Estudo genético-clínico e citogenético de crianças autistas

Infantile autism is characterized by a typical behavior that may be caused by an organic disease or by an emotional disorder. The objective of the present genetic-clinical and cytogenetic study was to detect the presence of organic diseases, especially those of genetic etiology, that migth be related to the signs and symptons of autism presented by 17 boys who attended at the Ribeirão Preto Association for Autistic Children. We concluded that 14 individuals had no organic alterations that might be related to their clinical picture; one subject presented a clinical picture compatible with macrocephaly; one subject presented a clinical picture compatible with a new X-linked mental deficiency syndorme associated with macrossomy, macrocephaly and obesity, and one subject presented the Angelman Syndrome (AS). The study of Xq27.3 fragility was also normal in all cases, excluding the presence of Fragile X syndrome in all subjects. The specific molecular study for the detection of AS revealed the presence of biparental inheritance for the markers used. Since the clinical aspects of this patient was extremely suggestive, we conclude that he represented a case of AS with biparental inheritance.O autismo infantil é caracterizado pelo comportamento típico que pode ser causado por uma doença orgânica ou por um distúrbio emocional. Através de um estudo genético-clínico e citogenético, tivemos como objetivo detectar a presença de doenças orgânicas, principalmente de etiologia genética, que pudessem estar relacionadas com o quadro de autismo apresentado por dezessete meninos que freqüentavam a AMA de Ribeirão Preto. Concluímos que quatorze indivíduos não possuíam alterações orgânicas que pudessem estar relacionadas com o quadro clínico por eles apresentado; um indivíduo apresentou quadro clínico compatível com macrocefalia; um indivíduo apresentou quadro clínico compatível com uma nova síndrome de deficiência mental, ligada ao X, associada à macrossomia, macrocefalia e obesidade, e um indivíduo  presentou a Síndrome de Angelman (SA). O estudo citogenético mostrou-se normal para todos os indivíduos estudados, assim como a pesquisa de fragilidade Xq27.3, excluindo a todos da possibilidade de apresentarem a Síndrome do X-frágil. O estudo molecular, específico para a detecção da SA, revelou a presença, no paciente, de herança biparental para os marcadores utilizados; como a clínica desse paciente é extremamente sugestiva, concluímos estar frente a um caso de SA com herança biparental

Avaliação etiológica da deficiência mental em pacientes brasileiros

INTRODUCTION: Mental retardation is present in approximately 2-3 % of the population. Clinical geneticists are frequently asked to evaluate children with development delay or mental retardation. Identifying the cause of the mental retardation will benefit individuals and families, answering questions about management, prognosis, recurrence risks and prevention.MATERIAL AND METHODS: A genetic diagnostic survey in a population of 260 mentally retarded institutionalized patients in the South of Brazil is presented.RESULTS: The patients had a male:female ratio of 1.3:1 and their ages varied from 1 month to 47 years with a mean of 5 years and one month. Using personal and family data,  careful clinical examination and laboratory investigation, the authors established a definitive diagnosis in 171 patients (65.76%). A constitutional disorder was present in 147 patients (56.53%).CONCLUSION: Down syndrome patients represented 32.30% and 3,84% had other chromosomal anomalies, including microdeletion syndromes. In 32 patients (12.30%) a mendelian inheritance disorder was diagnosed. In eleven patients (4.23%) a MCA/MR syndrome was recorded. Ten patients (3.84%) presented a CNS malformation. An acquired condition was observed in 26 patients (10%), representing 7.69 % of CNS dysfunction, 2.3% of pre- or postnatal infection and 0.4% of postnatally acquired conditions other than infections. In the remaining 87 patients (34.46%) a conclusive diagnosis was not possible.INTRODUÇÃO: Retardo mental está presente em aproximadamente 2-3% da população. Geneticistas clínicos são chamados freqüentemente para avaliar crianças com atraso no de senvolvimento neuropsicomotor ou deficiência mental. A identificação da causa da deficiência mental irá beneficiar o indivíduo e famílias, respondendo questões sobre manejo, prognóstico, risco de recorrência e prevenção.MATERIAL E MÉTODOS: Análise genético-clínica numa população de 260 deficientes men tais de uma instituição é apresentada.RESULTADOS: Os 260 pacientes distribuíram-se numa razão de 1.3 do sexo masculino para 1 do sexo feminino. A idade variou de 1 mês a 47 anos com a mediana de 5 anos e um mês. Usando dados pessoais e familiares, exame físico detalhado e investigação laboratorial, os autores estabeleceram diagnóstico definitivo em 171 pacientes (65,76%). Alterações constitucionais estavam presentes em 147 pacientes (56,53%).CONCLUSÃO: Pacientes com Síndrome de Down representaram 32,20% e 3,84% apresentaram anomalias envolvendo outros cromossomos, incluindo síndromes de microdeleção. Em 32 pacientes (12,30%) uma doença mendeliana foi diagnosticada. Em 11 pacientes (4,23%) uma anomalia congênita múltipla/retardo mental (ACM/RM) foi diagnosticada. Dez pacientes (3,84%) apresentaram uma malformação do sistema nervoso central (SNC). Uma condição adquirida foi observada em 26 pacientes (10%), representando 7,69% de disfunção do SNC, 2,3% de infecção pre ou pós-natal e 0,4% de dano pós-natal, excluindo infecções. Em 87 pacientes (34,46%) não foi possível determinar um diagnóstico

PERFIL DOS PACIENTES COM FENILCETONÚRIA DO SERVIÇO DE TRIAGEM NEONATAL DO MATO GROSSO DO SUL

The present study aimed to retrospectively evaluate a cohort of patients diagnosed with phenylketonuria, screened by the heel prick test and confirmed by serum phenylalanine measurement by the neonatal screening service in the state of Mato Grosso do Sul, IPED/Apae (SRTN –MS IPED/Apae), the connection between therapeutic adherence and the quantification of breastfeeding and the achievement of age-appropriate neuropsychomotor development. Methods: Retrospective cohort study involved patients treated from July to December 2022, of the 20 patients seen during this period, 5 were excluded from the analysis of data on control of serum phenylalanine while breastfeeding due to lack of data regarding treatment and levels of phenylketonuria in the first year of life, once, who lived in other states and were monitored in other services. Of the patients who participated, clinical and biochemical data, as well as demographic, social and treatment data, were analyzed from medical records. Results: In this group there was 1 case of consanguinity. 66.6% of patients were male. Most patients were diagnosed with classic phenylketonuria (46.6%), followed by 40% with mild phenylketonuria and only 13.3% with a diagnosis of other forms of phenylketonuria. The patients belonged to socioeconomic classes B2, C1, C2, D-E. It was not possible to establish a correlation between the socioeconomic class of patients and better control of the disease. Only two patients presented a delay in neuropsychomotor development, one with non-phenylketonuric hyperphenylalanine and the other with benign hyperphenylaninemia, in both cases the delay is not correlated with hyperphenylaninemia. Conclusion: Phenylketonuria has a good prognosis when diagnosed early and adequate therapy and monitoring are instituted. There is no consensus regarding the suspension of breastfeeding. Studies stating an age/serum phenylalanine dosage that indicates the need to discontinue breastfeeding are encouraged. O presente estudo teve como objetivo avaliar retrospectivamente em uma coorte de pacientes com diagnóstico de fenilcetonúria, triados pelo teste do pezinho e confirmados por dosagem sérica de fenilalanina pelo serviço de triagem neonatal do estado de Mato Grosso do Sul, IPED/Apae (SRTN–MS IPED/Apae), a conexão acerca da adesão terapêutica quanto a quantificação do aleitamento materno e o alcance do desenvolvimento neuropsicomotor adequado para a idade. Métodos: Estudo de coorte retrospectivo envolveu pacientes atendidos de julho a dezembro de 2022, dos 20 pacientes atendidos neste período, 5 foram excluídos da análise dos dados sobre o controle de fenilalanina sérica na vigência de aleitamento materno por não haver dados referentes ao tratamento e níveis de fenilcetonúria no primeiro ano de vida, uma vez, que residiam em outros estados e eram acompanhados em outros serviços. Dos pacientes que participaram, foram analisados a partir dos registros em prontuários os dados clínicos e bioquímicos, além de dados demográficos, sociais e de tratamento Resultados: Nesse grupo havia 1 caso de consanguinidade. 66,6% dos pacientes eram do sexo masculino. A maior parte dos pacientes foi diagnosticado com fenilcetonúria clássica (46,6%), seguidos de 40% com fenilcetonúria leve e apenas 13,3% com diagnóstico de outras formas de fenilcetonúria. Os pacientes pertenciam as classes socioeconômicas B2, C1, C2, D-E. Não foi possível estabelecer uma correlação entre a classe socioeconômica dos pacientes e o melhor controle da doença. Apenas dois pacientes apresentaram atraso no desenvolvimento neuropsicomotor, sendo um com hiperfenilalanina não fenilcetonúrica   e outro com hiperfenilaninemia benigna, em ambos o atraso não está correlacionado a hiperfenilaninemia. Conclusão: A fenilcetonúria apresenta bom prognóstico quando diagnosticada precocemente e instituída a terapêutica e acompanhamento adequado. Não existe consenso a respeito da suspensão do aleitamento materno. Estudos afirmando uma idade/dosagem sérica de fenilalanina que indiquem necessidade de suspensão do aleitamento materno são encorajados

Análise comparativa entre as metodologias de PCR metilação-específica (MSP), Southern blot (SB) e FISH utilizadas no diagnóstico genético molecular de pacientes com suspeita clínica das síndromes de Prader-Willi ou Angelman

Introdução: Prader-Willi (SPW) e Angelman (SA) são síndromes clinicamente distintas, causadas pela perda de expressão de genes na região cromossômica 15q11.2-q13, de origem paterna ou materna, respectivamente. Ambas compartilham os mesmos métodos diagnósticos. Nossos objetivos foram: a) analisar por PCR metilação-específica (MSP) pacientes com suspeita clínica de SPW/SA; b) comparar resultados de diferentes metodologias de diagnóstico molecular; c) aplicar a técnica MSP na rotina assistencial de pacientes encaminhados ao Serviço de Genética Médica/Hospital de Clínicas de Porto Alegre (SGM/HCPA).Métodos: Foram analisados 123 pacientes com suspeita clínica de SPW (n = 71) ou SA (n = 52) por MSP. Desses, 79 possuíam análise prévia por hibridação in situ fluorescente (FISH) e/ou Southern blot (SB).Resultados: Foram detectados 21 casos positivos – 15 de SPW (12,19%) e 6 de SA (4,88%). Nove pacientes tiveram etiologia molecular determinada, sendo sete com diagnóstico de SPW (quatro dissomias uniparentais – UPD15 materna – e três deleções na região 15q11-13) e dois com diagnóstico de SA (um com UPD15 paterna e um com deleção na região 15q11-13). Foram observados resultados equivalentes entre MSP e SB e resultados discrepantes entre MSP e FISH (n = 4). Foram padronizados dois protocolos de MSP para confirmação dos resultados e controle interno de qualidade.Conclusão: O perfil de detecção de cada técnica varia de acordo com o mecanismo etiológico presente. A análise por MSP detecta alterações no padrão de metilação geradas por deleção, UPD e defeitos de imprinting, sem identificar o mecanismo etiológico responsável. Contudo, mostrou ser eficiente para confirmação do diagnóstico clínico e screening dos pacientes com suspeita clínica sugestiva de SPW e SA. Diante de resultados positivos, é importante a identificação do mecanismo molecular subjacente para correlação genótipo-fenótipo e determinação do risco de recorrência familiar, fundamental para o aconselhamento genético. Palavras-chave: Metilação; imprinting; Prader-Willi; Angelma

Análise comparativa entre as metodologias de PCR metilação-específica (MSP), Southern blot (SB) e FISH utilizadas no diagnóstico genético molecular de pacientes com suspeita clínica das síndromes de Prader-Willi ou Angelman

Introdução: Prader-Willi (SPW) e Angelman (SA) são síndromes clinicamente distintas, causadas pela perda de expressão de genes na região cromossômica 15q11.2-q13, de origem paterna ou materna, respectivamente. Ambas compartilham os mesmos métodos diagnósticos. Nossos objetivos foram: a) analisar por PCR metilação-específica (MSP) pacientes com suspeita clínica de SPW/SA; b) comparar resultados de diferentes metodologias de diagnóstico molecular; c) aplicar a técnica MSP na rotina assistencial de pacientes encaminhados ao Serviço de Genética Médica/Hospital de Clínicas de Porto Alegre (SGM/HCPA). Métodos: Foram analisados 123 pacientes com suspeita clínica de SPW (n = 71) ou SA (n = 52) por MSP. Desses, 79 possuíam análise prévia por hibridação in situ fluorescente (FISH) e/ou Southern blot (SB). Resultados: Foram detectados 21 casos positivos – 15 de SPW (12,19%) e 6 de SA (4,88%). Nove pacientes tiveram etiologia molecular determinada, sendo sete com diagnóstico de SPW (quatro dissomias uniparentais – UPD15 materna – e três deleções na região 15q11-13) e dois com diagnóstico de SA (um com UPD15 paterna e um com deleção na região 15q11-13). Foram observados resultados equivalentes entre MSP e SB e resultados discrepantes entre MSP e FISH (n = 4). Foram padronizados dois protocolos de MSP para confirmação dos resultados e controle interno de qualidade. Conclusão: O perfil de detecção de cada técnica varia de acordo com o mecanismo etiológico presente. A análise por MSP detecta alterações no padrão de metilação geradas por deleção, UPD e defeitos de imprinting, sem identificar o mecanismo etiológico responsável. Contudo, mostrou ser eficiente para confirmação do diagnóstico clínico e screening dos pacientes com suspeita clínica sugestiva de SPW e SA. Diante de resultados positivos, é importante a identificação do mecanismo molecular subjacente para correlação genótipo-fenótipo e determinação do risco de recorrência familiar, fundamental para o aconselhamento genético.  Palavras-chave: Metilação; imprinting; Prader-Willi; Angelma

Molecular analysis of holoprosencephaly in South America

Holoprosencephaly (HPE) is a spectrum of brain and facial malformations primarily reflecting genetic factors, such as chromosomal abnormalities and gene mutations. Here, we present a clinical and molecular analysis of 195 probands with HPE or microforms; approximately 72% of the patients were derived from the Latin American Collaborative Study of Congenital Malformations (ECLAMC), and 82% of the patients were newborns. Alobar HPE was the predominant brain defect in almost all facial defect categories, except for patients without oral cleft and median or lateral oral clefts. Ethmocephaly, cebocephaly, and premaxillary agenesis were primarily observed among female patients. Premaxillary agenesis occurred in six of the nine diabetic mothers. Recurrence of HPE or microform was approximately 19%. The frequency of microdeletions, detected using Multiplex Ligation-dependant Probe Amplification (MLPA) was 17% in patients with a normal karyotype. Cytogenetics or QF-PCR analyses revealed chromosomal anomalies in 27% of the probands. Mutational analyses in genes SHH, ZIC2, SIX3 and TGIF were performed in 119 patients, revealing eight mutations in SHH, two mutations in SIX3 and two mutations in ZIC2. Thus, a detailed clinical description of new HPE cases with identified genetic anomalies might establish genotypic and phenotypic correlations and contribute to the development of additional strategies for the analysis of new cases.250262Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

High dosage folic acid supplementation, oral cleft recurrence and fetal growth

Objectives: To evaluate the effects of folic acid supplementation on isolated oral cleft recurrence and fetal growth. Patients and Methods: The study included 2,508 women who were at-risk for oral cleft recurrence and randomized into two folic acid supplementation groups: 0.4 and 4 mg per day before pregnancy and throughout the first trimester. The infant outcome data were based on 234 live births. In addition to oral cleft recurrence, several secondary outcomes were compared between the two folic acid groups. Cleft recurrence rates were also compared to historic recurrence rates. Results: The oral cleft recurrence rates were 2.9% and 2.5% in the 0.4 and 4 mg groups, respectively. The recurrence rates in the two folic acid groups both separately and combined were significantly different from the 6.3% historic recurrence rate post the folic acid fortification program for this population (p = 0.0009 when combining the two folic acid groups). The rate of cleft lip with palate recurrence was 2.9% in the 0.4 mg group and 0.8% in the 4 mg group. There were no elevated fetal growth complications in the 4 mg group compared to the 0.4 mg group. Conclusions: The study is the first double-blinded randomized clinical trial (RCT) to study the effect of high dosage folic acid supplementation on isolated oral cleft recurrence. The recurrence rates were similar between the two folic acid groups. However, the results are suggestive of a decrease in oral cleft recurrence compared to the historic recurrence rate. A RCT is still needed to identify the effect of folic acid on oral cleft recurrence given these suggestive results and the supportive results from previous interventional and observational studies, and the study offers suggestions for such future studies. The results also suggest that high dosage folic acid does not compromise fetal growt

Reduced transcription of TCOF1 in adult cells of Treacher Collins syndrome patients

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Treacher Collins syndrome (TCS) is an autosomal dominant craniofacial disorder caused by frameshift deletions or duplications in the <it>TCOF1 </it>gene. These mutations cause premature termination codons, which are predicted to lead to mRNA degradation by nonsense mediated mRNA decay (NMD). Haploinsufficiency of the gene product (treacle) during embryonic development is the proposed molecular mechanism underlying TCS. However, it is still unknown if <it>TCOF1 </it>expression levels are decreased in post-embryonic human cells.</p> <p>Methods</p> <p>We have estimated <it>TCOF1 </it>transcript levels through real time PCR in mRNA obtained from leucocytes and mesenchymal cells of TCS patients (n = 23) and controls (n = 18). Mutational screening and analysis of NMD were performed by direct sequencing of gDNA and cDNA, respectively.</p> <p>Results</p> <p>All the 23 patients had typical clinical features of the syndrome and pathogenic mutations were detected in 19 of them. We demonstrated that the expression level of <it>TCOF1 </it>is 18-31% lower in patients than in controls (<it>p < 0.05</it>), even if we exclude the patients in whom we did not detect the pathogenic mutation. We also observed that the mutant allele is usually less abundant than the wild type one in mesenchymal cells.</p> <p>Conclusions</p> <p>This is the first study to report decreased expression levels of <it>TCOF1 </it>in TCS adult human cells, but it is still unknown if this finding is associated to any phenotype in adulthood. In addition, as we demonstrated that alleles harboring the pathogenic mutations have lower expression, we herein corroborate the current hypothesis of NMD of the mutant transcript as the explanation for diminished levels of <it>TCOF1 </it>expression. Further, considering that <it>TCOF1 </it>deficiency in adult cells could be associated to pathologic clinical findings, it will be important to verify if TCS patients have an impairment in adult stem cell properties, as this can reduce the efficiency of plastic surgery results during rehabilitation of these patients.</p