Uma análise das diretrizes curriculares nacionais para o ensino superior no Brasil

Neste texto apresentamos uma análise das atuais Diretrizes Curriculares Nacionais (DCN) para os cursos de graduação no Brasil, com o intuito de identificar os princípios expressos e a concepção política subjacente. Compreendendo que toda política guarda uma intencionalidade e que o currículo não é um campo neutro, centramos nossa atenção no discurso oficial corporificado nesses normativos. Com base nessa análise, constatamos que as DCN recomendam a (re)elaboração dos projetos político-pedagógicos (PPP) dos cursos de graduação, constituindo norteadores e não imperativos a serem rigidamente seguidos, embora as avaliações dos cursos realizadas pelo Ministério da Educação (MEC) cobrem a adequação dos PPP às DCN. Observamos ainda, que o conjunto de princípios defendidos pelas DCN são uníssonos na defesa da autonomia, liberdade e flexibilidade para que as Instituições de Ensino Superior (IES) (re)formulem os seus currículos. Por outro lado, constatamos que na concepção política das DCN prevalece a lógica do Estado Avaliador que as concebe como mecanismos de regulação do ensino superior, conciliando ações contraditórias, como autonomia e controle, o que pode ser interpretado como uma intervenção híbrida

Classificação de risco na atenção primária e o Sistema de Manchester : scoping review

INTRODUÇÃO: O Acolhimento com Classificação de Risco (ACR) surge como uma Política Pública adotada pelo Sistema Único de Saúde (SUS) na busca de reafirmar a saúde como direito universal. A implantação do ACR com o Sistema de Triagem de Manchester (STM) mostra-se um protocolo de triagem que visa a ajustar o fluxo de atendimento, conferindo um desafio dentro da atenção primária, possibilitando um serviço humanizado baseados nos princípios da equidade e integralidade. O enfermeiro se faz instrumento crucial dentro da Estratégia de saúde da Família e na implantação deste protocolo em ressalvo autonomia que o mesmo proporciona. OBJETIVO: Sumarizar as experiências relatadas na literatura sobre o emprego do Protocolo de Manchester na Atenção Primária à Saúde Brasileira. METODOLOGIA: Foi realizada uma revisão da Literatura sobre o tema, selecionando-se publicações dos últimos dez anos das bases LILACS (Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde), IBECS (Índice Bibliográfico Espanhol de Ciências da Saúde), MEDLINE (Medical Literature Analysis and Retrieval System Online), Biblioteca Cochrane, SciELO (Scientific Electronic Library Online), BDENF (Base de Dados de Enfermagem), CINAHL (Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature), além do catálogo de teses e dissertações CAPES. RESULTADOS: Foram incluídos 15 estudos que se apresentam por meio de três categorias, quais sejam: 1) Avanços no acesso através do Protocolo de Manchester na visão dos profissionais da saúde, 2) Limites e desafios do acesso aos serviços de saúde devido a utilização do Protocolo de Manchester e 3) Potencialidades do Protocolo de Manchester na APS. CONCLUSÃO: A utilização deste protocolo ao nível primário tem mostrado um desafio à equipe de saúde, corroborando com a necessidade de aprimoramento a fim de conquistar um atendimento eficaz e sensibilizado.INTRODUCTION: The Triage with Risk Score emerges as a Public Policy adopted by the Sistema Único de Saúde (SUS) that is, Brasilian Health System in the search to reaffirm health as a universal right The implantation of Triage with Risk Score with the Manchester Triage System (STM) a screening protocol is shown that aims to adjust the flow of care, providing a challenge within primary care, enabling a humanized service based on the principles of equity and integrality. The nurse becomes a crucial instrument within the Family Health Strategy and in implementation of this protocol subject to the autonomy it provides OBJECTIVE: To summarize the experiences reported in the literature on the use of the Manchester Protocol in Primary Health Care in Brazil. METHODOLOGY: A literature review on the topic was carried out by selecting publications from the latest ten years of the LILACS (Latin American and Caribbean Literature in Health Sciences), IBECS (Spanish Bibliographic Index of Health Sciences), MEDLINE (Medical Literature Analysis and Retrieval System Online), Cochrane Library, SCIELO (Scientific Electronic Library Online), BDENF (Nursing Database), CINAHL (Cumulative Index to Nursing and Allied Health Literature) in addition to the CAPES thesis and dissertation catalog. RESULTS: We included 15 studies that are presented through three categories, namely: 1) Advances in access through the Manchester Protocol in the view of health professionals, 2) Limits and challenges of access to health services due to the use of Manchester Protocol and 3) Potentialities of the Manchester Protocol in PHC. CONCLUSION: The use of this protocol at the primary level has proved to be a challenge to the health team, corroborating the need for improvement, in order to achieve effective and sensitized care

Avaliação de duas ORFs pertencentes ao cluster de produção de lovastatina em Aspergillus terreus

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2018.Aspergillus terreus é um fungo filamentoso de importância biotecnológica por ser produtor de enzimas de interesse comercial, além de metabolitos secundários como a lovastatina. Esta é utilizada no tratamento de pessoas com hipercolesterolemia uma vez que é um inibidor competitivo da HMG-CoA redutase, enzima responsável pela conversão de HMG-CoA em Mevalonato, diminuindo assim a síntese de colesterol endógeno. Os 18 genes codificadores de enzimas envolvidas na via biosintética de lovastatina estão organizados em um agrupamento gênico de 65 kb no genoma de A. terreus. Dentre esses, genes essenciais já foram identificados, como os genes lovB e lovF, que codificam as principais enzimas da via. Apesar de vários estudos a respeito da via biosintética de lovastatina, ainda existem 10 genes do cluster com a função desconhecida ou predita. Dentre eles a ORF8 (open Reading frame), anotada como um possível gene de resistência. Análises de similaridades mostraram que esta ORF codifica para uma HMG-CoA redutase, sendo que o fungo ainda tem outras duas regiões fora do cluster de lovastatina que também codificam HMG-CoA redutase. Alinhando as três sequências, a ORF8 e as duas enzimas de fora do cluster, foi possível observar que a HMG-CoA redutase, codificada pela ORF8, possui duas mutações no sítio de ligação. Assim, para a caracterização da HMG-CoA redutase, que a ORF8 codifica, foi clonada a sequência no plasmídeo pET28a para expressa-la em Escherichia coli. O plasmídeo foi inserido em quatro linhagens de E. coli, nas quais não foi observada a expressão da proteína. Assim foram desenhados oligonucleotídeos iniciadores para que a ORF8 fosse clonada no vetor p416TEF, que possui a marca de seleção auxotrófica URA3 para inserção na levedura Saccharomyces cerevisiae. No entanto foi possível detectar a produção da enzima em S. cerevisiae pois a ligação do vetor e o inserto não foi alcançada. Outra ORF com função predita é a ORF10, anotada como um possível transportador de lovastatina. Dessa forma, para confirmar sua função biológica, foi realizada sua deleção na cepa ATCC20542, usada como referência para produção de lovastatina. A montagem do cassete de deleção foi realizada em 2 partes, sendo a primeira a amplificação por PCR do cassete de resistência a Higromicina B e dos fragmentos que flanqueiam o gene; e a segunda a fusão dos três fragmentos utilizando a técnica de PCR. O cassete de deleção foi utilizado na transformação da cepa de A. terreus ATCC20542, usada como referência para produção de lovastatina. Após os experimentos de transformação, os 17 clones obtidos foram cultivados em meio definido para quantificação da produção de lovastatina, tanto em sobrenadante quanto em micélio. Dentre os clones avaliados, em 4 clones não foi possível detectar lovastatina no sobrenadante, já em micélio foi observada uma redução de aproximadamente 60% de lovastatina produzida. Estes 4 clones tiveram então seu DNA genômico extraído e usado como molde em reações de PCR. Dessa foram foi possível confirmar que a ORF10 estava realmente deletada nas cepas cuja produção de lovastatina no sobrenadante foi eliminada evidenciando experimentalmente que essa ORF está, de fato, relacionada ao transporte de lovastatina.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq).Aspergillus terreus is a filamentous fungus of biotechnological importance because it produces enzymes of commercial interest, as well as secondary metabolites like lovastatin. It is used without treatment of people with hypercholesterolemia since it is a competitive inhibitor of HMG-CoA reductase, enzyme responsible for the conversion of HMG-CoA to Mevalonate, thus decreasing as endogenous cholesterol synthesis. The 18 genes encoding enveloping enzymes in the lovastatin biosynthetic pathway are organized into a 65 kb gene cluster in the A. terreus genome. Among these, essential genes have already been identified, as the genes are lovB and lovF, which code as major pathway enzymes. In spite of several genes of the cluster with an unknown or predicted function. There are still 10 cluster genes with an unknown or predicted function. Among them, an ORF8 (open reading frame), annotated as a possible resistance gene. Analyzes of analyzes similar to this ORF code for an HMG-CoA reductase, and the fungus still has other regions for the lovastatin cluster that also encode HMG-CoA reductase. Aligning as three sequences, one ORF8 and two enzymes from outside the cluster, and just like an HFG-CoA reductase encoded by ORF8 does not have two bonds. Thus, for a characterization of HMG-CoA reductase, which is an ORF8 coding, the sequence in plasmid pET28a was cloned to express in Escherichia coli. The plasmid was inserted into four E. coli lines, in which no expression of the protein was observed. Thus, oligonucleotide primers were designed so that the ORF8 was cloned into the p416TEF vector, which has an auxotrophic selection tag URA3 for insertion into the yeast Saccharomyces cerevisiae. However, the possibility of detecting the production of the enzyme in S. cerevisiae at a link of the vector and the insertion was not achieved. Another ORF with predicted function is an ORF10, annotated as a possible lovastatin transporter. Thus, to confirm its biological function, its deletion was carried out in strain ATCC20542, used as reference for lovastatin production. One assembly of a deletion was performed in 2 parts, a first PCR amplification of hygromycin B resistance cassette and fragments flanking the gene; and the second a fusion of the three fragments using a PCR technique. The deletion cassette was used in the transformation of A. terreus strain ATCC20542, used as a reference for lovastatin production. After the transformation experiments, the 17 clones obtained were cultured in defined medium for quantification of lovastatin production, both in supernatant and in mycelium. Among the clones, in 4 clones, it was not possible to detect lovastatin in the supernatant, while in the mycelium a reduction of approximately 60% of lovastatin produced was observed. These 4 clones had their genomic DNA extracted and used as template in PCR reactions. From this it was possible to confirm that ORF10 was indeed deleted in strains whose production of lovastatin in the supernatant was eliminated experimentally evidencing that this ORF is, in fact, related to the transport of lovastatin

Estudo da localização subcelular das proteínas p29 e CP de Pepper ringspot virus e desenvolvimento de clone infeccioso de cDNA do vírus

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014.Pepper ringspot virus (PepRSV) é um tobravírus e foi originalmente isolado no Brasil de plantas de Capsicum spp., que apresentavam sintomas de manchas anelares. As partículas são alongadas e rígidas e o seu genoma possui dois segmentos de RNA fita simples e senso positivo. Uma particularidade que o distingue de outros vírus conhecidos é a associação constante de suas partículas com as mitocôndrias do hospedeiro. Estudos preliminares in silico da proteína viral p29 de PepRSV sugeriram ser esta a proteína candidata a apresentar alguma interação com mitocôndrias. A capa proteica (CP) é a segunda candidata, por também estar presente na superfície das partículas virais, que se associam com mitocôndrias. Baseando-se nestas premissas, a interação das proteínas virais p29 e CP com a mitocôndria foi estudada, utilizando a estratégia de fusão da proteína-alvo com proteínas fluorescentes GFP ou YFP (Green/Yellow Fluorescent Protein), respectivamente, em vetores binários. Estas construções foram agro-inoculadas em folhas de Nicotiana benthamiana e as localizações subcelulares destas proteínas foram observadas em microscópio confocal. P29-GFP mostrou localização na periferia das células, provavelmente nos plasmodesmas, e a CP possivelmente no núcleo. Para confirmar a localização de p29 nos plasmodesmas, um experimento de co-localização foi realizado com a proteína 30 K de TMV, conhecida por se localizar no plasmodesma, e a co-localização de p29 e 30 K foi detectada. O desenvolvimento de clones infecciosos é uma estratégia padrão para estudar funções gênicas de vírus de RNA e é de vital importância para a elucidação da interação das proteínas virais com as mitocôndrias. Sendo assim, este trabalho também apresenta como objetivo a obtenção do clone de cDNA infeccioso de PepRSV. Para tanto, o RNA 2 foi clonado em vetor binário obtido a partir de um vetor de silenciamento gênico induzido por vírus (VIGS) de TRV contendo o promotor 35S duplicado na região 5´ e da ribozima na extremidade 3´. Para a clonagem do RNA 1, o segmento genômico foi dividido em dois fragmentos, que foram clonados em vetores comerciais, sendo então ligados utilizando sítios de enzimas de restrição. Pretende-se que o fragmento correspondente ao RNA 1 seja substituído pelo RNA 2 previamente inserido no VIGS modificado. Este clone infeccioso também poderá ser utilizado como VIGS para estudo básico de funcionamento de genes da planta. __________________________________________________________________________________ ABSTRACTPepper ringspot virus (PepRSV) is a tobravirus and was originally isolated from plants of Capsicum spp., with ringspot symptoms in Brazil. The particles are elongated and rigid and its genome has two segments of single stranded RNA and positive sense. Unique feature that distinguishes it from other known viruses is the specific and organized association of the virus particles with mitochondria of the host cell. Preliminary in silico studies of the viral protein p29 of PepRSV suggested that this is the candidate protein that has some interaction with mitochondria. The coat protein (CP) is the second candidate, since it is also present on the surface of viral particles, which associates with mitochondria. With these assumptions, the interaction of viral proteins p29 and CP with the mitochondria was studied, using the strategy of fusion of the target proteins with fluorescent proteins GFP or YFP (Green / Yellow Fluorescent Protein), respectively, using binary vectors. These constructions were agro-inoculated to Nicotiana benthamiana leaves and the location of both fused proteins was observed with confocal laser microscope. P29-GFP was located in periphery of cells, most likely in plasmodesmata, and CP was probably in nuclei. Aiming to confirm the localization of p29 in plasmodesmata, an experiment of co-localization was performed with 30 K protein of TMV, a movement protein well known to be located in plasmodesma, and colocalization of p29 and 30 K was detected. The development of infectious clones is a standard strategy for RNA viruses to study gene functions and will be critical for elucidating the interaction of viral proteins with the mitochondria. Thus, this work also had the objective of obtaining infectious cDNA clone PepRSV. To this end, the RNA 2 was cloned into binary vector obtained from a vector of virus-induced gene silencing (VIGS) of TRV, which contain the dual 35S promoter in the 5' region and the ribozyme in the 3' end. For cloning of RNA 1, the genome segment was divided into two fragments, which were cloned into commercial vectors and then ligated using restriction enzyme sites. Subsequently, the corresponding RNA fragment 1 will be replaced by the RNA 2 previously inserted in the modified VIGS. This infectious clone can also be used as a VIGS for basic studies of gene function in plants

Optimization of heterologous protein production in Chinese hamster ovary cells under overexpression of spliced form of human X-box binding protein

Background: The optimization of protein production is a complex and challenging problem in biotechnology. Different techniques for transcription, translation engineering and the optimization of cell culture conditions have been used to improve protein secretion, but there remain many open problems involving post-translational modifications of the secreted protein and cell line stability. Results: In this work, we focus on the regulation of secreted protein specific productivity (using a recombinant human immunoglobulin G (IgG)) by controlling the expression of the spliced form of human X-box binding protein (XBP-(s)) in Chinese hamster ovary cells (CHO-K1) under doxycycline (DOX) induction at different temperatures. We observed a four-fold increase in specific IgG productivity by CHO cells under elevated concentrations of DOX at 30°C compared to 37°C, without detectable differences in binding activity in vitro or changes in the structural integrity of IgG. In addition, we found a correlation between the overexpression of human XBP-1(s) (and, as a consequence, endoplasmic reticulum (ER) size expansion) and the specific IgG productivity under DOX induction. Conclusions: Our data suggest the T-REx system overexpressing human XBP-1(s) can be successfully used in CHO-K1 cells for human immunoglobulin production

Neutron diffraction reveals sequence-specific membrane insertion of pre-fibrillar islet amyloid polypeptide and inhibition by rifampicin

AbstractHuman islet amyloid polypeptide (hIAPP) forms amyloid deposits in non-insulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM). Pre-fibrillar hIAPP oligomers (in contrast to monomeric IAPP or mature fibrils) increase membrane permeability, suggesting an important role in the disease. In the first structural study of membrane-associated hIAPP, lamellar neutron diffraction shows that oligomeric hIAPP inserts into phospholipid bilayers, and extends across the membrane. Rifampicin, which inhibits hIAPP-induced membrane permeabilisation in functional studies, prevents membrane insertion. In contrast, rat IAPP (84% identical to hIAPP, but non-amyloidogenic) does not insert into bilayers. Our findings are consistent with the hypothesis that membrane-active pre-fibrillar hIAPP oligomers insert into beta cell membranes in NIDDM

KINEMATIC CHARACTERISTICS OF RESISTED SLED SPRINTS UNDER DIFFERENT LOADING CONDITIONS

The purpose of this study was to identify the kinematic characteristics of resisted sled sprinting under different loading conditions (0%, 10%, 20% and 30% velocity decrement (Vdec)) and in different sporting populations. Thirty-three healthy athletes (Sprinters n=10; Invasion team sport athletes n=23) were recruited and completed 3 days of testing. Kinematics were captured with high-speed cameras and processed using Dartfish Software. Loads of 20% and 30% Vdec resulted in a significant increase in trunk lean relative to unloaded sprinting, during both acceleration and maximum velocity phases, with no difference between groups (sprint & team sport athletes). This increase in trunk lean with load (20% and 30% Vdec) appeared to prevent athletes transitioning into upright maximum velocity mechanics, and therefore extended the distance of the acceleration phase. The trunk lean increase was related to the heavy loads and athletes were not able to reach mechanics that were truly reflective of maximum velocity (maxV) sprinting. However, heavy loading extended the distance over which it is possible to train acceleration