Efeito do cálcio na sobrevivência, crescimento e miogêneses do Rhamdia quelen durante o desenvolvimento larval e pós-larval

Orientadora : Profª. Drª. Flavia Sant'Anna RiosCo-orientador : Prof. Dr. Francisco Filipak NetoDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 16/03/2012Inclui referênciasÁrea de concentração : Biologia celular e molecularResumo: A água doce possui grande variedade de íons dissolvidos, os quais variam de acordo com a região, podendo afetar positivamente ou negativamente vários processos biológicos dos peixes, tais como sobrevivência e crescimento. Um desses minerais, o cálcio, é de particular importância à vários processos celulares e fisiológicos, além de estar relacionado com a diferenciação muscular (miogênese). Sendo o cálcio um potente sinalizador, diferentes concentrações deste íon (dissolvido na água) foram avaliadas na sobrevivência, crescimento e miogênese durante o desenvolvimento larval e pós-larval de Rhamdia quelen (Jundiá) à 26±1 °C. Para tanto, embriões desta espécie, obtidos por fertilização in vitro, foram incubados em diferentes tratamentos variando-se a concentração de Ca2+ (0, 3,63, 18,18 e 36,36 mg Ca2+/L. A sobrevivência foi avaliada através do percentual dos indivíduos que resistiram até a fase pós larval (7 e 15 dias). As taxas de crescimento relativo (RGR) e protéica específica (SGR) foram determinadas pelas variações da massa corporal e do conteúdo protéico total entre os períodos de eclosão e pós-larval (7 dias). A taxa de síntese protéica de larvas e pós-larvas foi avaliada pelo cálculo da razão RNA/Proteínas. A densidade muscular foi verificada com base na variação do número das fibras musculares por área. Na ausência de Ca2+ na água, as larvas sofreram grande mortalidade; porém, nas demais concentrações estudadas não houve diferença significativa entre elas. As concentrações de cálcio dissolvido na água testadas (3,63, 18,18 e 36,36 mg Ca2+/L) não provocaram alterações nos demais parâmetros avaliados em larvas de Rhamdia quelen. Entretanto, nas pós-larvas, a massa corporal apresentou uma correlação positiva com a concentração de cálcio dissolvido na água. O cálcio não causou alterações na concentração total de RNA e de proteínas, tanto em larvas, quanto em pós-larvas, entretanto a concentração total de RNA foi maior em pós-larvas com 7 dias (168 hpf) do em larvas (~24 hpf). A razão RNA/Proteínas das pós-larvas com 7 dias foi inversamente proporcional à concentração de cálcio, bem como à massa corporal, indicando que quanto maior a concentração de cálcio, maior a síntese protéica e maior a massa corporal. Entre o período larval e pós-larval, houve perda de massa corporal nos indivíduos incubados em 3,63 e 18,18 mg Ca2+/L e ganho de massa na concentração 36,36 mg Ca2+/L. Entre esses mesmos períodos, houve perda de massa protéica nos indivíduos incubados em 0 mg Ca2+/L, manutenção do conteúdo protéico em e 3,63 mg Ca2+/L e acúmulo de proteínas nas concentrações 18,18 e 36,36 mg Ca2+/L. Concluiu-se que a maior densidade de fibras musculares foi observada nos indivíduos com a maior massa corporal, que foram os animais expostos a 36,36 mg Ca2+/L, indicando que houve crescimento hiperplásico. Os resultados encontrados mostram que n ausência ou em baixas quantidades de cálcio, as pós-larvas de Rhamdia quelen sofrem degradação protéica e redução no crescimento, acarretando altas mortalidades. Porém nas maiores concentrações de cálcio, as larvas apresentam boa sobrevivência e melhor crescimento em massa e protéico, assim como melhor crescimento muscular. A melhor concentração de Ca2+ para a sobrevivência e crescimento de R. quelen é 36,36 mg Ca2+/L. Palavras-chave: Crescimento, Desenvolvimento larval, Dureza, Jundiá. Músculo. Qualidade da água.Abstract: Freshwater has a large variety of dissolved ions, which vary according to region and can affect positively or negatively various biological processes of fish such as survival and growth. One of these minerals, calcium, is of particular importance for several cellular and physiological processes, besides being related to differentiation muscle (myogenic). Since calcium is a potent signalizer, different concentrations of this ion (dissolved in water) were measured in survival, growth and myogenesis during larval and post-larval development of Rhamdia quelen (Jundiá) at 26 ± 1 ° C. Embryos were obtained by in vitro fertilization and incubated in different treatments varying the concentration of Ca2+ (0, 3.63, 18.18, and 36.36 mg Ca2+/ L. The survival was assessed by percentage of individuals who have endured to the post larval stage (7 and 15 days). Relative (RGR) and specific protein (SGR) growth rates were determined by changes in body mass and total protein content between periods hatching larvae and post-larvae (7 days). The protein synthesis rate of larvae and post larvae was evaluated by calculating the ratio RNA / protein. The muscle density was checked based on the variation in the number of muscle fibers per area. In the absence of Ca2+ in water, the larvae suffer high mortality, but in the other concentrations studied there was no significant difference between them. Concentrations of dissolved calcium in the water tested (3.63, 18.18, and 36.36 mg Ca2+ / L) caused no changes in other parameters in larvae of R.quelen. However, in post-larvae, body mass was significantly correlated with the concentration of dissolved calcium in water. Calcium did not alter the total concentration of RNA and protein in both larvae or in post-larvae, however, the total concentration of RNA was higher in post-larvae on day 7 (168 hpf) of larvae (~ 24 hpf). RNA / proteins ratio of post-larvae on day 7 was inversely proportional to calcium concentration and body weight, indicating that the higher the concentration of calcium, the higher the protein synthesis and the greater the body weight. Among the post-larval and larval periods, body weight loss occurred in those incubated in 3.63 Ca2+ and 18.18 mg / L and mass gain in Ca2+ concentration 36.36 mg / L. Among these same periods, there was loss of protein mass in individuals incubated in Ca2+ 0 mg / L, keeping the content of protein and 3 63 mg Ca2+/ L and the concentration of protein accumulation 18.18 and 36.36 mg Ca2+/ L. Increased fiber density muscle was observed in the post-larvae with the higher body mass (36.36 mg Ca2+/ L), indicating hyperplasic growth. The results show that in the absence or low amounts of calcium, R. quelen post-larvae suffer protein degradation and reduced growth, resulting in high mortality. But the highest concentrations of calcium, the larval present good survival, better growth in mass and protein as well as better muscle growth. The best concentration of Ca2+ to the survival and growth of R. quelen Ca2+ is 36.36 mg / L. Keywords: Growth. Hardness. Jundiá. Larval development. Muscle.. Water qualit

A importância da estrutura familiar na organização da subjetividade

Esta pesquisa foi desenvolvida sob orientação da epistemologia qualitativa. Nela, uma tentativa de compreender as relações da estrutura familiar na organização da subjetividade da pessoa, não formulando justificativas que levem o pesquisador a concluir a discussão teórica do problema. Muito pelo contrário, considerando a inegável complexidade da constituição individual, propõe uma abordagem teórica sobre o papel da família no desenvolvimento psíquico. Foram aplicados instrumentos de pesquisa interativos (questionário, entrevista, complemento de frases e redação), os quais forneceram indicadores de que a família exerce importância fundamental na forma como a pessoa percebe a si mesmo e o mundo à sua volta. Apresenta, também, uma breve discussão acerca dos impactos negativos ou positivos nas relações parentais (pai-filho, filho-pai, mãe-filho, filho-mãe, pai-mãe, mãe-pai), na estruturação da auto-estima cujo comprometimento repercute nas relações afetivas e sociais da pessoa. Não obstante as dificuldades naturais encontradas ao longo da vida individual, a família opera influentemente sobre o modo como a subjetividade é organizada. Cada membro apresenta formas distintas de comportamento, possuindo sistema afetivo próprio e, de igual forma, modos particulares de pensar, agir e sentir, fatores estes que influenciam na formação do seu sentido subjetivo. Há uma busca frenética e continuada pela elaboração de soluções que facilitem o processamento destas operações subjetivas. Assim nascem os processos de construção das soluções criativas como instrumentos mediadores no processo de enfrentamento da complexa tarefa de viver em sociedade

Propriedade intangível: a tutela das criações intelectuais

O objetivo deste trabalho monográfico é demonstrar a estreita relação entre a proteção das criações intelectuais, sobretudo aquelas aplicadas na indústria, e o desenvolvimento técnico-científico. Neste sentido procurou-se efetuar breve relato histórico da evolução dos institutos de proteção às criações industriais. De maneira bastante singela pontuamos as primeiras tentativas de harmonização internacional dos diversos diplomas nacionais referentes à matéria, procurando demonstrar a partir de que momento histórico se deu a definitiva vinculação entre a propriedade das criações do espírito humano e o comércio internacional e qual a relevância dessa vinculação. Nesta senda destacaremos a importância que representa atualmente a adequada tutela da propriedade industrial voltando nossa atenção, sobretudo para a questão das patentes, sua relevância para o comércio internacional e suas relações com o desenvolvimento tecnológico sustentável

Desenvolvimento de antígenos e anticorpos recombinantes com potencial ao diagnóstico do vírus sincicial respiratório humano

Orientador: Prof. Dr. Marco Aurélio KriegerCoorientador: Prof. Dr. Nilson I. T. ZanchinTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa : Curitiba, 24/02/2017Inclui referências: p.128-137Resumo: O vírus sincicial respiratório humano (HRSV) é o principal causador de infecções respiratórias agudas, incluindo pneumonia e bronquiolite em recém-nascidos e crianças pequenas; pode acometer também idosos, transplantados e pacientes imunocomprometidos. Atualmente, nenhum tratamento terapêutico eficaz ou vacina contra esta doença está disponível. Sua alta relevância reforça a necessidade do desenvolvimento de um método de diagnóstico que seja capaz de detectar o vírus logo após o surgimento dos primeiros sintomas. Porém, deve-se levar em conta as caracteristicas genéticas, que é um dos fatores limitantes dos ensaios imunológicos de detecção. O HRSV é um vírus RNA(-) de cadeia simples que codifica onze proteínas. Dados da literatura indicam que as proteínas do envelope F1 e G, e a proteína do nucleocapsídeo (N), são as que apresentam maior potencial imunogênico. As sequências codificadoras destas proteínas foram utilizadas na construção de vetores de expressão para obtenção dos seus respectivos antígenos recombinantes em Escherichia coli. Após a purificação por cromatografia de afinidade e troca iônica, estes antígenos foram utilizados para obtenção de anticorpos policlonais em camundongos. Foi produzido também um fragmento sintético de anticorpo do tipo Fab em Pichia pastoris, que reconhece a proteína F1 do HRSV. A capacidade dos anticorpos policlonais e do fragmento Fab para detectar seus respectivos antígenos recombinantes ou nativos em swabs nasofaringeal, foram avaliadas pelos ensaios de ELISA, Luminex e Western blot. Através dos ensaios de ELISA e Luminex não foi possível detectar os antígenos vírais nas amostras clínicas para nenhuma das condições testadas. Porém, nos ensaios de Western blot foi possível detectar tanto o antígeno F1 recombinante quanto os antígenos nativos, quando presentes nas amostras clínicas. Este ensaio demonstrou que o fragmento Fab recombinante está funcional e que possui a mesma capacidade para reconhecer o antígeno que o anticorpo monoclonal completo, o qual foi usado como referência nos experimentos. O fragmento Fab pode ser usado eficientemente em muitos tipos de testes diagnósticos baseados na captura de partículas virais, que são os recomendados para a fase aguda desta infecção. Palavras-chave: HRSV. Fragmento Fab. Imunodiagnóstico. Detecção de antígenos.Abstract: The human respiratory syncytial virus (HRSV) is the main cause of acute respiratory infections, including pneumonia and bronchiolitis in infants and young children, but can also affect vulnerable adults, elderly, transplanted and immunocompromised patients. Currently, no effective treatment or vaccine against this disease is available, and its high relevance enforces the necessity of the development of a diagnostic method capable of detecting the virus, as soon as the first symptoms appear and according to its genetic characteristics, which is one of the limiting factors of immunological detection assays. HRSV is a single stranded RNA(-) virus encoding only 11 proteins. The literature indicates that the envelope proteins F1 and G and the nucleocapsid protein (N) are the major immunogenic proteins. The coding sequences of these proteins were used to construct expression vectors from which their respective recombinant antigens were produced in Escherichia coli. After purification affinity and ion exchange chromatography, these antigens were used to obtain polyclonal antibodies in mice. A synthetic fragment of a Fab-type antibody that recognizes HRSV F1 protein was also produced in Pichia pastoris. The capacity of the polyclonal and the Fab fragment to detect their respective recombinant or native antigens, from nasopharyngeal swabs, was evaluated by ELISA, Luminex system and Western blot assays. The ELISA and Luminex assays fail to detect the viral antigens in the clinical samples in all tested conditions. However, with Western blot assays, it was possible to detect both, the recombinant F1 and the native antigens when present in the clinical samples. Through these assays it was possible to demonstrate that the recombinant Fab fragment is functional and has the same ability to recognize antigens as the complete monoclonal antibody, which was used as a control in the experiments. This fragment can be efficiently used in many types of diagnostic tests based on the capture of viral particles which are recommended for the acute phase of infection. Key-words: HRSV. Fab fragment. Immunodiagnosis. Antigen detection

MÚSICA NA INFÂNCIA: CANTAR E CONSTRUIR CONHECIMENTO MATEMÁTICO

Este artigo apresenta um curso de formação continuada realizada com professores de Educação Infantil no projeto de extensão intitulado “Música na infância: cantar e contar na Matemática” da Faculdade de Educação, da Universidade Federal da Grande Dourados. A formação atendeu a catorze docentes de uma instituição municipal de Educação Infantil do interior do Mato Grosso do Sul. O projeto teve como objetivo incentivar os docentes a utilizar a música para desenvolver o conhecimento Matemático na Educação Infantil e aprimorar atividades que já são realizadas na instituição, para que possa haver a articulação entre a Música e o conhecimento Matemático. Como referencial teórico  utilizamos os documentos nacionais da Educação Infantil e alguns teóricos da área. Esse trabalho mostrou as possibilidades de desenvolvimento do pensamento lógico matemático e construção de registros reflexivos e de atividades a serem direcionadas às diferentes idades na Educação Infantil

MÚSICA NA INFÂNCIA: CANTAR E CONSTRUIR CONHECIMENTO MATEMÁTICO

Este artigo apresenta um curso de formação continuada realizada com professores de Educação Infantil no projeto de extensão intitulado “Música na infância: cantar e contar na Matemática” da Faculdade de Educação, da Universidade Federal da Grande Dourados. A formação atendeu a catorze docentes de uma instituição municipal de Educação Infantil do interior do Mato Grosso do Sul. O projeto teve como objetivo incentivar os docentes a utilizar a música para desenvolver o conhecimento Matemático na Educação Infantil e aprimorar atividades que já são realizadas na instituição, para que possa haver a articulação entre a Música e o conhecimento Matemático. Como referencial teórico  utilizamos os documentos nacionais da Educação Infantil e alguns teóricos da área. Esse trabalho mostrou as possibilidades de desenvolvimento do pensamento lógico matemático e construção de registros reflexivos e de atividades a serem direcionadas às diferentes idades na Educação Infantil

Análise da aderência da Lei de Newcomb-Benford como red flag para identificação de padrões inesperados nas ordens de pagamento emitidas pela Administração Pública Federal no Brasil

A contabilidade registra os eventos econômicos e financeiros ocorridos em organizações variadas, como públicas, privadas e sem finalidade lucrativa. No curso das atividades normais é necessário realizar verificações e confirmações a fim de que seja possível certificar que os resultados apresentados estão de acordo com a realidade patrimonial e financeira nos termos das regras contábeis vigentes. Nesse contexto, as red flags podem auxiliar os avaliadores a estruturarem suas estratégias de investigação e auditoria. Isto porque as red flags são sinais de alerta para fraude que indicam áreas para maior atenção por parte dos auditores. Uma técnica ainda pouco explorada e que tem ganhado atenção se chama Lei de Newcomb-Benford (Lei-NB), que, pelas características, pode ser considerada uma potencial red flag. Ela preconiza que, em uma relação de números qualquer, a probabilidade do 1º dígito de cada um desses números ser 1 é maior do que ser 9. Um ajuste fraco à lei é uma red flag de que há risco de que os dados contenham duplicações anormais e anomalias. Neste trabalho, optou-se por aplicar os testes estatísticos Teste Z e o Teste X². A partir da análise, verificou-se que alguns ministérios apresentam frequência do primeiro dígito diferente daquele proposto pela Lei-NB. Alguns ministérios, como os da Infraestrutura, da Agricultura, a Controladoria-Geral de União e a Advocacia-Geral da União, apresentaram uma realidade próxima ao esperado, enquanto outros, como os da Ciência e Tecnologia, da Educação, da Justiça e Segurança Pública, do Desenvolvimento Regional e da Saúde, apresentaram números bastante discrepantes

Produtividade, índice de vegetação e clorofila de trigo em resposta à inoculação com Azospirillum brasilense e adubação nitrogenada em cobertura

O objetivo foi avaliar os efeitos da inoculação de sementes de trigo (Triticum aestivum L.) com Azospirillum brasilense e doses de nitrogênio em cobertura no desempenho produtivo, índices de vegetação e clorofila e teores de nitrogênio na folha e no grão. Experimentos a campo foram conduzidos em delineamento experimental de blocos casualizados, esquema fatorial 2 x 5 com seis repetições. Avaliou-se a inoculação de sementes com Azospirillum brasilense (com e sem) e cinco doses de nitrogênio em cobertura (0, 30, 60, 90 e 120 kg ha-1), aplicadas por ocasião do perfilhamento. Foram avaliados: produtividade e massa de mil grãos, teor de nitrogênio na folha e grão, massa seca da parte aérea, índice de clorofila e de vegetação avaliados por ocasião do perfilhamento, elongamento do colmo e espigamento. Os dados foram submetidos à análise de variância, correlação e análise de regressão para doses, e comparação de médias pelo teste de Tukey a 5% para inoculação. O nitrogênio aplicado em cobertura no trigo cultivado após a soja não altera a produtividade, a massa de 1000 grãos e a massa seca da parte aérea, porém, o incremento das doses aumenta linearmente o teor de nitrogênio no grão e o índice de clorofila e de vegetação avaliado na fase de espigamento. A inoculação com Azospirillum brasilense aumenta o teor do nitrogênio no grão, mas não influencia as demais características avaliadas. O índice de vegetação por diferença normatizada (NDVI), avaliado no perfilhamento, elongamento do colmo e espigamento possui correlação positiva com a produtividade, quando avaliado no espigamento com o teor de nitrogênio da folha bandeira

Citocinina e potencial fisiológico de sementes de milho doce

O trabalho teve como objetivo avaliar diferentes concentrações de citocinina na manutenção do potencial fisiológico de sementes de milho doce antes e após o processo de envelhecimento acelerado. Sementes de milho doce, cultivar BR-400 (Super-Doce) foram submetidas à embebição em diferentes concentrações de citocinina (0, 50, 100, 150 e 200 mg L-1), Benzil Amino Purina (BAP), sob o delineamento experimental inteiramente casualizado. Após os tratamentos, avaliou-se a determinação do teor de água, teste de germinação, primeira contagem do teste de germinação, condutividade elétrica e lixiviação dos íons K, Ca e Mg e, em seguida foram submetidas ao envelhecimento acelerado seguido pelas mesmas determinações iniciais. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey

Influence of different alcohol intake frequencies on alveolar bone loss in adult rats : a sem study

Alcohol intake is associated with oral diseases and bone changes including alveolar bone loss in humans and in experimental animals. The main aim of the present study is to assess the effect of long-term alcohol intake, at different frequencies, on periodontal bone loss (PBL) in adult rats. Thirty-six (36) rats were divided into 3 groups: Control (daily water intake, n=12), daily alcohol intake (20% ethanol, n=12), and social alcohol intake (20% ethanol twice a week, n=12). The rats were sacrificed after 90 days and their right maxillae were removed. Initially, a random portion from each group was analyzed through SEM (scanning electron microscope) to assess surface topography. Next, all pieces were dissected and stained with methylene blue 1% and photographed in stereomicroscope at 10x magnification. The PBL was assessed by measuring the distance between cement-enamel junction and alveolar bone crest. Results showed higher (p=0.0368) alcohol solution amount in the daily intake group than in the twice week intake one. The SEM showed qualitatively flat bone surface in the control group, the social intake group presented surface with few minor hollows, and the daily intake group evidenced increased number and diameter of wells. The comparison between groups showed higher bone loss (p<0.05) in both frequencies than in the control, but the bone loss was lower (p<0.05) in the social alcohol intake group than in the daily intake one. Alcohol intake may cause alveolar bone loss in periodontitis-free rats depending on the frequency