Goat uromodulin promoter directs kidney-specific expression of GFP gene in transgenic mice

BACKGROUND: Uromodulin is the most abundant protein found in the urine of mammals. In an effort to utilize the uromodulin promoter in order to target recombinant proteins in the urine of transgenic animals we have cloned a goat uromodulin gene promoter fragment (GUM promoter) and used it to drive expression of GFP in the kidney of transgenic mice. RESULTS: The GUM-GFP cassette was constructed and transgenic mice were generated in order to study the promoter's tissue specificity, the GFP kidney specific expression and its subcellular distribution. Tissues collected from three GUM-GFP transgenic mouse lines, and analyzed for the presence of GFP by Western blotting and fluorescence confirmed that the GUM promoter drove expression of GFP specifically in the kidney. More specifically, by using immuno-histochemistry analysis of kidney sections, we demonstrated that GFP expression was co-localized, with endogenous uromodulin protein, in the epithelial cells of the thick ascending limbs (TAL) of Henle's loop and the early distal convoluted tubule in the kidney. CONCLUSION: The goat uromodulin promoter is capable of driving recombinant protein expression in the kidney of transgenic mice. The goat promoter fragment cloned may be a useful tool in targeting proteins or oncogenes in the kidney of mammals

CARHYCE : Consolidation scientifique des connaissances et des modèles d’évaluation pour la caractérisation hydromorphologique des cours d’eau de métropole et d’Outre-mer

La Directive-cadre sur l’eau (DCE, 2000) et sa traduction dans la loi française (LEMA, 2006) définissent le contexte en matière de politique de l'eau. Elles impliquent une gestion globale et intégrée des milieux et écosystèmes aquatiques pour atteindre un « bon état écologique ». Cet objectif est défini sur la base de la situation des communautés biologiques et des caractéristiques physico-chimiques de l'eau mais pas uniquement. Les conditions hydrologiques et la morphologie des cours d'eau sont considérées comme les facteurs de contrôle, ou « supports », de la biodiversité aquatique au travers des habitats qu’elles contribuent à mettre en place. S’y ajoutent les conditions en matière de continuité des rivières, traduites par le thème de la « continuité écologique » dans la gouvernance française. S’intéressant tant à la forme des lits fluviaux, qu’aux sédiments qu’ils transportent, à la structure ou composition des berges ou encore à la qualité des corridors rivulaires végétalisés, l’ensemble est ainsi représenté par 3 grands éléments de qualité DCE (EQ) multi-compartiments (i-e Hydrologie, Continuité de la rivière, Morphologie).Dans ce rapport, il est tout d’abord proposé d’établir un état des lieux des données disponibles à l’issue des 4 mises à jour et des optimisations réalisées depuis le début de l’année 2019 au sein de l’Interface d’Exploitation des Données Carhyce (IED). Est présentée ensuite la nouvelle version du référentiel d’analyse dit « Référentiel v2.0 » basée sur les relevés récents d’une large majorité des stations de référence (au sens du fonctionnement hydromorphologique). Est proposée également une clé d’interprétation de l’Indicateur morphologique global (IMG) grâce à une comparaison avec le Morphological quality index (MQI), un indicateur morphologique utilisé en Italie. Enfin, cette étude conclut sur quelques éléments de réflexions sur les potentialités et perspectives du Lidar pour la caractérisation hydromorphologique des cours d’eau

Substantially improved pharmacokinetics of recombinant human butyrylcholinesterase by fusion to human serum albumin

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Human butyrylcholinesterase (huBChE) has been shown to be an effective antidote against multiple LD₅₀of organophosphorus compounds. A prerequisite for such use of huBChE is a prolonged circulatory half-life. This study was undertaken to produce recombinant huBChE fused to human serum albumin (hSA) and characterize the fusion protein.</p> <p>Results</p> <p>Secretion level of the fusion protein produced <it>in vitro </it>in BHK cells was ~30 mg/liter. Transgenic mice and goats generated with the fusion constructs expressed in their milk a bioactive protein at concentrations of 0.04–1.1 g/liter. BChE activity gel staining and a size exclusion chromatography (SEC)-HPLC revealed that the fusion protein consisted of predominant dimers and some monomers. The protein was confirmed to have expected molecular mass of ~150 kDa by Western blot. The purified fusion protein produced <it>in vitro </it>was injected intravenously into juvenile pigs for pharmacokinetic study. Analysis of a series of blood samples using the Ellman assay revealed a substantial enhancement of the plasma half-life of the fusion protein (~32 h) when compared with a transgenically produced huBChE preparation containing >70% tetramer (~3 h). <it>In vitro </it>nerve agent binding and inhibition experiments indicated that the fusion protein in the milk of transgenic mice had similar inhibition characteristics compared to human plasma BChE against the nerve agents tested.</p> <p>Conclusion</p> <p>Both the pharmacokinetic study and the <it>in vitro </it>nerve agent binding and inhibition assay suggested that a fusion protein retaining both properties of huBChE and hSA is produced <it>in vitro </it>and <it>in vivo</it>. The production of the fusion protein in the milk of transgenic goats provided further evidence that sufficient quantities of BChE/hSA can be produced to serve as a cost-effective and reliable source of BChE for prophylaxis and post-exposure treatment.</p

Structural and functional analysis of the Rous Sarcoma virus negative regulator of splicing and demonstration of its activation by the 9G8 SR protein

Retroviruses require both spliced and unspliced RNAs for replication. Accumulation of Rous Sarcoma virus (RSV) unspliced RNA depends upon the negative regulator of splicing (NRS). Its 5′-part is considered as an ESE binding SR proteins. Its 3′-part contains a decoy 5′-splice site (ss), which inhibits splicing at the bona fide 5′-ss. Only the 3D structure of a small NRS fragment had been experimentally studied. Here, by chemical and enzymatic probing, we determine the 2D structure of the entire RSV NRS. Structural analysis of other avian NRSs and comparison with all sequenced avian NRSs is in favour of a phylogenetic conservation of the NRS 2D structure. By combination of approaches: (i) in vitro and in cellulo splicing assays, (ii) footprinting assays and (iii) purification and analysis of reconstituted RNP complex, we define a small NRS element retaining splicing inhibitory property. We also demonstrate the capability of the SR protein 9G8 to increase NRS activity in vitro and in cellulo. Altogether these data bring new insights on how NRS fine tune splicing activity

Modifications dans l'attitude et la pratique d'activités physiques chez des adultes sédentaires âgés de 40 à 60 ans résultant d'une demande d'un médecin de consulter un kinésiologue

Il est suggéré dans la littérature scientifique, que le soutien social et particulièrement celui issu de la collaboration entre des professionnels de la santé, exerce une influence majeure tant sur l'adoption que sur l'assiduité à l'activité physique. Dans cette optique, cette recherche examine l'effet sur la pratique d'activité physique de la consultation d'un kinésiologue suite à la recommandation d'un médecin comparativement à l'effet produit par une simple recommandation d'exercices faite par le médecin lui-même. L'étude porte sur 35 sujets adultes âgés de 40 à 60 ans et comprend la collaboration de trois médecins et quatre kinésiologues. La sélection et l'assignation des sujets à l'un ou l'autre des deux groupes de l'étude se font de façon aléatoire et ce, dès leur arrivée dans la salle d'attente de la clinique médicale. Par la suite le sujet rencontre son médecin. Pour le groupe contrôle, le médecin fait une recommandation d'exercices et pour le groupe expérimental, le médecin demande à son patient de contacter un kinésiologue pour obtenir un programme d'entraînement personnalisé et un suivi régulier. Le traitement dure trois mois et des questionnaires sont administrés aux sujets au début et à la fin de l'étude. L'opinion des médecins est aussi recueillie par l'entremise d'un questionnaire à compléter après les trois mois de collaboration."--Résumé abrégé par UM

Modifications dans l'attitude et la pratique d'activités physiques chez des adultes sédentaires âgés de 40 à 60 ans résultant d'une demande d'un médecin de consulter un kinésiologue

Il est suggéré dans la littérature scientifique, que le soutien social et particulièrement celui issu de la collaboration entre des professionnels de la santé, exerce une influence majeure tant sur l'adoption que sur l'assiduité à l'activité physique. Dans cette optique, cette recherche examine l'effet sur la pratique d'activité physique de la consultation d'un kinésiologue suite à la recommandation d'un médecin comparativement à l'effet produit par une simple recommandation d'exercices faite par le médecin lui-même. L'étude porte sur 35 sujets adultes âgés de 40 à 60 ans et comprend la collaboration de trois médecins et quatre kinésiologues. La sélection et l'assignation des sujets à l'un ou l'autre des deux groupes de l'étude se font de façon aléatoire et ce, dès leur arrivée dans la salle d'attente de la clinique médicale. Par la suite le sujet rencontre son médecin. Pour le groupe contrôle, le médecin fait une recommandation d'exercices et pour le groupe expérimental, le médecin demande à son patient de contacter un kinésiologue pour obtenir un programme d'entraînement personnalisé et un suivi régulier. Le traitement dure trois mois et des questionnaires sont administrés aux sujets au début et à la fin de l'étude. L'opinion des médecins est aussi recueillie par l'entremise d'un questionnaire à compléter après les trois mois de collaboration."--Résumé abrégé par UM

Portrait des citoyens défavorables à l'arrivée, sur leur rue, d'une ressource accueillant des personnes ayant une maladie mentale

Afin de comprendre pourquoi certains citoyens sont défavorables à l'arrivée d'une ressource sur leur rue, la présente étude a rejoint 663 adultes a partir d'un échantillon aléatoire de 1400 numéros de téléphone. Le questionnaire utilisé mesure entre autre le danger appréhendé, l'autoritarisme, la bienveillance, le besoin de contrôle social, l'idéologie de santé mentale, l'expérience des répondants avec la maladie mentale et leurs données sociodémographiques. Les résultats obtenus indiquent que les gens défavorables à l'arrivée d'une ressource de santé mentale sur leur rue sont minoritaires. Des corrélat ions positives sont observées entre certaines variables sociodémographiques et 1 'attitude favorable ou défavorable du citoyen. Selon une analyse discriminante, il est possible de prédire l'attitude des citoyens à l'arrivée d'une ressource de santé mentale sur leur rue en étudiant leurs croyances en ce qui a trait à l'idéologie de santé mentale communautaires et au contrôle social. Ces résultats d'ordre quantitatifs sont validés ou complétés par l'analyse des propos tenus par deux groupes de discussion regroupant des répondants de l'échantillon initial

Incursion dans l'univers des jeunes du secondaire de la Rive-Sud : enquête sur les besoins en matière d'aide psychosociale : rapport /

(rel. à l'anglaise