256 research outputs found

    Expansion, improvement and application of metabolomic platforms for the determination of vitamin D and its metabolites

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    Introducción: La principal motivación que dio lugar a esta Memoria de Tesis fue optimizar, validar y aplicar un método para la determinación de vitamina D y sus metabolitos en sangre (suero y plasma). Los analitos a estudiar abarcaron la propia vitamina D (en las formas D2 y D3) y sus principales metabolitos mono y dihidroxilados. Se pretendió soportar el método en: (i) la completa automatización del proceso analítico (para un funcionamiento ininterrumpido y sin atención del operador durante 24 h/día, evitando o minimizando así la sobrecarga de muestras en el laboratorio), además de una adecuada validación. (ii) La multideterminación, que abarcara tantos analitos como fuera posible para obtener información cuantitativa del metabolismo de la vitamina D. (iii) El estudio en profundidad de la información básica sobre las primeras etapas del método para la cuantificación de la vitamina D y sus metabolitos y su impacto en las propiedades analíticas del mismo: la selección del tipo de muestra derivada de la sangre total (suero o plasma) y del contenedor de muestra y, especialmente, el procedimiento óptimo de preparación de la muestra. (iv) La suficiente información sobre la estabilidad de la muestra durante un periodo establecido de dos meses para evaluar el efecto de la temperatura de almacenamiento en las propiedades analíticas del método en función del/los analito/s a determinar. (v) La aplicación masiva a muestras procedentes de diferentes centros de investigación y de pacientes con diferentes enfermedades, para poner así de manifiesto las fortalezas y debilidades del método y ayudar a conocer los cambios que se producen en los metabolitos a causa de enfermedades concretas. Contenido de la investigación: Durante el desarrollo de esta Tesis Doctoral se consiguieron los siguientes objetivos: (i) Automatizar y validar un método basado en el acoplamiento en línea de una estación de extracción en fase sólida (SPE) a un cromatógrafo de líquidos conectado a un espectrómetro de masas en tándem (LC–MS/MS) para la determinación en suero de vitamina D (en las formas D2 y D3) y sus principales metabolitos monohidroxilados (25-hidroxivitamina D2 [25(OH)D2] y 25-hidroxivitamina D3 [25(OH)D3]) y dihidroxilados (1,25-dihidroxivitamina D2 [1,25(OH)2D2], 1,25-dihidroxivitamina D3 [1,25(OH)2D3] y 24,25-dihidroxivitamina D3 [24,25(OH)2D3]) constituyó un objetivo específico clave. El uso de estándares internos marcados isotópicamente (SIL-ISs) y la validación externa de acuerdo con el programa de validación “vitamin D External Quality Assurance Scheme (DEQAS)” contribuyeron a dar un soporte sólido al método. (ii) Ampliar el número de metabolitos determinados fue el objetivo específico del que resultó la discriminación de los epímeros 25(OH)D3, además de mantener el resto de los hidroximetabolitos. La cromatografía de líquidos bidimensional (LC×LC) con una etapa previa de SPE y la subsiguiente detección mediante MS/MS hicieron posible la consecución de este objetivo: un método ampliado y validado mediante aplicación a muestras del programa DEQAS y a un material de referencia certificado (CRM) del NIST. (iii) Conocer la mejor muestra derivada de sangre total (suero o plasma) y el mejor procedimiento de preparación de la muestra fue el tercer objetivo específico. Se utilizaron diferentes tubos de recogida, con y sin recubrimiento interno por gel, para obtener el suero y el plasma. Por otra parte, la información necesaria sobre la etapa de preparación de la muestra se obtuvo comparando cómo afecta a cada uno de los analitos la desproteinización o la SPE previas al análisis mediante LC–MS/MS. (iv) Estudiar la estabilidad de los analitos de las muestras de suero sometidas a diferentes condiciones de conservación durante dos meses fue otro de los objetivos específicos. El estudio estadístico de los datos obtenidos en el seguimiento mediante LC–MS/MS permitió conocer la magnitud de los cambios experimentados por cada uno de los compuestos en estudio, con especial énfasis en los metabolitos. Un logro interesante de este estudio fue la comprobación de que la estabilidad de los analitos se mantiene de forma general cuando las muestras se liofilizan. (v) Validar el excelente comportamiento del método fue el último de los objetivos específicos de la Tesis, al cual el estudiante le dedicó un largo periodo de tiempo. Algunos de los ejemplos de aplicación del método por el doctorando son los siguientes: análisis de 546 muestras de suero de una cohorte de mujeres con cáncer de mama y 558 mujeres control (del proyecto MCC del Instituto de Salud Carlos III, Madrid); 1472 muestras de suero de una cohorte de mujeres pre- y postmenopáusicas (proyecto del mismo instituto); 314 muestras de suero de pacientes con esclerosis múltiple (proyecto sobre vitamina D y esclerosis múltiple en pacientes con síndromes clínicamente aislados, del Hospital San Rafaelle de Milán, Italia). Los datos analíticos han sido y están siendo en la actualidad usados con éxito por los participantes en los proyectos para la obtención de resultados que soporten o destruyan las hipótesis propuestas. Algunos de los datos obtenidos en los análisis realizados se han tratado desde el punto de vista analítico–quimiométrico. 3. Conclusión: Se han desarrollado dos métodos automatizados para el análisis cuantitativo de la vitamina D y sus principales metabolitos proporcionando una rápida separación cromatográfica de las vitaminas D3 y D2 y los metabolitos 1,25(OH)2D3, 24,25(OH)2D3, 1,25(OH)2D2, 25(OH)D3, 25(OH)D2 y 3-epi-C3-25(OH)D3 en muestras de suero (a nivel de nmol/L o pmol/L). Ambas plataformas se han caracterizado y validado mediante programas externos utilizando muestras proporcionadas por DEQAS, para la determinación del total de 25(OH)D y 1,25(OH)2D, y un material de referencia certificado por el NIST para validar la determinación individual de los epímeros del 25(OH)D3. Se han establecido unas recomendaciones en lo que se refiere a la conservación de la muestra (referidas tanto al tiempo de almacenamiento como a los ciclos de congelación/descongelación) deben mantenerse para la medición de todos los metabolitos de la vitamina D3 en estudios clínicos, donde la sensibilidad es un parámetro crítico. Por otro lado, la liofilización y posterior almacenamiento a temperatura ambiente son una estrategia fácil, rápida y robusta para conservar las muestras que se utilizarán en los estudios clínicos. Finalmente, tres centros de investigación nacionales e internacionales han solicitado el análisis de la vitamina D y sus metabolitos en 2890 muestras de suero para determinar el metabolismo de la vitamina D en diferentes estudios clínicos realizados a lo largo del desarrollo de la Tesis

    Dependencia emocional y violencia en una muestra de mujeres de Huaraz

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    El presente trabajo de investigación se desarrolló con la finalidad de analizar la relación entre dependencia emocional y violencia en una muestra de mujeres de Huaraz, así mismo es una investigación de tipo no experimental con diseño analítico correlacional donde la muestra estuvo constituida por 105 mujeres con edades que oscilaban entre los 18 y 60 años y que a la vez estuvieran en una relación de pareja en la actualidad. Según los resultados obtenidos se determinó que existe una relación positiva de efecto grande y significativa entre las variables dependencia emocional y violencia, lo que indica que a mayor nivel de dependencia emocional incrementa también el nivel de padecimiento de violencia dentro de las relaciones de pareja

    Use of semantic technologies in the development of an ontology for the management of urban projects. the case of the Seville city council

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    The implementation and start-up of economic activities that generate wealth and employment in any municipality require obtaining municipal licenses and authorizations for which the drafting of a technical activity project is mandatory. All the interested parties benefit from the regulatory compliance with the urban and environmental legal requirements established by the municipalities for this type of projects. However, the numerous non-compliances detected in the "a posteriori" inspections carried out by the municipal technicians are causing that in many Spanish municipalities a high percentage of these projects are not viable and are paralyzed due to non-compliances in aspects such as accessibility for people with disabilities, incorrect location of the machines of the different facilities, smoke and gas outlets, lack of acoustic insulation, etc. The consequence of this situation is the enormous delay in the opening of the establishments, or even that some of the promoters of these projects desist from undertaking the activity. In response to this serious problem, a Knowledge-Based System (KBS) is proposed that would significantly improve the legalization system of economic activity projects processed by a responsible declaration in Spanish municipalities

    Detection of open phase condition in power transformers

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    This article deals with open phase events in power transformers, mainly related to nuclear power plants where several cases have led to a global initiative for a prompt solution for this vulnerability. Different solutions are possible, and one of them, which has already been tested at a Spanish nuclear power plant, is presented here. Field test results are presented together with simulations

    Cultura Organizacional Y La Práctica Docente En La Institución Educativa San José - Cusco.

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    El presente estudio de investigación, tiene como objetivo determinar la relación entre la Cultura organizacional y la práctica docente en el aula en la Institución Educativa San José - Cusco. El tipo de investigación es descriptivo correlacional, porque permite evidenciar la la asociación que existe entre las variables de estudio, el diseño fue no experimental de corte transversal – correlacional. En una población de 25 docentes y la muestra estuvo conformado por 25 docentes de la Institución Educativa San José - Cusco Se aplicó la técnica de la encuesta con cuestionario con la escala de Liker para la variable Cultura Organizacional y Práctica docente. Los resultados de esta investigación demuestran que existe una relación significativa entre la cultura organizacional se relaciona directa y significativamente con la práctica docente en la Institución Educativa San José- Cusco, esto se establece de la tabla N° 22, donde del valor de chi cuadrado cuyo valor es 33.036 y p<0,05, se acepta que las variables cultura organizacional y práctica docente no son independientes estadísticamente y del valor de Tau B=0.720 y p<0,05, se acepta la hipótesis alterna concluyéndose que ambas variables están asociadas en un nivel moderado, debido a que el índice de asociación es 0.720 en la muestra en estudio; por lo cual se evidencia la asociación

    Comparación de métodos diagnósticos electrofisiológicos del Síndrome del Túnel Carpiano

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    El Síndrome del Túnel Carpiano es una mononeuropatía asociada al atrapamiento del nervio mediano a nivel de la articulación carpiana, en el túnel que le da su nombre, y se trata de un padecimiento frecuente y subdiagnosticada. Actualmente se emplean un grupo de técnicas para su diagnóstico, que incluyen pruebas electrofisiológicas de velocidad de conducción nerviosa, sensitiva y motora. El presente estudio tuvo como objetivo identificar el método o combinación de métodos electrofisiológicos con mayor precisión en el diagnóstico del Síndrome del Túnel Carpiano. Se realizó un estudio observacional analítico de validez de pruebas diagnósticas, basado en la comparación de velocidades de conducción sensitiva y motora distal, en el segmento palma muñeca y la electromiografía de los pacientes. Se observó que la mejor fue la combinación de la latencia con la velocidad de conducción sensitiva y la velocidad de conducción motora en el segmento palma-muñeca con una sensibilidad del 98.62%, especificidad del 90%, el valor predictivo positivo fue de 99.08%, la razón de verosimilitud positiva fue de 9.8624 y la razón de verosimilitud negativa 0.0153. Por esta razón se considera que la secuencia ideal para el diagnóstico del padecimiento es el estudio de las latencias sensoriales y motoras en primer lugar, y si el resultado es negativo, entonces determinar la velocidad de conducción motora palma-muñeca

    Efecto del programa nacional jóvenes productivos en el empleo, periodo 2018 al 2020

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    En el Perú, la tasa de empleo presentó un constante descenso, los jóvenes de 15 a 29 años de edad, están desempleados o tienen un empleo informal con sueldos muy bajos, sin seguro social y horas por encima de lo permitido y por lo tanto no perciben los ingresos económicos suficientes para cubrir sus necesidades básicas. Por ello, la presente investigación buscó determinar el grado de relación entre las variables, así mismo la relación entre las dimensiones de la variable independiente con la variable dependiente. Es de tipo aplicado, de enfoque cuantitativo, diseño no experimental de corte longitudinal. Teniendo como población el número de regiones en la que tiene presencia el programa. Para determinar la relación se hizo uso del coeficiente de contingencia R2 y R2 ajustada. La investigación arribo a las siguientes conclusiones: Se acepta la hipótesis principal, de acuerdo con el coeficiente de determinación R2 ajustada, las dos dimensiones del Programa Nacional Jóvenes Productivos explican la variable empleo en un 89% para el año 2018, en un 96% para el año 2019 y en un 98% para el año 2020

    Proyecto europeo: ARISTOIL. Programa Interreg-Med

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