Inmunopatogenia de los granulomas producidos por micobacterias de interés veterinario en especies animales productoras de alimento

Tuberculosis (TB) and Paratuberculosis (PTB) in cattle, caused by Mycobacterium bovis and M. avium subsp paratuberculosis respectively, induce granulomatous inflammation in affected tissues. However, pathogenesis after natural infection remains unknown. The aim of this study was to evaluate the immune response profile developed after the infection by both agents. Samples from 5 cows with TB (2 from liver, 2 from lymph nodes and 1 from cerebellum) and 6 with PTB (ileum) were analysed. Tissues with TB lesions (except the cerebellum) were autolysed. Microscopic changes, presence of acid fast bacilli (AFB) and expression of IL10, βTGF, αTNF and γINF were evaluated by hematoxilin/eosin and Ziehl Nielsenn staining and by immunohistochemistry. The microscopic changes found were similar to those described for TB and PTB, and the autolysis grossly described was confirmed in the TB tissues. TB changes were multifocal granulomatous inflammation with necrosis. All animals with PTB showed diffuse granulomatous enteritis. Intracytoplasmic AFB were found in all tissues, scanty in TB cases and numerous in PTB animals. Immunostaining was negative for all cytokines in all TB samples, and strongly positive for all cytokines in the PTB cases. The lack of immunostaining in cases of TB could be originated by the low expression of the studied cytokines in this type of granuloma, or by the autolysis process which might affect the integrity of these molecules. The detection of high levels of cytokines with pro and anti-inflammatory effect in tissues with PTB changes confirm that pathogenesis of PTB development is hard to determine. The αTNF and γINF levels would explain the diffuse extension of lesions, and the levels of βTGF and IL10 could be related with the survival and proliferation of AFB within the macrophages. Further studies are necessary to determine the cytokine’s expression in TB and PTB affected tissues at different stages after infection.Mycobacterium bovis y M. avium subsp paratuberculosis son agentes causales de tuberculosis (TB) y paratuberculosis (PTB) en bovinos, las cuales afectan la producción animal y la salud pública. Aunque ambos producen inflamación granulomatosa, poco se conoce de su patogenia tras la infección natural debido al prolongado período de incubación. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el perfil de respuesta inmune desarrollado tras la infección natural por ambas micobacterias. Se analizaron muestras de 5 bovinos con lesiones de TB (2 de hígado, 2 de ganglio linfático y 1 de cerebelo) y 6 de animales con PTB (íleon). Los tejidos con TB (excepto el cerebelo) mostraron autolisis. Se evaluó la presencia de lesiones microscópicas y micobacterias mediante las coloraciones con hematoxilina, eosina, y de Ziehl Nielsen, y se determinó la expresión de las citoquinas IL10, βTGF, αTNF y γINF mediante inmunohistoquímica (IHQ). Las lesiones microscópicas observadas fueron similares a las descriptas para ambas enfermedades, con lo cual se confirmó la autolisis descripta en 4 casos de TB. Las lesiones de TB fueron granulomas multifocales con necrosis de tamaño variable. Por su parte, en los casos de PTB se detectó enteritis granulomatosa difusa. Se encontraron bacilos ácido-alcohol resistente (BAAR) en el citoplasma de macrófagos de los 11 animales, escasos en aquellos con TB y abundantes en los que padecían PTB. No se observó inmunomarcación para ninguna citoquina en ningún animal con lesiones de TB. Por el contrario, se evidenció marcación intensa frente a todas las citoquinas en los casos con PTB. Los resultados obtenidos indican que la técnica de IHQ empleada permite la detección de las citoquinas de interés. La ausencia de inmunotinción en los casos de TB podría relacionarse con una baja expresión de las citoquinas analizadas en este tipo de lesiones, como también con el proceso de autolisis observado, el cual afectaría la integridad de estos mediadores. La detección de citoquinas de efecto pro y antiinflamatorio en los animales con PTB confirman el desarrollo de un proceso inflamatorio complejo. La abundante expresión de αTNF y γINF explicaría la extensión de la lesión, mientras que la presencia de βTGF e IL10 podría relacionarse con la sobrevida y proliferación de los BAAR observados. Futuros estudios serán necesarios para determinar la diferente expresión de citoquinas en tejidos con lesiones de TB y PTB en diferente estadío de desarrollo

Evolución de la Patología Veterinaria en la Argentina

Etimológicamente, la patología (del griego pathos: enfermedad, logos: tratado, estudio), incluye el estudio y descripción de las enfermedades con sentido abarcativo. No obstante, el grado de especialización que comenzó en el Siglo XIX y se consolidó en el Siglo XX ha confinado a nuestra disciplina al estudio de los cambios estructurales y funcionales que permiten caracterizar la naturaleza esencial de las enfermedades. Si bien en principio podría pensarse que ese “achicamiento” temático facilitó las cosas, la realidad es bien distinta. Cada vez resulta más difícil la actualización en patología, o patobiología, como también se la denomina modernamente. Por un lado la biología celular y molecular aportan permanentemente datos insospechados y cada vez más complejos sobre las funciones normales y alteradas de células y tejidos; y por otro lado, el ejercicio de las distintas ramas de la medicina obliga a profundizar conocimientos y a buscar nuevas herramientas. Eso ha traído como lógica consecuencia el desarrollo de subdivisiones dentro de la disciplina: neuropatología, dermatopatología, patología de enfermedades infecciosas, inmunopatología, etc.Facultad de Ciencias VeterinariasAcademia Nacional de Agronomía y Veterinari

Evolución de la Patología Veterinaria en la Argentina

Etimológicamente, la patología (del griego pathos: enfermedad, logos: tratado, estudio), incluye el estudio y descripción de las enfermedades con sentido abarcativo. No obstante, el grado de especialización que comenzó en el Siglo XIX y se consolidó en el Siglo XX ha confinado a nuestra disciplina al estudio de los cambios estructurales y funcionales que permiten caracterizar la naturaleza esencial de las enfermedades. Si bien en principio podría pensarse que ese “achicamiento” temático facilitó las cosas, la realidad es bien distinta. Cada vez resulta más difícil la actualización en patología, o patobiología, como también se la denomina modernamente. Por un lado la biología celular y molecular aportan permanentemente datos insospechados y cada vez más complejos sobre las funciones normales y alteradas de células y tejidos; y por otro lado, el ejercicio de las distintas ramas de la medicina obliga a profundizar conocimientos y a buscar nuevas herramientas. Eso ha traído como lógica consecuencia el desarrollo de subdivisiones dentro de la disciplina: neuropatología, dermatopatología, patología de enfermedades infecciosas, inmunopatología, etc.Facultad de Ciencias VeterinariasAcademia Nacional de Agronomía y Veterinari

Protection induced by a glycoprotein E-deleted bovine herpesvirus type 1 marker strain used either as an inactivated or live attenuated vaccine in cattle

BACKGROUND: Bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) is the causative agent of respiratory and genital tract infections; causing a high economic loss in all continents. Use of marker vaccines in IBR eradication programs is widely accepted since it allows for protection of the animals against the disease while adding the possibility of differentiating vaccinated from infected animals.The aim of the present study was the development and evaluation of safety and efficacy of a glycoprotein E-deleted (gE-) BoHV-1 marker vaccine strain (BoHV-1ΔgEβgal) generated by homologous recombination, replacing the viral gE gene with the β-galactosidase (βgal) gene. RESULTS: In vitro growth kinetics of the BoHV-1ΔgEβgal virus was similar to BoHV-1 LA. The immune response triggered by the new recombinant strain in cattle was characterized both as live attenuated vaccine (LAV) and as an inactivated vaccine. BoHV-1ΔgEβgal was highly immunogenic in both formulations, inducing specific humoral and cellular immune responses. Antibody titers found in animals vaccinated with the inactivated vaccine based on BoHV-1ΔgEβgal was similar to the titers found for the control vaccine (BoHV-1 LA). In the same way, titers of inactivated vaccine groups were significantly higher than any of the LAV immunized groups, independently of the inoculation route (p < 0.001). Levels of IFN-γ were significantly higher (p < 0.001) in those animals that received the LAV compared to those that received the inactivated vaccine. BoHV-1ΔgEβgal exhibited an evident attenuation when administered as a LAV; no virus was detected in nasal secretions of vaccinated or sentinel animals during the post-vaccination period. BoHV-1ΔgEβgal, when used in either formulation, elicited an efficient immune response that protected animals against challenge with virulent wild-type BoHV-1. Also, the deletion of the gE gene served as an immunological marker to differentiate vaccinated animals from infected animals. All animals vaccinated with the BoHV-1ΔgE βgal strain were protected against disease after challenge and shed significantly less virus than control calves, regardless of the route and formulation they were inoculated. CONCLUSIONS: Based on its attenuation, immunogenicity and protective effect after challenge, BoHV-1ΔgEβgal virus is an efficient and safe vaccine candidate when used either as inactivated or as live attenuated forms.Fil: Romera, Sonia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronomicas; Argentina. Universidad del Salvador; ArgentinaFil: Puntel, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquimicas de Buenos Aires; Argentina. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Quattrocchi, Valeria. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronomicas; ArgentinaFil: del Medico Zajac, Maria Paula. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronomicas; ArgentinaFil: Zamorano, Patricia Ines. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronomicas; Argentina. Universidad del Salvador; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Blanco Viera, Javier. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronomicas; ArgentinaFil: Carrillo, Consuelo. USDA. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Chowdhury, Shafiqul. Louisiana State University. Department of Pathobiological Sciences; Estados UnidosFil: Borca, Manuel V.. USDA. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Sadir, Ana M.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronomicas; Argentina. Universidad del Salvador; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

New marker vaccine against bovine herpesvirus 1. Protection induced in cattle by the marker strain BoHV1ΔgEβgal

El Herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV1) es el agente causal de infecciones de la mucosa respiratoria y genital de los bovinos causando grandes pérdidas económicas en todos los continentes. El uso de vacunas marcadoras en los programas de erradicación de rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR) es ampliamente utilizada ya que permite la protección de los animales contra la enfermedad y adicionalmente la posibilidad de diferenciar animales vacunados de infectados. El objetivo del presente estudio fue el desarrollo y la evaluación de la seguridad y eficacia de una cepa vacunal marcadora (BoHV1ΔgEβgal) generada en base a la cepa parental BoHV1 LA sustituyendo por recombinación homóloga el gen que codifica para la glicoproteína E (gE) del virus con el gen de la β-galactosidasa (β gal). La cinética de crecimiento in vitro del virus BoHV1ΔgEβgal fue similar a la del virus parental BoHV1 LA. Cuando se evaluó la respuesta inmune inducida BoHV-1ΔgEβgal resultó altamente inmunogénico en ambas formulaciones, induciendo respuesta inmune tanto humoral como celular. Los títulos de anticuerpos inducidos en los animales vacunados con la vacuna inactivada (IBoHV1ΔgEβgal) fueron similares a los inducidos por la vacuna control con el virus parental (IBoHV1 LA). Los niveles de IFN-γ fueron significativamente mayores en los animales vacunados con vacuna viva atenuada que los vacunados con vacuna inactivada. La cepa recombinante BoHV1ΔgEβgal exhibió una atenuación evidente cuando se administra como vacuna viva atenuada, no se detectó virus en las secreciones nasales de animales vacunados o centinelas durante el período posterior a la vacunación. La cepa marcadora BoHV1ΔgEβgal, cuando se utilizó, ya sea como vacuna inactivada o como vacuna viva atenuada, indujo una respuesta inmune especifica eficiente que protege a los animales en el desafío contra la cepa salvaje BoHV1 LA infecciosa. Asimismo, la deleción del gen gE resultó un marcador inmunológico para diferenciar animales vacunados de infectados. Todos los animales vacunados con la cepa BoHV1ΔgE resultaron protegidos contra la enfermedad después del desafío y excretaron significativamente menos virus que los bovinos control, independientemente de la ruta y la formulación con la que se inocularon. Basados en la atenuación, inmunogenicidad y eficacia protectiva frente al desafío viral, el virus BoHV1ΔgEβgal es un candidato a vacuna muy eficaz cuando se lo usa tanto inactivo como vivo atenuado, seguro en cuanto a transmisión horizontal y en hembras preñadas.Bovine herpesvirus type 1 (BoHV1) is the causative agent of respiratory and genital tract infections; causing a high economic loss in all continents. Use of marker vaccines in infectious bovine rhinotracheitis (IBR) eradication programs is widely accepted since it allows for protection of the animals against the disease while adding the possibility of differentiating vaccinated from infected animals. The aim of the present study was the development and evaluation of safety and efficacy of a glycoprotein E-deleted (gE-) BoHV1 marker vaccine strain (BoHV1ΔgEβgal) generated by homologous recombination, replacing the viral gE gene with the β-galactosidase (βgal) gene. In vitro growth kinetics of the BoHV1ΔgEβgal virus was similar to BoHV1 LA. The immune response triggered by the new recombinant strain in cattle was characterized both as live attenuated vaccine (LAV) and as an inactivated vaccine. BoHV-1ΔgEβgal was highly immunogenic in both formulations, inducing specific humoral and cellular immune responses. Antibody titers found in animals vaccinated with the inactivated vaccine based on BoHV1ΔgEβgal was similar to the titers found for the control vaccine (BoHV1 LA). In the same way, titers of inactivated vaccine groups were significantly higher than any of the LAV immunized groups, independently of the inoculation route. Levels of IFN-γ were significantly higher in those animals that received the LAV in comparison with those that received the inactivated vaccine. BoHV-1ΔgEβgal exhibited an evident attenuation when administered as a LAV; no virus was detected in nasal secretions of vaccinated or sentinel animals during the post-vaccination period. BoHV1ΔgEβgal, when used in either formulation, elicited an efficient immune response that protected animals against challenge with virulent wild-type BoHV1. Also, the deletion of the gE gene served as an immunological marker to differentiate vaccinated animals from infected animals. All animals vaccinated with the BoHV1ΔgE βgal strain were protected against disease after challenge and shed significantly less virus than control calves, regardless of the route and formulation they were inoculated. Based on its attenuation, immunogenicity and protective effect after challenge, el virus BoHV1ΔgEβgal virus is an efficient and safe vaccine candidate when used either as inactivated or as live attenuated forms.Trabajo ganador del Premio Biogénesis Bagó 2013.Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria (ANAV

New marker vaccine against bovine herpesvirus 1. Protection induced in cattle by the marker strain BoHV1ΔgEβgal

El Herpesvirus bovino tipo 1 (BoHV1) es el agente causal de infecciones de la mucosa respiratoria y genital de los bovinos causando grandes pérdidas económicas en todos los continentes. El uso de vacunas marcadoras en los programas de erradicación de rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR) es ampliamente utilizada ya que permite la protección de los animales contra la enfermedad y adicionalmente la posibilidad de diferenciar animales vacunados de infectados. El objetivo del presente estudio fue el desarrollo y la evaluación de la seguridad y eficacia de una cepa vacunal marcadora (BoHV1ΔgEβgal) generada en base a la cepa parental BoHV1 LA sustituyendo por recombinación homóloga el gen que codifica para la glicoproteína E (gE) del virus con el gen de la β-galactosidasa (β gal). La cinética de crecimiento in vitro del virus BoHV1ΔgEβgal fue similar a la del virus parental BoHV1 LA. Cuando se evaluó la respuesta inmune inducida BoHV-1ΔgEβgal resultó altamente inmunogénico en ambas formulaciones, induciendo respuesta inmune tanto humoral como celular. Los títulos de anticuerpos inducidos en los animales vacunados con la vacuna inactivada (IBoHV1ΔgEβgal) fueron similares a los inducidos por la vacuna control con el virus parental (IBoHV1 LA). Los niveles de IFN-γ fueron significativamente mayores en los animales vacunados con vacuna viva atenuada que los vacunados con vacuna inactivada. La cepa recombinante BoHV1ΔgEβgal exhibió una atenuación evidente cuando se administra como vacuna viva atenuada, no se detectó virus en las secreciones nasales de animales vacunados o centinelas durante el período posterior a la vacunación. La cepa marcadora BoHV1ΔgEβgal, cuando se utilizó, ya sea como vacuna inactivada o como vacuna viva atenuada, indujo una respuesta inmune especifica eficiente que protege a los animales en el desafío contra la cepa salvaje BoHV1 LA infecciosa. Asimismo, la deleción del gen gE resultó un marcador inmunológico para diferenciar animales vacunados de infectados. Todos los animales vacunados con la cepa BoHV1ΔgE resultaron protegidos contra la enfermedad después del desafío y excretaron significativamente menos virus que los bovinos control, independientemente de la ruta y la formulación con la que se inocularon. Basados en la atenuación, inmunogenicidad y eficacia protectiva frente al desafío viral, el virus BoHV1ΔgEβgal es un candidato a vacuna muy eficaz cuando se lo usa tanto inactivo como vivo atenuado, seguro en cuanto a transmisión horizontal y en hembras preñadas.Bovine herpesvirus type 1 (BoHV1) is the causative agent of respiratory and genital tract infections; causing a high economic loss in all continents. Use of marker vaccines in infectious bovine rhinotracheitis (IBR) eradication programs is widely accepted since it allows for protection of the animals against the disease while adding the possibility of differentiating vaccinated from infected animals. The aim of the present study was the development and evaluation of safety and efficacy of a glycoprotein E-deleted (gE-) BoHV1 marker vaccine strain (BoHV1ΔgEβgal) generated by homologous recombination, replacing the viral gE gene with the β-galactosidase (βgal) gene. In vitro growth kinetics of the BoHV1ΔgEβgal virus was similar to BoHV1 LA. The immune response triggered by the new recombinant strain in cattle was characterized both as live attenuated vaccine (LAV) and as an inactivated vaccine. BoHV-1ΔgEβgal was highly immunogenic in both formulations, inducing specific humoral and cellular immune responses. Antibody titers found in animals vaccinated with the inactivated vaccine based on BoHV1ΔgEβgal was similar to the titers found for the control vaccine (BoHV1 LA). In the same way, titers of inactivated vaccine groups were significantly higher than any of the LAV immunized groups, independently of the inoculation route. Levels of IFN-γ were significantly higher in those animals that received the LAV in comparison with those that received the inactivated vaccine. BoHV-1ΔgEβgal exhibited an evident attenuation when administered as a LAV; no virus was detected in nasal secretions of vaccinated or sentinel animals during the post-vaccination period. BoHV1ΔgEβgal, when used in either formulation, elicited an efficient immune response that protected animals against challenge with virulent wild-type BoHV1. Also, the deletion of the gE gene served as an immunological marker to differentiate vaccinated animals from infected animals. All animals vaccinated with the BoHV1ΔgE βgal strain were protected against disease after challenge and shed significantly less virus than control calves, regardless of the route and formulation they were inoculated. Based on its attenuation, immunogenicity and protective effect after challenge, el virus BoHV1ΔgEβgal virus is an efficient and safe vaccine candidate when used either as inactivated or as live attenuated forms.Trabajo ganador del Premio Biogénesis Bagó 2013.Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria (ANAV

Characterization of BoHV-5 field strains circulation and report of transient specific subtype of bovine herpesvirus 5 in Argentina

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) is a member of the subfamily <it>Alphaherpesvirinae </it>responsible for meningo-encephalitis in young cattle. The first case of bovine meningo-encephalitis associated with a herpesvirus infection was reported in Australia. The current geographical distribution of BoHV-5 infection is mainly restricted to South America, especially Brazil and Argentina. Outbreaks of BoHV-5 are regularly observed in Argentina suggesting the circulation of the virus in the bovine population.</p> <p>Results</p> <p>Seventeen field strains of BoHV-5 isolated from 1984 to now were confirmed by differential PCR and subjected to restriction endonuclease analysis (REA). Viral DNA was cleaved with BstEII which allows the differentiation among subtypes a, b and non a, non b. According to the REA with BstEII, only one field strain showed a pattern similar to the Argentinean A663 strain (prototype of BoHV-5b). All other isolates showed a clear pattern similar to the Australian N569 strain (prototype of BoHV-5a) consistent with the subtypes observed in Brazil, the other South-American country where BoHV-5 is known to be prevalent. The genomic region of subtype b responsible for the distinct pattern was determined and amplified by PCR; specifically a point mutation was identified in glycoprotein B gene, on the BstEII restriction site, which generates the profile specific of BoHV-5b.</p> <p>Conclusions</p> <p>This is the first report of circulation of BoHV-5a in Argentina as the prevailing subtype. Therefore the circulation of BoHV-5b was restricted to a few years in Argentina, speculating that this subtype was not able to be maintained in the bovine population. The mutation in the gB gene is associated with the difference in the restriction patterns between subtypes "a" and "b".</p

Enfrentando los riesgos socionaturales

El objetivo del libro es comprender la magnitud de los Riesgos Socionaturales en México y Latinoamérica, para comprender el peligro que existe por algún tipo de desastre, ya sea inundaciones, sismos, remoción en masa, entre otros, además conocer qué medidas preventivas, correctivas y de contingencias existen para estar atentos ante alguna señal que la naturaleza esté enviando y así evitar alguna catástrofe. El libro se enfoca en los aspectos básicos de análisis de los peligros, escenarios de riesgo, vulnerabilidad y resiliencia, importantes para la gestión prospectiva o preventiva

Comparison Between Different Discharge Lamp Models Based on Lamp Dynamic Conductance

International audienc