Paratuberculosis bovina: estrategias para el diagnóstico en rebaños lecheros de la cuenca sur del Uruguay

La Paratuberculosis, (PT) también conocida como Enfermedad de Johne es una enfermedad entérica crónica y progresiva de los rumiantes y animales silvestres, producida por una bacteria: Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map). La PT se caracterizada clínicamente en bovinos por diarrea crónica, debilidad, pérdida de peso, hipoproteinemia y muerte. Así mismo se la ha asocia a una enfermedad en humanos denominada enfermedad e Crohn, siendo el Map aislado de biopsias de intestino de pacientes con esta enfermedad. Se estudiaron 3 herramientas de diagnóstico para detectar rebaños infectados por Map. Se muestrearon 9 establecimientos lecheros, se extrajeron muestras ambientales 8 áreas diferentes en promedio. Así mismo se extrajeron muestras de sangre y de materia fecal individual de 45 bovinos mayores de 2 años en producción. Con las muestras de materia fecal se realizaron pools de 3, 6 y 9 muestras individuales por pool. Tanto las muestras de materia fecal individual, como las muestras de pools y ambientales fueron procesadas por el método de centrifugación y cultivadas en el medio de cultivo Herrold con micobactina. Se obtuvieron 6 muestras de cultivo de materia fecal individual positivos de 408 sembradas. Así mismo se obtuvieron 2, 2, y 3 muestras de pools positivos de los pools de 3, 6 y 9 respectivamente. La sensibilidad de rodeo del método de pools fue de 11% (1/9), 22% (2/9) y 22% (2/9) para los pools de 3, 6 y 9 respectivamente. El cultivo individual tuvo una sensibilidad de rebaño de 44 %. El método de muestro ambiental detecto 2 de los establecimientos positivos de los 9 muestreados, las áreas con mayor porcentaje de positivos fue el estercolero del tambo y la sala previo al ordeñe. Las muestras de sangre fueron procesadas por la técnica de ELISA indirecto, se obtuvieron 14 muestras seropositivas de 451 analizadas, la sensibilidad y especificidad de la técnica con respecto al cultivo individual fue de 16,67% y 97,01% respectivamente. La sensibilidad del rebaño fue de 77, 78%. De los 9 establecimientos muestreados las 3 técnicas coincidieron en clasificar como positivos 2 de los 9. Si bien el número de muestras fue pequeño y por tanto los resultados no se pueden proyectar a la población general este trabajo espera contribuir con el conocimiento de la Paratuberculosis en el Uruguay y generar nuevas hipótesis para futuros trabajos

Abortion outbreak caused by Campylobacter fetus subspecies venerealis and Neospora caninum in a bovine dairy herd

In November 2015, an abortion outbreak occurred in a commercial dairy herd of 650 Holstein cows in Florida department, Uruguay. Forty-five (45) cows aborted within 3 wk. Five fetuses were subjected to gross and microscopic pathologic examination, and microbiological testing. One fetus had fibrinous epicarditis and peritonitis, and neutrophilic bronchopneumonia. Campylobacter fetus subsp. venerealis was detected by direct immunofluorescence, isolated and identified by PCR and sequencing of the 16S rDNA in the abomasal fluid and/or lung. Histologic examination of two other fetuses revealed nonsuppurative necrotizing encephalitis, lymphohistiocytic myositis and myocarditis, and lymphocytic interstitial nephritis. In these fetuses, N. caninum antigen was detected intralesionally by immunohistochemistry, and N. caninum DNA was amplified by PCR on formalin-fixed paraffin-embedded brain. Antibodies against N. caninum were detected by indirect immunofluorescence in 10 of 27 cows, with titers ranging from 1/200 to 1/3200. The results indicate that two abortigenic microorganisms may coexist and cause contemporaneous abortion in a herd. It is relevant to highlight the importance of performing multiple diagnostic tests in various aborted dams and fetuses from the same herd for the etiologic confirmation of bovine abortion syndromeEn noviembre de 2015 ocurrió un brote de abortos en un hato lechero comercial de 650 vacas Holstein en el departamento de Florida, Uruguay. Cuarenta y cinco (45) vacas abortaron en un lapso de 3 semanas. Cinco fetos fueron sometidos a un examen patológico macro y microscópico y a pruebas microbiológicas. Un feto tenía epicarditis fibrinosa y peritonitis, así como bronconeumonía neutrofílica. Se detectó Campylobacter fetus subesp. venerealis utilizando inmunofluorescencia directa; se lo aisló e identificó mediante PCR y secuenciación del 16S rDNA en el líquido abomasal y en el pulmón. El examen histológico de otros dos fetos reveló encefalitis necrotizante no supurativa, miositis linfohistiocítica y miocarditis, y nefritis linfocítica intersticial. En estos fetos se detectó intralesionalmente el antígeno de N. caninum mediante análisis inmunohistoquímico, y se amplificó el ADN de N. caninum mediante PCR en tejido cerebral fijado con formalina y embebido en parafina. Se detectaron anticuerpos contra N. caninum mediante inmunofluorescencia indirecta en 10 de 27 vacas, con títulos de entre 1/200 y 1/3200. Los resultados indican que dos microorganismos abortígenos pueden coexistir y provocar abortos contemporáneos en un hato. Subrayamos la importancia de realizar pruebas diagnósticas múltiples en diversas madres abortadas y fetos del mismo hato para obtener una confirmación etiológica del síndrome de aborto bovino.EEA BalcarceFil: Macías-Rioseco, Melissa. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; UruguayFil: Caffarena, Rubén D. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; Uruguay. Universidad de la República, Facultad de Veterinaria; UruguayFil: Fraga, Martín. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; UruguayFil: Silveira, Caroline. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; UruguayFil: Giannitti, Federico. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; Uruguay. University of Minnesota, Veterinary Population Medicine Departament; UsaFil: Cantón, Germán. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Hecker, Yanina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET); ArgentinaFil: Suanes, Alejandra. Ministerio de Ganadería Agricultura y Pesca. Montevideo. Dirección de Laboratorios Veterinarios; Uruguay.Fil: Riet-Correa, Franklin. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria; Urugua

Control of paratuberculosis: who, why and how. A review of 48 countries

Paratuberculosis, a chronic disease affecting ruminant livestock, is caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). It has direct and indirect economic costs, impacts animal welfare and arouses public health concerns. In a survey of 48 countries we found paratuberculosis to be very common in livestock. In about half the countries more than 20% of herds and flocks were infected with MAP. Most countries had large ruminant populations (millions), several types of farmed ruminants, multiple husbandry systems and tens of thousands of individual farms, creating challenges for disease control. In addition, numerous species of free-living wildlife were infected. Paratuberculosis was notifiable in most countries, but formal control programs were present in only 22 countries. Generally, these were the more highly developed countries with advanced veterinary services. Of the countries without a formal control program for paratuberculosis, 76% were in South and Central America, Asia and Africa while 20% were in Europe. Control programs were justified most commonly on animal health grounds, but protecting market access and public health were other factors. Prevalence reduction was the major objective in most countries, but Norway and Sweden aimed to eradicate the disease, so surveillance and response were their major objectives. Government funding was involved in about two thirds of countries, but operations tended to be funded by farmers and their organizations and not by government alone. The majority of countries (60%) had voluntary control programs. Generally, programs were supported by incentives for joining, financial compensation and/or penalties for non-participation. Performance indicators, structure, leadership, practices and tools used in control programs are also presented. Securing funding for long-term control activities was a widespread problem. Control programs were reported to be successful in 16 (73%) of the 22 countries. Recommendations are made for future control programs, including a primary goal of establishing an international code for paratuberculosis, leading to universal acknowledgment of the principles and methods of control in relation to endemic and transboundary disease. An holistic approach across all ruminant livestock industries and long-term commitment is required for control of paratuberculosis

Abortion outbreak caused by Campylobacter fetus subspecies venerealis and Neospora caninum in a bovine dairy herd

In November 2015, an abortion outbreak occurred in a commercial dairy herd of 650 Holstein cows in Florida department, Uruguay. Forty-five cows aborted within three weeks. Five fetuses were subjected to gross and microscopic pathologic examination, and microbiological testing. One fetus had fibrinous epicarditis and peritonitis, and neutrophilic bronchopneumonia. Campylobacter fetus subsp. venerealis was detected by direct immunofluorescence, isolated and identified by PCR and sequencing of the 16S rDNA in the abomasal fluid and/or lung. Histologic examination of two other fetuses revealed non-suppurative necrotizing encephalitis, lymphohistiocytic myositis and myocarditis, and lymphocytic interstitial nephritis. In these fetuses, N. caninum antigen was detected intralesionally by immunohistochemistry, and N. caninum DNA was amplified by PCR on formalin-fixed paraffin-embedded brain. Antibodies against N. caninum were detected by indirect immunofluorescence in 10 of 27 cows, with titers ranging from 1/200 to 1/3200. The results indicate that two abortigenic microorganisms may coexist and cause contemporaneous abortion in a herd. We highlight the importance of performing multiple diagnostic tests in various aborted dams and fetuses from the same herd for the etiologic confirmation of bovine abortion syndrome

Informe final del proyecto: Generación de un banco de cepas y ADN estandarizado para estudios epidemiológicos de Mycobacterium bovis en Uruguay

La tuberculosis bovina (TBB) es una enfermedad infecto-contagiosa crónica del ganado que en ocasiones afecta a otras especies de mamíferos incluyendo al hombre. Recientemente se ha observado una duplicación en el número de establecimientos positivos a TB en Uruguay, generando preocupación en el sector ganadero, así como en las autoridades sanitarias pertinentes. El ganado detectado positivo a T. Bovis se mantiene aislado y es sacrificado. Algunas muestras son posteriormente cultivadas para confirmar el agente infeccioso. Sin embargo esto se realiza para un número reducido de muestras y no se realizan otro tipo de análisis de vanguardia que permiten estudiar la epidemiología de la enfermedad como ser la tipificación. Para poder evaluar la epidemiología de las enfermedades micobacterianas es fundamental poder discriminar a los miembros del complejo Mycobacterium tuberculosis. La diversidad genómica entre cepas de M. bovis es un factor importante en la determinación de la patogénesis que puede influir en el grado de virulencia, transmisibilidad, y respuesta del huésped. El diseño de estrategias e intervenciones en salud pública basadas en evidencias sobre la evolución, aparición y propagación de enfermedades infecciosas es uno de los principales objetivos de la epidemiología actual. El seguimiento que permita el trazado de las cepas de M. bovis circulantes en nuestro país con el fin de estudiar la dinámica de la TBB en Uruguay en relación a los datos genéticos/genómicos es de suma importancia. El objetivo de este proyecto es realizar un plan piloto para establecer un banco de islados y ADN que permita el seguimiento de la enfermedad a través de estudios bioquímicos y marcadores genéticos, que permita predecir el desarrollo de la enfermedad y mas importante ayude a establecer políticas concisas para el control de la enfermedad.Agencia Nacional de Investigación e Innovació

Informe final del proyecto: Generación de un banco de cepas y ADN estandarizado para estudios epidemiológicos de Mycobacterium bovis en Uruguay

La tuberculosis bovina (TBB) es una enfermedad infecto-contagiosa crónica del ganado que en ocasiones afecta a otras especies de mamíferos incluyendo al hombre. Recientemente se ha observado una duplicación en el número de establecimientos positivos a TB en Uruguay, generando preocupación en el sector ganadero, así como en las autoridades sanitarias pertinentes. El ganado detectado positivo a T. Bovis se mantiene aislado y es sacrificado. Algunas muestras son posteriormente cultivadas para confirmar el agente infeccioso. Sin embargo esto se realiza para un número reducido de muestras y no se realizan otro tipo de análisis de vanguardia que permiten estudiar la epidemiología de la enfermedad como ser la tipificación. Para poder evaluar la epidemiología de las enfermedades micobacterianas es fundamental poder discriminar a los miembros del complejo Mycobacterium tuberculosis. La diversidad genómica entre cepas de M. bovis es un factor importante en la determinación de la patogénesis que puede influir en el grado de virulencia, transmisibilidad, y respuesta del huésped. El diseño de estrategias e intervenciones en salud pública basadas en evidencias sobre la evolución, aparición y propagación de enfermedades infecciosas es uno de los principales objetivos de la epidemiología actual. El seguimiento que permita el trazado de las cepas de M. bovis circulantes en nuestro país con el fin de estudiar la dinámica de la TBB en Uruguay en relación a los datos genéticos/genómicos es de suma importancia. El objetivo de este proyecto es realizar un plan piloto para establecer un banco de islados y ADN que permita el seguimiento de la enfermedad a través de estudios bioquímicos y marcadores genéticos, que permita predecir el desarrollo de la enfermedad y mas importante ayude a establecer políticas concisas para el control de la enfermedad.Agencia Nacional de Investigación e Innovació

Isolation of pathogenic Leptospira strains from naturally infected cattle in Uruguay reveals high serovar diversity, and uncovers a relevant risk for human leptospirosis.

Leptospirosis is a neglected zoonosis with worldwide distribution. The causative agents are spirochete bacteria of the Leptospira genus, displaying huge diversity of serovars, the identity of which is critical for effective diagnosis and vaccination purposes. Among many other mammalian species, Leptospira infects cattle, eliciting acute signs in calves, and chronic disease in adult animals often leading to abortions. In South America, and including in Uruguay, beef and dairy export are leading sources of national income. Despite the importance of bovine health, food safety, and bovine-related dissemination of leptospirosis to humans, extremely limited information is available as to the identity of Leptospira species and serovars infecting cattle in Uruguay and the South American subcontinent. Here we report a multicentric 3-year study resulting in the isolation and detailed characterization of 40 strains of Leptospira spp. obtained from infected cattle. Combined serologic and molecular typing identified these isolates as L. interrogans serogroup Pomona serovar Kennewicki (20 strains), L. interrogans serogroup Canicola serovar Canicola (1 strain), L. borgpetersenii serogroup Sejroe serovar Hardjo (10 strains) and L. noguchii (9 strains). The latter showed remarkable phenotypic and genetic variability, belonging to 6 distinct serogroups, including 3 that did not react with a large panel of reference serogrouping antisera. Approximately 20% of cattle sampled in the field were found to be shedding pathogenic Leptospira in their urine, uncovering a threat for public health that is being largely neglected. The two L. interrogans serovars that we isolated from cattle displayed identical genetic signatures to those of human isolates that had previously been obtained from leptospirosis patients. This report of local Leptospira strains shall improve diagnostic tools and the understanding of leptospirosis epidemiology in South America. These strains could also be used as new components within bacterin vaccines to protect against the pathogenic Leptospira strains that are actually circulating, a direct measure to reduce the risk of human leptospirosis