Mobilização da calmodulina e da neurogranina depende da variação da concentração de cálcio

Projeto final da licenciatura, Bioquímica, Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade do Algarve, 2012A calmodulina (CaM) e neurogranina (Ng) são duas proteínas expressas em células nervosas, localizadas maioritariamente no soma e no núcleo em células do hipocampo. Foi detetado que existia uma mobilização da calmodulina e da neurogranina do soma para as dendrites quando era induzido uma variação da concentração de cálcio, pela adição de um agente quelante (EGTA). Sabendo que a concentração intracelular de cálcio é de 100 nM, pela relação da intensidade de fluorescência com a concentração de cálcio, verificou-se que houve uma redução de 40 nM da concentração intracelular de cálcio em cortes tratados com EGTA durante 15 minutos. Estas proteínas são necessárias em grandes quantidades durante a atividade neuronal na zona das dendrites para ativar os enzimas dependentes de cálcio\calmodulina. A CaM regula uma serie de processos biológicos como por exemplo na regulação da ativação das cinases Ca2+/CaM-dependentes e pela sua grande afinidade com o cálcio. Para obter um conhecimento mais avançado sobre a interação destas duas proteínas analisou-se se estas respondem a estímulos de alta frequência de uma forma coordenada. Verificou-se que apos estímulo existia uma mobilização da CaM e da Ng para os dendrites indicando que a CaM e Ng são necessárias na zona dos dendrites durante atividade neuronal. Em estudos em células sem a capacidade de expressar a Ng a CaM não era mobilizada com a mesma eficácia registada em células normais que expressam a Ng. Verificou-se também que a mobilização da CaM também depende da ativação de recetores NMDA já que na presença do inibidor AP5 a mobilização não foi tão eficaz como em condições normais. Concluiu-se que a mobilidade da CaM e da Ng da soma para as dendrites depende da variação da concentração de cálcio e que esta mesma mobilização dá-se também numa situação de estímulo eletrofisiológico.Calmodulin (CaM) and neurogranina (Ng) are two proteins expressed in nerve cells, primarily localized in the soma and nucleus in cells in the hippocampus. It was detected that there was a mobilization of calmodulin and neurogranina from the soma to the dendrites when was induced a variation of calcium concentration by the addition of a chelating agent (EGTA). Knowing the intracellular calcium concentration is 100 nM, by the ratio of fluorescence intensity is possible to estimate the concentration of calcium, It was found that the concentration intracellular of calcium decreases 40 nM in slices treated with EGTA for 15 min. These proteins are required in large quantities during neuronal activity in the area of dendrites to activate the enzymes calcium-calmodulin dependents. The CaM regulates a number of biological processes such as the regulation of activation of kinases Ca2 + / CaM-dependents and its high affinity for calcium. For a more advanced knowledge about the interaction of these two proteins examined whether these stimuli respond to high frequency in a coordinated way. It was found that after stimulation there was a mobilization of CaM and Ng for the dendrites indicating that CaM and Ng are needed in the area of dendrites during neuronal activity. In studies on cells lacking the ability to express Ng, the CaM was not mobilized as effectively recorded in normal cells with expression of Ng. It was also found that mobilization of CaM also depends on activation of NMDA receivers since the presence of the inhibitor AP5, the mobilization of CaM was not as effective as under normal conditions. It was concluded that the mobility of CaM and Ng sum for the dendrites depends on the variation of the concentration of calcium mobilization and that the same occurs also in a situation electrophysiological stimulus

DEFINING COMMUNICATION: FACTORS AND BARRIERS OF A COMPLEX CONCEPT

This article aims to analyze the history of the concept of Communication, the evolution, and the different approaches from several scientific domains that led to the understanding that we have nowadays about this complex theme. Today, communication is a key issue in modern societies, not just for the individual and the current challenges in the information society, but also when the concept is understood in more complex frameworks such as organizational communication. It is this act, derived from a personal and social need, that allows human beings to live together, to establish contacts with others: the way we relate to other individuals, the greater or lesser effectiveness of these connections, depending on much of our communication skills. After analyzing the concept, the importance of communication in today’s society is evaluated, as well as the most important objectives accordingly to several uses in contemporary contexts and barriers that can affect this process. Article visualizations

FORMAL AND INFORMAL ORGANIZATIONAL COMMUNICATION: FRAMEWORKING ITS ROLES AND PURPOSES

This article intends to analyze communication in organizations. Public Relations aim to spread the good image of an organization among its different targets, generally seeking to reach each restricted group through different actions; this is because, in this area of activity, it is always difficult to reach all relevant audiences through a global campaign, given their specificities and differences. A first major division is therefore created between internal and external audiences, with some subdivisions still being noted in each of them. In the last three decades, personnel management strategies began to make human aspects within the institution one of their priorities. Those responsible tend to adopt more humanitarian values, which facilitate the integration of workers in the company. A slow "mental revolution" is therefore underway, renewing the ideologies of the leaders, but also their personalities and attitudes. This may result in a better rationalization of relations between the Administration and other employees. In this order of ideas, we intend to include within the scope of Internal Public Relations a section dedicated to communication in organizations; this is conceptualized as a means of providing the information and understanding necessary for the efforts of individuals, translated into appropriate attitudes for motivation, cooperation, and satisfaction at work, which allow for the improvement of performance.  Article visualizations

CORPORATE COMMUNICATION: INNOVATION, PUBLIC RESPONSABILITY AND CITIZENSHIP IMPACT

The essence of innovation is creativity, which allows finding new solutions to existing problems. Innovative organizations do not depend solely on an entrepreneur, but on teams of experts gathered to create an entrepreneurial spirit. For this reason, it is necessary to use scientific techniques to promote creativity, as well as encourage and reward people and organizations that innovate, through the recognition of successful practices, both in the public and private sectors. Thus, public communication is at the basis of the quality and effectiveness of public service, the modernization of administrations and institutions, as well as the exercise of democracy. Article visualizations

Modulation of fatty acid synthase and plasma membrane microdomains by hydrogen peroxide

Adaptation of Saccharomyces cerevisiae cells to hydrogen peroxide (H2O2) decreases plasma membrane permeability, slowing H2O2 diffusion into cells and turning cells more resistant to H2O2. The mechanism responsible for this change remains largely unknown. Here this mechanism was addressed revealing that fatty acid synthase (Fas) plays a key role during the cellular response of S. cerevisiae to H2O2: Adaptation to H2O2 was associated with a decrease in both Fas expression and activity. However, cellular effects of H2O2 were shown to vary over a narrow range of concentrations. Therefore, a tight control of H2O2 exposure is essential for cellular studies of H2O2-dependent redox regulation. The importance of Fas in adaptation was reinforced by the observation that the decrease of Fas activity by 50 % through deletion of one of the FAS1 alleles increases the resistance to lethal doses of H2O2. The plasma membrane of fas1 cells presented a large increase lignoceric acid (C24:0) (40%) and cerotic acid (C26:0) (50%) levels, suggesting that alterations in the plasma membrane composition of very-long-chain fatty acids (VLCFA) occur with Fas downregulation. Through interdigitation or by modulating formation of lipid rafts, VLCFA may decrease the overall or localized plasma membrane permeability to H2O2, respectively, thus conferring a higher resistance to H2O2. In agreement, fluorescence studies with transparinaric acid showed that both H2O2 adaptation and Fas downregulation increase the formation of lipid domains in the plasma membrane. Also, microscopy studies revealed that changes in Fas activity lead to the reorganization of plasma membrane domains. Preliminary studies in Jurkat T cells showed a decrease in plasma membrane fluidity, alteration to digitonin sensitivity and reorganization of membrane microdomains after exposure to a nonlethal H2O2 dose for 4 h. However, no relation between these changes and fatty acid synthase activity could be established. In conclusion, these results reveal the key role of Fas in the modulation of plasma membrane permeability to H2O2 during adaptation in S. cerevisiae and suggest that downregulation of FAS1 is the molecular mechanism by which H2O2 leads to the reorganization of the plasma membrane by remodelling specific membrane microdomains.O peróxido de hidrogénio (H2O2) é a espécie reactiva de oxigénio mais abundante em organismos aeróbios, uma vez que é produzido intracelularmente de forma contínua. As suas características fisico-químicas, juntamente com a facilidade de difusão através das membranas celulares fazem com que o H2O2 seja uma importante molécula sinalizadora em diversos processos celulares. Porém, a regulação precisa dos níveis intracelulares de H2O2 é crucial, uma vez que a exposição a diferentes doses de H2O2 pode levar a respostas tão diferentes como proliferação celular, senescência, adaptação, apoptose ou necrose. Em Saccharomyces cerevisiae, a exposição a doses baixas de H2O2 (150 μM) leva à adaptação das células, tornando-as mais resistentes a uma exposição posterior a uma dose letal deste mesmo agente. Esta adaptação ao H2O2 deve-se não só a um aumento da actividade dos principais enzimas que catalisam a redução do H2O2 (catalase e citocromo c peroxidase), mas também a uma diminuição da permeabilidade da membrana plasmática ao H2O2, impedindo a sua difusão para o interior das células. O mecanismo reponsável por estas alterações permanece ainda desconhecido porém, estudos anteriores mostraram que a adaptação ao H2O2 leva a alterações na composição lipídica e organização da membrana plasmática, sendo este muito provavelmente responsável pelas alterações de fluidez e permeabilidade ao H2O2 detectadas. Estudos anteriores mostraram que, após uma curta exposição a uma dose adaptativa de H2O2, há um aumento dos níveis de esqualeno (intermediário na via de síntese do ergosterol), uma alteração na composição relativa dos principais fosfolípidos e uma reorganização dos microdomínios rígidos da membrana plasmática, enriquecidos em ergosterol e esfingolípidos. Neste estudo observaram-se também alterações nos níveis de expressão de genes envolvidos no metabolismo de lípidos, nomeadamente, de genes envolvidos na via biosintetica do ergosterol (ERG1, ERG3, ERG7 and ERG25) e do metabolismo de ácidos gordos (os genes ELO1, ELO2 and ELO3, envolvidos na enlongação de ácidos gordos, o gene OLE1 envolvido na desaturação de ácidos gordos e nos genes FAS1 e FAS2 codificantes para as duas sub-unidades do sintase de ácidos gordos). Uma vez que os ácidos gordos são um dos principais componentes das membranas, o sintase de ácidos gordos surgiu como um candidato interessante para o estudo das alterações celulares na adaptação ao H2O2. Neste trabalho fez-se então uma abordagem ao mecanismo de adaptação centrada nas alterações observadas no sintase de ácidos gordos (Fas), pretendendo-se compreender de que modo o H2O2 altera a actividade de Fas e de que modo as alterações na actividade xiv deste enzima alteram, por si, a resistência celular ao H2O2 e a composição e organização da membrana plasmática. Um dos principais resultados obtidos foi o de que a exposição de células de Saccharomyces cerevisiae a doses adaptativas de H2O2, que leva a uma diminuição da expressão do gene FAS1, levando consequentemente a uma diminuição da actividade de Fas. Porém, foi observada uma variação dos efeitos celulares do H2O2 num intervalo curto de concentrações de H2O2. Este resultado demonstra que é essencial que haja um controlo estrito da concentração de H2O2 a que as células estão expostas de modo a ter uma reprodutibilidade de resultados. A exposição em estado estacionário demonstrou ser a mais adequeada a este tipo de estudos, uma vez que permite a exposição prolongada a uma dose constante de H2O2, aproximando-se mais das condições fisiológicas. A sobre-expressão de FAS1 (conseguida através da construção de uma estirpe contendo o gene sob influência de um promotor regulável) levou por si a uma diminuição da capacidade de sobreviver a doses letais de H2O2, sendo esta reestabelecida com a diminuição da expressão de FAS1. A importância do gene FAS1 no mecanismo de adaptação ao H2O2 foi reforçada pela observação de que uma estirpe fas1 , com uma diminuição em aproximadamente 50 % dos níveis de expressão do gene FAS1 e consequente diminuição da actividade de Fas, apresenta por si uma maior resistência a doses letais de H2O2. Os níveis de actividade dos principais enzimas responsáveis pela remoção de H2O2 intracelular (catalase e citocromo c peroxidase) não aumentaram com a diminuição da expressão de FAS1 em 50 %. Os níveis de citocromo c peroxidase mostraram até ser inferiores na estirpe fas1 , o que demonstra que a maior resistência celular ao H2O2 nestas células não se deve a um aumento da capacidade de eliminação de H2O2. Estudos de integridade da parede celular (estrutura que poderia também actuar como barreira de entrada ao H2O2) mostraram não existirem alterações a nível da parede que possam justificar a diferente resistência ao H2O2. Deste modo a membrana plasmática, que já demonstrou no mecanismo de adaptação ao H2O2 ser uma estrutura dinâmica que sofre alterações de modo a limitar a difusão de H2O2 para o interior da célula, foi considerada como a principal responsável pela resistência acrescida ao H2O2 nas células fas1 . Efectivamente, a membrana plasmática da estirpe fas1 apresentou um aumento da razão PC/PE. Devido às suas características biofísicas, esta alteração leva por si a um aumento da rigidez da membrana plasmática. A membrana plasmática da estirpe fas1 apresentou também um aumento acentuado dos níveis de ácido lignocérico (C24:0) (40 %) e ácido cerótico (C26:0) (50 %), sugerindo que as alterações na composição da membrana plasmática em ácidos gordos de cadeia muito longa (VLCFA) estão envolvidas neste xv processo. Em concordância estão os estudos de fluorescência com ácido trans-parinárico que revelaram que a repressão de Fas leva a um aumento quantitativo e aumento da rigidez dos domínios gel da membrana plasmática. Também os estudos de microscopia com marcação dos princípais microdomínios da membrana plasmática de S. cerevisiae (MCCmicrodomains occupied by Can1 e MCP – microdomains occupied by Pma1) mostraram que as alterações na actividade de Fas levam a uma reorganização destes domínios lipídicos na membrana plasmática. A diminuição da actividade de Fas não provoca alterações significativas na distribuição dos domínios MCP (ao contrário do acontece na adaptação), observando-se, porém, um pequeno aumento dos níveis de Pma1p na membrana plasmática, embora não tão significativo como o observado no processo de adaptação ao H2O2. As maiores alterações foram observadas ao nível dos domínios MCC, que sofreram não só uma reorganização na membrana como um aumento em número na membrana plasmática das células da estirpe fas1 . As alterações nos MCC poderão estar associadas às restantes alterações observadas na membrana plasmática das células fas1 , uma vez que estes domínios se encontram normalmente associados aos eisossomas, estruturas organizadoras da membrana plasmática. Foram também efectuados alguns estudos preliminares em Jurkat mostraram que a exposição a uma dose não letal de H2O2 por tempos curtos leva a uma diminuição da fluidez da membrana plasmática acompanhada por uma alteração da sensibilidade à digitonina e por uma reorganização dos microdomínios da membrana plasmática. Não foi porém ainda possível estabelecer uma ligação entre estas alterações e a sintase de ácidos gordos. Em conclusão, este trabalho revela o papel fundamental de Fas na modulação da permeabilidade da membrana plasmática ao H2O2 durante o processo de adaptação e sugere que a repressão de Fas é um dos mecanismos moleculares pelos quais o H2O2 estimula a formação de jangadas lipídicas em S. cerevisiae. O proteína Fas é aqui apresentada pela primeira vez como um novo candidato na resposta ao stress oxidativo em S. cerevisiae.Fundação para a Ciência e a Tecnologi

Fosfato De Toceranib Em Oncologia Veterinária De Animais De Companhia

A doença oncológica em animais de companhia tem-se tornado uma crescente preocupação, devido ao aumento da sua esperança de vida e a uma maior procura por cuidados médico veterinários. A terapêutica oncológica tem vindo a evoluir, procurando tratamentos mais direcionados às células neoplásicas e com menos efeitos adversos. Uma nova abordagem no tratamento de neoplasias é a administração de inibidores de alvos moleculares específicos, que se encontram alterados nas células tumorais, nomeadamente recetores tirosina quinase. Os inibidores dos recetores tirosina quinase, como o fosfato de toceranib, têm vindo a destacar-se no tratamento de neoplasias, mostrando eficácia e estando associados à ocorrência de menos efeitos adversos. O fosfato de toceranib é um inibidor, capaz de bloquear a função de diversos recetores tirosina quinase, atuando como um inibidor competitivo do ATP. Funciona como agente anti-angiogénico, mas também possui efeitos anti tumorais diretos, o que o torna uma opção terapêutica mais versátil. O fosfato de toceranib está aprovado no tratamento de mastocitomas caninos de grau II e III não extirpáveis. Embora esteja aprovado apenas para mastocitomas, tem sido utilizado em regime “off-label”, como terapia adjuvante ou de forma paliativa em diversos tipos de neoplasias, nomeadamente adenocarcinoma das glândulas anais, carcinoma da tiroide, adenocarcinoma nasal, neoplasias do estroma gastrointestinal, osteossarcoma e hemangiossarcoma, exibindo resultados favoráveis particularmente no aumento do tempo de sobrevida dos pacientes. A dose mais utilizada nos diversos tipos de neoplasias tem sido, de 2,5 a 2,75mg/Kg, a cada 48h ou três vezes por semana. Nesta dose, verificou-se uma diminuição da frequência e gravidade dos efeitos adversos observados nos pacientes quando comparados aos observados em pacientes sujeitos à dose standard. Os efeitos adversos mais observados são toxicidades gastrointestinais. O fosfato de toceranib representa assim uma alternativa viável em casos onde as opções terapêuticas convencionais são limitadas.The occurrence of oncological diseases in companion animals has become a growing concern due to their increased life expectancy and a higher demand for veterinary care. Oncological therapy has been evolving, seeking treatments that are more targeted to neoplastic cells and have fewer adverse effects. A new approach in the treatment of neoplasms is the administration of inhibitors of specific molecular targets that are altered in tumor cells, particularly tyrosine kinase receptors. Tyrosine kinase receptor inhibitors, such as toceranib phosphate, have been gaining prominence in the treatment of neoplasms, showing efficacy and being associated with fewer adverse effects. Toceranib phosphate is an inhibitor capable of blocking the function of various tyrosine kinase receptors, acting as a competitive ATP inhibitor. It functions as an anti-angiogenic agent but also has direct anti-tumor effects, making it a more versatile therapeutic option. Toceranib phosphate is approved for the treatment of non-resectable grade II and III canine mast cell tumors. Although it is only approved for mast cell tumors, it has been used "off-label" as an adjuvant or palliative therapy in various types of neoplasms, including anal gland adenocarcinoma, thyroid carcinoma, nasal adenocarcinoma, gastrointestinal stromal tumors, osteosarcoma, and hemangiosarcoma, showing favorable results particularly in increasing the survival time of patients. The most commonly used dose in various types of neoplasms has been 2.5 to 2.75 mg/kg, every 48 hours or three times a week. At this dose, a decrease in the frequency and severity of adverse effects observed in patients was noted compared to those observed in patients subjected to the standard dose. The most commonly observed adverse effects are gastrointestinal toxicities. Thus, toceranib phosphate represents a viable alternative in cases where conventional therapeutic options are limited

Cultural Heritage and Industrial Tourism: a marketing approach to the case of Center of Portugal

The aim of this work is to raise awareness concerning the potential of Industrial Tourism, especially in the Center of Portugal, in addition to sharing experiences concerning the development of touristic programs and promotion in the post-Covid times. This study aims to analyze how industrial tourism is contributing to the center region of Portugal, namely by attracting new tourists and enhancing the local economy; it also aims to chart the industrial tourism in the region and its potential growth capability; this research also aims to chart possibilities for investments in new industrial tourism projects, by analyzing the most important examples of Industrial Tourism so far and how they are facing the challenges. With this work, we aim for a theoretical approach on how to turn unique resources concerning Industry in development and wealth for each region in the postpandemic world. We also intend to focus on some cases of municipalities where this tourist modality already exists, and how it has been promoting the local particularities and heritage. The methodology is based on qualitative and quantitative analysis of data concerning the center of Portugal (28 200 km² and 2 217 285 inhabitants), provided by the government and regional tourism data sources, to understand and chart the Industrial Tourism in this region, capacity for attracting tourists, number of tourists who visited such places and their impact.info:eu-repo/semantics/publishedVersio