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The In Vitro Effect of Royal Jelly, Apis mellifera, on Proliferation of Human Gingival,Periodontal Ligament Fibroblasts and Human Bone Cells
AbstractObjective: To study the in vitro effect of royal jelly crude extraction (RJCE)on proliferation and osteoblastic activity in 3 cell types which were human gingival fibroblasts (HGF), human periodontal ligament fibroblasts (HPDL) and human hip bone cells (HIP). Method: This study used 24-hour (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) cytotoxic assay, sulforhodamin B (SRB) proliferation assay and alkaline phosphatase activity (ALP) assay to evaluate the responses of these three cell types to the RJCE (concentrations of 0.1, 0.5, 1, 5 and 10 mg/ml) after 14-dayculture. Results: It was found that RJCE was cytotoxic to HGF and HPDL at 10 mg/ml, but no cytotoxicity to HIP. From a 6-day-proliferation assay, RJCE showed proliferation inhibition to HGF and HPDL at 5 mg/ml, however, slight proliferation stimulation was observed with lower doses. On the contrary, HIP showed no proliferation response to RJCE for all dosages used up to 5 mg/ml. Stimulation on alkaline phosphatase (ALP) activity for HPDL and HIP with or without RJCE after 14-day culture was found only in HIP at 5 mg/ml RJCE, and not in HPDL. Conclusion: this present study showed different effect of RJCE on the 3 cell lines proliferation. The positive effect on bone cell proliferation and ALP activity looks promising for bone regeneration as needed for periodontal disease as well as other bone pathology.Keywords: royal jelly, human gingival fibroblasts, human periodontal ligament fibroblasts, human hip bone cells, cytotoxicity āļāļāļāļąāļāļĒāđāļāļ§āļąāļāļāļļāļāļĢāļ°āļŠāļāļāđ: āđāļāļ·āđāļāļāļāļŠāļāļāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļēāļāļāļĄāļāļķāđāļāļāđāļāļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļāļĨāļĨāđāđāļĨāļ°āļāļĨāļāđāļāļāļēāļĢāļŠāļĢāđāļēāļāđāļāļĨāļĨāđāļāļĢāļ°āļāļđāļāđāļāđāļāļĨāļĨāđ 3 āļāļāļīāļ āļāļ·āļ āđāļāļĨāļĨāđāđāļāđāļāļĢāļāļĨāļēāļŠāļāđāļāļēāļāđāļāļ·āđāļāđāļĒāļ·āđāļāđāļŦāļāļ·āļāļāļĄāļāļļāļĐāļĒāđ (HGF) āļāļēāļāđāļāđāļāļĒāļķāļāļāļĢāļīāļāļąāļāļāđ (HPDL) āđāļĨāļ°āđāļāļĨāļĨāđāļāļĢāļ°āļāļđāļāļŠāļ°āđāļāļāļĄāļāļļāļĐāļĒāđ (HIP)āļ§āļīāļāļĩāļāļēāļĢāļĻāļķāļāļĐāļē: āļāļāļŠāļāļāļāļĨāļāļāļāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļĄāļāļķāđāļ (āļāļ§āļēāļĄāđāļāđāļĄāļāđāļ 0.1, 0.5, 1, 5 āđāļĨāļ°10 āļĄāļ./āļĄāļĨ.) āļāđāļāļāļēāļĢāļĄāļĩāļāļĩāļ§āļīāļāļāļāļāđāļāļĨāļĨāđāļāđāļ§āļĒāļ§āļīāļāļĩ (3-(4,5 āđāļāđāļĄāđāļāļāļīāļĨāđāļāļāļ°āļāļāļĨ-2-āļāļīāļĨ)-2,5-āđāļāđāļāļāļīāļĨāđāļāļāļĢāļ°āđāļāđāļĨāļĩāļĒāļĄāđāļāļĢāđāļĄāļāđ (MTT) āļĻāļķāļāļĐāļēāļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļāļĨāļĨāđāđāļāļāđāļ§āļ 6āļ§āļąāļāļāđāļ§āļĒāļ§āļīāļāļĩāļāļąāļĨāđāļāđāļĢāļāļēāļĄāļīāļāļāļĩ (SRB) āđāļĨāļ°āļ§āļąāļāļĢāļ°āļāļąāļāļāļēāļĢāļāļģāļāļēāļāļāļāļāļŠāļēāļĢāļāļąāļĨāļāļēāđāļĨāļāđāļāļāļŠāļāļēāđāļāļŠ (ALP) āđāļāļ·āđāļāļ§āļąāļāļāļēāļĢāļāļāļāļŠāļāļāļāļāļāļāđāļāļĨāļĨāđāļāļąāļāđ 3 āļāļāļīāļāļāđāļāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļēāļāļāļĄāļāļķāđāļāđāļāļĒāļāļēāļĢāđāļāļēāļ°āđāļĨāļĩāđāļĒāļāđāļāđāļāđāļ§āļĨāļē 14 āļ§āļąāļ āļāļĨāļāļēāļĢāļĻāļķāļāļĐāļē: āļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļĄāļāļķāđāļāđāļāđāļĄāļāđāļ 10 āļĄāļ./āļĄāļĨ.āđāļāđāļāļāļīāļĐāļāđāļ HGF āđāļĨāļ° HPDL āđāļāđāđāļĄāđāļāļāļĪāļāļāļīāļāđ āļąāļāļāļĨāđāļēāļ§āļāđāļ HIP āļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļĄāļāļķāđāļāļĒāļąāļāļĒāļąāļāđāļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļāļĨāļĨāđ HGF āđāļĨāļ° HPDL āļāļĩāđ 5 āļĄāļ./āļĄāļĨ. āđāļāļĒāļāļĩāđāļāļ§āļēāļĄāđāļāđāļĄāļāđāļāļāđāļģāļāļ§āđāļēāļāļĩāđāļāļĢāļ°āļāļļāđāļāļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļāļĨāļĨāđāļāļąāļāļāļĨāđāļēāļ§āđāļāđāđāļĨāđāļāļāđāļāļĒ āđāļāļāļēāļāļāļĨāļąāļāļāļąāļāļāļāļ§āđāļēāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļĄāļāļķāđāļāļāļļāļāļāļ§āļēāļĄāđāļāđāļĄāļāđāļāđāļĄāđāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļāļĨāļĨāđ HIP āđāļāđāļāļĨāļĨāđ HPDLāđāļĨāļ° HIP āļāļĩāđāđāļāļīāļĄāđāļĨāļ°āđāļĄāđāđāļāļīāļĄāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļĄāļāļķāđāļāļāļāļāļēāļĢāļ§āđāļēāļāļēāļĢāļāļģāļāļēāļāļāļāļāļāļąāļĨāļāļēāđāļĨāļāđāļāļāļŠāļāļēāđāļāļŠāļāļđāļāļāļĢāļ°āļāļļāđāļāđāļHIP āļāļĩāđāļāļ§āļēāļĄāđāļāđāļĄāļāđāļāļāļāļāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļĄāļāļķāđāļ 5 āļĄāļ./āļĄāļĨ. āđāļāļĒāđāļĄāđāļĄāļĩāļāļĨāļāđāļ HPDL āļŠāļĢāļļāļ:āļāļāļāļĨāļāļāļāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļēāļāļāļĄāļāļķāđāļāļāļĩāđāđāļāļāļāđāļēāļāļāļąāļāđāļāļāđāļēāļāļāļēāļĢāļāļĢāļ°āļāļļāđāļāļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļāđāļāļĨāļĨāđ 3 āļāļāļīāļ āđāļāļĒāļāļāļāļīāļĻāļāļēāļāļāļĩāđāļāļĩāļāļāļāļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļēāļāļāļĄāļāļķāđāļāļāļĩāđāđāļŦāđāļāļĨāļāļ§āļāļāđāļāļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļģāļāļ§āļāđāļĨāļ°āļāļēāļĢāđāļāļīāđāļĄāļāļēāļĢāļāļģāļāļēāļāļāļāļāļŠāļēāļĢāļāļąāļĨāļāļēāđāļĨāļāđāļāļāļŠāļāļēāđāļāļŠāđāļāđāļāļĨāļĨāđāļāļĢāļ°āļāļđāļ āļāļķāđāļāļŠāđāļāļāļĨāļāļĩāļŠāļģāļŦāļĢāļąāļāļāļ§āļēāļĄāļāđāļāļāļāļēāļĢāļāļĢāļ°āļāļļāđāļāđāļŦāđāļŠāļĢāđāļēāļāļāļĢāļ°āļāļđāļāđāļāļāļēāļĢāļĢāļąāļāļĐāļēāđāļĢāļāļāļĢāļīāļāļąāļāļāđāļāļąāļāđāļŠāļāļŦāļĢāļ·āļāđāļĢāļāļāļ·āđāļ āđ āļāļĩāđāļāļāļāļēāļĢāļāļģāļĨāļēāļĒāļāļĢāļ°āļāļđāļāļāļģāļŠāļģāļāļąāļ: āļŠāļēāļĢāļŠāļāļąāļāļāļēāļāļāļĄāļāļķāđāļ, āđāļāļĨāļĨāđāđāļāđāļāļĢāļāļĨāļēāļŠāļāđāļāļēāļāđāļāļ·āđāļāđāļĒāļ·āđāļāđāļŦāļāļ·āļāļāļĄāļāļļāļĐāļĒāđ,āđāļāļĨāļĨāđāđāļāđāļāļĢāļāļĨāļēāļŠāļāđāļāļēāļāđāļāđāļāļĒāļķāļāļāļĢāļīāļāļąāļāļāđ, āđāļāļĨāļĨāđāļāļĢāļ°āļāļđāļāļĄāļāļļāļĐāļĒāđ, āļāļ§āļēāļĄāđāļāđāļāļāļīāļĐāļāđāļāđāļāļĨāļĨ