Detecção de anticorpos séricos anti-Giardia lamblia em crianças de creches

OBJETIVES: To detect anti-Giardia lamblia serum antibodies in healthy children attending public day care centers and to assess serological tests as tools for estimating the prevalence of G. lamblia in endemic areas. METHODS: Three separate stool specimens and filter paper blood samples were collected from 147 children ranging from 0 to 6 years old. Each stool sample was processed using spontaneous sedimentation and zinc sulfate flotation methods. Blood samples were tested by indirect immunofluorescence (IIF) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for Giardia IgG. RESULTS AND CONCLUSIONS: Of 147 individuals tested, 93 (63.3%) showed Giardia cysts in their feces. Using IIF and ELISA, serum antibodies were detected in 93 (63.3%) and 100 (68%) samples , respectively. Sensitivity of IIF and ELISA was 82% and 72%, respectively. However, ELISA revealed to be less specific (39%) than IIF (70%). IIF also showed a higher concordance with microscopic examination than ELISA.OBJETIVOS: Detectar anticorpos séricos anti-Giardia lamblia entre crianças atendidas em creches e estimar a freqüência de infecção por Giardia lamblia em área endêmica. MÉTODOS: Foram coletadas três amostras de fezes de cada uma das 147 crianças de três creches da rede municipal de Botucatu, SP, com idade variando de 0 a 6 anos, e as amostras foram processadas pelos métodos de sedimentação espontânea e flutuação pelo sulfato de zinco. Amostras de sangue foram obtidas da polpa digital, coletadas em papel de filtro e testadas pelos métodos de imunofluorescência indireta (IFI) e de reação imunoenzimática (Elisa) para pesquisa de IgG anti-Giardia. RESULTADOS E CONCLUSÕES: De um total de 147 crianças, 93 (63,3%) apresentaram cistos de Giardia nas fezes. Dos 147 eluatos testados, 93 (63,3%) e 100 (68%) foram positivos para Giardia em IFI e em Elisa, respectivamente. A sensibilidade de IFI foi de 82% e de Elisa, 72%. Contudo, Elisa foi menos específica (39%) do que IFI (70%). A imunofluorescência indireta apresentou maior concordância com o exame de fezes do que Elisa

Análise de proteínas de frações de membranas e de frações solúveis de trofozoítos de duas cepas de Giardia duodenalis, isoladas e axenizadas no Brasil

In the present study, we have analyzed by sodium docecyl sulphate - polyacrilamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), immunoblotting and Concanavalin A blotting (Con A blotting) proteins of membrane fractions and soluble fractions obtained from Giardia duodenalis trophozoites of two axenic strains isolated in Brazil from a symptomatic (BTU-11) and an asymptomatic patient (BTU-10), as compared to the reference strain Portland 1. Both Brazilian strains showed a complex and homogeneous electrophoretic pattern of proteins, but some differences could be observed. Several glycoproteins were detected, particularly the proteins of 81, 72, 59 kDa and the protein of 62 kDa in the membrane proteins and cytosol, respectively. Many antigenic components were revealed by anti-Giardia rabbit IgG antibodies in the immunoblotting analysis. Among these components, the membrane protein of 32 kDa and the cytosol protein of 30 kDa could be related to giardin, as previously demonstrated.Foi realizada a análise de algumas características bioquímicas e antigênicas de duas cepas axênicas de Giardia duodenalis, isoladas em Botucatu, a partir de cistos obtidos de paciente sintomático (BTU-11) e assintomático (BTU-10), tendo por referência a cepa padrão Portland 1 (P-1), isolada e axenizada nos Estados Unidos. Preparações contendo proteínas de membranas e proteínas solúveis (citosol) de cada cepa foram empregadas na eletroforese das proteínas em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), na análise de glicoproteínas pela técnica de Con A blot e na análise antigênica pela técnica de "Immunoblotting". Na análise do perfil eletroforético os padrões de bandas de proteínas das cepas BTU-10 e BTU-11 foram complexos e na maior parte homogêneos; algumas diferenças foram detectadas entre as proteínas de membranas. Várias glicoproteínas foram demonstradas, destacando-se as de 81, 72, 59 kDa e a glicoproteína de 62 kDa, detectadas nas preparações de proteínas de membranas e proteínas solúveis, respectivamente. Entre estas glicoproteínas, a de 81 kDa foi detectada apenas entre as proteínas de membranas das cepas BTU-11 e P-1, isoladas de casos sintomáticos. Vários componentes antigênicos foram reconhecidos por anticorpos IgG de coelho pela técnica de "Immunoblotting". Entre estes componentes, as proteínas de 32 kDa, entre as proteínas de membranas e a de 30 kDa, entre as proteínas solúveis, parecem tratar-se de proteínas já caracterizadas como "giardinas". O presente trabalho possibilitou detectar glicoproteínas, proteínas e antígenos em trofozoítos de duas cepas autóctones de G. duodenalis. De modo geral, as análises dos perfis eletroforético e glicoproteico e do "immunoblotting" demonstraram similaridade entre as cepas

Caracterização parcial da atividade proteolítica de frações de proteínas purificadas de trofozoítos de Giardia duodenalis

This report describes a preliminary characterization of proteolytic activity of proteins isolated from lysate of Giardia trophozoites of an axenic Brazilian strain. Fractions obtained by high-performance liquid chromatography (FPLC) were tested in SDS-polyacrylamide gel for the protein profiles, and the proteases activity was analyzed using gelatin impregnated SDS-PAGE. The proteases characterization was based on inhibition assays employing synthetic inhibitors for cysteine (E-64, IAA), serine (PMSF, TPCK, TLCK, and elastatinal), metalo (EDTA) and aspartic (pepstatin) proteases. Among thirty eluted fractions, polypeptide bands were observed in eight of them, however, proteolytic activity was detected in four ones (F23, F24, F25 and F26). Protein profiles of these fractions showed a banding pattern composed by few bands distributed in the migration region of 45 to < 18 kDa. The zymograms revealed proteolytic activity in all the four fractions assayed, mainly distributed in the migration region of 62 to 35 kDa. Among the profiles, the main pronounced zones of proteolysis were distinguished at 62, 55, 53, 50, 46 and 40 kDa. In inhibition assays, the protease activities were significantly inhibited by cysteine (E-64) and serine proteases (TPCK, TLCK and elastatinal) inhibitors. Gels incubated with other cysteine and serine protease inhibitors, IAA and PMSF, respectively, showed a decrease in the intensity of hydrolysis zones. Indeed, in the assays with the inhibitors EDTA for metalloproteases and pepstatin for aspartic proteases, none inhibition was detected against the substrate. These observations are relevants, especially if we consider that to define the real role of the proteases in host-parasite interaction, the purification of these enzymes for detailed studies may be warranted.O presente estudo consiste em uma caracterização preliminar da atividade proteolítica de frações de proteínas purificadas a partir de lisados de trofozoítos de cepa isolada e axenizada no Brasil. Frações obtidas por cromatografia líquida (FPLC) foram analisadas quanto ao perfil eletroforético em géis de poliacrilamida (SDS-PAGE) e a atividade proteolítica foi avaliada em géis contendo gelatina como substrato. A caracterização das enzimas foi realizada a partir da análise do efeito de inibidores sintéticos de cisteína-proteases (E-64, IAA), serina-proteases (PMSF), serina e cisteína-proteases (TPCK, TLCK, elastatinal), metalo-proteases (EDTA) e aspartil proteases (pepstatina) sobre a degradação do substrato. Entre 30 frações eluídas, bandas de proteínas foram observadas em oito delas, entretanto, atividade proteolítica foi detectada apenas nas frações 23, 24, 25 e 26. O perfil eletroforético das proteínas revelou poucas bandas distribuídas na faixa de 45 a 18 kDa. Os zimogramas revelaram zonas de proteólise na faixa de aproximadamente 62 a 35 kDa, entretanto destacaram-se as bandas de hidrólise de 62, 55, 53, 50, 46 e 40 kDa. Nos ensaios de inibição, a proteólise foi marcantemente inibida por E-64, TPCK, TLCK e elastatinal. Redução discreta da proteólise foi observada com IAA e PMSF, enquanto que EDTA e pepstatina não promoveram alteração dos perfis de hidrólise. Estas observações são relevantes, especialmente se considerarmos que para elucidar o envolvimento das proteases na relação parasita-hospedeiro, a purificação dessas moléculas é um requisito importante

Apesar dos avanços, os cardápios de escolas atendidas pelo Programa Nacional de Alimentação Escolar ainda podem ser mais saudáveis

The objective of this study was to evaluate the quality of Brazilian school meals. Cross-sectional study that used 2785 daily menus, from 557 municipalities in the country, offered between 2022 and 2024, in elementary schools. For evaluation, the Quality Index for School Meal Menus Revised was used. It was observed that the majority of menus presented intermediate quality (70.74%) and the other categories presented similar frequencies. The groups of cereals and tubers; vegetables; and fruits were the most frequent, followed by legumes; red meat; and eggs, chicken and fish. Already ultra-processed; regional foods appeared on a quarter of the menus; dairy products; candy; processed foods; and time compatibility; socio-biodiversity foods and sweet regional preparations were less frequent. This study provides an overview of Brazilian school meals with a high frequency of fresh and minimally processed foods. However, it was also possible to observe the presence of foods that are not allowed in school meals.El objetivo de este estudio fue evaluar la calidad de la alimentación escolar brasileña. Estudio transversal que utilizó 2785 menús diarios, de 557 municipios del país, ofrecidos entre 2022 y 2024, en escuelas primarias. Para la evaluación se utilizó el Índice de Calidad de Menús de Alimentación Escolar Revisado. Se observó que la mayoría de los menús presentaron calidad intermedia (70,74%) y las demás categorías presentaron frecuencias similares. Los grupos de cereales y tubérculos; hortalizas y verduras; y las frutas fueron las más frecuentes, seguidas de las legumbres; carne roja; y huevos y carne blanca. Ya ultraprocesados; los alimentos regionales aparecían en una cuarta parte de los menús; productos lácteos; dulce; alimentos procesados; y compatibilidad horaria; fueron menos frecuentes los alimentos de sociobiodiversidad y las preparaciones dulces regionales. Este estudio ofrece una visión general de la alimentación escolar brasileña con alta frecuencia de alimentos frescos y mínimamente procesados. Sin embargo, también fue posible observar la presencia de alimentos no permitidos en la alimentación escolar.O objetivo foi avaliar a qualidade da alimentação escolar brasileira. Estudo transversal que utilizou 2785 cardápios diários, de 557 municípios do país, ofertados de 2022 a 2024. Para avaliação foi utilizado o Índice de Qualidade para Cardápios da Alimentação Escolar Revisado. Observou-se que a maioria dos cardápios apresentou qualidade intermediária (70,74%) e as demais categorias apresentaram frequências semelhantes. Os grupos de cereais e tubérculos; legumes e verduras; e frutas foram os mais frequentes, seguidos de  leguminosas; carnes vermelhas; e ovos aves e peixes. Já ultraprocessados; alimentos regionais apareceram em um quarto dos cardápios; laticínios; doces; alimentos processados; e compatibilidade de horário; alimentos da sociobiodiversidade e preparações regionais doces foram menos frequentes. Foi possível concluir a presença de alta frequência de alimentos in natura e minimamente processados. Contudo, também observou-se a presença de alimentos que não são permitidos na alimentação escolar

Prevalence and genetic characterization of Dientamoeba fragilis in asymptomatic children attending daycare centers

In order to provide additional data on the prevalence and genetic diversity of Dientamoeba fragilis in human populations, we conducted a study in children from low-income communities in Sao Paulo State, Brazil. Fecal samples from daycare center attendees up to 6 years old (n=156) and staff members (n=18) were submitted to PCR and sequencing of D. fragilis as well as to microscopic examination for the presence of other intestinal parasites. All children assessed were asymptomatic and 10.3% (16/156) were positive for D. fragilis. No worker was found to be positive. An association between Dientamoeba and coinfection with other intestinal parasites was observed. Concerning the genetic diversity, 14 and only two isolates were genotype 1 and genotype 2, respectively. Our findings outline interesting aspects: (1) asymptomatic children as carriers of Dientamoeba in communities in which environmental conditions ensure parasite transmission and, (2) association between Dientamoeba infection in young children and coinfection with other enteric parasites, reinforcing its transmission via the fecal–oral route

Molecular Characterization Of Intestinal Protozoa In Two Poor Communities In The State Of São Paulo, Brazil.

Several species of protozoa cause acute or chronic gastroenteritis in humans, worldwide. The burden of disease is particularly high among children living in developing areas of the world, where transmission is favored by lower hygienic standards and scarce availability of safe water. However, asymptomatic infection and polyparasitism are also commonly observed in poor settings. Here, we investigated the prevalence of intestinal protozoa in two small fishing villages, Porto Said (PS) and Santa Maria da Serra (SM), situated along the river Tietê in the State of São Paolo, Brazil. The villages lack basic public infrastructure and services, such as roads, public water supply, electricity and public health services. Multiple fecal samples were collected from 88 individuals in PS and from 38 individuals in SM, who were asymptomatic at the time of sampling and had no recent history of diarrheal disease. To gain insights into potential transmission routes, 49 dog fecal samples (38 from PS and 11 from SM) and 28 river water samples were also collected. All samples were tested by microscopy and PCR was used to genotype Giardia duodenalis, Blastocystis sp., Dientamoeba fragilis and Cryptosporidium spp. By molecular methods, the most common human parasite was Blastocystis sp. (prevalence, 45% in PS and 71% in SM), followed by D. fragilis (13.6% in PS, and 18.4% in SM) and G. duodenalis (18.2% in PS and 7.9% in SM); Cryptosporidium spp. were not detected. Sequence analysis revealed large genetic variation among Blastocystis samples, with subtypes (STs) 1 and 3 being predominant, and with the notable absence of ST4. Among G. duodenalis samples, assemblages A and B were detected in humans, whereas assemblages A, C and D were found in dogs. Finally, all D. fragilis samples from humans were genotype 1. A single dog was found infected with Cryptosporidium canis. River water samples were negative for the investigated parasites. This study showed a high carriage of intestinal parasites in asymptomatic individuals from two poor Brazilian villages, and highlighted a large genetic variability of Blastocystis spp. and G. duodenalis.810

Cenário e perspectivas do sistema alimentar brasileiro frente à pandemia de Covid-19

A food system can be defined as the entire range of processes and resources involved from the production of food through its consumption, including disposal of waste. The objective of this perspective paper is to discuss some of the impacts of Covid-19 on the hegemonic Brazilian food system. Based on a description of the pre-pandemic scenario, the article discusses the hegemonic food system in Brazil and its known effects on quality of life and environment, as well as the consequences that led to the current condition of fragility, with a great risk of crises, such as the one we now face. Briefly, the article also reflects on possible transformative changes resulting from the sanitary crises. Finally, possible ways of leading to a fairer, truly regenerative, local based and inclusive food system, are discussed. It is evident that just promoting healthy food systems is not enough, it is necessary to divest in degenerative systems, structured to increase earnings and the balance trade.  These demands reconfiguring and redirecting public policies and investments related to land use, expanding spaces and giving priority to financial, political and social resources to nourish food systems that result in more systemic benefits.Compreende-se um Sistema Alimentar como o conjunto de processos e recursos necessários desde a produção até o consumo e o descarte do alimento. O objetivo desse artigo de perspectiva é discutir alguns impactos da pandemia de Covid-19 sobre o Sistema Alimentar hegemônico no Brasil. A partir de uma descrição do cenário pré-pandemia, são expostos alguns desdobramentos conhecidos sobre a qualidade de vida e do ambiente, bem como as consequências que potencialmente levaram a esta condição de fragilidade que é fértil para o desencadeamento de crises como a atual. Na sequência, o artigo traz uma reflexão sobre as repercussões possíveis em função da crise sanitária. Finalmente, trata das possibilidades de evoluir para um Sistema Alimentar mais justo, localizado, inclusivo e regenerativo. Destaca-se que não basta fomentar Sistemas Alimentares saudáveis, é necessário desinvestir em sistemas degenerativos, focados em beneficiar a arrecadação ou a balança comercial. Isso implica reconfigurar e redirecionar uma parte maior das políticas e recursos públicos relacionados com o uso da terra, liberando espaço e recursos financeiros, políticos e sociais para nutrir Sistemas Alimentares que resultem benefícios mais sistêmicos

SEGURANÇA DO PACIENTE A NÍVEL HOSPITALAR: IMPORTÂNCIA DA QUALIDADE DOS REGISTROS EM PRONTUÁRIOS

O tema da Segurança do Paciente vem sendo amplamente difundido em diversos países, o que se reflete na grande quantidade de estudos sobre a ocorrência de eventos adversos. Nesse sentido, o prontuário tem sua relevância, no que concerne ao contexto da segurança do paciente, pois representa uma fonte de dados deste para se tomar medidas e comportamentos cabíveis de acordo com o quadro apresentado através deste instrumento, o qual precisa ser bem registrado. O estudo teve por objetivo criar e implementar um formulário para observar a qualidade dos registros em prontuários de usuários assistidos em um alojamento conjunto e clínica médico-cirúrgica de um hospital-maternidade localizado no Sertão Central do Ceará. Trata-se de uma pesquisa descritiva, com abordagem quantitativa. A coleta de dados foi realizada nos meses de setembro e outubro de 2016, com visita semanal organizada, de acordo com a disponibilidade dos membros da equipe. Foram utilizados 50 questionários, onde foram analisados vários componentes do prontuário do paciente. Os dados quantitativos foram tabulados no programa Excel 2013, onde foram obtidos gráficos com frequências absolutas e percentuais, sendo analisados e discutidos, posteriormente, com base em literatura pertinente. As informações extraídas dos prontuários foram agrupadas em oito itens no questionário. Os itens continham dados referentes: a identificação do paciente, prescrição médica, evolução médica, evolução do enfermeiro, evolução dos técnicos de enfermagem, sinais vitais do paciente, resultados de exames e termos de consentimento para realização de procedimentos. Entre os principais resultados destaca-se que a maioria dos prontuários dos pacientes hospitalizados, tanto no alojamento conjunto, quanto na clínica médico-cirúrgica apresentam informações satisfatórias com relação ao estado de saúde do cliente, porém esses registros precisam ser melhorados no que tange à frequência das anotações. Conclui-se que este estudo será de grande valia não só para enfermeiros, médicos e técnicos de enfermagem, mas também para toda a equipe interdisciplinar entendendo a importância do registro no prontuário como uma ferramenta para a segurança do paciente e da qualidade do serviço prestado