Avaliação da produção de amilase e protease por bactérias de ambientes extremos

Anais do VI Encontro de Iniciação Científica e II Encontro Anual de Iniciação ao Desenvolvimento Tecnológico e Inovação – EICTI 2017 - 04 a 06 de outubro de 2017 - temática OutrosA flexibilidade enzimática atribuída à micro-organismos psicrofílicos, é uma característica adaptativa de grande aplicabilidade em diversos setores industriais e com promissor interesse científico para aplicações voltadas a indústria biotecnológica. As amostras marinhas e de sedimentos do solo Antártico, possuem um alto potencial de conterem micro-organismos com características única no que se refere a adaptação microbiana em ambientes extremos, o que torna estas comunidades microbianas promissoras na obtenção de produtos metabólicos diferenciados dos já encontrados a partir de células originárias de ambientes com temperaturas amenas. Neste sentido, o presente estudo objetivou a busca das enzimas amilases e proteases produzidas bactérias associados à ambientes de baixa temperatura bem como a avaliação das estruturas morfológicas destas linhagens proporcionando a estruturação de um acervo de linhagens bacterianas com​ ​ potencial ​ aplicação​ ​ biotecnológicaUniversidade Federal da Integração Latino-Americana (Unila); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq); Fundação Araucária; Parque Tecnológico Itaipu (PTI) e Companhia de Saneamento do Paraná (SANEPAR

Extração de hidrocarbonetos produzidos por bactérias de ambientes frios

Anais do V Encontro de Iniciação Científica e I Encontro Anual de Iniciação ao Desenvolvimento Tecnológico e Inovação – EICTI 2016 - 05 e 07 de outubro de 2016 – Sessão BiológicasA utilização e desperdício dos recursos fósseis em processos industriais e rotineiros, vêm cada vez mais, acarretando em um grande impacto ambiental. Como medida de minimizar esses problemas, cresce o interesse na busca por fontes energéticas mais sustentáveis. Os micro-organismos têm tido um papel fundamental em vários processos tecnológicos, com o avanço da biotecnologia e a especialização da microbiologia industrial, estão se tornando alvos de estudos para a descoberta de diversos compostos utilizados na indústria. Micro-organismos psicrofílicos possuem características metabólicas únicas que garantem sua sobrevivência em regiões extremas, como o continente Antártico. Bactérias psicrofílicas apresentam potencial na produção de hidrocarbonetos, que possibilita uma nova fonte sustentável para a produção de biocombustível. O presente trabalho objetivou a extração de hidrocarbonetos á partir de bactérias isoladas de amostras marinhas do continente Antártico bem como a avaliação morfológica destas linhagens bacterianas e avaliação do peso seco

Construção de vetores para caracterizaçao de genes de Trypanosoma cruzi em um sistema para clonagem em alta demanda

Orientador : Marco Aurélio KriegerDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 18/07/2008Inclui bibliografiaEm Trypanosoma cruzi, as informações provenientes do projeto genoma, o grande número de proteínas hipotéticas, as limitações da expressão protéica heteróloga em bactérias e a baixa quantidade de genes caracterizados constituem o cenário atual deste organismo. Esses fatores demonstram a necessidade da obtenção de ferramentas que permitam a caracterização em larga escala de genes deste organismo. Entre estas ferramentas, estão os vetores para expressão de proteínas em tripanossomatídeos, que, através da genética reversa, combinada com eficiência, plasticidade e compatibilidade permitem a caracterização de genes de forma rápida. Diante desta necessidade, foram construídos vetores para expressão de proteínas em Trypanosoma cruzi e Crithidia fasciculata que permitem a rápida clonagem de genes através do sistema Gateway® (Invitrogen). As construções para T. cruzi possuem a região 35.1 como intergênica, além de diferentes etiquetas (hexâmero de histidinas, c-myc, GFP, CFP, YFP e TAP), promotores (ribossomal de T. cruzi Dm28c e do bacteriófago T7) e resistências a antibióticos (higromicina e G418), permitindo a caracterização de genes por diversas abordagens. Além disso, a utilização de C. fasciculata como sistema de expressão protéica heteróloga tem como vantagens a sua proximidade evolutiva com T. cruzi e o fato de não parasitar seres humanos. Tal sistema é baseado nos vetores pNUS, com a adição do promotor do bacteriófago T7 e região operadora de tetraciclina. A validação desta plataforma foi realizada com 3 genes de T. cruzi, utilizando anticorpos contra as proteínas recombinantes para a confirmação da expressão, localização e obtenção de complexos protéicos. Os resultados obtidos demonstraram a funcionalidade e plasticidade dos vetores gerados, tornando factíveis as caracterizações gênicas em larga escala.The availability of the Trypanosoma cruzi genome is only a small piece of the puzzle of this parasite’s biology. A high percentage of hypothetical proteins, few genes characterized and limitations on heterologous protein expression are the present scenario for this biological model. Thus, the need for development of a highthroughput gene characterization platform becomes evident. Ideally, such platform should allow efficient cloning and disponibility of different applications. In this context, the goal of this study was to use the GatewayÒ technology (Invitrogen) to construct plasmid vectors suitable for different uses. Our constructs contained 35.1 intergenic regions, T. cruzi Dm28c 18S ribosome or the T7 bacteriophage promoters, antibiotic resistance genes, and several tags for multiple purposes. Besides T. cruzi vectors, a Crithidia fasciculata heterologous protein expression system was created based on pNUS-H1 and modified for use of the bacteriophage T7 RNA polymerase. The advantages of the C. fasciculata system are that it is related to T. cruzi but it is not pathogenic for humans. Three T. cruzi genes were used to validate our strategy. Antibodies against the products of these genes were used to detect the presence of the recombinant proteins in T. cruzi and C. fasciculata extracts, and to compare the localization of the native proteins with that of the recombinant proteins tagged with cmyc epitope or fluorescent proteins GFP, CFP and YFP in T. cruzi. The results obtained with these antibodies corroborated the results obtained with our system. TAP tag protein complex purification was also used for strategy validation. Our results show that this platform is a fast and efficient cloning system that allows the characterization of Trypanosoma cruzi genes by different biological approaches. The development of this high-throughput platform is a step further to large scale applications such as the T. cruzi ORFeome

A FORMAÇÃO DE PROFESSORES DOS ANOS INICIAIS PARA O ENSINO DE ASTRONOMIA NO ESTADO DO PARANÁ

Este trabalho apresenta parte dos resultados de uma pesquisa de doutorado que objetivou por meio da pesquisa qualitativa realizar um estudo exploratório acerca das caracterí­sticas e dos fundamentos que norteiam a formação do pedagogo para o ensino de astronomia em oito instituições de ensino paranaense, seis cursos de graduação oferecidos por instituições públicas de ensino superior, dois cursos de graduação oferecidos por instituições privadas e um curso de formação de docentes em ní­vel médio, também ofertado por uma instituição pública. O material de análise para a investigação consistiu em ementas e programas detalhados das disciplinas Metodologia de Ensino de Ciências (MEC). Verificou-se que os programas acentuam os aspectos metodológicos em detrimento dos conteúdos especí­ficos de Ciências Naturais havendo, em alguns casos, dissociação da prática de ensino no contexto da disciplina MEC

Synchronization and partial synchronization of linear maps

We study synchronization of low-dimensional ($d=2,3,4$) chaotic piecewise linear maps. For Bernoulli maps we find Lyapunov exponents and locate the synchronization transition, that numerically is found to be discontinuous (despite continuously vanishing Lyapunov exponent(s)). For tent maps, a limit of stability of the synchronized state is used to locate the synchronization transition that numerically is found to be continuous. For nonidentical tent maps at the partial synchronization transition, the probability distribution of the synchronization error is shown to develop highly singular behavior. We suggest that for nonidentical Bernoulli maps (and perhaps some other discontinuous maps) partial synchronization is merely a smooth crossover rather than a well defined transition. More subtle analysis in the $d=4$ case locates the point where the synchronized state becomes stable. In some cases, however, a riddled basin attractor appears, and synchronized and chaotic behaviors coexist. We also suggest that similar riddling of a basin of attractor might take place in some extended systems where it is known as stable chaos.Comment: 7 pages, eps figures include

Caracterização de estruturas cristalinas de Syntermes wheeleri (Insecta : Isoptera : Termitidae)

Trabalho de Conclusão de Curso (graduação)—Universidade de Brasília, Faculdade UnB Planaltina, Licenciatura em Ciências Naturais, 2013.Desde tempos remotos da história humana o magnetismo animal causa curiosidade e instiga novas descobertas a respeito da interação entre os seres vivos e campo geomagnético. Campos magnéticos que a princípio eram vistos como uma forma de cura para inúmeros males do corpo, se mostraram na verdade vetores de extrema importância para existência das formas de vida terrestres, em algumas chegando ao ponto de interagir com estruturas presentes em seus corpos. Estudos sobre o efeito do campo geomagnético têm sido feitos em vários grupos animais, na tentativa de compreender suas propriedades e peculiaridades nos processos vitais. Entre esses estudos o grupo dos insetos sociais tem chamado a atenção da comunidade científica por suas propriedades magnéticas utilizadas como forma e orientação entre outras propriedades específicas a cada grupo da classe insecta. Porém tais descobertas só foram possíveis devido a descoberta do raio X, que possibilitou a caracterização de estruturas cristalinas, dentre as quais certos materiais poderão ser responsáveis pela origem da sensibilidade magnética em seres vivos. Por meio de técnicas de difração de raios X esta pesquisa procura caracterizar estruturas cristalinas presentes no isoptera Syntermes wheeleri, espécie presente no cerrado de Brasília, conhecida por possuir indivíduos de maior massa corporal em relação às demais espécies presentes neste habitat. Sendo previsto que após a identificação das estruturas cristalinas seja possível, em estudos posteriores, afirmar se está espécie de isoptera é realmente sensível ao campo magnético terrestre

Evaluación de la producción de amilasa y proteasa por bacterias de la Antártica

Este número da Revista Brasileira de Iniciação Científica publica os artigos com os resultados das pesquisas de Iniciação Científica 2016/17 da Universidade Federal da Integração Latino-Americana (UNILA). A UNILA é uma das novas universidades federais brasileiras, iniciando suas atividades em 2010. Já em 2011, começa a funcionar seu Programa de Iniciação Científica (IC). A IC é uma das prioridades da política de pesquisa da UNILA. Seu aporte em bolsas de IC é superior ao de fontes externas como CNPq e Fundação Araucária. Em seus seis anos de existência, o Programa de IC tem promovido a difusão da cultura científica entre os estudantes, contribuído com sua formação e os estimulado ao ingresso na pós-graduação.A Antártica representa um importante habitat na busca por micro-organismos adaptados a ambientes extremos. O presente estudo avaliou a produção das enzimas amilases e proteases por bactérias isoladas do ambiente frio. De 100 bactérias triadas, 8 e 4 formaram halo nos meios de seleção para protease e amilase, respectivamente. Dois isolados formaram halo para as duas enzimas. Os resultados encorajam estudos futuros de produção, otimização e purificação enzimática para aplicações biotecnológicas.Antarctica represents an important habitat in the search for microorganisms adapted to extreme environments. The study aimed to evaluate the production of amylases and proteases by bacteria from the cold environment. From 100 bacteria screened, 8 and 4 produced halo on the protease and amylase selection media, respectively. Two isolates formed halo for the two enzymes. The results encourage future studies of production, optimization and enzymatic purification for biotechnological applications.La Antártica representa un importante hábitat en la búsqueda de microorganismos adaptados a ambientes extremos. El presente estudio evaluó la producción de las enzimas amilasa y proteasa por bacterias aisladas del ambiente frío. De las 100 bacterias estudiadas, 8 e 4 formaron halo en los medios de selección para proteasa y amilasa, respectivamente. Dos aislados formaron halo para las dos enzimas. Los resultados alientan estudios futuros de producción, optimización y purificación enzimática para aplicaciones biotecnológicas

Mitogen-activated protein kinase kinase 5 regulates proliferation and biosynthetic processes in procyclic forms of Trypanosoma brucei

The pathogenic protozoan T. brucei alternates into distinct developmental stages in the mammalian and insect hosts. The mitogen-activated protein kinase (MAPK) signaling pathways transduce extracellular stimuli into a range of cellular responses, which ultimately lead to the adaptation to the external environment. Here, we combined a loss of function approach with stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC)-based mass spectrometry (MS) to investigate the role of the mitogen-activated protein kinase kinase 5 (MKK5) in T. brucei. The silencing of MKK5 significantly decreased the proliferation of procyclic forms of T. brucei. To shed light on the molecular alterations associated with this phenotype, we measured the total proteome and phosphoproteome of cells silenced for MKK5. In the total proteome, we observed a general decrease in proteins related to ribosome and translation as well as down-regulation of several components of the fatty acids biosynthesis pathway. In addition, we observed alterations in the protein levels and phosphorylation of key metabolic enzymes, which point toward a suppression of the oxidative metabolism. Taken together, our findings show that the silencing of MKK5 alters cell growth, energy metabolism, protein and fatty acids biosynthesis in procyclic T. brucei

SENSORY MULTIPLE MONONEUROPATHY INDUCED BY PRAVASTATIN USE: FROM A CASE REPORT TO LITERATURE’S REVIEW

Statins are frequently prescribed in clinical practice for their proven efficacy in prevention of cardiovascular and cerebrovascular diseases. Despite the recognized beneficial effects of this class of drugs, in recent years, many studies published in medical literature have shown a wide range of adverse effects as a consequence of this therapy, including the risk of peripheral neuropathy. The purpose of thisarticle is to report a case in which clinical features consistent with multiple mononeuropathy probably secondary to use of pravastatin were observed. The case report is followed by a review of the relevant literature