Caracterización funcional de Snail2 como represor de cadherina-E y como regulador del proceso de carcinogénesis química

Patricia Molina Ortiz Licenciada en Bioquímica, presenta esta memoria para optar al título de Doctor por la Universidad Autónoma de Madrid. La presente tesis ha sido realizada en el Instituto de Investigaciones Biomédicas Madrid “Alberto Sols” (CSIC-UAM).[ES]: La pérdida de expresión de la proteína de adhesión intercelular cadherina-E es un evento esencial en el proceso de transición epitelio-mesénquima (TEM) que permite la migración celular durante el desarrollo embrionario y la invasión de las células tumorales de origen epitelial (carcinomas). La represión transcripcional es uno de los principales mecanismos de regulación de la expresión de cadherina-E, tanto en el desarrollo embrionario como durante la progresión tumoral. En los últimos años se han caracterizado diferentes represores transcripcionales del gen de cadherina-E, que a su vez inducen TEM, entre los que se encuentran los factores de dedos de zinc de la familia Snail (Snail1 y Snail2) y ZEB (ZEB-1 y ZEB-2), así como los factores de la familia bHLH (E47, E2-2 y Twist). Estudios previos de nuestro laboratorio de analisis de perfiles de expresión génica demostraron que los factores Snail1, Snail2 y E47 inducen programas genéticos comunes y específicos, apoyando un papel no redundante de los distintos factores, en particular de Snail1 y Snail2, en la invasión y progresión tumoral. En estudios previos se había caracterizado el mecanismo de represión de Snail1 y puesto de manifiesto diferencias significativas en la afinidad de los factores Snail1 y Snail2 por las cajas-E del promotor de cadherina-E. Sin embargo, se desconocen los mecanismos específicos de represión mediados por Snail2. Esta tesis ha analizado los mecanismos transcripcionales utilizados por Snail2 para la represión transcripcional de cadherina-E así como su papel en el proceso de carcinogénesis química. Los estudios bioquímicos mostraron que Snail2 precisa de los dominios SNAG (dominio común a Snail y Gfi-1) y SLUG para el reclutamiento de distintos co-represores, como mSin3A, NCoR y CtBP1.Estos co-represores interactúan entre sí durante la represión transcripcional de cadherina-E. Además, se han identificado diferentes residuos fosforilables de Snail2 in vivo capaces de regular su actividad represora. Finalmente, el análisis funcional de los dedos de zinc desveló que si bien el segundo dedo de zinc de Snail2 es esencial para la represión de cadherina-E, el quinto dedo de zinc tiene una función dependiente del contexto del promotor, modificando la capacidad de represión de Snail2 según la estructura del mismo. Estos resultados señalan diferencias entre los mecanismos de represión transcripcional de Snail1 y Snail2, apoyando las diferencias funcionales entre ambos factores. Los estudios de proliferación realizados en la piel de ratones control y Snail2 -/- mostraron que Snail2 es esencial para la proliferación de los queratinocitos in vitro y el programa de diferenciación in vivo. Sin embargo, la ausencia de Snail2 aumenta significativamente el número de lesiones y la progresión maligna de tumores inducidos por carcinogénesis química, mediante el protocolo de DMBA/TPA. El análisis detallado de las lesiones reveló que la ausencia de Snail2 favorece la proliferación e inhibe parcialmente la diferenciación terminal en las lesiones, contribuyendo así a la progresión tumoral. El tratamiento de ratones carentes de Snail2 con antiinflamatorios reduce la progresión maligna de las lesiones inducidas por DMBA/TPA pero no la aparición y el crecimiento de lesiones benignas. Estos resultados sugieren una alteración importante de la respuesta inflamatoria en ausencia de Snail2, que a su vez puede contribuir en la mayor progresión maligna.[EN]: Loss of expression of the intercellular adhesion protein E-cadherin is a key event in the process of epithelial-mesenchymal transition (EMT), which allows cell migration during embryonic development and invasion of tumor cells of epithelial origin (carcinomas). One of the main mechanisms of negative regulation of E-cadherin expression during both embryonic development and tumor progression is transcriptional repression. Recently, different transcriptional repressors of E-cadherin gene, which in turn induce TEM, have been identified including the zinc finger family of Snail (Snail1 and Snail2) and ZEB (ZEB - 1 and ZEB-2) factors and the bHLH family (E47, E2-2 and Twist). Previous gene expression profiles studies from our laboratory, identified common and specific genetic programs induced by Snail1, Snail2 and E47, supporting a non redundant role for these factors, particularly for Snail1 and Snail2, during invasion and tumor progression. Previous studies about Snail1 repression mechanism revealed significant differences in the affinity of Snail1 and Snail2 for the E-boxes of E-cadherin promoter. However, the specific repression mechanisms mediated by Snail2 are unknown. In this thesis the mechanisms used by Snail2 for transcriptional repression of E-cadherin and its role in the process of chemical carcinogenesis in mice heve been analized. Biochemical approaches have shown that the SNAG (Snail and Gfi-1) and SLUG domains of Snail2 are required for the recruitment of different co-repressors, such as mSin3A, NCoR and CtBP1. These corepressors functionally interact during transcriptional repression of E-cadherin gene. In addition, several in vivo phosphorylated residues able to modulate Snail2 funtional activity have been identified. Finally, functional analysis of the zinc fingers of Snail2 revealed that while the second zinc finger is essential for the repression activity of Snail2, the fifth zinc finger is required depending on the promoter context and structure. These results highlight the differences between the mechanisms of transcriptional repression of Snail and Snail2, supporting the non redundant function of both factors. On the other hand, proliferation and wound healing studies in the skin of control or Snail2 -/- mice showed that Snail2 is essential for in vivo proliferation of keratinocytes and for their differentiation program end. However, the absence of Snail2 significantly increases malignant progression of tumors induced by DMBA/TPA protocol of skin chemical carcinogenesis. In-depth analysis of the lesions revealed that the absence of Snail2 favors proliferation and partial inhibition of their terminal differentiation, thereby contributing to tumor progression. Anti-inflammatory treatment of Snail2 -/- mice reduces malignant progression of the lesions induced by DMBA/TPA but not the emergence and growth of benign lesions. These results suggest significant alterations of the inflammatory response in the absence of Snail2, which in turn may be causing the acute malignant progression.La presente tesis ha sido financiada por una Beca de Formación del Personal Investigador (FPI) del Ministerio de Ciencia e Innovación.Peer Reviewe

El riesgo operativo y su influencia en las pequeñas y medianas empresas

Trabajo de investigaciónLas situaciones que afectan a las empresas y generan pérdidas económicas importantes son conocidas como riesgo operativo, son fallas en los sistemas que generan fraudes por falta de control y gestión en las diferentes áreas de la organización. Por esta razón el propósito de este trabajo es realizar un ejercicio de exploración y aplicación que permita identificar cuáles son los niveles de riesgo a los que se enfrenta la organización, con el fin de administrar, controlar y caracterizar el riesgo, estableciendo procedimientos para realizar su medición y correspondiente resultado.1. EL RIESGO OPERATIVO Y SU INFLUENCIA EN LAS PEQUEÑAS Y MEDIANAS EMPRESA 2. ANTECEDENTES DE LA MANIFESTACIÓN DEL RIESGO OPERATIVO 3. MODELO DE EVALUACIÓN DEL RIESGO 4. EJEMPLO MATRIZ DE RIESGO OPERATIVO BIBLIOGRAFÍAEspecializaciónEspecialista en Análisis y Administración Financier

Historia de los poderes de la libertad. Conversación con Nikolas Rose.

El texto presenta la entrevista realizada al profesor Nikolas Rose el día 11 de septiembre de 2013, en su visita al Instituto de Psicología y a la Facultad de Ciencias Sociales y Económicas de la Universidad del Valle. El trabajo del profesor Rose se ha centrado en el análisis de las producciones de verdad, la gubernamentalidad y la subjetivación que fueron los temas centrales de la conversación. El texto es una invitación a superar el divorcio entre práctica y discurso, que se dirime cuando se considera la acción. La reflexión sobre el método se centra en la etnografía como recurso amplio para comprender temas que la investigación convencional no captaría

Plan de negocios para implementar una empresa comercializadora de elementos de protección personal para trabajadores del sector de la construcción ubicada en el municipio de Madrid (Cundinamarca).

En el presente proyecto tiene como fin velar por el cumplimiento de los requisitos legales en cuanto a elementos de protección laboral, para minimizar el número de accidentes laborales a través de la comercialización de artículos de seguridad industrial en sector de la construcción situado en el Municipio de Madrid Cundinamarca

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Bad News and Quality Reputation among Users of Public Services

This manuscript examines whether the effect of anchoring bias is greater when citizens evaluate the quality of a public service after receiving negative initial information about service performance than after receiving positive information. It also tests whether there are differences in this anchoring bias by comparing formal (report) vs. informal (rumor) communication. Two field experiments were conducted with the participation of passengers of a commuter public train transportation organization (Experiment 1, N = 105) and users of a public university administrative service (Experiment 2, N = 172). The first experiment confirmed the bias produced by the negative initial information, whereas this bias does not exist for the positive information. The second experiment showed that the bias produced by the initial information has the same magnitude for both formal and informal communication. This paper concludes with a discussion of theoretical and practical implications for managing reputation in public services

Objetos virtuales de aprendizaje para la formación profesional: una mirada desde los estudiantes de la Universidad del Atlántico

This document shows the results of a study that aimed to identify the educational goals or educational objectives of the students of the Universidad del Atlántico in the remote education setting. For its fulfillment, a descriptive-transversal-non-experimental research design was chosen, the sample corresponds to students from the ten (10) faculties of the Universidad del Atlántico (N = 1022), from a simple random sampling and a Likert-type scale for data collection. Based on the evidence and statistics resulting from the systematization of the results, there are disparities between the reality described by the students who opted for the face-to-face methodology on the scale, in the face of the paradigm shift resulting from the Covid-19 and the perceptions on the use of technologies.En este documento se muestran los resultados de un estudio que buscó identificar las metas educativas u objetivos educativos de los estudiantes de la Universidad del Atlántico en el escenario de la educación remota. Para su cumplimiento, se optó por un diseño de investigación de corte descriptivo-transversal-no experimental, la muestra corresponde a estudiantes de las diez (10) facultades de la Universidad del Atlántico (N=1022), a partir de un muestreo aleatorio simple y una escala tipo Likert para la recolección de los datos. Con base en las evidencias y las estadísticas producto de la sistematización de los resultados, existen disparidades entre la realidad descrita por los estudiantes quienes optaron en la escala por la metodología presencial, frente al cambio de paradigma producto del Covid-19 y las percepciones sobre el uso de las tecnologías