62 research outputs found
Goat uromodulin promoter directs kidney-specific expression of GFP gene in transgenic mice
BACKGROUND: Uromodulin is the most abundant protein found in the urine of mammals. In an effort to utilize the uromodulin promoter in order to target recombinant proteins in the urine of transgenic animals we have cloned a goat uromodulin gene promoter fragment (GUM promoter) and used it to drive expression of GFP in the kidney of transgenic mice. RESULTS: The GUM-GFP cassette was constructed and transgenic mice were generated in order to study the promoter's tissue specificity, the GFP kidney specific expression and its subcellular distribution. Tissues collected from three GUM-GFP transgenic mouse lines, and analyzed for the presence of GFP by Western blotting and fluorescence confirmed that the GUM promoter drove expression of GFP specifically in the kidney. More specifically, by using immuno-histochemistry analysis of kidney sections, we demonstrated that GFP expression was co-localized, with endogenous uromodulin protein, in the epithelial cells of the thick ascending limbs (TAL) of Henle's loop and the early distal convoluted tubule in the kidney. CONCLUSION: The goat uromodulin promoter is capable of driving recombinant protein expression in the kidney of transgenic mice. The goat promoter fragment cloned may be a useful tool in targeting proteins or oncogenes in the kidney of mammals
CARHYCE : Consolidation scientifique des connaissances et des modĂšles dâĂ©valuation pour la caractĂ©risation hydromorphologique des cours dâeau de mĂ©tropole et dâOutre-mer
La Directive-cadre sur lâeau (DCE, 2000) et sa traduction dans la loi française (LEMA, 2006) dĂ©finissent le contexte en matiĂšre de politique de l'eau. Elles impliquent une gestion globale et intĂ©grĂ©e des milieux et Ă©cosystĂšmes aquatiques pour atteindre un « bon Ă©tat Ă©cologique ». Cet objectif est dĂ©fini sur la base de la situation des communautĂ©s biologiques et des caractĂ©ristiques physico-chimiques de l'eau mais pas uniquement. Les conditions hydrologiques et la morphologie des cours d'eau sont considĂ©rĂ©es comme les facteurs de contrĂŽle, ou « supports », de la biodiversitĂ© aquatique au travers des habitats quâelles contribuent Ă mettre en place. Sây ajoutent les conditions en matiĂšre de continuitĂ© des riviĂšres, traduites par le thĂšme de la « continuitĂ© Ă©cologique » dans la gouvernance française. SâintĂ©ressant tant Ă la forme des lits fluviaux, quâaux sĂ©diments quâils transportent, Ă la structure ou composition des berges ou encore Ă la qualitĂ© des corridors rivulaires vĂ©gĂ©talisĂ©s, lâensemble est ainsi reprĂ©sentĂ© par 3 grands Ă©lĂ©ments de qualitĂ© DCE (EQ) multi-compartiments (i-e Hydrologie, ContinuitĂ© de la riviĂšre, Morphologie).Dans ce rapport, il est tout dâabord proposĂ© dâĂ©tablir un Ă©tat des lieux des donnĂ©es disponibles Ă lâissue des 4 mises Ă jour et des optimisations rĂ©alisĂ©es depuis le dĂ©but de lâannĂ©e 2019 au sein de lâInterface dâExploitation des DonnĂ©es Carhyce (IED). Est prĂ©sentĂ©e ensuite la nouvelle version du rĂ©fĂ©rentiel dâanalyse dit « RĂ©fĂ©rentiel v2.0 » basĂ©e sur les relevĂ©s rĂ©cents dâune large majoritĂ© des stations de rĂ©fĂ©rence (au sens du fonctionnement hydromorphologique). Est proposĂ©e Ă©galement une clĂ© dâinterprĂ©tation de lâIndicateur morphologique global (IMG) grĂące Ă une comparaison avec le Morphological quality index (MQI), un indicateur morphologique utilisĂ© en Italie. Enfin, cette Ă©tude conclut sur quelques Ă©lĂ©ments de rĂ©flexions sur les potentialitĂ©s et perspectives du Lidar pour la caractĂ©risation hydromorphologique des cours dâeau
Substantially improved pharmacokinetics of recombinant human butyrylcholinesterase by fusion to human serum albumin
<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Human butyrylcholinesterase (huBChE) has been shown to be an effective antidote against multiple LD<sub>50 </sub>of organophosphorus compounds. A prerequisite for such use of huBChE is a prolonged circulatory half-life. This study was undertaken to produce recombinant huBChE fused to human serum albumin (hSA) and characterize the fusion protein.</p> <p>Results</p> <p>Secretion level of the fusion protein produced <it>in vitro </it>in BHK cells was ~30 mg/liter. Transgenic mice and goats generated with the fusion constructs expressed in their milk a bioactive protein at concentrations of 0.04â1.1 g/liter. BChE activity gel staining and a size exclusion chromatography (SEC)-HPLC revealed that the fusion protein consisted of predominant dimers and some monomers. The protein was confirmed to have expected molecular mass of ~150 kDa by Western blot. The purified fusion protein produced <it>in vitro </it>was injected intravenously into juvenile pigs for pharmacokinetic study. Analysis of a series of blood samples using the Ellman assay revealed a substantial enhancement of the plasma half-life of the fusion protein (~32 h) when compared with a transgenically produced huBChE preparation containing >70% tetramer (~3 h). <it>In vitro </it>nerve agent binding and inhibition experiments indicated that the fusion protein in the milk of transgenic mice had similar inhibition characteristics compared to human plasma BChE against the nerve agents tested.</p> <p>Conclusion</p> <p>Both the pharmacokinetic study and the <it>in vitro </it>nerve agent binding and inhibition assay suggested that a fusion protein retaining both properties of huBChE and hSA is produced <it>in vitro </it>and <it>in vivo</it>. The production of the fusion protein in the milk of transgenic goats provided further evidence that sufficient quantities of BChE/hSA can be produced to serve as a cost-effective and reliable source of BChE for prophylaxis and post-exposure treatment.</p
Structural and functional analysis of the Rous Sarcoma virus negative regulator of splicing and demonstration of its activation by the 9G8 SR protein
Retroviruses require both spliced and unspliced RNAs for replication. Accumulation of Rous Sarcoma virus (RSV) unspliced RNA depends upon the negative regulator of splicing (NRS). Its 5âČ-part is considered as an ESE binding SR proteins. Its 3âČ-part contains a decoy 5âČ-splice site (ss), which inhibits splicing at the bona fide 5âČ-ss. Only the 3D structure of a small NRS fragment had been experimentally studied. Here, by chemical and enzymatic probing, we determine the 2D structure of the entire RSV NRS. Structural analysis of other avian NRSs and comparison with all sequenced avian NRSs is in favour of a phylogenetic conservation of the NRS 2D structure. By combination of approaches: (i) in vitro and in cellulo splicing assays, (ii) footprinting assays and (iii) purification and analysis of reconstituted RNP complex, we define a small NRS element retaining splicing inhibitory property. We also demonstrate the capability of the SR protein 9G8 to increase NRS activity in vitro and in cellulo. Altogether these data bring new insights on how NRS fine tune splicing activity
Modifications dans l'attitude et la pratique d'activités physiques chez des adultes sédentaires ùgés de 40 à 60 ans résultant d'une demande d'un médecin de consulter un kinésiologue
Il est suggĂ©rĂ© dans la littĂ©rature scientifique, que le soutien social et particuliĂšrement celui issu de la collaboration entre des professionnels de la santĂ©, exerce une influence majeure tant sur l'adoption que sur l'assiduitĂ© Ă l'activitĂ© physique. Dans cette optique, cette recherche examine l'effet sur la pratique d'activitĂ© physique de la consultation d'un kinĂ©siologue suite Ă la recommandation d'un mĂ©decin comparativement Ă l'effet produit par une simple recommandation d'exercices faite par le mĂ©decin lui-mĂȘme. L'Ă©tude porte sur 35 sujets adultes ĂągĂ©s de 40 Ă 60 ans et comprend la collaboration de trois mĂ©decins et quatre kinĂ©siologues. La sĂ©lection et l'assignation des sujets Ă l'un ou l'autre des deux groupes de l'Ă©tude se font de façon alĂ©atoire et ce, dĂšs leur arrivĂ©e dans la salle d'attente de la clinique mĂ©dicale. Par la suite le sujet rencontre son mĂ©decin. Pour le groupe contrĂŽle, le mĂ©decin fait une recommandation d'exercices et pour le groupe expĂ©rimental, le mĂ©decin demande Ă son patient de contacter un kinĂ©siologue pour obtenir un programme d'entraĂźnement personnalisĂ© et un suivi rĂ©gulier. Le traitement dure trois mois et des questionnaires sont administrĂ©s aux sujets au dĂ©but et Ă la fin de l'Ă©tude. L'opinion des mĂ©decins est aussi recueillie par l'entremise d'un questionnaire Ă complĂ©ter aprĂšs les trois mois de collaboration."--RĂ©sumĂ© abrĂ©gĂ© par UM
Modifications dans l'attitude et la pratique d'activités physiques chez des adultes sédentaires ùgés de 40 à 60 ans résultant d'une demande d'un médecin de consulter un kinésiologue
Il est suggĂ©rĂ© dans la littĂ©rature scientifique, que le soutien social et particuliĂšrement celui issu de la collaboration entre des professionnels de la santĂ©, exerce une influence majeure tant sur l'adoption que sur l'assiduitĂ© Ă l'activitĂ© physique. Dans cette optique, cette recherche examine l'effet sur la pratique d'activitĂ© physique de la consultation d'un kinĂ©siologue suite Ă la recommandation d'un mĂ©decin comparativement Ă l'effet produit par une simple recommandation d'exercices faite par le mĂ©decin lui-mĂȘme. L'Ă©tude porte sur 35 sujets adultes ĂągĂ©s de 40 Ă 60 ans et comprend la collaboration de trois mĂ©decins et quatre kinĂ©siologues. La sĂ©lection et l'assignation des sujets Ă l'un ou l'autre des deux groupes de l'Ă©tude se font de façon alĂ©atoire et ce, dĂšs leur arrivĂ©e dans la salle d'attente de la clinique mĂ©dicale. Par la suite le sujet rencontre son mĂ©decin. Pour le groupe contrĂŽle, le mĂ©decin fait une recommandation d'exercices et pour le groupe expĂ©rimental, le mĂ©decin demande Ă son patient de contacter un kinĂ©siologue pour obtenir un programme d'entraĂźnement personnalisĂ© et un suivi rĂ©gulier. Le traitement dure trois mois et des questionnaires sont administrĂ©s aux sujets au dĂ©but et Ă la fin de l'Ă©tude. L'opinion des mĂ©decins est aussi recueillie par l'entremise d'un questionnaire Ă complĂ©ter aprĂšs les trois mois de collaboration."--RĂ©sumĂ© abrĂ©gĂ© par UM
Portrait des citoyens défavorables à l'arrivée, sur leur rue, d'une ressource accueillant des personnes ayant une maladie mentale
Afin de comprendre pourquoi certains citoyens sont défavorables à l'arrivée d'une ressource sur leur rue, la présente étude a rejoint 663 adultes a partir d'un échantillon aléatoire de 1400 numéros de téléphone. Le questionnaire utilisé mesure entre autre le danger appréhendé, l'autoritarisme, la bienveillance, le besoin de contrÎle social, l'idéologie de santé mentale, l'expérience des répondants avec la maladie mentale et leurs données sociodémographiques. Les résultats obtenus indiquent que les gens défavorables à l'arrivée d'une ressource de santé mentale sur leur rue sont minoritaires. Des corrélat ions positives sont observées entre certaines variables sociodémographiques et 1 'attitude favorable ou défavorable du citoyen. Selon une analyse discriminante, il est possible de prédire l'attitude des citoyens à l'arrivée d'une ressource de santé mentale sur leur rue en étudiant leurs croyances en ce qui a trait à l'idéologie de santé mentale communautaires et au contrÎle social. Ces résultats d'ordre quantitatifs sont validés ou complétés par l'analyse des propos tenus par deux groupes de discussion regroupant des répondants de l'échantillon initial
Nathalie Derome et François Martel : Amour, émeraude et road movie // Julie-Andrée Tremblay : Intentions réversibles ou 1 + 1 + 1 = 0
Incursion dans l'univers des jeunes du secondaire de la Rive-Sud : enquĂȘte sur les besoins en matiĂšre d'aide psychosociale : rapport /
(rel. Ă l'anglaise
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