Investigating the differentiation and functional maturation of stem cell-derived β cells

Diabetes mellitus is a chronic and global disease rapidly growing in prevalence. Diabetes can be characterized by the dysfunction or death of the glucose sensing insulin secreting cell. cells are located within the islet of Langerhans (islet), a tissue within the pancreas. Human islets are critical for the study and treatment of diabetes. However, they can only be obtained from cadaveric organ donors. These cadaveric islets do not proliferate and can only be maintained in vitro for short periods of time, making their availability rare and fleeting. Stem cell-derived -like cells can be generated in indefinite amounts and are a potential alternative to cadaveric islet cells. Throughout this document stem cell-derived -like cells will be interchangeably referred as SC- cells or SC-islet. A major challenge towards applying SC- cells to disease modeling or cell replacement therapies is their lack of functional maturity and supporting technology. In this thesis, I am to investigate and improve the functional maturity of SC- cells and their supporting technologies. Chapter 1 serves as an introduction to the field of SC- cells. In Chapter 2, by temporally manipulating TGF signaling, I develop a novel differentiation protocol for generation of SC- cells with enhance function. These enhanced SC- cells are generated more efficiently and achieve dynamic insulin secretion with first and second phase insulin secretion kinetics, a critical hallmark of cadaveric islet function. When transplanted into immune compromised diabetic mice, their function is detected within two weeks and cure their diabetes. In Chapter 3, I elucidate the role of transcription factor SIX2 in SC- cells differentiations. Using gene knockdown and knockout techniques, I show SIX2’s necessity for the functional maturation of SC- cells. Importantly, I identify SIX2 positive and negative cell populations and postulate its use as a marker to guide future cell maturation efforts. In Chapter 4, I present a method for cryopreserving SC-islets and characterize them relative to their un-cryopreserved counterparts. Cryopreserved SC-islets functionally and transcriptionally resemble un-cryopreserved SC-islets. This advancement will facilitate biobanking of stem cells, a necessary step to increase their accessibility to the research and therapeutic research population. In Appendix A, I describe the application of a luciferase insulin secretion reporter in SC- cells. Luciferase co-secretes in correlation with insulin and a proof-of-concept compound screen is performed identifying several cell secretagogues. These secretagogues were then assessed with cadaveric islets verifying the potential of SC- cells as biologically relevant screening models. In Appendix B, I describe a method for co-culturing SC- cells with endothelial cells using a hydrogel system. The work in this thesis advances SC- cell technologies and facilitates their use as disease models and cell-therapeutics

Análisis actancial de la obra ezequiel: el profeta que incendió la pradera, según el paradigma de greimas

Esta investigación titulada “análisis actancial de la obra Ezequiel: el profeta que incendió la pradera, según el paradigma de Greimas”, se propuso como objetivo general analizar dicha obra del escritor puneño, Feliciano Padilla, según Greimas, y tres objetivos como específicos: identificar, mediante la metodología de Greimas, los roles actanciales y temáticos, representar el programa narrativo de dicha novela, según el paradigma de Greimas, y plasmar, la estructura ideológica del personaje Ezequiel Urviola. De esta forma, se ha realizado un análisis que encierra de forma indistinta y metodológica, en los tres ejes, los cuales son el eje de los roles actanciales, eje de los roles temáticos y el eje del programa narrativo. Concluyendo, de manera general, que el Ezequiel Urviola, sujeto que forma parte del programa general, no logra dar con su objeto debido a la enfermedad que contare, dando pie a que prevalezca el anti programa, que tiene como anti sujeto a Avelino Lizarazo, cuyo anti objeto era deshacerse de Ezequiel porque representaba un obstáculo para lograr sus ambiciones

La calidad de vida laboral y el estudio del recurso humano: una reflexión sobre su relación con las variables organizacionales

Estudiar el término calidad de vida laboral (CVL) supone como principal objetivo realizar una valoración de la percepción de los trabajadores respecto a sus ambientes de trabajo, así como permite identificar cuáles son los principales factores que hacen que esta percepción sea positiva o negativa. Dado lo anterior, el propósito de la presente investigación es determinar las principales variables que se relacionan con el concepto de calidad de vida laboral, lo cual se realizó mediante una búsqueda de artículos científicos publicados en los últimos siete años, en función de los términos “calidad de vida laboral”, las variables organizacionales, CVT y variables, CVT y relaciones; esto en las bases de datos de Scopus, ELSEVIER, The ThompsonReuters, CONRICyT, Emerald y repositorios científicos. A partir del análisis de la información se determinó que las principales variables que se relacionan con el término CVL son: el coaching gerencial, el esfuerzo y atractivo laboral, la responsabilidad social corporativa, la rotación del personal, el acoso laboral, el cambio organizacional y la discapacidad intelectual; todo dentro del contexto del comportamiento humano en el ámbito empresarial

Advances toward engineering functionally mature human pluripotent stem cell-derived β cells

Human stem cell-derived β (SC-β) cells have the potential to revolutionize diabetes treatment through disease modeling, drug screening, and cellular therapy. SC-β cells are likely to represent an early clinical translation of differentiated human pluripotent stem cells (hPSC). In 2014, two groups generated the firs

Single-cell transcriptome profiling reveals β cell maturation in stem cell-derived islets after transplantation

Human pluripotent stem cells differentiated to insulin-secreting β cells (SC-β cells) in islet organoids could provide an unlimited cell source for diabetes cell replacement therapy. However, current SC-β cells generated in vitro are transcriptionally and functionally immature compared to native adult β cells. Here, we use single-cell transcriptomic profiling to catalog changes that occur in transplanted SC-β cells. We find that transplanted SC-β cells exhibit drastic transcriptional changes and mature to more closely resemble adult β cells. Insulin and IAPP protein secretions increase upon transplantation, along with expression of maturation genes lacking with differentiation in vitro, including INS, MAFA, CHGB, and G6PC2. Other differentiated cell types, such as SC-α and SC-enterochromaffin (SC-EC) cells, also exhibit large transcriptional changes. This study provides a comprehensive resource for understanding human islet cell maturation and provides important insights into maturation of SC-β cells and other SC-islet cell types to enable future differentiation strategy improvements

Aprendizaje basado en retos para desarrollar competencias digitales en estudiantes de computación de educación superior tecnológica, Lima, 2022

La búsqueda de metodologías activas e innovadoras de enseñanza que nos impulsen desarrollar competencias digitales en la comunidad educativa, ha orientado el presente estudio cuyo objetivo fue establecer la influencia del aprendizaje basado en retos (ABR), en el desarrollo de las competencias digitales en estudiantes del área de computación de educación superior tecnológica. El estudio fue de tipo aplicada, toda vez que se buscaba medir los efectos del ABR, el paradigma de la investigación fue positivista con enfoque cuantitativo, el método empleando fue el hipotético deductivo tuvo un diseño cuasi experimental. Se tuvo una población de 210 estudiantes, la muestra estuvo compuesta por 60 estudiantes del VI ciclo de la unidad didáctica de Proyecto Empresarial, se conformó una sección experimental a quienes se les aplicó el programa de la estrategia metodológica del ABR en el grupo de control se trabajó con la metodología tradicional. Para la recolección de datos la técnica empleada fue la encuesta aplicándose un cuestionario como instrumento. Los resultados encontrados demostraron que el ABR influyó en el desarrollo de las competencias digitales del grupo en estudio al alcanzar un ρ=0.00, siendo (ρ < 0.05); indica que la estrategia de enseñanza propuesta resulta ser altamente efectiva, lo que permitió concluir que los estudiantes mejoraron significativamente su nivel de competencia digital

SIX2 regulates human β cell differentiation from stem cells and functional maturation in vitro

Generation of insulin-secreting β cells in vitro is a promising approach for diabetes cell therapy. Human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) are differentiated to β cells (SC-β cells) and mature to undergo glucose-stimulated insulin secretion, but molecular regulation of this defining β cell phenotype is unknown. Here, we show that maturation of SC-β cells is regulated by the transcription factor SIX2. Knockdown (KD) or knockout (KO) of SIX2 in SC-β cells drastically limits glucose-stimulated insulin secretion in both static and dynamic assays, along with the upstream processes of cytoplasmic calcium flux and mitochondrial respiration. Furthermore, SIX2 regulates the expression of genes associated with these key β cell processes, and its expression is restricted to endocrine cells. Our results demonstrate that expression of SIX2 influences the generation of human SC-β cells in vitro

Saliva secretory IgA kinetics in obese subjects submitted to a graded exercise test

INTRODUCTION: Secretory IgA (sIgA) is predominant immunoglobulin in secretions of the mucosal immune system. It inhibit attachment and replication of pathogenic microorganism, preventing colonization by these pathogens. Therefore, sIgA is consider the first line of defense against pathogens. Previous studies have indicated a direct link between low salivary sIgA levels with of upper respiratory tract infections (UTRI) episodes in endurance sports and elite athletes. PURPOSE: Determine the effect of a maximal graded exercise test on the saliva sIgA levels in obese adult subjects. METHODS: Eleven obese male subjects (Age 31± 1.53 years) were recruited. The Body Mass Index (BMI) and, Waist Circumference (WC) were measured. Graded exercise test was performed on an electrically-braked cycle ergometer (Lode). The Heart rate (HR) was registered using a digital pulse meter (Polar FT1 model) before, immediately finished the exercise and after 30 min post- exercise test. The saliva samples were collected alongside with HR during the test. RESULTS: The WC (110.37 ± 3.89 cm) and BMI (34.73 ± 1.62 kg/m2) values confirmed the obesity state in the participants. The HR at basal was 77.09 ± 3.10 bpm, at post exercise, the HR mean was 175.45 ± 4.94 bpm (p \u3c0.0001 vs basal). Finally, at 30 post exe, the HR was 91.81 ± 3.01 bpm (P \u3c0.0001 vs post-exe). In basal state, the sIgA concentration was 94.21 ± 13.57 µm/mL. At post exe, the sIgA mean was 175.9 ± 22.45 µm/mL (p\u3c0.05 vs basal). Finally, 30’ post-exercise the sIgA level was 91.39 ± 10.40 µm/mL. However, the sIgA was not modified by the exercise. CONCLUSION: The present work demonstrates that the salivary sIgA increases temporally as a response to the graded exercise test in obese adults. Although, the changes in the sIgA concentration was not accompanied with a major sIgA secretion in the saliva

EL CONTENIDO DE LA ADMINISTRACIÓN EMPRESARIAL Y LA FORMACIÓN POR COMPETENCIA: ALGUNOS APUNTES A CONSIDERAR EN EL CURRÍCULUM DEL ESTUDIANTE UNIVERSITARIO

En el presente artículo expone una sistematización sobre el papel de las competencias así como las principales cuestiones de la administración empresarial a tener en cuenta dentro del currículo del estudiante universitario y de cómo es vital en el ejercicio de la formación para mayor conocimiento, actualización y desarrollo de la capacidad en la toma de decisiones estratégicas y operativas; así como el entendimiento global, las particularidades y el reforzamiento de sus habilidades profesionales para la reflexión y el fomento del intercambio de conocimientos y experiencias con otros profesionales

Implementación de un taller automotriz móvil

El presente proyecto denominado “Estudio para la implementación de un taller automotriz móvil” tiene por objetivo determinar la viabilidad de una empresa para brindar los servicios de mantenimiento y reparación de vehículos livianos a domicilio en la ciudad de Arequipa, que comprenderá los distritos de Cercado, Cerro Colorado, Cayma, Yanahuara y José Luis B. y Rivero. De acuerdo al estudio de mercado desarrollado se ha encontrado que se tiene una demanda de 20,016 servicios dentro de los cuales se encuentran mantenimiento básico de 5000 km, pulido y tratamiento de pintura y recarga de aire acondicionado. El proyecto pretende cubrir 5% del servicio de mantenimiento básico, 9% del servicio de pulido de pintura, 20% del servicio de tratamiento de pintura y 70% del servicio de recarga de aire acondicionado, dando todas las facilidades al cliente para que estos trabajos se realicen en su domicilio sin que interne su vehículo en un taller, para ello se tiene que invertir un monto de S/100,951.30 con un horizonte a 5 años, donde el monto invertido es recuperado a partir de segundo año de operación, lo cual demuestra junto a los indicadores de VAN y TIR su viabilidad para ser desarrollado.The present project called "Study for the implementation of a mobile automotive workshop" aims to determine the viability of a company to provide maintenance and repair of light vehicles at home in the city of Arequipa, which will include the districts of Cercado, Cerro Colorado, Cayma, Yanahuara and José Luis B. y Rivero. According to the developed market study, it has been found that there is a demand for 20,016 services, which include basic maintenance of 5000 km, polishing, paint treatment and air conditioning recharge. The project pretends to cover 5% of the basic maintenance service, 9% of the paint polishing service, 20% of the paint treatment service and 70% of the air conditioning recharge service, giving all the facilities to the client so that these works they are made in your home without having your vehicle in a workshop, for this you have to invest an amount of S/. 100,951.30 with a horizon of 5 years, where the invested amount is recovered from the second year of operation, which demonstrates next to the indicators of VAN and IRR its viability to be developed.Trabado de investigacio