Do MHC Class I negative tumour cells display the cancer stem cell property of chemoresistance? Unravelling a potential surface marker on colorectal cancer stem cells

Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2021, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.O cancro colorectal (CCR) é o segundo cancro mais mortífero em ambos os géneros, mundialmente, e o terceiro mais diagnosticado em homens e o segundo em mulheres. O CCR apresenta grande heterogeneidade em termos morfológicos, fenotípicos e funcionais, devido a um elevado número de alterações genéticas. É de conhecimento geral que o cancro é composto por uma mistura de células com capacidades autorregenerativas (células estaminais cancerígenas, CECs) e outras células com capacidades proliferativas, evidenciando um ciclo celular limitado (células não-regenerativas). As CECs consistem numa população de células cancerígenas no interior de tumores, apresentando várias características como autorregeneração e geração de células diferenciadas, contribuindo para a heterogeneidade tumoral. Adicionalmente, estas células são capazes de iniciar o crescimento tumoral, sendo responsáveis pela tumorigénese, além de exibirem mecanismos de resistência, cujos lhes conferem vantagem em termos de sobrevivência contra várias terapias, como a quimioterapia e a radioterapia, causando recaídas após tratamento. Tem sido, também, descrito que as CECs são capazes de formar tumores na presença de um sistema imunitário funcional, devido aos mecanismos de edição do sistema imune, como por exemplo, a baixa regulação da apresentação de antigénios, (através do Complexo Principal de Histocompatibilidade de classe I – MHC-I) de modo a evitar a sua deteção por parte das células imunitárias. Com isto em consideração, é sugerido que a população de células sem MHC-I na sua superfície esteja enriquecida com CECs, as quais desenvolvem propriedades de quimioresistência contra terapias convencionais para o CCR, durante numerosas alterações genéticas e epigenéticas. Desta forma, utilizando como modelo o CCR, este projeto propõe-se a 1) realizar uma vasta caracterização da população de células cancerígenas negativas para o MHC-I, correlacionando com os atuais biomarcadores de CECs (CD44, Lgr5, EpCAM e o CD133); 2) testar a resposta de tratamento das células cancerígenas negativas para o MHC-I contra agentes quimioterapêuticos usados no CCR, tentando compreender se esta população exibe a propriedade de quimioresistência das CECs. Os resultados obtidos demonstraram que as células sem MHC-I na superfície não apresentam, homogeneamente, elevada expressão dos marcadores de CECs (CD44, Lgr5, EpCAM e CD133). Além disso, nos ensaios de quimiosensibilidade in vitro, não há consistência nos resultados relativos à população que será mais quimioresistente. Com isto, o MHC-I parece ser um biomarcador que sofre regulação mediante condições externas, numa tentativa de as células malignas adquirirem resistência ao longo de uma evolução tumoral, de modo a sobreviverem contra a ambientes adversos. Desta forma, a célula estaminal cancerígena talvez seja um estado transiente de uma célula cancerígena que sobreviveu a condições desfavoráveis.Colorectal Cancer (CRC) is the second leading cause of death in both genders, worldwide, and the third most diagnosed cancer in males and the second in females. CRC presents high heterogeneity in morphology, phenotype, and functions due to an elevated number of genetic alterations. It is well known that cancer is comprised by a mixture of cells, some with the ability of self-renewal (cancer stem cells, CSCs) and proliferative cells with limited life cycle (non-self-renewing cells). CSCs are a subpopulation of cancer cells within tumours, presenting several characteristics like self-renewal and generation of differentiated cells, contributing to tumour heterogeneity. Additionally, they are capable to initiate tumour growth, being responsible for tumorigenesis, as well as to exhibit mechanisms of resistance, which confer them survival advantage, against various therapies, such as chemotherapy and radiotherapy, causing relapse after treatment. It has been also reported that CSCs are also capable of forming tumours in the presence of a functional immune system, due to their immunoediting mechanisms, like downregulation of antigen presentation (through Major Histocompatibility Complex class I - MHC-I) to avoid detection by immune cells. With this in mind, it is suggested that HLA class I negative tumour cells are enriched with cancer stem cells, which develop chemoresistance properties to conventional therapies during several genetic and epigenetic alterations. Therefore, in this project, using CRC as a model, we aim to 1) perform a wide characterization of HLA-I negative tumour cells correlating with the current CSC biomarkers (CD44, Lgr5, EpCAM and CD133); 2) test treatment response of HLA-I negative tumour cells to chemotherapeutic agents used for CRC, trying to understand if this population displays the CSC property of chemoresistance. The obtained results demonstrated that MHC-I negative cells do not homogeneously display high expression of CSCs markers (CD44, CD133, EpCAM, and Lgr5). Additionally, in the in vitro chemosensitivity experiments, there were no consistent results on which is the most resistant population. Thus, MHC-I seems to be a biomarker that undergoes regulation as a response to different external conditions, in an attempt of malignant cells to acquire resistance over tumour evolution to survive against adverse environments. Thus, the cancer stem cell may be a transient status of a specific cancer cell, which survives against adverse conditions.Com o patrocínio de Champalimaud Centre for the Unknown - Molecular and Experimental Pathology La

Association of nutritional status indicators with hospital length of stay: usefulness of components from undernutrition screening and diagnostic tools

Trabalho Complementar apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Licenciada em Ciências da NutriçãoAims: To investigate the association of the nutritional indicators from the most used, validated and recent undernutrition screening and diagnostic tools, with LOS and to evaluate which of these have the greatest power in predicting LOS. Methods: 633 Portuguese inpatients were included in a prospective study. Data collection incorporated sociodemographic, clinical, functional and nutritional characteristics. The nutritional status indicators studied were weight loss, gastrointestinal symptoms, food intake in the preceding week and month, handgrip strength, physical exam, body mass index, fat-free mass index and disease-related inflammation. LOS was determined as the time from the date of hospital admission until discharge home or to usual residence. Cox regression analysis was conducted and Cox proportional hazard ratios (HR) and 95% confidence intervals (95% CI) models were adjusted for age, Charlson Index, professional activity and Katz Index. Results: Factors independently associated with LOS were: weight loss of 5.1-10.0% (HR=0.64, 95% confidence interval (CI)=0.50-0.82) and >10.0% (HR=0.58, 95% CI=0.44-0.76), presence or severe presence of gastrointestinal symptoms (HR=0.74, 95% CI=0.60-0.91), moderate and severe decreased food intake in the preceding month (HR=0.65, 95% CI=0.53-0.79), reduced handgrip strength (HR=0.72, 95% CI=0.57-0.90), mild to moderate (HR=0.72, 95% CI=0.60-0.87) and severe changes in the physical exam (HR=0.65, 95% CI=0.52-0.82) and acute disease-related inflammation (HR=0.74, 95% CI=0.62-0.88). Conclusions: From all the components analysed, weight loss >5.1%, gastrointestinal symptoms, decreased food intake, reduced handgrip strength, changes detected in the physical exam, and disease-related inflammation showed to be independently associated with longer LOS, since a lower probability of being discharged home or to usual residence was found. This study provides scientific evidence that can be used to revise and improve undernutrition screening and diagnostic tools.Objetivos: Investigar quais os componentes das ferramentas de rastreio e diagnóstico da desnutrição mais usadas, validadas e mais recentes, que se associam com o tempo de internamento (TI) e avaliar quais desses indicadores têm maior poder em prever o TI. Métodos: 633 doentes portugueses hospitalizados foram incluídos num estudo prospetivo. Foram recolhidos dados sociodemográficos, clínicos, funcionais e nutricionais. Os indicadores do estado nutricional avaliados foram a perda de peso, sintomas gastrointestinais, ingestão alimentar na última semana e no último mês, força preensora da mão (FPM), exame físico, índice de massa corporal, índice de massa livre de gordura e inflamação relacionada com doença ou lesão. O tempo de internamento foi determinado como sendo o tempo decorrido desde a admissão hospitalar, até à alta para o domicílio ou residência habitual. Foram conduzidos modelos de regressão de Cox para calcular os respetivos hazard ratios (HR) e intervalos de confiança (IC) a 95%, que foram ajustados para a idade, índice de Charlson, atividade profissional e índice de Katz. Resultados: Os fatores independentemente associados com o TI foram: perda de peso de 5.1-10.0% (HR=0.64, IC 95%=0.50-0.82) e >10.0% (HR=0.58, IC 95%=0.44-0.76), presença e presença grave de sintomas gastrointestinais (HR=0.74, IC 95%=0.60-0.91), ingestão alimentar moderada e gravemente reduzida no último mês (HR=0.65, IC 95%=0.53-0.79), FPM reduzida (HR=0.72, IC 95%=0.57-0.90), alterações leves a moderadas (HR=0.72, IC 95%=0.60-0.87) e graves no exame físico (HR=0.65, IC 95%=0.52-0.82) e inflamação relacionada com doença ou lesão aguda (HR=0.74, IC 95%=0.62-0.88). Conclusões: De todos os componentes estudados, perda de peso, presença de sintomas gastrointestinais, diminuição da ingestão alimentar no último mês, FPM reduzida, alterações detetadas no exame físico e inflamação relacionada com doença ou lesão aguda mostraram associação com o TI, uma vez que para estes indicadores, uma menor probabilidade de alta para o domicílio ou residência habitual foi encontrada. Este estudo fornece evidência científica que pode ser usada para melhorar as ferramentas de rastreio e diagnóstico da desnutrição.N/

Bioatividade da quinoxalina 1,4-dióxido e seus derivados

O objetivo deste estudo consiste em avaliar a atividade antimicrobiana da quinoxalina 1,4-dióxido e alguns dos seus derivados em estirpes bacterianas e leveduras. Os compostos estudados foram a quinoxalina 1,4-dióxido (QNX), 2-metilquinoxalina-1,4-dióxido (2MQNX), 2-metil-3-Benzoilquinoxalina-1,4-dióxido (2M3BenzoilQNX), 2-metil-3-benzilquinoxalina-1,4-dióxido (2M3BQNX), 2-amino-3-cianoquinoxalina-1,4-dióxido (2A3CQNX), 3-metil-2-quinoxalinacarboxamida-1,4-dióxido (3M2QNXC), 2-hidroxifenazina–N-dióxido (2HF) e 3-metil-N-(2-metilphenil)quinoxalinacarboxamida-1,4-dioxido (3MN(2MF)QNXC). Os modelos procariotas selecionados para este estudo foram o Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus aureus ATCC 6538P, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli S3R9, Escherichia coli S3R22, Escherichia coli TEM CTX-M9, Escherichia coli TEM-1, Escherichia coli AmpC MOX-2, Escherichia coli CTX-M2 e Escherichia coli CTX-M9. A Candida albicans ATCC 10231 e a Saccharomyces cerevisiae PYCC 4072 constituíram os modelos eucariotas deste estudo. Para os compostos químicos que apresentem atividade pelo método de difusão em disco, será determinada a Concentração Mínima Inibitória (CMI), bem como a viabilidade e o crescimento (na presença e na ausência dos compostos químicos). Os resultados deste estudo mostram atividade antimicrobiana para a maioria dos compostos estudados em todos os modelos procariotas Gram negativos, à exceção da E.coli CTX-M2 e CTX-M9 e nenhuma atividade nos modelos eucariotas. O estudo da viabilidade/curvas de morte em bactérias e num modelo eucariota (S.cerevisiae) sugerem que alguns destes compostos constituem potenciais drogas para a quimioterapia antibacteriana.The present work reports the study of the antimicrobial activity of quinoxaline N,N-dioxide and some derivatives against bacterial and yeast strains. The compounds studied were quinoxaline-1,4-dioxide (QNX), 2-methylquinoxaline -1,4-dioxide (2MQNX), 2-methyl-3-benzoylquinoxaline-1,4-dioxide (2M3BenzoilQNX), 2-methyl-3-benzylquinoxaline-1,4-dioxide (2M3BQNX), 2-amino-3-cyanoquinoxaline-1,4-dioxide (2A3CQNX), 3-methyl-2-quinoxalinecarboxamide-1,4-dioxide (3M2QNXC), 2-hydroxyphenazine–N-dioxide (2HF) and 3-methyl-N-(2-methylphenyl)quinoxalinecarboxamide-1,4-dioxide (3MN(2MF)QNXC). The prokaryotic model used were Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus aureus ATCC 6538P, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli S3R9, Escherichia coli S3R22, Escherichia coli TEM CTX-M9, Escherichia coli TEM-1, Escherichia coli AmpC MOX-2, Escherichia coli CTX-M2 e Escherichia coli CTX-M9. The Candida albicans ATCC 10231 and Saccharomyces cerevisiae PYCC 4072 were used as eukaryotic model. For the compounds that present activity for disk diffusion method, minimum inhibitory concentration (MIC) was determined, as well as verified the viability and growth curves (present and absence of chemical compounds). The results show antimicrobial activity for some compounds in every prokaryotic model Gram negative, with exception of Escherichia coli CTX-M2 and Escherichia coli CTX-M9 and no inhibition for eukaryotic models. The study of viability/growth curves in bacterial and S.cerevisiae suggest that some compounds are potential new drugs for antibacterial chemotherapy

Gravação áudio no estudo individual do fagote

Mestrado em Ensino de MúsicaO presente estudo propõe-se avaliar o impacto da gravação áudio no estudo individual do fagote. Pretendeu-se entender de que forma a utilização das gravações áudio podem ser uma estratégia pedagógica no estudo individual dos alunos de fagote. Deste modo, o propósito principal desta investigação consiste em analisar a forma como os alunos estudam, bem como, proporcionar-lhes um meio de analisarem a sua própria prática, na expetativa de no futuro poderem recorrer à gravação como estratégia de estudo. O projeto consistiu na monitorização/regulação do estudo individual de 3 alunos, através do cumprimento de tarefas gravadas em formato áudio, enviadas por correio eletrónico para o investigador e analisadas na aula, fomentando assim a autocrítica dos alunos em relação à sua própria performance.The present study aims to evaluete the impact of áudio recording in the individual study of the bassoon. It was intended to understand how the use of áudio recording can be a pedagogical strategy in the individual study of bassoon students. Thus, the main purpose of this research is to analize how students study and to provide students with a way to analyze their own practice, in the hope that in the future they will be able to use recording as a study strategy. The project consisted in monitoring/regulating the individual study of 3 students, through the fulfillment of tasks recorded in áudio format, sent by eletronic mail to the researcher and analyzed in class, thus encouraging students self-criticism concerning their own performance

Perfil do consumidor Nerd: um exemplo de subcultura urbana

Este estudo parte do contributo interdisciplinar de diversas referências literárias, de áreas como a comunicação, a sociologia, a psicologia e até a filosofia, de maneira a o compreender a subcultura Nerd e os seus comportamentos perante o consumo. Contextualiza-se esta subcultura na evolução cultural da sociedade moderna, responsável por enraizar a Cultura Pop um pouco por todo o mundo. O Nerd e a sua relação emocional com os bens do universo da Cultura Pop é o âmbito deste estudo, com intenção de “traçar” o seu perfil enquanto consumidor e enquadrando os seus comportamentos e interesses nas componentes racionais e hedónicas do processo de tomada de decisão de compra. Procurou-se também, com o mesmo enquadramento, classificar segundo um grau de importância alguns fatores de decisão de compra que a possam influenciar. Para corresponder a estes objetivos, efetuou-se a análise empírica em que se tenta compreender o perfil do consumidor Nerd, Fã de Cultura Pop, com recurso a um questionário como instrumento de pesquisa. Caracterizou-se este consumidor, e recorrendo à análise fatorial exploratória com extração pelo método dos componentes principais, segmentou-se a amostra de Nerds, Fãs de Cultura Pop, pelo seu interesse nos produtos/atividades relacionadas com esta subcultura. Recorrendo também a esta técnica, agruparam-se os itens mais relevantes, quer da variável fatores de decisão de compra, quer da variável comportamento, numa tentativa de explicar quais os mais importantes para motivar ou influenciar o processo da tomada de decisão de compra. Da conclusão deste estudo retiraram-se contributos que poderão ser importantes para estudos futuros do comportamento do consumidor Nerd e para os profissionais do marketing que criam, comunicam e influenciam produtos ou atividades neste mercado de nicho

Antimicrobial activity of quinoxaline 1,4-dioxide with 2- and 3-substituted derivatives

Quinoxaline is a chemical compound that presents a structure that is similar to quinolone antibiotics. The present work reports the study of the antimicrobial activity of quinoxaline N,N-dioxide and some derivatives against bacterial and yeast strains. The compounds studied were quinoxaline-1,4-dioxide (QNX), 2-methylquinoxaline-1,4-dioxide (2MQNX), 2-methyl-3-benzoylquinoxaline-1,4-dioxide (2M3BenzoylQNX), 2-methyl-3-benzylquinoxaline-1,4-dioxide (2M3BQNX), 2-amino-3-cyanoquinoxaline-1,4-dioxide (2A3CQNX), 3-methyl-2-quinoxalinecarboxamide-1,4-dioxide (3M2QNXC), 2-hydroxyphenazine-N,N-dioxide (2HF) and 3-methyl-N-(2-methylphenyl)quinoxalinecarboxamide-1,4-dioxide (3MN(2MF)QNXC). The prokaryotic strains used were Staphylococcus aureus ATCC 6538, S. aureus ATCC 6538P, S. aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922, E. coli S3R9, E. coli S3R22, E. coli TEM-1 CTX-M9, E. coli TEM-1, E. coli AmpC Mox-2, E. coli CTX-M2 e E. coli CTX-M9. The Candida albicans ATCC 10231 and Saccharomyces cerevisiae PYCC 4072 were used as eukaryotic strains. For the compounds that presented activity using the disk diffusion method, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined. The alterations of cellular viability were evaluated in a time-course assay. Death curves for bacteria and growth curves for S. cerevisiae PYCC 4072 were also accessed. The results obtained suggest potential new drugs for antimicrobial activity chemotherapy since the MIC's determined present low values and cellular viability tests show the complete elimination of the bacterial strain. Also, the cellular viability tests for the eukaryotic model, S. cerevisiae, indicate low toxicity for the compounds tested.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

ANÁLISE DOS DESAFIOS DA TRANSFORMAÇÃO DIGITAL NAS INSTITUIÇÕES DE ENSINO SUPERIOR

A transformação digital é uma das áreas que merecem atenção das instituições de ensino superior (IES) para se manterem em um cenário cada vez mais competitivo. A demanda por soluções, serviços e conveniências baseadas em tecnologias vem ao encontro do novo perfil de aluno que está gradativamente mais exigente. A Internet of Things (IOT) é uma tecnologia que conecta diversos dispositivos e serviços que qualificam o ensino e a aprendizagem, bem como aumenta o conforto e a segurança dos alunos e usuários dos campi. A transformação digital se dá quando uma IES tradicional aplica IOT, podendo ser considerada uma Smart University ou um Smart Campus. Contudo, há riscos financeiros e de efetividade na implantação, principalmente para instituições que não possuem amplo conhecimento no assunto. Isso porque ainda não há soluções prontas para todas as dificuldades que possam surgir. O objetivo deste artigo é criar um instrumento de pesquisa, baseado em uma revisão da literatura, com os principais aspectos que devem ser considerados em um projeto de implantação da IOT. Foi possível apresentar de forma sintetizada uma relação de aspectos e questões norteadoras, que servem de base para o aprofundamento da pesquisa inicial do projeto de implantação da tecnologia IOT nas IES