Speciation and Quantification of Thiols by Reversed-Phase Chromatography Coupled with On-Line Chemical Vapor Generation and Atomic Fluorescence Spectrometric Detection: Method Validation and Preliminary Application for Glutathione Measurements in Human Whole Blood

AbstractBackground: We developed a sensitive, specific method for the low–molecular-mass thiols cysteine, cysteinylglycine, glutathione, and homocysteine and validated the method for measurement of glutathione in blood.Methods: The technique was based on reversed-phase chromatography (RPC) coupled on line with cold vapor generation atomic fluorescence spectrometry (CVGAFS). Thiols were derivatized before introduction on the column by use of a p-hydroxymercuribenzoate (PHMB) mercurial probe and separated as thiol-PHMB complexes on a Vydac C4 column. Postcolumn on-line reaction of derivatized thiols with bromine allowed rapid conversion of the thiol-PHMB complexes to inorganic mercury with recovery of 100 (2)% of the sample. HgII was selectively detected by atomic fluorescence spectrometry in an Ar/H2 miniaturized flame after sodium borohydride reduction to Hg0.Results: The relationship between thiol-PHMB complex concentration and peak area (CVGAFS signal) was linear over the concentration range 0.01–1400 μmol/L (injected). The detection limits were 1, 1, 0.6, and 0.8 nmol/L for cysteine, cysteinylglycine, homocysteine, and glutathione in the injected sample, respectively. The CVs for thiols were 1.5%–2.2% for calibrator solutions and 2.1% and 3.0% for real samples. The RPC-CVGAFS method allowed speciation of glutathione (reduced and oxidized) in human whole blood from healthy donors and from the coronary sinus of patients with idiopathic dilated cardiomyopathy during and after chronotropic stress.Conclusion: The RPC-CVGAFS method could be used to measure reduced and oxidized glutathione in human whole blood as disease biomarkers

Spatial and temporal distribution of floral rewards within the capitula: The case of Hyalis argentea (Asteraceae)

Una asignación diferencial de recursos entre la función de atracción, recompensa y sexual ha sido observada en capítulos de especies derivadas de Asteraceae. Los capítulos heterógamos están compuestos por flores pistiladas, estaminadas o estériles y perfectas, con lo cual las funciones sexual y de recompensa son realizadas por diferentes tipos de flores y en distintos momentos. Esta distribución espacial y temporal de las recompensas dentro del capítulo no es tan clara en especies con capítulos homógamos, donde todas las flores son perfectas y producen polen y néctar. Aquí evaluamos la distribución espacial y temporal de las recompensas florales en los capítulos homógamos de Hyalis argentea. Comparamos la fenología floral, el número de granos de polen y la concentración y volumen de néctar entre las flores marginales y centrales, y registramos el comportamiento de forrajeo de los visitantes florales. Los capítulos tienen un patrón de floración centrípeto y también alterno y son visitados por abejas, hormigas, mariposas, polillas, escarabajos y trips, siendo Apis mellifera su principal polinizador. No encontramos un patrón temporal en la oferta de recompensas dentro de los capítulos, pero sí un patrón espacial en el volumen de néctar que aumenta desde las flores marginales hacia las del centro del capítulo.Conclusiones: Dicha variabilidad espacial en la cantidad de néctar podría afectar el comportamiento de forrajeo de los polinizadores y así aumentar las probabilidades de polinización cruzada, mejorando la reproducción sexual de esta especie autoincompatible.Differential resource allocation to attraction, reward, andsexual functions has been observed at capitula level of derived species of Asteraceae. Heterogamous capitula contain a combination of pistillate, staminate or sterileand perfect florets, thus rewarding and sexual functions are performed by different kinds of florets and at different times. Such spatial and temporal distribution of rewards within the capitula is not as clearly established in species with homogamous capitula, where all florets are perfect and produce pollen and nectar. We evaluated the spatial and temporal distribution of floral rewards in homogamous capitula of Hyalis argentea.Fil: Camina, Julia Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; ArgentinaFil: Tourn, Elian. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Andrada, Ana C.. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Pellegrini, Cecilia Noemí. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Ashworth, Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; Argentin

Propolis extract and oregano essential oil as biofungicides for garlic seed cloves: in vitro assays and synergistic interaction against Penicillium allii

Aims: This study aimed to evaluate in vitro individual and combined antifungal activity of propolis extract (PE) and oregano essential oil (OEO) against Penicillium allii, causal agent of blue mould disease. The chemical characterization of both products was also included. Methods and Results: Chromatographic analysis of PE and OEO confirmed the presence of bioactive compounds. The antifungal susceptibility assays showed that PE and OEO were highly active against the mycelial growth and conidial germination of P. allii. PE and OEO MICs were 12·5 and 1·5 μl ml−1, respectively. The MFCs of these products were 50 and 3·1 μl ml−1, respectively. PE acted mainly through diffusion, while OEO acted by a mixed contribution of vapour and diffusion. Synergism and additive effect between both products were found in some combination ratios. Conclusion: PE and OEO, both natural products with different chemical composition, have a strong antifungal activity against P. allii and show a favourable interaction causing synergism. Significance and Impact of the Study: The results of this study indicated the potential use of PE combined with OEO as a non-conventional strategy towards the formulation of a biofungicide to control blue mould disease in garlic seed-cloves.Fil: Cibanal, Irene Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía. Laboratorio de Estudios Apícolas; ArgentinaFil: Fernandez, Leticia Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía. Laboratorio de Estudios Apícolas; ArgentinaFil: Murray, Ana Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química; ArgentinaFil: Pellegrini, Cecilia Noemí. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía. Laboratorio de Estudios Apícolas; ArgentinaFil: Gallez, Liliana María. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía. Laboratorio de Estudios Apícolas; Argentin

Nuevas citas para la flora de la región de Bahía Blanca (provincia de Buenos Aires, Argentina)

En el presente trabajo se aportan nuevos datos sobre la distribución de dos especies de Poaceae en la provincia de Buenos Aires, Argentina

Persian Walnut (Juglans regia L.) Bud Dormancy Dynamics in Northern Patagonia, Argentina

Temperate deciduous fruit trees survive winter temperatures by entering a dormant phase in their aerial meristematic organs. Release from bud dormancy occurs after chill requirements (CR) have been satisfied, whereas bud burst/flowering follows heat requirement (HR) fulfillment. The physiological basis behind these metrics remains elusive. In this study, we are presenting the first multidisciplinary dormancy progression analysis in northern Patagonia, linking (1) forcing/field phenology, (2) bud anatomical development, and (3) soluble sugar (sucrose, glucose, and fructose) dynamics in Juglans regia L. CR and HR were determined for ‘Chandler’ and ‘Franquette,’ two walnut cultivars with markedly different CR, in artificial chill/forced heat trials (three seasons) and in-field chill/forced heat tests (five seasons) using excised twigs either with or without apical buds (non-decapitated and decapitated). The soluble sugar dynamics of ‘Chandler’ (high-performance liquid chromatography) and the anatomical changes of the buds (light microscopy) of the two cultivars were analyzed during endo-ecodormancy progression in one and two seasons, respectively. The CR defined by artificial chill tests proved to be an overestimation compared to the field determinations. Moreover, HR was the main driver in the phenology dynamics, as expected for a high-chill region. ‘Chandler’ showed an average of 10.3 field chill portions (CP) and 2,163 Growing Degree Hours (GDH°C) less than ‘Franquette’ for dormancy release and bud burst, respectively. These results were consistent with the transition of the shoot apex from the vegetative to the reproductive phase and the soluble sugar profile. The decrease in sucrose between 15 and 30 days after CR fulfillment could be a reliable biological marker for endodormancy release in walnut, while the increase in fructose and glucose is likely an osmolyte and cellulosic carbon source in pre-sprouting. In addition, we discuss the effect of paradormancy thanks to our apical bud experiment (with or without). Our results improve the current understanding of endo-ecodormancy progression in walnut and provide insightful results for walnut production (i.e., cultivation practices such as pruning) as well as for further application in dormancy modeling, to infer the ideotypes that should be bred for future climate conditions.Fil: del Barrio, Ricardo Alfredo. Universidad Nacional de Río Negro. Sede Andina; ArgentinaFil: Orioli, Gustavo Adolfo. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Brendel, Andrea Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto Argentino de Oceanografía. Universidad Nacional del Sur. Instituto Argentino de Oceanografía; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Lindström, Lilia Ivone. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Pellegrini, Cecilia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Agronomía; ArgentinaFil: Campoy, José Antonio. Max Planck Institute Of Biochemistry.; Alemani

Immunogenicity of Three Different Influenza Vaccines against Homologous and Heterologous Strains in Nursing Home Elderly Residents

We studied whether MF59-adjuvanted influenza vaccine improves immunity against drifted influenza strains in institutionalised elderly with underling chronic health conditions. Sera from a randomized study, comparing MF59-adjuvanted (Sub/MF59, n = 72), virosomal (SVV, n = 39), and split (n = 88) vaccines, were retested using a hemagglutination inhibition (HI) assay against homologous (Northern Hemisphere [NH] 1998/99) and drifted (NH 2006/07) strains. Corrected postvaccination HI antibody titres were significantly higher with Sub/MF59 than SVV for all strains; GMTs against homologous A/H3N2 and B and both drifted A strains were significantly higher for Sub/MF59 than split. Seroprotection rates and mean-fold titer increases were generally higher with Sub/MF59 for all A influenza strains. MF59-adjuvanted influenza vaccine induced greater and broader immune responses in elderly people with chronic conditions, than conventional virosomal and split vaccines, particularly for A/H1 and A/H3 strains, potentially giving clinical benefit in seasons where antigenic mismatch occurs

Efecto de la acidificación edáfica sobre los aluminosilicatos en un suelo de la región pampeana

La Región Pampeana manifiesta acidificación de suelos con producción agropecuaria prolongada. Se informó que el H+ derivado de la nitrificación de fertilizantes amoniacales/urea puede producir degradación de arcillas modificando propiedades de interés agronómico. Objetivo: evaluar la modificación de aluminosilicatos y capacidad de liberación de Al en una experiencia de acidez creciente por adición de HNO3. Suelo: horizonte superficial de un Argiudol típico de La Plata (Buenos Aires). Se incubaron (Tº ambiente, 6 meses) unidades de 10 gr de suelo seco (2 mm), y 25 ml de agua destilada, en envases de 50 ml con 0 (testigo, T0), 0,5 (T0,5); 1 (T1); 2 (T2) y 3 (T3) ml de HNO30,2 N. A posteriori se realizaron análisis de pH, Al soluble-intercambiable, difractometría de rayos X y microscopia electrónica de barrido. La difractometría del suelo original señala la presencia dominante de cuarzo/feldespatos entre los minerales primarios, y arcilla entre los secundarios, con una relación Si:Al en donde predomina el Si y cationes de K, Mg, Fe y Na. La arcilla dominante fue illita, con escasas cantidades de esmectitas, interestratificados illita/esmectita y trazas de caolinita. La muestra T0, fue semejante mineralógicamente en su fracción arcilla, a la muestra de arcilla sin incubación, sugiriendo que la incubación no alteró la naturaleza de la fracción < 2 μm cuando no se adicionó HNO3. El aporte creciente de ácido degradaría la estructura cristalina de la illita, particularmente en la situación más acida (T3; pH 3,83). El contenido de Ca-Mg de la fracción arcilla no registró cambios ante la acidificación, evidenciándose un aumento de K, Fe y, particularmente Al. Esto se relaciona con el nivel de Al soluble-intercambiable. La acidificación por debajo de pH 4, valores aun no registrados en la Región Pampeana, arrojaría niveles de Al soluble-intercambiable considerados tóxicos para la mayor parte de las especies

Efecto de la acidificación edáfica sobre los aluminosilicatos en un suelo de la Región Pampeana

La Región Pampeana manifiesta acidificación de suelos con producción agropecuaria prolongada. Se informó que el H+ derivado de la nitrificación de fertilizantes amoniacales/urea puede producir degradación de arcillas modificando propiedades de interés agronómico. Objetivo: evaluar la modificación de aluminosilicatos y capacidad de liberación de Al en una experiencia de acidez creciente por adición de HNO3. Suelo: horizonte superficial de un Argiudol típico de La Plata (Buenos Aires). Se incubaron (Tº ambiente, 6 meses) unidades de 10 gr de suelo seco (2 mm), y 25 ml de agua destilada, en envases de 50 ml con 0 (testigo, T0), 0,5 (T0,5); 1 (T1); 2 (T2) y 3 (T3) ml de HNO30,2 N. A posteriori se realizaron análisis de pH, Al soluble-intercambiable, difractometría de rayos X y microscopia electrónica de barrido. La difractometría del suelo original señala la presencia dominante de cuarzo/feldespatos entre los minerales primarios, y arcilla entre los secundarios, con una relación Si:Al en donde predomina el Si y cationes de K, Mg, Fe y Na. La arcilla dominante fue illita, con escasas cantidades de esmectitas, interestratificados illita/esmectita y trazas de caolinita. La muestra T0, fue semejante mineralógicamente en su fracción arcilla, a la muestra de arcilla sin incubación, sugiriendo que la incubación no alteró la naturaleza de la fracción < 2 μm cuando no se adicionó HNO3. El aporte creciente de ácido degradaría la estructura cristalina de la illita, particularmente en la situación más acida (T3; pH 3,83). El contenido de Ca-Mg de la fracción arcilla no registró cambios ante la acidificación, evidenciándose un aumento de K, Fe y, particularmente Al. Esto se relaciona con el nivel de Al soluble-intercambiable. La acidificación por debajo de pH 4, valores aun no registrados en la Región Pampeana, arrojaría niveles de Al soluble-intercambiable considerados tóxicos para la mayor parte de las especies.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Efecto de la acidificación edáfica sobre los aluminosilicatos en un suelo de la Región Pampeana

La Región Pampeana manifiesta acidificación de suelos con producción agropecuaria prolongada. Se informó que el H+ derivado de la nitrificación de fertilizantes amoniacales/urea puede producir degradación de arcillas modificando propiedades de interés agronómico. Objetivo: evaluar la modificación de aluminosilicatos y capacidad de liberación de Al en una experiencia de acidez creciente por adición de HNO3. Suelo: horizonte superficial de un Argiudol típico de La Plata (Buenos Aires). Se incubaron (Tº ambiente, 6 meses) unidades de 10 gr de suelo seco (2 mm), y 25 ml de agua destilada, en envases de 50 ml con 0 (testigo, T0), 0,5 (T0,5); 1 (T1); 2 (T2) y 3 (T3) ml de HNO30,2 N. A posteriori se realizaron análisis de pH, Al soluble-intercambiable, difractometría de rayos X y microscopia electrónica de barrido. La difractometría del suelo original señala la presencia dominante de cuarzo/feldespatos entre los minerales primarios, y arcilla entre los secundarios, con una relación Si:Al en donde predomina el Si y cationes de K, Mg, Fe y Na. La arcilla dominante fue illita, con escasas cantidades de esmectitas, interestratificados illita/esmectita y trazas de caolinita. La muestra T0, fue semejante mineralógicamente en su fracción arcilla, a la muestra de arcilla sin incubación, sugiriendo que la incubación no alteró la naturaleza de la fracción < 2 μm cuando no se adicionó HNO3. El aporte creciente de ácido degradaría la estructura cristalina de la illita, particularmente en la situación más acida (T3; pH 3,83). El contenido de Ca-Mg de la fracción arcilla no registró cambios ante la acidificación, evidenciándose un aumento de K, Fe y, particularmente Al. Esto se relaciona con el nivel de Al soluble-intercambiable. La acidificación por debajo de pH 4, valores aun no registrados en la Región Pampeana, arrojaría niveles de Al soluble-intercambiable considerados tóxicos para la mayor parte de las especies.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale