Esteroides antitumorais: desenvolvimento e avaliação biológica de esteroides estrogénicos potencialmente úteis no tratamento do cancro da mama

Os cancros da mama e da próstata são das patologias mais prevalentes na sociedade atual, tendo elevado impacto social e económico. Assim, o desenvolvimento de estratégias terapêuticas eficientes e seguras neste contexto é de elevado interesse e tem estimulado investigadores em todo o mundo a desenvolver novos compostos capazes de combater estas patologias. Uma vez que grande parte destes tipos de tumores é, pelo menos numa fase inicial, dependente de hormonas esteroides para se desenvolver, as estratégias de descoberta de novas moléculas para os tratar passam frequentemente por preparar compostos esteroides análogos das hormonas endógenas que possam bloquear o crescimento tumoral, por antagonismo dos seus receptores ou por inibição da biossíntese dessas hormonas endógenas. Assim, o objectivo deste trabalho foi o desenvolvimento de esteroides da série estrano, potencialmente úteis no tratamento de tumores hormono-dependentes da mama e da próstata. Para isso, foram sintetizados, principalmente através de reacções de oxidação, e caracterizados estruturalmente por IV e RMN vários derivados esteroides da série estrano, análogos do estradiol e da estrona, e foi efectuada a avaliação da sua ação antiproliferativa em células MCF-7 e LNCaP através do ensaio MTT. Adicionalmente também foram estudados os efeitos destes compostos em células NHDF, saudáveis, para aferir a sua toxicidade selectiva perante as células tumorais. Os resultados obtidos mostraram que alguns compostos tinham ações antiproliferativas interessantes, potencialmente exploráveis, especialmente nas células LNCaP. Adicionalmente evidenciou-se, entre outros aspectos, que a introdução de um grupo 9α-OH ao esqueleto da estrona teve diferentes tipos de implicações na proliferação das células estudadas, que a introdução de uma dupla ligação em C9=C11 e de uma lactona no anel D (17a-oxa-D-homoderivados) parecem não ter efeito muito relevante nas ações antiproliferativas, e que nas células LNCaP, exceptuando para os derivados D-homo, a ação antiproliferativa mais marcada está associada à presença de grupos OH em C3 ou em C9

The influence of the blood pressure on the venous cerebral flow measured by magnetic susceptibility (SWI) technique

Susceptibility Weighted Image (SWI) is a Magnetic Resonance Imaging (MRI) technique that combines high spatial resolution and sensitivity to provide magnetic susceptibility differences between tissues. It is extremely sensitive to venous blood due to its iron content of deoxyhemoglobin. The aim of this study was to evaluate, through the SWI technique, the differences in cerebral venous vasculature according to the variation of blood pressure values. 20 subjects divided in two groups (10 hypertensive and 10 normotensive patients) underwent a MRI system with a Siemens® scanner model Avanto of 1.5T using a synergy head coil (4 channels). The obtained sequences were T1w, T2w-FLAIR, T2* and SWI. The value of Contrast-to-Noise Ratio (CNR) was assessed in MinIP (Minimum Intensity Projection) and Magnitude images, through drawing free hand ROIs in venous structures: Superior Sagittal Sinus (SSS) Internal Cerebral Vein (ICV) and Sinus Confluence (SC). The obtained values were presented in descriptive statistics-quartiles and extremes diagrams. The results were compared between groups. CNR shown higher values for normotensive group in MinIP (108.89 ± 6.907) to ICV; (238.73 ± 18.556) to SC and (239.384 ± 52.303) to SSS. These values are bigger than images from Hypertensive group about 46 a.u. in average. Comparing the results of Magnitude and MinIP images, there were obtained lower CNR values for the hypertensive group. There were differences in the CNR values between both groups, being these values more expressive in the large vessels-SSS and SC. The SWI is a potential technique to evaluate and characterize the blood pressure variation in the studied vessels adding a physiological perspective to MRI and giving a new approach to the radiological vascular studies

Evaluative Scales of the Student's Functioning : Two supporting instruments of teaching

2nd International Conference of Education, Research and Innovation. Madrid (Spain), on 16th, 17th and 18th of November, 2009 (Comunicação).This work is about two evaluative scales meant to gather the students’ perspectives on some dimensions of their functioning, between 8 and 13/14 years old. The main goal of the scales is to help teachers to deal with different aspects of learning, in order to facilitate teaching as a diversified task. One of the scales is focused on the Academic domain. In other words, it is conceptually close to areas or disciplines of the official education programs. The other one is focused on the Pro-Academic domain. It is linked with non intellectual variables that can interfere with the school achievement. Both instruments are supported by a multidimensional approach and its subject is about students’ potentialities, interests, concerns and difficulties. In this article, we point out procedures that held the definition of the dimensions in each scale and results of validation studies, mainly of internal consistency

Characterization of novel plasma membrane carboxylate transporters from non-conventional yeasts

Carboxylic acids (CAs) are a group of organic compounds that play a central role in cellular metabolism of many organisms, using it as unique sources of carbon and energy [1]. In order to replace conventional petroleum-based methods for the obtainment of CAs, alternatives are required for more sustainable way of producing these compounds. The exploitation of yeast biodiversity has received great interest from food, pharmaceuticals and even fuels companies, due to the interesting properties of some microorganisms in producing these compounds in a “greener” trait [2]. Non-Saccharomyces yeasts, also called unconventional yeasts, have recently gained prominence in the biotech industry, and are increasingly being used for the heterologous production of valuable products [3]. New strategies for increasing the production of bio-based organic acids are based on the expression of carboxylate transporters in Saccharomyces cerevisiae strains. In this work, we focus on the identification of new carboxylate transporters present in several yeasts. The strategy involved the search of homologs to known carboxylate transporters characterized in several microorganisms from yeast, fungi and bacteria. The S. cerevisiae IMX1000 Δ25 strain, without carboxylate uptake capacity, was used as a host for the heterologous expression of putative genes encoding CAs transporters [4]. Transport activity was determined by growth phenotypes in different medias containing sole carbon and energy sources, namely mono, di and tricarboxylic acids. The full characterization of the newly identified putative CAs transporters is currently undergoing

Se tu eliminares o conto de fadas da realidade eu sou contra ti: disse Kahn

Dissertação de mestrado integrado em Arquitetura (área de especialização em Cultura Arquitetónica)Em tempos marcados pela revalorização de ideais, tendo em vista mudanças de paradigma arquitetónico, o presente trabalho pretende contribuir para o equacionamento de uma “Arquitetura fantasiada” que, ainda pouco relevante junto de um discurso académico mais ortodoxo, tem, contudo, conquistado uma crescente importância, num contexto dominado pelo ceticismo de alguns. Procurando um distanciamento objetivo, intencional e fundamentado relativamente a uma prática prosaica e reducionista — a “Arquitetura silenciosa”, (a personagem inimiga) — a protagonista desta história é uma disciplina reinventada através da fantasia, da narrativa e dos contos de fadas (a heroína desta dissertação). Apelar-se-á a uma prática mais sensível, mais criativa; apelar-se-á, fundamentalmente, a uma transcendência figurativa, enaltecendo a imaginação como a principal e a mais importante ferramenta ao serviço de todo o processo de criação. Assim, a “Arquitetura fantasiada” desenvolver-se-á a partir de uma metodologia ficcional e interdisciplinar, incorporando conhecimentos oriundos desde a literatura fantástica à História da arte, desde a arquitetura à teoria da linguagem. Surgirá, ainda, no seu seguimento, a criação de um conto de fadas arquitetónico, narrado e ilustrado, a partir do qual se pretende, numa fase final, materializar todos estes propósitos num formato de projeto de arquitetura, manifestamente especulativo.In a time marked by the revaluation of ideals, and having as a goal changes in architectural paradigms, the present work intends to contribute to the conceiving of a “fantasized Architecture”; which, despite its little relevance to the orthodox academic discourse, has nevertheless gained a growing importance in a context dominated by the scepticism of some. Seeking an objective, intentional and founded distancing from a prosaic and reductionist practice — “Silent Architecture”, the enemy practice — the protagonist of this story is a discipline reinvented through fantasy, narrative and fairy tales (the heroine of this dissertation). An appeal will be made for a more sensitive and creative practice; an appeal will be made, fundamentally, to a figurative transcendence, which celebrates imagination as the main and most important tool on the service of the whole process of creation. Thus, “fantasized Architecture” will develop itself from a fictional and interdisciplinary methodology, by incorporating knowledge stemming from fantastic literature to art history, from architecture to the theory of language. Following this, there will be a creation of a narrated and illustrated fairy tale, onto which all of these manifestly speculative purposes will be materialized — in the shape of an architectural project

Desenvolvimento de um guia prático para acompanhamento de Planos Municipais de Ordenamento do Território no âmbito das competências da ARH Tejo – APA, I.P.

Relatório de Estágio de Mestrado em Gestão do Território, Área de Especialização em Ambiente e Recursos NaturaisEste trabalho constitui um relatório do estágio realizado na Agência Portuguesa do Ambiente (APA, I.P.), no Gabinete de Sistemas de Informação (GSI) do atual Departamento de Administração da Região Hidrográfica do Tejo e Oeste (ARH Tejo e Oeste), obedecendo aos requisitos para cumprimentos da componente não letiva do Mestrado em Gestão do Território, área de especialização em Ambiente e Recursos Naturais e para a obtenção de grau de Mestre pela Faculdade de Ciências Sociais e Humanas da Universidade Nova de Lisboa. O estágio, realizado sob a orientação da Engenheira Maria Teresa Álvares da Instituição de Acolhimento e pelo Professor José Eduardo Ventura da Faculdade de Ciências Sociais e Humanas (UNL), teve a duração de 800 horas que se iniciaram em Novembro do ano de 2012. O tema foi definido pelos representantes da Agência Portuguesa do Ambiente, tendo em consideração o contributo do trabalho a desenvolver tanto em termos de aplicação de conhecimentos académicos, como de utilidade para a Instituição. O título é “Desenvolvimento de um guia prático para acompanhamento de Planos Municipais de Ordenamento do Território no âmbito das competências da ARH Tejo /Agência Portuguesa do Ambiente”, e consistiu na elaboração de um conjunto tarefas de levantamento, tratamento e organização de informação como suporte à elaboração de ferramentas que viriam a constitui um guia prático para acompanhamento de Planos Municipais de Ordenamento do Território. A construção deste guia baseou-se na necessidade de simplificação de procedimentos de acompanhamento de Instrumentos de Gestão Territorial que, na sua generalidade, são complexas em função do elevado número de fases e aspetos a acautelar na sua execução

Estudo preliminar de escalas de avaliação do funcionamento do aluno

X Congresso Internacional Galego-Português de Psicopedagogia, realizado nos dias 9, 10 e 11 de Setembro de 2009, na Universidade do Minho (Campus de Gualtar).Neste trabalho apresentam-se procedimentos de construção de duas Escalas de avaliação do funcionamento do aluno, uma incidindo no domínio Académico e outra no Pró-Académico. Estas Escalas estão pensadas para serem usadas, em primeira instância, por professores e o seu conteúdo incide tanto ao nível dos interesses e potencialidades do aluno como das suas preocupações ou dificuldades. Caracterizam-se por uma composição multidimensional, procurando traduzir a diversidade de áreas dos programas de ensino, por um lado, e contemplando um conjunto de variáveis do domínio sócio cognitivo que têm evidenciado relação com a educação escolar, por outro. Assim, em primeiro lugar, procede-se a uma breve descrição das dimensões que definem a Escala Académica (EA) e a Escala Pró-Académica (EPA). Em seguida, dão-se a conhecer os resultados estatísticos alcançados, decorrentes da conjugação dos primeiros dados numéricos produzidos com elementos do domínio conceptual, com vista a fortalecer a consistência interna das dimensões estudadas e a reduzir o número de itens por Escala

Structural characterization of the Aspergillus niger citrate transporter CexA uncovers the role of key residues S75, R192 and Q196

Supplementary data associated with this article can be found in the online version at doi:10.1016/j.csbj.2023.04.025.The Aspergillus niger CexA transporter belongs to the DHA1 (Drug-H+ antiporter) family. CexA homologs are exclusively found in eukaryotic genomes, and CexA is the sole citrate exporter to have been functionally characterized in this family so far. In the present work, we expressed CexA in Saccharomyces cerevisiae, demonstrating its ability to bind isocitric acid, and import citrate at pH 5.5 with low affinity. Citrate uptake was independent of the proton motive force and compatible with a facilitated diffusion mechanism. To unravel the structural features of this transporter, we then targeted 21 CexA residues for site-directed mutagenesis. Residues were identified by a combination of amino acid residue conservation among the DHA1 family, 3D structure prediction, and substrate molecular docking analysis. S. cerevisiae cells expressing this library of CexA mutant alleles were evaluated for their capacity to grow on carboxylic acid-containing media and transport of radiolabeled citrate. We also determined protein subcellular localization by GFP tagging, with seven amino acid substitutions affecting CexA protein expression at the plasma membrane. The substitutions P200A, Y307A, S315A, and R461A displayed loss-of-function phenotypes. The majority of the substitutions affected citrate binding and translocation. The S75 residue had no impact on citrate export but affected its import, as the substitution for alanine increased the affinity of the transporter for citrate. Conversely, expression of CexA mutant alleles in the Yarrowia lipolytica cex1Δ strain revealed the involvement of R192 and Q196 residues in citrate export. Globally, we uncovered a set of relevant amino acid residues involved in CexA expression, export capacity and import affinity.This work was supported by the Strategic Programme UID/BIA/04050/2020 and the project LA/P/0069/2020 granted to the Associate Laboratory ARNET, both funded by Portuguese funds through the FCT-IP. J.A. acknowledges the FCT and the Doctoral Program in Applied and Environmental Microbiology for the PD/BD/150584/2020 PhD grant and a COST Action CA18113 Short-Term Scientific Mission grant (EuroMicropH). M.S.S. acknowledges the Norte2020 for the UMINHO/BD/25/2016 PhD grant with the re ference NORTE-08-5369-FSE-000060. I.S-S. was supported by the program contract FCTUMINHO/Norma transitória from the Legal Regime of Scientific Employment (RJEC)

Characterization of Cyberlindnera jadinii carboxylate permeases by heterologous expression in Saccharomyces cerevisiae

Background: The wide applicability of organic acids for direct use as commodity chemicals and as polymer building blocks has evidenced their importance in diverse types of industries. In Saccharomyces cerevisiae, two permeases are responsible for the uptake of carboxylates (CA) at the plasma membrane, Jen1p a monocarboxylate proton symporter (Major Facilitator Superfamily) and Ady2p an acetate permease (AceTr Family). Objectives: In Cyberlindnera jadinii, different uptake systems for CAs were functionally characterized however until now the genes encoding these transporters remain unidentified. In this study, CA transporter homolog genes from C. jadinii were identified and expressed in S. cerevisiae. Methods: The S. cerevisiae strain W303-1A jen1Δ ady2Δ, lacking carboxylate uptake capacity, was used to express C. jadinii ScADY2 homologs. Genes were identified through sequence alignment and homology prediction and cloned in the p416GPD vector, under the control of a GPD constitutive promoter. GFP-fusions versions were used to determine protein expression and localization. Transport activity was determined through growth on different carbon sources and measurement of the uptake of labelled CAs, namely D,L-[U14C] lactic acid, [2,3-14C] succinic acid and [1-14C] acetic acid. Results: In C. jadinii, 4 genes homolog to ScADY2 were identified. These are functional carboxylate transporters in S. cerevisiae, localized at the plasma membrane, presenting different specificities for the mono- and di-carboxylates. Further studies are underway to fully characterize these four new plasma membrane transporters, including molecular docking of these transporters to unveil the amino acids that play a major role in the substrate binding of CAs tested.PTDC/BIAMIC/5184/2014. NORTE-01-0145-FEDER-000009. UMINHO/BD/25/201