The role of calcium-activated chloride current in cardiomyocytes

Az ionáramoknak az akciós potenciál (AP) kialakításában betöltött szerepének megértése nagy jelentőséggel bírhat, hiszen ezen csatornák kóros működése arrhythmiák kialakulásához vezethet, melynek hirtelen szívhalál lehet a következménye. Annak ellenére, hogy a Ca2+-függő Cl− áramról (ICl(Ca)) ismert, hogy kóros működése arrhythmiát okozhat, a ICl(Ca) pontos szerepe az AP kialakításában kevésbé ismert. Feltételezik, hogy a TMEM16A és/vagy Bestrophin-3 proteinek lehetnek felelősek a csatorna kialakításáért. Kísérleteink célja az volt, hogy összehasonlítsuk két ismert gátlószer, a 9-antracén karboxilsav (9 AC) és a 4,4’-diisotiocianostilbén-2,2’-diszulfonsav (DIDS) hatásait, és eldöntsük, hogy melyik alkalmasabb a ICl(Ca) detektálására. Továbbá, célunk volt a ICl(Ca) AP alatti (Ca2+ puffer nélkül, AP voltage-clamp technika) és megváltozott intracelluláris Ca2+ koncentráció ([Ca2+]i) melletti aktivációjának tanulmányozása kutya kamrai szívizomsejteken. A TMEM16A és a Bestrophin-3 expressziójának és esetleges Cav1.2 proteinnel való ko-lokalizációjának a vizsgálatát kutya kamrai szívizomsejteken és humán szívizommintákon is elvégeztük. Megállapítottuk, hogy a 9-AC (0,5 mmol/l) és a DIDS (0,2 mmol/l) is növelte az AP időtartamot. A voltage-clamp technikával mért DIDS- és 9 AC-érzékeny áram amplitúdók azonosak voltak. A DIDS, a 9 AC-val ellentétben szignifikánsan csökkentette a depolarizáció maximális sebességének értékét, ami a DIDS Na+ áram gátló hatására utal. AP-clamp mérések során a 9 AC-érzékeny áramgörbe (ICl(Ca)) egy korai outward és egy késői inward komponensből tevődött össze, melyek időben az első fázis és a terminális repolarizációnak megfelelően jelentkeztek. A ryanodin és az EGTA mindkét komponens amplitúdóját csökkentette, míg a BAPTA teljesen megszüntette az áramkomponenseket. Az 1,1 µmol/l [Ca2+]i (a systoles [Ca2+] megfelelő érték) csökkentette a ICl(Ca) amplitúdóját, ezzel szemben a [Ca2+]i növelése Bay K8644, isoproterenol, és a magasabb ingerlési frekvencia által növelte a ICl(Ca)-ot. Ezen eredmények arra utalnak, hogy az L-típusú Ca2+ csatornákon beáramló Ca2+ elengedhetetlen a ICl(Ca) fiziológiás aktivációjához. A TMEM16A és Bestrophin-3 erős ko-lokalizációt mutatott egymással és a Cav1.2 fehérjével kutya izolált szívizomsejteken és humán szívizommintákon egyaránt. Eredményeink arra utalnak, hogy a DIDS és a 9 AC egyformán jól használható voltage-clamp mérésekben, de a 9 AC kedvezőbb AP mérésekben, mert nem gátolja a Na+ csatornákat. A ICl(Ca) aktivációjához az L-típusú Ca2+ csatornákon át beáramló Ca2+ szükséges. A sarcoplasmaticus reticulumból felszabaduló Ca2+ nem nélkülözhetetlen az áram aktivációjához, az áram aktivációjának felerősödéséhez járul hozzá. A ICl(Ca) aktivációjához magas [Ca2+] szükséges a diádikus résben, melyet a BAPTA megfelelően tud pufferelni.Understanding the role of ionic currents in shaping the cardiac action potential (AP) has great importance as channel malfunctions can lead to sudden cardiac death by inducing arrhythmias. Despite the possible contribution of (ICl(Ca)) may mediated by TMEM16A and/or Bestrophin-3 to cardiac arrhythmias, the true profile of ICl(Ca) during an actual ventricular AP, is poorly understood. In this study we aimed to explore which blocker, 4,4’-diisothiocyanostilbene-2,2’-disulfonic acid (DIDS) or 9-anthracene carboxylic acid (9 AC) is preferable to visualize the profile of ICl(Ca). We aimed to study ICl(Ca) at normal Ca2+ cycling and by AP voltage-clamp as well as in conditions designed to change [Ca2+]i in canine ventricular myocytes. The expression of TMEM16A and/or Bestrophin-3 in canine left ventricular myocytes and human ventricular myocardium by immunolabelling was examined. The possible spatial distribution of these proteins and their co-localization with Cav1.2 was also studied. Both inhibitors, DIDS (0.2 mmol/l) and 9 AC (0.5 mmol/l) increased AP duration. DIDS- and 9 AC-sensitive currents were identical in voltage-clamp conditions. 9 AC did not influence either the AP amplitude or the maximal rate of depolarizations (Vmax), while DIDS caused marked reduction of Vmax. The profile of ICl(Ca), identified as a 9 AC-sensitive current under AP voltage-clamp conditions, contained an early fast outward and a late inward component, overlapping early and terminal repolarizations, respectively. Both components were moderately reduced by ryanodine, while fully abolished by BAPTA, but not EGTA. Setting [Ca2+]i to the systolic level measured in the bulk cytoplasm (1.1 µmol/l) decreased ICl(Ca). Increase in [Ca2+]i elicited by application of BayK 8644, isoproterenol, and faster stimulation rates increased the amplitude of ICl(Ca). We concluded that Ca2+-entry through L-type Ca2+ channels is essential for activation of ICl(Ca). TMEM16A and Bestrophin-3 showed strong co-localization with one another and also with Cav1.2 channels, when assessed using immunolabelling and confocal microscopy in both canine myocytes and human ventricular myocardium. These results suggest that DIDS and 9 AC are equally useful to study ICl(Ca) during voltage-clamp but 9 AC is superior in AP due to its lack of sodium channel inhibition. Activation of ICl(Ca) in canine ventricular cells requires Ca2+-entry through neighboring L-type Ca2+ channels and is only augmented by SR Ca2+-release. Substantial activation of ICl(Ca) requires high Ca2+ in the dyadic clefts which can be effectively buffered by BAPTA, but not EGTA

Cultural connections and interactions of Eastern Transdanubia during the Urnfield period

Abstract of PhD thesis submitted in 2013 to the Archaeology Doctoral Programme, Doctoral School of History, Eötvös Loránd University, Budapest under the supervision of Gábor V. Szabó.</p

Survey of fans habits at two games of the 2013 Men's Handball World Champioship in Madrid

I have done a survey at the World’s Men Handball Championship 2013 in Madrid during two games of the Hungarian team among the Hungarian’s and the opponent’s fans. I was curious about how are the fans, who are coming to the World Championship, are behaving in this enviroment. I was also interested how strong bonds they have with the handball as a sport and what are their financial budget for this global event. At last I compared the number of the sport fans visiting the stadiums in Madrid in 2013 and in Gothenburg in 2011

Autonomous in situ measurement of daily courses of the net CO2 exchange rate in a moss from alpine environment ( Short Communication )

Moss-dominated vegetation type is considered one of the the most productive community type in treeless alpine environments in European mountains. In this study, net carbon exchange rate (NCER) of alpine moss Polytrichum commune was measured by automatic CO2 exchange station unit. Samples of mosses were collected in a mountains from the site located above tree line (1420 m a.s.l.), and transferred to Brno, Czech Republic. Then the cluster of moss (23 cm in diameter, 30 cm in depth) including dead parts was placed into open measuring chamber end exposed to local climate for two weeks in autumn 2019. The chamber closed by a transparent lid repeatedly each 20 min and NCER measured by the system. Data on photosynthetically active radiation (PAR), relative air humidity (RH), and moss temperature (T) were recorded as well. Maximum/ minimum dark respiration reached 1.0 and 0.2 mmol (CO2) m-2 s-1. The highest NCER was found - 0.6 mmol (CO2) m-2 s-1 was caused by photosynthesis of moss clump at the temperature within the range of 14.5-17.5°C and 100% of relative air humidity

The cultural position of a Late Bronze Age community in the interaction network of the early Urnfield period

A Kr. e. 14–13. század fordulóján a Közép-Tisza völgyében élő közösségek tárgyi kultúráját több irányból érkező kulturális hatások formálták. Egyrészt az erős dunántúli és kelet-alpi kapcsolatokat fenntartó korai urnamezős kultúrának, másrészt a vajdasági, bánsági Belegiš II-csoport kerámiastílusának a keveredése figyelhető meg Tiszabura pre-Gáva-korszakra keltezhető településén. A nagy felületen feltárt lelőhely több ezer darabot meghaladó leletanyag mennyisége lehetővé teszi, hogy kerámiatípusokra és felületkezelési technológiára alapozott kapcsolati hálózatot lehessen modellezni. A felépített gráf topológiája és erőforrás-eloszlási modellje felvázolja a tiszaburai közösség legerősebb kapcsolatainak irányát és intenzitását, illetve pozicionálja helyzetét a korszak közösségeinek interakciós hálózatában

What kind of effects had the global economic crisis on the attendance of the NBA games?

The global economic crisis of 2008 had effects on the world at all levels of life. It caused serious problems and difficulties in professional sports as well. In my paper I will try to show what kind of effects the global economic crisis had on one of the best organised championships of the world. What effects it had on attendance? How this influenced the prices of the tickets to the matches?I am going to show those marketing and financial steps, which were made by the championship’s leader corp and the teams participating in it. I think the teams could moderate their losses by making different special offers, drafting new players and being opened for the foreign countries, I think this will lead to an increase in attendance in the next few years. Finally, I will try to make a future forecast of attendance

Oxygen evolution rate in Antarctic filamentous alga Stigeoclonium sp. evaluated by optodes relates to chlorophyll fluorescence parameters (Short Communication)

Photosynthetic reactions of algal communities, the essential component of primary production in polar regions, are strongly dependent on environmental factors. Among them, availability and amount of light in particular parts of growing season are of major importance. In this paper, the response of the photosynthetic processes of a filamentous fresh-water alga to photosynthetically active radiation (PAR) was studied by two approaches. The simultaneous measurements of the effective quantum yield (FPSII) and oxygen evolution rate (OER) at stepwise increasing photosynthetically active radiation provided data for beneficial correlation analysis of the FPSII to OER relationship in a wide range of PAR. In this study, the culture of filamentous alga Stigeoclonium sp. was analyzed. The linear relationship between FPSII and OER was found for the low PAR (the range of 0 – 200 mmol.m-2.s-1). At high PAR levels (200 – 1000 mmol.m-2.s-1) another linear relationship with different slope was found. The approach combining the fluorometric and oxymetric method might be used for calibration of data in follow up studies and, consequently for evaluation of photosynthetic rates (O2 evolution) from chlorophyll fluorescence data