and Methods: A split-face design dermatological evaluation of the serum spray was conducted on 33 subjects with visible signs of skin aging, with 29 subjects completing the study according to its protocol. The subjects had a mean age of 50 years and 16 had sensitive skin. The instrumental efficacy and subjective efficacy of the spray were measured on facial skin by evaluating the trans-epidermal water loss (TEWL), skin pH, skin roughness/wrinkle reduction, and skin hydration at baseline, 20 min after its application and 28 days after its continuous use. Results: We found that the application of the serum spray did not significantly affect the TEWL. The hydration in the area treated with Moisturizer + Spray was 17% higher than that in the area treated with Moisturizer alone after 20 min of application (p p p p p < 0.05). Conclusion: The results of this study suggest that the marine-derived compounds fucoidan, ulvans, and ectoin have hydrating and anti-wrinkle properties that make them effective ingredients for skincare products. The serum spray developed in this study was demonstrated to be safe and increase hydration, showing a reduction in wrinkles and maintenance of the skin barrier function after 28 days of its continuous use. Therefore, it could be a promising addition to skincare products for improving skin health

Beyond Satisfaction - Internal Service Barometer for measuring customer satisfaction

Background and aim - The objective and research question is to measure the satisfaction of internal customers with various real estate services in the context of the operational utilization phase. Methods / Methodology - Methodologically, the study is based on the context-related application and use of the structural equation model for measuring internal customer satisfaction. In this context, a questionnaire-based study was carried out at KPMG Germany with over 2,800 respondents and the respective satisfaction levels along various service lines were measured and evaluated. Results - The results suggest a significant and clear causal relationship between internal service quality and internal customer satisfaction. The service quality - regardless of the service line considered in the real estate service area - is also significantly responsible for the internal recommendation rate. The results are thus able to measure the internal customer satisfaction of CREM services in all companies and internal organizational units and to include it as an integral component in the description and measurement of added value. The potential uses in the future are complex and range from the creation of a benchmark to the use within the framework of service level agreements and the linking of internal and external customer satisfaction. Practical or social implications - The "internal" customer satisfaction is mostly a direct part of the target system of a CREM organization. Against this background, every CREM can use the basic structure of the model to measure, evaluate and optimize satisfaction - as a component of the CREM added value. Type of paper - Full research paper

Administration of Gemcitabine for Metastatic Adenocarcinoma during Pregnancy: A Case Report and Review of the Literature

Abstract We present the case of a 38-year-old woman diagnosed with metastatic adenocarcinoma of the biliary tract in the 18th week of pregnancy. Chemotherapy based on cisplatin and gemcitabine was administered, reaching disease stabilization until late-preterm delivery at 35 + 0 weeks of gestation. The infant was healthy and showed no malformations. Her head circumference was small, yet no neurological and behavioral defects have been detected. Development was normal during 14 months of follow-up. We discuss the implications of metastatic cancer in pregnancy with focus on therapeutic options for metastatic adenocarcinoma of the biliary tract. In this context, available data for the active regimens in biliary tract cancers—platinum compounds and gemcitabine—are discussed. This report is the fourth in the literature detailing the application of gemcitabine during pregnancy and the first presenting longer term follow-up, complementing available evidence that gemcitabine-based regimens are feasible in this situation