Development of an antisense-mediated exon skipping therapeutic strategy to correct a frequent causing mutation in Mucolipidosis II

Lysosomal Storage Disorders (LSDs) are a group of rare inherited diseases caused by the malfunction of the lysosomal system, resulting in the accumulation of undegraded substrates inside the lysosomes and leading to severe and progressive pathology. Among them is Mucolipidosis II (ML II), one of most severe LSDs, which is caused by the total or near total deficiency of the GlcNAc-phosphotransferase, a key enzyme for the correct trafficking of lysosomal hydrolases to the lysosome. GlcNAc-phosphotransferase is a multimeric enzyme and is encoded by two genes: GNPTAB and GNPTG. One of the most frequent ML II causal mutations is a dinucleotide deletion on exon 19 of the GNPTAB gene that disrupts the reading frame and prevents the production of an active GlcNAc-phosphotransferase, which in turn impairs the proper targeting of lysosomal enzymes. Despite broad understanding of the molecular causes behind this and other LSDs, the same progress has not been observed in the development of new therapies, with current treatments still mostly symptomatic and presenting several limitations. Therefore, alternative options should be investigated in order to provide patients and families with better healthcare and more promising therapies. One possibility is the modulation of splicing by antisense oligonucleotides (AOs) with the purpose of altering the splicing pattern, the mature mRNA and ultimately the final protein product. Acknowledging this, the present study intends to design and develop a RNA-based therapeutic agent through the use of AOs capable of inducing the skipping of exon 19 of the GNPTAB gene and consequently circumvent the effects of the most common ML II causal mutation. The approach is presently ongoing and different 2’O-Methyl AOs were designed and synthesized to target the GNPTAB exon 19 and promote its skipping. We have already succeeded in inducing the skipping of exon 19 in control and ML II patient fibroblasts. At biochemical level, 48 hours following transfection, enzyme activity suffered a small increase in patients fibroblasts for all enzymes tested, even if the results are still much lower than the observed for healthy controls. In conclusion, this work constitutes a proof of principle for correcting in vitro the defects caused by a frequent ML II mutation with antisense therapy. Acknowledgments: This work is supported by the project PTDC /BBB-BMD/6301/2014 (SPLICETHER) financed by Fundação para a Ciência e a Tecnologia – Portugal.This work is supported by the project PTDC /BBB-BMD/6301/2014 (SPLICETHER) financed by Fundação para a Ciência e a Tecnologia – Portugal.N/

Use of an antisense-mediated exon skipping approach as a therapeutic option for a common Mucolipidosis type II causing mutation

Lysosomal Storage Disorders (LSDs) are a group of rare inherited diseases caused by the malfunction of the lysosomal system, resulting in the accumulation of undegraded substrates inside the lysosomes and leading to severe and progressive pathology. Among them is ML II, one of most severe LSDs, which is caused by the total or near total deficiency of the GlcNAc-phosphotransferase, a key in enzyme for the correct trafficking of lysosomal hydrolases to the lysosome. GlcNAc-phosphotransferase is a multimeric enzyme and is encoded by two genes: GNPTAB and GNPTG. One of the most frequent ML II causal mutations is a dinucleotide deletion on exon 19 of the GNPTAB gene that disrupts the reading frame and prevents the production of an active GlcNAc-phosphotransferase, which in turn impairs the proper targeting of lysosomal enzymes. Despite broad understanding of the molecular causes behind this and other LSDs, the same progress has not been observed in the development of new therapies, with current treatments still mostly symptomatic and presenting several limitations. Therefore, alternative options should be investigated in order to provide patients and families with better healthcare and more promising therapies. One possibility is the modulation of splicing by antisense oligonucleotides with the purpose of altering the splicing pattern, the mature mRNA and ultimately the final protein product. Acknowledging this, the present study intends to design and develop a RNA-based therapeutic agent through the use of antisense oligonucleotides capable of inducing the skipping of exon 19 of the GNPTAB gene and consequently circumvent the effects the most common ML II causal mutation. The approach is presently ongoing and different 2’O-Methyl AOs were designed and synthesized to target the GNPTAB exon 19 and promote its skipping. We have already succeed in inducing the skipping of exon 19 in control and ML II patient cell lines and we are now evaluating the effects of this therapeutic approach at biochemical levels.FCT (PTDC/BBB-BMD/6301/2014 (SPLICETHER), Application of splicing approaches to exploit alternative therapies for Lysosomal Storage Diseases: in vitro and in vivo studies)N/

ASPECTOS NUTRICIONAIS E FUNCIONAIS DO MORANGO

The fruits have an important role in human feed. They are natural sources of nutrients, vitamins and minerals, besides supplying staple fibers and presenting flavonoids that contribute for the prevention of illnesses, as for example, the combat to the cancer, illnesses of the intestinal treatment gastric and also the precocious aging caused by the free radicals. This article is about a bibliographical revision where the texts of vitamins, total staple fibers will be boarded, soluble and insoluble staple fibers and phenolic composites present in the strawberry in comparison with other fruits and antinutricionals agents present in the strawberry as acid salicylic and acid oxalic that especially deserve prominence for the people who are allergics to these composites.As frutas desempenham um papel muito importante em nossa alimentação. São fontes naturais de nutrientes, vitaminas e sais minerais, além de fornecerem fibras e apresentarem flavonóides que contribuem para a prevenção de doenças, como por exemplo, o combate ao câncer, doenças do trato gastro intestinal e também o envelhecimento precoce causado pelos radicais livres. Este artigo trata-se de uma revisão bibliográfica onde serão abordados os teores de vitaminas, fibras totais, fibras solúveis e insolúveis e compostos fenólicos presentes no morango em comparação com outras frutas e os agentes antinutricionais presentes no morango como ácido salicílico e ácido oxálico que merecem destaque especialmente pelas pessoas que são alérgicas à estes compostos

The use of biomarkers to study the effects of the mixture of diuron and hexazinone on small and large O. niloticus

Pesticides have made possible a safer and plentiful supply of food; however, the ultimate sink for many of these contaminants is the aquatic environment. We analyzed the commercial mixture Velpar K® WG, which is composed of the pesticides diuron (46.8% m/m) and hexazinone (13.2% m/m), as well as inert ingredients (40.0% m/m). The present study aimed to evaluate the effects of the herbicide mixture on Oreochromis niloticus of different sizes. To this end, we analyzed biomarkers in small and large O. niloticus exposed to a mixture of herbicides at 125, 250 and 500 ug L-1 for 72h. EROD increased activity in small fish exposed to the herbicide mixture at 250 and 500 ug L-1. The GST activity and levels of the antioxidant enzymes GPx and CAT remained the same in the treated fish, compared with the control. The level of the antioxidant enzyme SOD measured in the fish gills was changed in animals exposed to the herbicide mixture at 250 ug L-1. MDA analysis did not show lipid peroxidation. The comet assay evidenced widespread DNA damage, but the micronucleus test did not show mutagenicity. Hepatosomatic (HSI) analysis did not indicate any alterations in liver morphology. The biomarkers response in the fish depended on the size of the individuals

Estudo da prevalência dos critérios clínicos para a síndrome metabólica em Bombeiros Militares de um Batalhão da Região Centro-sul de Belo Horizonte

A Síndrome Metabólica (SM) é constituída pela presença de vários fatores de risco à saúde, como dislipidemia, resistência à insulina, hipertensão arterial e obesidade. Muitos profissionais necessitam de aptidão física devido às funções que exercem, cita-se como exemplo, a profissão bombeiro militar. O objetivo do trabalho foi estudar a prevalência dos critérios clínicos para a SM em Bombeiros Militares. O estudo foi conduzido no primeiro semestre de 2012, com amostra de 27 bombeiros militares voluntários, de ambos os sexos, idade 31,0 ± 7,5 anos, massa corporal 77,3 ± 16,0 kg, estatura 171,5 ± 7,4 cm e índice de massa corporal (IMC) mediano de 24,7 kg/m2. Os dados foram coletados em um Batalhão da Região Centro-Sul de Belo Horizonte, onde foi realizada medida da massa corporal, estatura, circunferência abdominal (CA), pressão arterial (PA) e coleta sanguínea. Após a estratificação e classificação dos critérios relacionados à SM, os limiares que demonstraram frequência significativa na amostra foram o triglicérides (30%) e a pressão arterial sistêmica (26%). Houve prevalência do triglicerídeo em relação ao colesterol de lipoproteínas de alta densidade (HDL-C) (8 vs 1); Houve prevalência da PA em relação ao HDL-C (7 vs 1) e à glicose (7 vs 2). Ao realizar a estratificação considerando o IMC foi encontrada a classificação sobrepeso (n=7) e obesidade (n=5), havendo prevalência do IMC em relação à circunferência abdominal, colesterol total, colesterol de lipoproteínas de baixa densidade (LDL-C), HDL-C e a glicose. Concluiu-se que os militares com maior pressão arterial sistêmica apresentaram menores concentrações de HDL-C e maiores níveis de glicose; Os militares com maiores concentrações de triglicerídeo apresentaram menores concentrações de HDL-C; Houve prevalência do IMC com a CA, o colesterol total, o LDL-C, o HDL-C e a glicose. Houve divergência entre a prevalência da obesidade expressa pela CA, estabelecida com um critério para a SM, quando comparada aos parâmetros de peso excessivo preconizados pelo IMC

Aspectos Afetivos e o Desempenho Acadêmico de Escolares

Using the House-Tree-Person Drawing (HTP) and the Color Pyramid Test (CPT) we aimed at characterizingthe affective behavior of 50 children of average intellectual level, male and female, aged from 8 to 12 years. Two groups of 25subjects each were formed; one presenting school delay and another with satisfactory school performance and age compatiblewith school grade. The used techniques showed that low school performance among the children with school delay seemed tobe related to feelings of failure and a low self-esteem. In the group with no school delay prevailed a better use of affective andintellectual resources, but associated to high demand. The study of affective variables and their association with school performancelead to a deeper understanding of the way the children are experiencing their developing stage.Objetivou-se caracterizar através do Desenho da Casa-Árvore-Pessoa (HTP) e do Teste das Pirâmides Coloridas de Pfister (TPC) o funcionamento afetivo de 50 crianças com idade entre 8 e 12 anos, de ambos os sexos, com nível intelectual médio. Elas foram distribuídas em dois grupos de 25 sujeitos, um deles com atraso escolar, e o outro grupo apresentando desempenho escolar satisfatório e idade compatível à série cursada. Observou-se através destas técnicas que o rendimento escolar rebaixado nas crianças do grupo com atraso escolar pareceu relacionado a sentimentos de fracasso e a uma autoimagem depreciativa. No grupo de crianças sem atraso escolar predominou, uma melhor utilização dos recursos intelectuais e afetivos, contudo associado a elevado nível de exigência. O estudo das variáveis afetivas e sua associação ao rendimento escolar puderam favorecer uma compreensão mais aprofundada da maneira como as crianças estão experimentando esta etapa do desenvolviment

Autolesão não suicida em adolescentes: Terapia Comunitária Integrativa como estratégia de partilha e de enfrentamento

Objetivo: apreender por meio da Terapia Comunitária Integrativa (TCI) os fatores relacionados à autolesão não suicida em adolescentes e à contribuição da mesma para as estratégias de enfrentamento. Método: estudo qualitativo, conduzido com adolescentes que participaram das rodas de Terapia Comunitária Integrativa, as quais foram gravadas eregistradas em diário de campo. Utilizou-se análise temática e fundamentou-se no Modelo de Habilidades de Vida. Resultados: a autolesão emergiu em seis rodas, como tema ou envolto a outro sofrimento vivenciado pelas adolescentes mulheres. Foram evidenciadas as categorias “Adolescência e autolesão não suicida: alívio da angustia”, “Roda de Terapia Comunitária Integrativa: espaço terapêutico” e suas subcategorias. Conclusões: as adolescentes encontram na autolesão não suicida uma forma para materializar e aliviar o sofrimento decorrente de múltiplos fatores. A Terapia Comunitária revelou um espaço vivo de partilha e de ressignificação do sofrimento.Objetivo: aprender a través de la Terapia Comunitaria Integradora (TCI) los fatores relacionados con la autolesión no suicida en adolescentes y su contribución a las estrategias de afrontamiento. Metodo: estudio cualitativo, conducido con adolescentes que participaron en las ruedas de TCI, las cuales fueron grabadas y registradas en diario de campo. Se utilizó análisis temáticos y se fundó en el Modelo de Habilidades de Vida. Resultados: La autolesión surgió en seis ruedas, como tema vinculado a otro sufrimiento. Del análisis surgieron las categorías “Adolescencia y autolesiones no suicidas: alivio de la angustia” y “Rueda de Terapia Comunitaria Integrativa: espacio terapéutico” y sus subcategorías. Conclusiones: Las adolescentes utilizan la autolesiónno suicida como forma de materializar y aliviar el sufrimiento resultante de múltiples factores. La Terapia Comunitaria reveló un espacio vivo de compartir y redefinir el sufrimiento.Objective: to learn though the Integrative Community Therapy (ICT) the factors related to non-suicidal self-harm in adolescents and their contribution to coping strategies. Method: a qualitative study, conducted with adolescents who participated in the Integrative Community Therapy wheels, which were saved and recorded in a field diary. Thematic analysis was used and it was based on the Life Skills Model. Results: self-harm has emerged on six wheels, as a themeor wrapped in other suffering. The following categories emerged from the analysis: “Adolescence and non-suicidal self-harm: Anguish relief” and “Integrative Community Therapy Wheel: Therapeutic space” and its subcategories. Conclusions: adolescents find in non-suicidal selfharm a way to materialize and alleviate the suffering resulting from multiple factors. Community Therapy revealed a living space of sharing and re-signification of suffering

VÍTIMAS DE TRAUMA ATENDIDAS EM UM HOSPITAL UNIVERSITÁRIO

Objetivo: caracterizar o perfil das vítimas de trauma segundo dados sociodemográficos, do evento e assistenciais em uma unidade de pronto atendimento de um hospital público de ensino. Método: estudo transversal retrospectivo quantitativo. Resultados: prevaleceram vítimas com idade média de 43 anos, sexo masculino (72,4%), cor branca (58,5%), acidentes de trânsito (39,8%), lesões em extremidades superiores (37,9%), admissões no período noturno (39,1%), segunda-feira (15,4%) e em maio (10,2%), cirurgias ortopédicas (56,5%), sem complicações (58,1%), internação por um dia (60,4%), incapacidade ligeira na alta hospitalar (28,8%). O tratamento hospitalar teve um custo > US$ 100,00 (53,0%). Conclusão: a caracterização do perfil das vítimas de trauma atendidas em unidade de pronto atendimento de um hospital público de ensino mostrou que o tratamento do trauma envolve muitos fatores e as sequelas que causam à vítima interferem na realização das atividades de vida diária, na ocupação de leitos e determinam altos custos de tratamento. Descritores: Ferimentos e Lesões. Serviços Médicos de Emergência. Perfil de Saúde. Causas Externas

Reinvenção do Ensino da Língua Portuguesa e Literatura na Escola: Propostas de Alunos Estagiários em Letras

The job, here presented, is a literacy practices result, in special, developed during the letters students trainee, through a extension project called Experiences of reading/writing: the readers/writers formation. This text  has as objective relate two teaching proposals, bringing a specific methodology which tries to show, to the future letters professionals, a fertile possibility of working with language and literature at school.  Also, bring a brief theoretical approaching about literacy, to situate the lector about the meaning of this term.  Through practices developed during the trainee results, was possible to realize the diversity and richness of actions which has the potential of overarching the language and literature classroom, transforming this space in a pleasure space, of significant learning which mobilize the creativity, the criticality and the development of the reading and writing pleasure. O trabalho, aqui apresentado, é resultado das práticas de letramento, em especial, de letramento literário levadas a cabo no período de estágio de discentes do Curso de Letras, via projeto de extensão Experiências de leitura/escrita: a formação de leitores/escritores. O objetivo deste texto é o de relatar duas propostas de ensino com o texto literário, trazendo uma metodologia específica que visa apresentar, aos futuros profissionais das Letras, uma possibilidade fértil de trabalhar com a língua e a literatura na escola. Também, traz uma breve abordagem teórica sobre letramento, para situar o leitor sobre o significado de tal termo. Como resultado das práticas desenvolvidas ao longo do estágio, foi possível perceber a diversidade e riqueza de ações que podem perpassar a sala de aula de língua e literatura, transformando esse espaço em espaço de prazer, de aprendizagens significativas que mobilizam a criatividade, a criticidade e o desenvolvimento do prazer pela leitura e escrita. Palavras-chave: letramento; ensino de língua e literatura; estágio de docência.

Módulo VII: : Enfermagem na atenção à saúde da mulher e da criança: parto e nascimento

Ministério da Saúd