Estudo da virulência de Lasiodiplodia theobromae e Lasiodiplodia hormozganensis por genómica funcional e isolamento de metabolitos

Global climate change may lead to interactions of pathogenic fungi with new hosts, even from different kingdoms. In order for this to occur, fungi need to develop specific virulence mechanisms for the new host, for example through production of virulence factors. Some phytopathogenic fungi belonging to Botryosphaeriaceae are known human opportunistic pathogens. Moreover, the genus Lasiodiplodia has been reported in several human infections. Nonetheless, the virulence mechanisms behind this ability are still in need of research. The goal of this thesis consisted on the study of virulence towards human hosts by L. theobromae - strain LA-SOL3 - (isolate from grapevine) and L. hormozganensis - strain CBS339.90 - (isolated from human patient). In chapter 1, gene targeted replacement of ssd1 gene via Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation was conducted in both fungi. Consequently, phenotypic characterization of wild-type fungi was conducted after growth in five different media. Cytotoxicity of crude extracts was tested on both normal (Vero-B4) and cancer (Hela S3) mammalian cell lines, antifungal, and antibacterial activity. The deletion vectors (pSJ-SSD1-HPT) were successfully constructed, however, no mutants were generated. The crude extracts presented activity against normal and cancer cells, bacteria, and fungi, although these abilities varied according to growth media. In Hela S3 cells and test organisms, extracts from growth in nutrient-rich media presented higher activities. Also, HPLC analysis of the extracts revealed a total number of analytes higher when growth was on BAF medium. Thus, in chapter 2, this medium was used for large-scale fermentation of L. hormozganensis, to isolate active secondary metabolites. After extraction of crude extracts -mycelium and culture filtrate - the latter was submitted to solid phase extraction, preparative HPLC and HPLC-MS. Pure compounds identified as 4-ethylaniline (27.3 mg) and orsellinic acid (1.5 mg) were reported for the first time in L. hormozganensis. The compound 4-ethylaniline displayed no effects on bacteria, fungi, plants, mammalian and human cancer cells, suggesting that this compound is not involved in virulence by the fungus. The role of the two compounds remains unclear. The results on these compounds characterization reveal that further studies are required to understand their involvement - as well as other metabolites produced by this fungus - in potential virulence mechanisms towards the human host.As alterações climáticas globais podem levar a interações de fungos patogénicos com novos hospedeiros, incluindo de reinos diferentes. Para que isto ocorra, os fungos necessitam de desenvolver mecanismos específicos de virulência, por exemplo por produção de fatores de virulência. Alguns fungos fitopatogénicos da família Botryosphaeriaceae são patogénicos oportunistas humanos. Além disso, o género Lasiodiplodia tem sido relatado em várias infeções humanas. Contudo, os mecanismos de virulência por detrás desta capacidade ainda carecem de investigação. O objetivo desta tese consistiu no estudo da virulência em humanos por L. theobromae - estirpe LA-SOL3 - (isolado da videira) e L. hormozganensis - estirpe CBS339.90 - (isolado de paciente humano). No capítulo 1 realizou-se a substituição do gene ssd1 nos fungos por transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens. Consequentemente, a caracterização fenotípica dos fungos “selvagens” foi realizada após o seu crescimento em cinco meios diferentes. A citotoxicidade dos extratos brutos foi testada em células de mamíferos normais (Vero-B4) e cancerígenas (Hela S3), atividade antifúngica e antibacteriana. Os vetores de deleção (pSJ-SSD1-HPT) foram construídos com sucesso, porém não foram gerados mutantes. Os extratos brutos apresentaram atividade contra células normais e cancerígenas, bactérias, e fungos, embora os resultados variem de acordo com o meio de crescimento: em células Hela S3 e nos organismos teste, extratos de crescimento em meios ricos em nutrientes apresentaram maiores atividades. A análise dos extratos por HPLC revelou um número total de analitos maior no crescimento em meio BAF. No capítulo 2, este meio foi usado para fermentação em larga escala de L. hormozganensis, para isolar metabolitos secundários ativos. Após extração dos extratos brutos - micélio e meio extracelular - o último foi submetido a extração em fase sólida, HPLC preparativo e HPLC-MS. Compostos puros identificados como 4-etilanilina (27,3 mg) e ácido orselínico (1,5 mg) foram relatados pela primeira vez em L. hormozganensis. O composto 4-etilanilina não apresentou efeitos contra bactérias, fungos, plantas, células normais e cancerígenas, o que sugere não estar envolvido na virulência do fungo. O papel dos dois compostos ainda não está clarificado. O resultado da caracterização destes compostos revelou que são necessários mais estudos para compreender o seu envolvimento - assim como de outros metabolitos produzidos pelo fungo - em possíveis mecanismos de virulência para o hospedeiro humano.Mestrado em Microbiologi

Programa de competências parentais para prevenção da negligência

Projecto de Graduação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Licenciada em CriminologiaNos dias que decorrem os maus-tratos e a negligência por parte dos progenitores aos menores que se encontram à sua responsabilidade têm vindo a crescer de um modo quase exponencial. Contudo este é um tema que não é atual, uma vez que já nos nossos antepassados existiram registos de situações de maus-tratos com crianças e situações de escravidão. Tal como sabemos os efeitos dos maus-tratos não são apenas evidências físicas, tais como pisaduras, mordeduras… Estes podem ainda ser afetivos, sociais, comportamentais ou até mesmo cognitivos. O que pode levar a um défice no desenvolvimento integral do indivíduo. De um modo geral, com os questionários que foram sendo administrados, com as visitas domiciliárias e com as sessões de formação de competências parentais foi notório que os progenitores conseguem identificar quais os tipos e sinais dos maus-tratos assim como os comportamentos que são reconhecidos como uma forma maltratante. Com a implementação do programa de competências parentais verificaram-se melhorias nos estilos parentais dos progenitores envolvidos assim como no ambiente familiar e na organização da habitação.In days to derive the mistreatment and neglect by parents to children who are the responsibility has been growing almost exponentially. This topic is not current, since they already exist in our records ancestors of situations of abuse with children and situations of slavery. As we know the effects of abuse is not just physical evidence such as bruises, bites ... These can still be affective, social, behavioral, or even cognitive. This can take to a deficit in the development of an individual. In general, with questionnaires being administered, with home visits and training sessions of parenting skills was apparent that parents can identify which types and signs of abuse as well as the behaviors that are identified as such. With the implementation of parenting skills program saw improvements in parenting styles of the parents involved as well as the family atmosphere and organization of housing

Alergias e intolerâncias alimentares : leite e trigo alimentos complexos?

Monografia realizada no âmbito da unidade de Estágio Curricular do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas, apresentada à Faculdade de Farmácia da Universidade de CoimbraAs alergias e intolerâncias alimentares têm vindo a afetar cada vez mais um elevado número de pessoas. O trigo e o leite são alimentos que figuram na alimentação diária de grande parte da população, sendo também os alimentos mais associados às alergias e intolerâncias alimentares. O leite poderá desencadear reações alérgicas à proteína do leite de vaca e intolerância à lactose. Quanto ao trigo, pode estar associada a alergia ao trigo e a intolerância ao glúten não-celíaca, tendo esta última um mecanismo diferente daquele que apresenta a doença celíaca. O cumprimento da legislação e a correta rotulagem relacionada com os alimentos que contêm substâncias ou produtos que provocam alergias ou intolerâncias é fundamental para salvaguardar a segurança das pessoas que têm este de tipo de reações adversas alimentares. A presente monografia aborda as alergias e intolerâncias alimentares direcionadas ao trigo e ao leite com foco nos mecanismos de ação, sintomas, diagnóstico e terapêutica. A legislação direcionada à menção dos constituintes que provocam alergias ou intolerância irá também ser abordadaFood allergies and intolerances have come to affect an increasingly large number of people. Wheat and milk are foods that are part of the daily diet of much of the population, and are the most associated with food allergies and food intolerances. The milk may trigger allergic reactions to the protein in cow’s milk and cause lactose intolerance. As for wheat, it may be associated with wheat allergy and intolerance to non-coeliac gluten sensitivity, the latter having a different mechanism present in celiac disease. Compliance with legislation and the correct labeling related to the foods that contain substances that cause allergies or intolerances, is critical to ensuring the safety of people who have this type of adverse food reactions. This paper targets allergies and food intolerances to wheat and milk with focus on actions, symptoms, diagnosis and therapy. The legislation directed at the mention of the constituents that cause allergies or intolerances, will also be discussed

Determinantes da resposta de adesão ao medicamento em idosos: uma abordagem experimental

Procurou-se perceber como os(as) idosos(as) no seu quotidiano adotam condutas que possam levar a (não)tomar a medicação prescrita. Recorreu-se a uma tarefa experimental que cenariza um diagnóstico clínico designado “doença do coração”, combinando diferentes níveis de fatores determinantes dos comportamentos de adesão: “severidade da condição clínica” (SCC); “custo dos medicamentos” (CM); “confiança no clínico”; e, “complexidade do regime”. Pediu-se aos participantes que avaliassem, através de uma escala visual-analógica, o grau de adesão à medicação que o(a) doente deveria exibir em cada combinação dos fatores. A amostra integrou um total de 72 idosos(as) voluntários(as), selecionados(as) de forma não probabilística e controlados(as) para demência e depressão. Para a análise dos dados, recorreu-se a ANOVAs de medidas repetidas e os resultados revelam que o CM e a SCC foram determinantes na adesão. Encontraram-se diferenças entre ter ou não patologia cardíaca relativamente à adesão no regime “complexo”. Não se verificaram diferenças entre os géneros; Determinants of response to drug adherence in the elderly: An experimental approach Abstract: The goal of this study was the understanding how elderly adopt conducts into their everyday life that lead them to take prescribed medication. It was made through an experimental approach with scenarios related to the clinical diagnosis “heart disease”, that combine different levels of factors identified in literature as determinants of adherence behavior: “severity of clinical condition” (SCC); “cost of medication” (CM); “trust in clinician”; and “complexity of regimen”. Participants were asked to evaluate, using a visual-analog scale, the degree of medication adherence that a patient should display on each combination of factors. The sample was composed by 72 volunteer elders, selected through non-probabilistic methods and controlled for dementia and depression. Repeated measures ANOVA was used for data analysis and results suggested that SCC and CM were important factors to determine adherence. Differences were found between having or not cardiac pathology in “complex” regimen. There were no differences between genders

Relatório de estágio em farmácia comunitária

Relatório de estágio realizado no âmbito do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas, apresentado à Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbr

Social Inequalities, Poverty and Obesity

Nowadays, the growth of obesity, especially in socially vulnerable groups, reveals the complex nature of food patterns involving socioeconomic and cultural aspects. In this scenario, there has been slow progress in intervention actions for this issue. In general, initiatives to reduce obesity tend to focus on changes in diet behavior and individual sector strategies. They underestimate broader aspects social inequalities, symbolic dynamics and cultural local situations. Faced with this reality, the objective of this study was to investigate the phenomenon of obesity in a context marked by poverty incorporating the constructivist perspective. About 24 interviews and 3 focus groups were performed. The expectation was to analyze perceptions, interpretations and practices around food and body fat. The results revealed fundamental components to be observed in the design of public policies aimed at the reduction of obesity. Concentrating in this direction, actions directed to the promotion of social equity and gender equality, as well as greater access to food, education, technology and the quality of health care, especially in the postpartum period, seems more promising ways of dealing with the problem of obesity in this local context

Analysis of disclosure levels of compulsory and noncompulsory items : a study of Petrobras accounting reports

Com os avanços da tecnologia, torna-se cada vez mais fácil a disseminação da informação, possibilitando a publicação de informações diferenciadas para usuários de interesses distintos, com o benefício de divulgação a baixo custo. Contudo, muitas empresas relutam em divulgar informações não compulsórias, tal relutância diminui à medida que as empresas passam a depender de capital estrangeiro, pois tendem a fazer divulgação apropriada aos mercados financeiros nos quais pretendem captar recursos. Com o intuito de garantir a qualidade dessas informações divulgadas pelas empresas brasileiras, os órgãos regulamentadores estabelecem um conjunto mínimo de informações a serem disponibilizadas pelas empresas de capital aberto, por meio de itens compulsórios, como os exigidos pela Lei nº 6.404/76, e não compulsórios, como os recomendados por Pareceres de Orientação da CVM, entre outros itens. O objetivo deste trabalho é analisar o nível de evidenciação dos itens compulsórios e não compulsórios dos relatórios contábeis da PETROBRAS, para os exercícios findos de 1998 a 2004. O estudo, quanto à metodologia, compreende uma pesquisa exploratória; em relação aos procedimentos, uma pesquisa bibliográfica, buscando orientações legais e científicas sobre evidenciação contábil, no que se refere às demonstrações contábeis publicadas; é qualitativa em relação à análise dos dados. Os resultados da pesquisa demonstraram um cumprimento de todos os itens compulsórios e, com relação aos itens não compulsórios de evidenciação contábil, foi verificado um nível de divulgação maior que 75% das recomendações demonstradas pela pesquisa. Isso demonstra um alto nível de evidenciação contábil, porém, deve-se permanecer atento às exigências dos usuários. _______________________________________________________________________________ ABSTRACTTechnological advances have made dissemination of information easier, enabling publication of differentiated information for users with different purposes, with the added benefit of low cost dissemination. However, many companies resist revealing non-compulsory information. This resistance reduces companies’ dependence on foreign capital since they tend to divulge information appropriate to the financial markets where they intend to gather monetary resources. With the objective of guaranteeing the quality of information revealed by Brazilian companies, regulatory bodies established a minimum amount of information to be made available by publicly owned companies, through compulsory items like those required by Law number 6.404 of 1976, and non-compulsory items, such as those recommended by Orientation Statements of CVM (Brazilian Securities and Exchange Commission), among other items. With this in mind, the present study intends to analyse the level of disclosure oft compulsory and non-compulsory items of the financial statements of Petrobrás, for the period 1998 to 2004. Regarding its objectives, the study entails exploratory quantitative research; its procedures include bibliographic research, seeking legal and scientific orientation about accounting disclosure referent to published accounting demonstrations, and qualitative, in regard to the data analysis. The results of the research demonstrated compliance with all compulsory items, while in relation to non-compulsory items of accounting disclosure, a disclosure level greater than 75% of the recommendations demonstrated by the research was verified. This demonstrates a high level of accounting disclosure, although careful attention should continue to be paid to users’ requirements and to the search for constant improvement in accounting practices