Classification of Inhibitors of Hepatic Organic Anion Transporting Polypeptides (OATPs): Influence of Protein Expression on Drug–Drug Interactions

ABSTRACT: The hepatic organic anion transporting poly-peptides (OATPs) influence the pharmacokinetics of several drug classes and are involved in many clinical drug−drug interactions. Predicting potential interactions with OATPs is, therefore, of value. Here, we developed in vitro and in silico models for identification and prediction of specific and general inhibitors of OATP1B1, OATP1B3, and OATP2B1. The maximal transport activity (MTA) of each OATP in human liver was predicted from transport kinetics and protein quantification. We then used MTA to predict the effects of a subset of inhibitors on atorvastatin uptake in vivo. Using a data set of 225 drug-like compounds, 91 OATP inhibitors were identified. In silico models indicated that lipophilicity and polar surface area are key molecular features of OATP inhibition. MTA predictions identified OATP1B1 and OATP1B3 as major determinants of atorvastatin uptake in vivo. The relative contributions to overall hepatic uptake varied with isoform specificities of the inhibitors

Arbetstagares lojalitetsplikt i modern tid - Särskilt med avseende på konkurrensförbud och och tystnadsplikt

En relativt omfattande del av arbetstagarens skyldigheter enligt anställningsavtalet är arbetstagarens lojalitetsplikt. Lojalitetsplikten är ett begrepp under vilket flera olika typer av regler brukar räknas, bland annat regler kring konkurrerande verksamhet, tystnadsplikt och bisysslor. Generellt sett har det uttalats att lojalitetsplikten är en skyldighet för arbetstagaren att sätta arbetsgivarens intresse framför sitt eget, samt att undvika situationer där han kan komma i pliktkollision. Skyldigheten är inte generellt reglerad i lag, även om vissa lagregler förekommer för speciella områden. Innebörden av denna framgår istället i första hand av rättspraxis och doktrin. Lojalitetsplikten har genom åren varit föremål för prövning i en rad olika mål och Arbetsdomstolen har vid flera tillfällen gett vägledning kring pliktens omfattning. Lojalitetsplikten uppkom emellertid ursprungligen under en tid då näringsliv och arbetsmarknad i mångt och mycket såg annorlunda ut än de gör idag och mot bakgrund av en annan syn på arbete. Under senare tid har näringslivet och arbetsmarknaden genomgått ett stort antal förändringar i takt med den ekonomiska, teknologiska och globala utvecklingen. Dessa förändringar har medfört att lojalitetsplikten med tiden kommit att prövas och till stor del kommit att utvecklas. Förändringarna har gjort sig starkt gällande i modernare lagstiftning, rättspraxis och kollektivavtal. Framför allt har förändringarna varit tydliga för reglerna kring konkurrensförbud och tystnadsplikt, som idag ställer särskilda krav på företags flexibilitet och effektivitet. Denna uppsats behandlar den moderne löntagarens lojalitetsplikt, med särskild fokus på områdena för konkurrensförbud och tystnadsplikt. Olika lösningar på dagens problem är av betydelse för detta arbete och även hur dagens lojalitetsplikt ser ut och fungerar praktiskt. En ambition med uppsatsen är att integrera senare tids förändringar i lagstiftning, rättspraxis och kollektivavtal med framställningen av lojalitetsplikten i övrigt

In vitro and in silico Predictions of Hepatic Transporter-Mediated Drug Clearance and Drug-Drug Interactions in vivo

The liver is the major detoxifying organ, clearing the blood from drugs and other xenobiotics. The extent of hepatic clearance (CL) determines drug exposure and hence, the efficacy and toxicity associated with exposure. Drug-drug interactions (DDIs) that alter the hepatic CL may cause more or less severe outcomes, such as adverse drug reactions. Accurate predictions of drug CL and DDI risk from in vitro data are therefore crucial in drug development. Liver CL depends on several factors including the activities of transporters involved in the hepatic uptake and efflux. The work in this thesis aimed at developing new in vitro and in silico methods to predict hepatic transporter-mediated CL and DDIs in vivo. Particular emphasis was placed on interactions involving the hepatic uptake transporters OATP1B1, OATP1B3, and OATP2B1. These transporters regulate the plasma concentration-time profiles of many drugs including statins. Inhibition of OATP-mediated transport by 225 structurally diverse drugs was investigated in vitro. Several novel inhibitors were identified. The data was used to develop in silico models that could predict OATP inhibitors from molecular structure. Models were developed for static and dynamic predictions of in vivo transporter-mediated drug CL and DDIs. These models rely on a combination of in vitro studies of transport function and mass spectrometry-based quantification of protein expression in the in vitro models and liver tissue. By providing estimations of transporter contributions to the overall hepatic uptake/efflux, the method is expected to improve predictions of transporter-mediated DDIs. Furthermore, proteins of importance for hepatic CL were quantified in liver tissue and isolated hepatocytes. The isolation of hepatocytes from liver tissue was found to be associated with oxidative stress and degradation of transporters and other proteins expressed in the plasma membrane. This has implications for the use of primary hepatocytes as an in vitro model of the liver. Nevertheless, by taking the altered transporter abundance into account using the method developed herein, transport function in hepatocyte experiments can be scaled to the in vivo situation. The concept of protein expression-dependent in vitro-in vivo extrapolations was illustrated using atorvastatin and pitavastatin as model drugs

In vitro and in silico Predictions of Hepatic Transporter-Mediated Drug Clearance and Drug-Drug Interactions in vivo

The liver is the major detoxifying organ, clearing the blood from drugs and other xenobiotics. The extent of hepatic clearance (CL) determines drug exposure and hence, the efficacy and toxicity associated with exposure. Drug-drug interactions (DDIs) that alter the hepatic CL may cause more or less severe outcomes, such as adverse drug reactions. Accurate predictions of drug CL and DDI risk from in vitro data are therefore crucial in drug development. Liver CL depends on several factors including the activities of transporters involved in the hepatic uptake and efflux. The work in this thesis aimed at developing new in vitro and in silico methods to predict hepatic transporter-mediated CL and DDIs in vivo. Particular emphasis was placed on interactions involving the hepatic uptake transporters OATP1B1, OATP1B3, and OATP2B1. These transporters regulate the plasma concentration-time profiles of many drugs including statins. Inhibition of OATP-mediated transport by 225 structurally diverse drugs was investigated in vitro. Several novel inhibitors were identified. The data was used to develop in silico models that could predict OATP inhibitors from molecular structure. Models were developed for static and dynamic predictions of in vivo transporter-mediated drug CL and DDIs. These models rely on a combination of in vitro studies of transport function and mass spectrometry-based quantification of protein expression in the in vitro models and liver tissue. By providing estimations of transporter contributions to the overall hepatic uptake/efflux, the method is expected to improve predictions of transporter-mediated DDIs. Furthermore, proteins of importance for hepatic CL were quantified in liver tissue and isolated hepatocytes. The isolation of hepatocytes from liver tissue was found to be associated with oxidative stress and degradation of transporters and other proteins expressed in the plasma membrane. This has implications for the use of primary hepatocytes as an in vitro model of the liver. Nevertheless, by taking the altered transporter abundance into account using the method developed herein, transport function in hepatocyte experiments can be scaled to the in vivo situation. The concept of protein expression-dependent in vitro-in vivo extrapolations was illustrated using atorvastatin and pitavastatin as model drugs

"Don´t expect me to know everything" : Multiparous women´s expectations of their forthcoming childbirth

Bakgrund: Det finns samband mellan den gravida kvinnans förväntningar inför förlossning och förlossningsupplevelsen. Trots tidigare förlossningserfarenhet tycks omföderskor förvånansvärt nog inte ha mer realistiska förväntningar inför förlossning än vad förstföderskor har. Syfte: Att synliggöra tvåföderskors förväntningar inför kommande förlossning. Metod: En kvalitativ metod med hermeneutisk textanalys inspirerad av Gadamer användes. Nio tvåföderskor i åldrarna 26-33 år intervjuades med hjälp av en halvstrukturerad intervjuguide. Resultat: De analyserade intervjutexterna mynnade ut i fyra huvudteman: Blandade känslor – förväntningar formas av första förlossningsupplevelsen, Partnern – en stöttepelare för vissa, Barnmorskan som vägledare genom förlossningen och ”Go with the flow” – förväntningar på kontroll under förlossning. I resultatet framgår att det finns en uppfattning hos kvinnorna om att den första förlossningsupplevelsen har stor inverkan på förväntningarna inför kommande förlossning, på gott och ont. Det finns en rädsla hos kvinnorna att det förväntas av dem att de på grund av sin tidigare förlossningserfarenhet redan ”kan”, vilket leder till oro. Konklusion: Tvåföderskorna har överlag positiva förväntningar inför sin kommande förlossning. Trots positiva förväntningar ges uttryck för en oro om att barnmorskan förväntar sig att de på grund av sin tidigare förlossningserfarenhet redan ”kan”. Tvåföderskor är således i behov av barnmorskans individuella och professionella stöd.Background: There is a connection between the pregnant woman's expectations of childbirth and the actual childbirth experience. Aim: To illustrate multiparous women’s expectations of their forthcoming childbirth. Method: This study used a qualitative method with hermeneutic text analysis inspired by Gadamer. Nine multiparous women aged 26-33 years were interviewed using a semi-structured interview guide. Results: Analysis of the interviews revealed four main themes: Mixed emotions – expectations are formed by the first childbirth experience, The partner – for some, an important source of support, The midwife as a guide through childbirth and “Go with the flow” - expectations of control during childbirth. Results showed that the women held the opinion that the first childbirth experience has a major impact on their expectations for future childbirth, both good and bad. There was a concern amongst the women that because of their previous childbirth experience, they would be expected to "know what to do". Conclusion: Women generally have positive expectations of childbirth. Given the concern of these multiparous women that they may be considered as experienced in childbirth, it is clear that the midwife should be prepared to offer professional support to multiparous women based on their individual needs

Beskattning av pokervinster efter Grebbestadsdomen

Beskattning av pokervinster har inte minst under 2011 varit ett ämne för många diskussioner i media. Vissa anser att det krävs stora inslag av skicklighet för att vara duktig på poker och att det inte borde anses vara ett lotteri. Denna skicklighetsaspekt var fall för prövning i HD under 2011 i den s.k. Grebbestadsdomen. Vissa ansåg att domen skulle direkt avgöra om pokervinster skulle komma att beskattas. Jag har i arbetet undersökt vilka aspekter som kan göra poker till ett skicklighetsspel. Grebbestadsdomen har jag gått igenom samt undersökt om några förändringar i skattebestämmelserna om pokervinster skett efter domen eller om några kommer att ske. Jag har även undersökt huruvida ett pokerproffs skulle kunna försörja sig på poker om poker skulle komma att beskattas som ett skicklighetsspel, alltså i inkomstslaget tjänst. Jag har även granskat SKV:s roll och inflytande inom beskattningsområdet samt om lagarna som finns angående beskattning av pokervinster är tillräckliga. För en i Sverige obegränsat skattskyldig person är pokervinster erhållna i Sverige och inom EES skattefria. Detta då både tolkningar av lotteriinspektionen och ställningstaganden av SKV anser poker vara ett kortspel som är ett lotteri enligt 3 § lotterilagen. Enligt 8 kap. 3 § första stycket IL är svenska lotterivinster skattefria medan utländska vinster är beskattningsbara enligt 42 kap. 25 § IL. Ett undantag finns i 8 kap. 3 § andra stycket IL som stadgar att lotterivinster från länder inom EES är skattefria. HD kom i Grebbestadsdomen fram till att poker i turneringsform inte är väsentligt beroende på slumpen i den mening som avses i 16 kap. 14 § BrB. Vidare menar de att cash games i sin spelform beror till väsentlig del på slumpen med hänvisning till att en spelare kan lämna bordet när som helst samt att nya inköp kan göras. Poker anses alltså, enligt HD, delvis vara ett skicklighetsspel beroende på spelform. Det går dock inte att ta bort det slumpmoment ur poker som utdelningen av korten utgör vilket enligt lotteriinspektionen innebär att poker inte kan ses som ett rent skicklighetsspel. Lotteriinspektionen anser alltså att poker skall vara fortsatt skattefritt och SKV kom med ett nytt ställningstagande efter domen 2011 där de förtydligade vissa aspekter angående internetpoker och menade även de att poker skall vara skattefritt. Inga förändringar har alltså skett på beskattningsområdet gällande pokervinster efter domen men om det skulle ske, hur skulle pokerspelandet påverkas i Sverige? Jag har givit exempel på beskattningssituationer som skulle uppstå för pokerproffs om deras vinster skulle beskattas i tjänst. Jag har gjort skattekalkyleringar i situationer där en spelare skulle spela poker genom ett AB respektive HB för att se hur pass mycket av vinsten som skulle försvinna i skatt och huruvida fortsatt spel är möjligt. Jag anser att fortsatt spel är möjligt även vid beskattning. Detta då avdrag är möjliga att göra för förluster samt resor, datorer osv. Dessutom skulle spelare få en social trygghet via socialavgifterna som de ej åtnjuter i nuläget. Jag har givit exempel där en spelare i ett HB är under 26 år gammal vid årets start. Den totala summan som denne spelare får betala i skatt är dryga 33 % av vinsten efter avdrag. Procentsatsen ökar om en spelare är 26 år eller äldre. Något som dock är troligt vid införd tjänstbeskattning är att ett flertal spelare troligen kommer flytta från Sverige. En hel del kommer förmodligen sluta eller trappa ner med pokern och skatteintäkterna kommer vara relativt små. Poker är inte som ett traditionellt lotteri i och med att det oftast spelas i flera omgångar samt att spelarna själva i viss mån bestämmer sina satsningar beroende på spelutvecklingen. Poker är heller inte, i de flesta fall, som ett traditionellt yrke där det finns någon garanterad lön utan en spelare måste satsa pengar för att kunna vinna pengar. SKV har tolkat beskattning av pokervinster i tre ställningstaganden som de publicerat på sin hemsida mellan 2005 och 2011. Lagarna som finns är inte tillräckligt specifika för att behandla beskattning av pokervinster så SKV har blivit en viktig myndighet i diskussionen om vilka bestämmelser som gäller. Detta då SKV:s ställningstaganden, som inte är några lagar utan allmänna råd, har tolkat skattereglerna som så att skattebetalarna har fått skattefrihet vilket inte har lett till något överklagande. På det viset står sig SKV:s tolkning då ingen hittills har överklagat att denne inte behöver betala någon skatt. SKV har bland annat tolkat vad ett spel innebär, att avdragsrätt borde finnas på pokervinster erhållna utanför EES och vad som gäller angående vinster över internet. Ett område där förtydligande verkligen krävs anser jag vara spel över internet. Jag har visat på svårigheter för spelare att veta var pokersajter har sin hemvist vilket betyder att det är svårt att veta huruvida vinster från olika sidor är skattefria eller inte. Något som klart pekar på att poker kommer att beskattas anser jag dock inte finnas då slumpmomentet spelar en så pass stor roll i spelet även om det enligt mig inte är övervägande.Taxation on poker winnings have not the least in 2011 been a topic of discussion in the media. Some believe that it requires significant element of skill to be good at poker and that it should not be considered a lottery. This skill aspect was tried in the Supreme Court in 2011 in the so-called Grebbestad verdict. Some felt that the appeal would directly determine whether poker profits would be taxed. I have in my thesis, examined the aspects that can make poker a skill game. Grebbestad verdict, I’ve gone through and examined whether any changes in tax rules on poker winnings have occurred after the decision or if any will. I have also investigated whether a poker professional could make a living off poker if poker would be taxed as a game of skill, thus, as income from services. I have also examined Tax Board’s role and influence in the area of taxation and if the laws that exist on taxation of poker winnings are sufficient. For one in Sweden unlimited taxable person, poker winnings obtained in Sweden and in the EEA is tax-free. That when interpretations from the Gaming Board and statements from the tax office believes poker to be a card game that is a lottery under the 3 § of the lotteries act. Under chapter 8 § 3 first paragraph of the Income Tax Act is Swedish lottery winnings tax-free while foreign winnings are taxable under chapter 42 § 25 of the Income Tax Act. An exception exists in chapter 8 § 3 second paragraph of the Income Tax Act which provides that lottery winnings from EEA countries are tax-free. In the Grebbestad verdict the Supreme Court came to the conclusion that poker tournaments are not significantly dependent on chance in the meaning of chapter 16 § 14 of the Penal Code. Furthermore, they claim that cash games in the form that it is played depends substantially on chance on the grounds that a player can leave the table at any time and that new purchases can be made. The Supreme Court means that poker is thus partly a game of skill, depending on the game. It is not possible to remove the element of chance from poker that the distribution of the cards is which according to the Gaming Board makes it impossible for poker to be seen as a pure game of skill. The Gaming Board therefore considers that poker is to remain tax-free and the tax office came with a new position after the decision in 2011 where they clarified some aspects concerning internet poker and they also meant that poker should be free of tax. No changes have occurred in the area of taxation applicable on poker winnings after the decision but if so were to happen, how would poker gambling be affected in Sweden? I have given examples of tax situations that would arise for the poker professionals if their winnings would be taxed. I have made tax calculations in situations where a player would play poker through corporation or partnership to see how much of the gain would be lost in tax and whether any further play is possible. I believe that further play is possible, even with tax. This is because the deductions for losses and travel, computers etc. are possible. In addition, players would receive social security through social security contributions as they are not enjoying at the moment. I have given examples where a player in a partnership is under 26 years old at the year start. The total amount of tax this player is to pay is just over 33 % of earnings after deductions. The percentage increases if a player is 26 years or older. Something that is likely if taxation is started is that many players will probably move from Sweden. Some players will probably slow down their play or totally stop playing and tax revenues will be relatively small. Poker is not like a traditional lottery cause it is usually played in several rounds and the players themselves, to some extent determines their bets depending on the game development. Poker is not, in most cases, as a traditional occupation because in poker there is no guaranteed salary and a player must wage money to win money. The Tax Office has interpreted the taxation of poker winnings in the three positions that they published on their website between 2005 and 2011. The laws that exist are not specific enough to address the taxation of poker winnings so the Tax Office has become a major authority in the discussion about what rules apply. This is because the Tax Office’s positions, which are not laws, but general counsel, has interpreted the tax rules so that taxpayers have received tax exemption which has not led to any appeal. In this way, the interpretations from the Tax Office stands since no one have appealed because he doesn’t have to pay taxes. The Tax Office has among other things; interpret what a game means, that deductions should be possible on poker winnings received from outside the EEA and what applies on profits over the internet. One area where clarification is really needed is about poker played over the internet. I have demonstrated the difficulties for players to know where the poker sites are located which means it is difficult to know whether the gains from the various poker sites are tax-free or not. I don’t see anything that clearly indicates that poker will be taxed because the element of chance plays such a major role in the game even though in my opinion the element of chance is not overwhelming

Förlossningsställningen som riskfaktor för sfinkterrupturer : En kvantitativ registerstudie

Perinealbristningar är vanligt förekommande i samband med förlossning. Studier har visat att svårare former av perinealbristningar, så kallade sfinkterrupturer, kan ge långvariga problem och påverka kvinnors livskvalitet negativt. Flertalet riskfaktorer för att drabbas av sfinkterrupturer har kartlagts i tidigare forskning. Evidensen kring förlossningsställningens samband med sfinkterrupturer är dock svårtolkad då flertalet studier nått olika resultat. Syftet med denna studie var därför att undersöka om förlossningsställningen kan vara en riskfaktor för uppkomsten av sfinkterrupturer. En journalgranskning från två förlossningsavdelningar i Stockholms län genomfördes och materialet analyserades med Pearsons chi-2-test samt binär logistisk regressionsanalys. En signifikant skillnad i förekomsten av sfinkterrupturer kunde påvisas i förlossningsställningen gynekologiskt läge (gyn). Dock kan riskfaktorerna att vara förstföderska samt att föda ett barn med en födelsevikt över 4000 gram ha påverkat resultatet. Detta bidrar till evidensen om att förlossningsställningen kan vara en riskfaktor för uppkomsten av sfinkterrupturer. Denna kunskap kan ge barnmorskan möjligheten att uppmuntra kvinnor att inta en förlossningsställning som inte påvisats ha en ökad risk för sfinkterrupturer och på så sätt kan kvinnans sexuella och reproduktiva hälsa främjas

Förlossningsställningen som riskfaktor för sfinkterrupturer : En kvantitativ registerstudie

Perinealbristningar är vanligt förekommande i samband med förlossning. Studier har visat att svårare former av perinealbristningar, så kallade sfinkterrupturer, kan ge långvariga problem och påverka kvinnors livskvalitet negativt. Flertalet riskfaktorer för att drabbas av sfinkterrupturer har kartlagts i tidigare forskning. Evidensen kring förlossningsställningens samband med sfinkterrupturer är dock svårtolkad då flertalet studier nått olika resultat. Syftet med denna studie var därför att undersöka om förlossningsställningen kan vara en riskfaktor för uppkomsten av sfinkterrupturer. En journalgranskning från två förlossningsavdelningar i Stockholms län genomfördes och materialet analyserades med Pearsons chi-2-test samt binär logistisk regressionsanalys. En signifikant skillnad i förekomsten av sfinkterrupturer kunde påvisas i förlossningsställningen gynekologiskt läge (gyn). Dock kan riskfaktorerna att vara förstföderska samt att föda ett barn med en födelsevikt över 4000 gram ha påverkat resultatet. Detta bidrar till evidensen om att förlossningsställningen kan vara en riskfaktor för uppkomsten av sfinkterrupturer. Denna kunskap kan ge barnmorskan möjligheten att uppmuntra kvinnor att inta en förlossningsställning som inte påvisats ha en ökad risk för sfinkterrupturer och på så sätt kan kvinnans sexuella och reproduktiva hälsa främjas