Retinal biomarkers of Alzheimer’s disease: insights from transgenic mouse models

In this paper, we use the retina as a window into the central nervous system and in particular to assess changes in the retinal tissue associated with the Alzheimer’s disease. We imaged the retina of wild-type (WT) and transgenic mouse model (TMM) of Alzheimer’s disease with optical coherence tomography and classify retinas into the WT and TMM groups using support vector machines with the radial basis function kernel. Predictions reached an accuracy over 80% at the age of 4 months and over 90% at the age of 8 months. Texture analysis of computed fundus reference images suggests a more heterogeneous organization of the retina in transgenic mice at the age of 8 months in comparison to controls.This study was supported by the Neuroscience Mantero Belard Prize 2015 (Santa Casa da Misericórdia)(MB-1049-2015), by The Portuguese Foundation for Science and Technology (PEst-UID/NEU/04539/2013), by FEDER-COMPETE (POCI-01-0145-FEDER-007440) and Centro 2020 Regional Operational Programme (CENTRO-01-0145-FEDER-000008: BrainHealth 2020).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Effect of N3-Methyladenine and an Isosteric Stable Analogue on DNA Polymerization

N3-methyladenine (3-mA) is a cytotoxic lesion formed by the reaction of DNA with many methylating agents, including antineoplastic drugs, environmental agents and endogenously generated compounds. The toxicity of 3-mA has been attributed to its ability to block DNA polymerization. Using Me-lex, a compound that selectively and efficiently reacts with DNA to afford 3-mA, we have observed in yeast a mutational hotspot at the 5′-terminus of an A4 tract. In order to explore the potential role of sequence-dependent DNA polymerase bypass of 3-mA, we developed an in vitro system to prepare 3-mA modified substrates using Me-lex. We detail the effects of 3-mA, its stable isostere analogue, 3-methyl-3-deazaadenine, 3-deazaadenine and an THF abasic site on DNA polymerization within an A4 sequence. The methyl group on 3-mA and 3-methyl-3-deazaadenine has a pronounced inhibitory effect on DNA polymerization. There was no sequence selectivity for the bypass of any of the lesions, except for the abasic site, which was most efficiently by-passed when it was on the 5′-terminus of the A4 tract. The results indicate that the weak mutational pattern induced by Me-lex may result form the depurination of 3-mA to an abasic site that is bypassed in a sequence dependent context

Efeitos da Glicação sobre o Glioxalase II

Relatório de projecto no âmbito de Bolsa Universidade de Lisboa/Fundação Amadeu Dias (2008/2009)Universidade de Lisboa; Fundação Amadeu Dia

Efeito do fibrinogénio na formação de fibras de TTR em doentes com amiloidose familiar

Tese de mestrado em Bioquímica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2011A Polineuropatia Amiloidótica Familiar (PAF) é uma doença neurodegenerativa hereditária caracterizada pela deposição de transtirretina (TTR) no sistema nervoso periférico. Como consequência, verifica-se perda de sensibilidade nos membros dos pacientes, seguida de atrofia muscular, fraqueza e morte 10 a 20 anos após o início dos sintomas. O desenvolvimento desta doença requer a presença de TTR mutada, conhecendo-se mais de 80 mutações que levam à formação de fibras amilóides. Como mecanismo para a formação destes agregados, estudos in vitro apontam para uma destabilização dos tetrâmeros que contêm variantes da TTR, resultando na formação de monómeros amiloidogénicos. No entanto, existem diversas observações que sugerem um mecanismo mais complexo in vivo, envolvendo factores não genéticos. Por exemplo, indivíduos que possuem a mesma mutação no gene da TTR, incluindo gémeos monozigóticos, não mostram o início da sintomatologia com a mesma idade. Existem ainda diferenças geográficas no que toca à idade de desenvolvimento dos sintomas e na própria morfologia dos agregados. Ao contrário do expectável, indivíduos homozigóticos para genes de TTR mutada não apresentam uma forma mais agressiva da doença. Com um papel central nestas diferenças fenotípicas poderão constar mecanismos de defesa, como é o caso do conjunto de proteínas denominadas chaperones moleculares. Seguindo esta hipótese, observou-se recentemente uma interacção da TTR com o chaperone extracelular fibrinogénio. Curiosamente, o fibrinogénio encontra-se selectivamente modificado em pacientes PAF. Esta modificação pós-traducional, denominada glicação, foi descrita como estando envolvida noutras doenças de natureza semelhante à PAF, como é o caso da doença de Alzheimer ou de Parkinson. Neste trabalho, investigou-se o efeito do fibrinogénio e da glicação na amiloidogénese da TTR. Verificou-se que o fibrinogénio tem a capacidade de prevenir a sua agregação, atingindo-se a actividade máxima numa proporção molar fibrinogénio:TTR de 1:20, sugerindo uma relevância desta interacção in vivo, já que neste caso esta proporção é aproximadamente 1:2. Adicionalmente, observou-se que a glicação do fibrinogénio leva a uma abolição da referida função. Paralelamente, foi realizado um mapeamento dos locais modificados do fibrinogénio com vista a estabelecer a correlação entre os locais modificados e a perda de função deste. Desta forma, foi estabelecido um método optimizado para realizar este mapeamento por espectrometria de massa, tendo-se identificado um total de 60 locais modificados nas três cadeias do fibrinogénio, α, β e γ, com uma cobertura de sequência média de 82%.Familial Amyloidotic Polyneuropathy (FAP) is an hereditary neurodegenerative disease characterized by the deposition of transthyretin (TTR) in the peripheral nervous system. As a consequence, sensibility loss in the patients’ arms and legs takes place, followed by muscle atrophy and death after 10 to 20 years of the disease onset. The development of this disease requires the presence of a mutated variant of TTR, being described more than 80 mutations that result in amyloid fiber formation. As a mechanism for TTR aggregation, in vitro studies suggest that in these patients TTR tetramer (its native form) is destabilized, resulting in the formation of amyloidogenic monomers. However, several observations suggest a more complex mechanism in vivo, with the implication of non-genetic factors. For instance, patients that share the same mutation in the TTR gene, including monozygous twins, do not show the same disease onset age. There are also geographical differences when it comes to the aggregates’ morphology and also the disease onset age. Opposite from the expected, homozygous individuals to mutated TTR genes do not show a more aggressive form of the disease. With a central role in these phenotypic differences may be defense mechanisms, such as molecular chaperones. Following this hypothesis, recently an interaction between TTR and the extracellular chaperone fibrinogen was described. Surprisingly, fibrinogen is selectively modified in FAP patients. This post-translational modification, termed glycation, was previously described as being involved in other conformational diseases, such as Alzheimer’s and Parkinson’s diseases. In this work, the effect of fibrinogen and glycation in TTR amyloidogenesis was studied by monitoring the aggregation process using spectroscopic methods. It was observed that fibrinogen has the ability to prevent its aggregation, achieving its maximum activity in a molar ratio of 1:20 (fibrinogen:TTR), suggesting a relevance of this interaction in vivo, as in this case the ratio fibrinogen:TTR is approximately 1:2. Moreover, it was observed that fibrinogen glycation abolishes its chaperone function. Additionally, the glycation sites in fibrinogen were mapped, in order to correlate those sites with the loss of fibrinogen’s chaperone function. Therefore, here is also established an optimized method to perform such mapping using mass spectrometry, having been identified a total of 60 modified sites in the three fibrinogen chains, α, β e γ, with an average sequence coverage of 82%

The Oral Health Surveillance Policy in Brazil: progresses and challenges

Revisión crítica e integral, de carácter descriptivo-discursivo, dedicada a la explanación de la política de vigilancia de la salud bucal vigente actualmente en Brasil. Con base en una apreciación critica de los trabajos nacionales e internacionales consultados sobre la temática de la vigilancia de la salud, se examina la formulación de una agenda política y científica en vigilancia de la salud bucal, anclada en la institucionalidad del Sistema Brasileño de Salud. La efectividad de la referida agenda es ejemplificada con la presentación de la Investigación Nacional de Salud Bucal (SBBrasil 2010). Se presentó una síntesis conclusiva, buscando la convergencia teórico-metodológica entre la identificación, por un lado, de los obstáculos y fragilidades aún detectables en la implementación de la agenda y, por el otro, en el reconocimiento de su mérito, discernible en expresivos avances y conquistas ya consolidados.This comprehensive critical review, carried out in a descriptive-discursive style, presents the oral health surveillance policy currently in force in Brazil. Based on an appraisal of the national and international literature on the subject of health surveillance, it examines the formulation of a scientific and political agenda for oral health surveillance, which is anchored in the institutions of the Brazilian Public Health System. The accomplishment of this agenda is exemplified by the presentation of the most recent Brazilian Oral Health survey (SBBrasil 2010). A conclusive summary is presented on the search for a theoretical and methodological convergence of both the identification of the obstacles and weaknesses still detectable in this policy, and the recognition of its virtues already confirmed by important advances and achievements.Revisão crítica e integrativa, de caráter descritivo-discursivo, dedicada à explanação da política de vigilância à saúde bucal vigente atualmente no Brasil. Com base em uma apreciação crítica dos trabalhos nacionais e internacionais consultados sobre a temática da vigilância à saúde, examina-se a formulação de uma agenda política e científica em vigilância à saúde bucal, ancorada na institucionalidade do Sistema Único de Saúde. A efetivação da referida agenda é exemplificada com a apresentação da Pesquisa Nacional de Saúde Bucal (SBBrasil 2010). Uma síntese conclusiva é apresentada, buscando a convergência teórico-metodológica entre a identificação, por um lado, dos obstáculos e fragilidades ainda detectáveis na implementação da agenda e, por outro, no reconhecimento do seu mérito, discernível em expressivos avanços e conquistas já consolidados

The know-reality and the constitution of teaching : philosophizing on contemporary mathematics education

Neste artigo, temos como objetivo analisar as narrativas docentes a partir do que interpretamos como uso pedagógico da realidade na Educação Matemática. Os excertos selecionados de um congresso do campo referido foram organizados segundo suas semelhanças, possibilitando a constituição de identidades docentes que representam, controlam, regulam o uso pedagógico da realidade. Nosso viés teórico é pautado nos estudos de Michel Foucault a partir da perspectiva pós-estrutural. Assim, atentos a essas representações, as produções da rede discursiva em Educação Matemática, buscamos tensionar como os discursos em torno da docência constituem um saber específico sobre a contemporaneidade. Não apenas constituem, mas são constituídos do que denominamos saber-realidade. Tal maneira de produzir a docência segue compondo os entendimentos; segue regulando e orientando as práticas pedagógicas em prol de uma matemática contextualizada, utilitarista, lúdica, significativa. Enfim, uma matemática que esteja em todos os lugares, que pertença a todos.In this article, we aim to analyze teacher narratives from what we interpret as pedagogical use of reality in Mathematics Education. The excerpts selected from a congress of the said field were organized according to their similarities, enabling the constitution of teaching identities that represent, control, and regulate the pedagogical use of reality. Our theoretical bias is based on the studies of Michel Foucault from the poststructural perspective. Thus, attentive to these representations, the productions of the discursive network in Mathematical Education, we try to stress how the discourses around the teaching constitute a specific knowledge about contemporaneity. They not only constitute, but are constituted of what we call know-reality. Such a way of producing teaching continues to compose the understandings; continues to regulate and guide pedagogical practices in favor of a contextualized, utilitarian, playful, meaningful mathematics. In short, a mathematics that is everywhere, belongs to everyone

DOCÊNCIAS ESCRAVA E NOBRE: FILOSOFIA E EDUCAÇÃO

Based on Friedrich Nietzsche’s philosophical discussion about slave and noble typologies, we create slave and noble teaching as ways to foresee discussions in the education field. When developing a genealogical procedure, we tension the values that support the Pedagogy of Reality. For such analytics, we present discussions about the real discursive presence in the educational field. Therefore, we discuss ways to challenge ourselves, educators, between denying and supporting life: slave and noble teaching.A partir de la discusión filosófica de Friedrich Nietzsche sobre las tipologías esclavas y nobles, compusimos las docencias esclavas y nobles como formas de ver las discusiones en el campo de la educación. Al desarrollar un procedimiento genealógico, tensionamos los valores que sustentam la Pedagogía de la Realidad. Para tal analítica, presentamos discusiones sobre la presencia discursiva de lo real en el campo educativo. De esta manera, discutimos formas para desafiar a nosotros mismos, educadores, entre negar y afirmar la vida: las docencias esclavas y nobles.A partir da discussão filosófica de Friedrich Nietzsche em torno das tipologias escrava e nobre, compomos as docências escrava e nobre como modos de perspectivar discussões no campo da educação. Ao desenvolver um procedimento genealógico, tensionamos valores que sustentam a Pedagogia da Realidade. Para tal analítica, apresentamos discussões acerca da presença discursiva do real no campo educacional. Destarte, discutimos modos de interpelar a nós mesmos, educadores, entre negar e afirmar a vida: as docências escrava e nobre