Influência da suplementação do fator de crescimento epidermal (EGF) em diferentes momentos da maturação in vitro de oócitos caninos

O objetivo deste estudo foi avaliar a influência do fator de crescimento epidermal (EGF) em diferentes momentos da maturação in vitro de oócitos caninos. Os ovários foram coletados de 55 cadelas consideradas sadias e isolados assepticamente, imersos em solução fisiológica e transportados refrigerados. Os complexos cumulus-oócito (COCs) grau 1 foram selecionados e divididos em dois grupos, denominados grupo controle (GC) e grupo tratamento (GT). No GC, 698 COCs grau I foram cultivados em placas de quatro poços contendo meio TCM-199 suplementado com 25 mM de HEPES, 100 UI/mL de penicilina, 100 mg/mL de estreptomicina, 26 mM de bicarbonato de sódio, 1,5 mM de piruvato de sódio, 2,9 mM de lactato de sódio penta hidratado, 0,6 mM de cisteína, 0,03 UI/mL de hCG, 0,5 µg/mL de FSH, 20 µg/mL de estrógeno em estufa úmida a 38ºC, 5% de CO2 nos períodos de 24h, 48 h e 72 h . Já no GT, 547 COCs receberam o mesmo meio de maturação acrescido de 10 ηg/mL do EGF. Modelos de regressão logística foram elaborados para estimar as chances do oócito ser observado nos estágios de maturação nuclear em diferentes tempos de cultivo. Com base nos resultados encontrados, o meio suplementado com EGF demonstrou 2,56 vezes mais chances de ter um oócito no estágio de metáfase I (M-I) do que o meio sem EGF (p < 0,0001). Os resultados desse estudo demonstraram também que o tempo de 72 h mostrou 5,88 vezes mais chances de ter um oócito no estágio de metáfase II (M-II) do que o tempo de 2 h (p = 0,0001) e 7,69 vezes mais chance do que o tempo de 48h (p = 0,0001). As chances de se encontrar um oócito em M-II também foram 9,09 vezes maiores no meio suplementado com EGF do que no meio sem EGF (p = 0,0001). Dessa forma, estes resultados demonstraram a importância essencial do EGF em diferentes momentos da maturação oocitária, sendo componente chave para a aquisição da competência meiótica nas cadelas, aumentando os índices de M-I e M-II.The aim of this study was to evaluate the influence of epidermal growth factor (EGF) on in vitro maturation of canine oocytes at different times of the process. Ovaries were collected from 55 bitches considered healthy and aseptically isolated, immersed in physiological solution (0.9% NaCl) and transported under refrigeration. Grade 1 cumulus-oocyte complexes (COCs) were selected and divided into two groups: control group (CG) and treatment group (TG). In CG 698 grade I COCs were placed in 4-well plates containing TCM-199 medium supplemented with 25 mM HEPES, 100 IU/mL penicillin, 100 mg/mL streptomycin, 26 mM sodium bicarbonate, 1.5 mM sodium pyruvate, 2.9 mM sodium lactate pentahydrate, 0.6 mM cysteine, 0.03 IU/mL hCG, 0.5 μg/mL FSH, 20 μg/mL estrogen at 38.5ºC in a humidified atmosphere of 5% CO2 in times of 24 h, 48 h, and 72 h. In TG 547 COCs received the same maturation medium plus 10 ηg/mL EGF. Logistic regression models (SAS, 2011) were constructed in order to estimate the chances of oocytes being observed at nuclear maturation stages in different culture times (24 h, 48 h, and 72 h). Based on the results found EGF-supplemented medium showed 2.56 times more chances of having an oocyte at metaphase I (M-I) than medium without EGF (p < 0.0001). The results of this study demonstrated that the time of 72 h showed 5.88 times more chances of having an oocyte at metaphase II (M-II) compared to time of 24 h (p = 0.0001) and 7.69 times more chance than time of 48 h (p = 0.0001). The chances of finding an oocyte at M-II were also 9.09 times higher in medium supplemented with EGF than in medium without EGF (p = 0.0001). Thus, these results demonstrated the essential importance of EGF at different moments of oocyte maturation, being a key component for the acquisition of meiotic competence in bitches, increasing the M-I and M-II rates

Avaliação da função testicular utilizando a citologia aspirativa e testosterona sérica em cães

In order to verify alternative clinical approach in the reproductive evaluation of 4 adult dogs, the fine needle aspiration cytology (FNAC) and serum testosterone levels were used together with testicular volume measurement and semen analysis. FNAC was performed in both testes and serum testosterone concentrations were assayed in regular intervals during a 24h period. Results of semen analysis and FNAC were normal in dogs 1 and 3. In dog 2, small testes, poor semen quality, a high percentage of Sertoli cells and early spermatids were found suggesting testicular degeneration. In dog 4, a small right testicle, poor semen quality with low sperm concentration and an uncounted amount of spermatozoa in the FNAC indicated testicular degeneration due to an obstructive lesion; whereas high percentage of distal droplets, thicker left epididymis and normal FNAC of the left testis suggested a slow sperm transit. Testosterone circadian rhythm was clear in 3 of 4 dogs, although concentrations were low. Testicular volume, semen analysis and testicular FNAC could provide valuable information about spermatogenesis. In contrast, serum testosterone concentration was not clearly correlated with any reproductive characteristic of those dogs.Com o objetivo de avaliar a função reprodutiva de 4 cães machos, adultos, a citologia aspirativa com agulha fina (FNAC) e as concentrações de testosterona sérica foram usadas em associação a determinação do volume testicular e análise do sêmen. FNAC foi realizada em ambos os testículos e as concentrações de testosterona foram determinadas durante 24 horas, em intervalos regulares. Os resultados da análise do semen se encontraram dentro do padrão para a espécie nos cães 1 e 3. O cão 2 apresentou testículos pequenos, baixa qualidade seminal, alta porcentagem de células de Sertoli e espermátides iniciais sugerindo uma degeneração testicular. No cão 4 observou-se uma degeneração testicular do lado direito conseqüência de um processo obstrutivo mostrada pela diminuição do testículo, baixa qualidade do sêmen evidenciada pela baixa concentração espermática e incontável número de espermatozóides na FNAC; uma diminuição do trânsito espermático foi observada no testículo esquerdo, com espessamento do epidídimo, alta porcentagem de gotas distais na análise seminal, porém resultados normais na FNAC. O ritmo circadiano da testosteronafoi claro nos cães 3 e 4, entretanto as concentrações encontraram-se próximas ao limite inferior. O volume testicular, a análise do sêmen e a FNAC testicular podem fornecer informações valiosas sobre a espermatogênese. Entretanto, as concentrações séricas de testosterona não são claramente correlacionadas as características reprodutivas nesses cães.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Universidade Estadual Paulista Departamento de Reprodução Animal e Radiologia VeterináriaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de UrologiaUniversidade Estadual Paulista Departamento de BioestatísticaUNIFESP, Depto. de UrologiaSciEL

Relationship Between Hygienic Behavior and Varroa destructor Mites in Colonies Producing Honey or Royal Jelly

Genetic and phenotypic parameters for hygienic behavior, invasion and infestation rates, total and effective reproduction of Varroa destructor in Africanized honeybee colonies producing honey (20 hives) or royal jelly (30 mini-hives) were analyzed. The significance of monthly fixed effects, type of product (honey and royal jelly) and their interactions were verified through generalized linear model procedures. Software WinBugs (Bayesian Inference Using Gibbs Sampling) with Bayesian inference was employed for (co)variance estimates. The average values for colonies producing honey or royal jelly were 74.38 and 71.40% for hygienic behavior in 24 hours; infestation rates 8.30 and 11.40%; invasion rates 9.50 and 7.50%; total reproduction 1.02 and 0.55%; effective reproduction was 0.62 and 0.33%, respectively. The additive genetic variance for invasion (0.16), total reproduction (0.25) and effective reproduction (0.94) rates of the mite were higher than estimates for hygienic behavior in 24 hours (0.05) and infestation rate (0.04). Mean heritability for hygienic behavior, infestation and invasion rates, total and effective reproduction of the mite were .58, 0.54, 0.56, 0.63 and 0.61, respectively. The genetic correlation of -0.48 for hygienic behavior with total reproduction rate of Varroa destructor shows that hygienic behavior may be the most interesting trait for selection. Besides a heritability of high magnitude, when combined with the total reproduction rate of the mite, it has a high and antagonistic correlation. Consequently, in cases of high infestation of Varroa destructor, the selection for hygienic behavior would decrease the reproduction rate of the mite

Communication and culture in the business core

O desenvolvimento tecnológico hoje aplicado aos diversos meios e plataformas de comunicação resulta da necessidade do capital em expandir sua atuação e diminuir seu tempo de realização. Nesse sentido, o artigo analisa as relações entre comunicação, cultura e capital, partindo da hipótese de que o desenvolvimento dos meios de comunicação foi fomentado pelo capital e pelo Estado para cumprir funções econômicas e ideológicas. Propomos uma volta às origens do proceso de mercantilização da cultura e do surgimento dos meios de comunicação de massa para traçar um percurso histórico da evolução dos meios de comunicação problematizando as transformações no seio da indústria cultural como reflexos das necessidades econômicas. Esse percurso é feito tendo a Economia Política da Comunicação como base teórica.The technological development currently applied to several media and platforms of communication is a result of the necessity of the capital to spread its operation and to shorter its time of realization. Thus, this article analyses the relation between communication, capital and culture. Our hypothesis relay on the development of the media based on the needs of capital and the needs of the States to accomplish economic and ideological functions. We propose go back to the origins of the process of commercialization of culture and of the beginning of the mass media to draw a historical path of the evolution of the media problematizing the changes in the cultural industries as reflex of the economic needs. We go through this path having the Political Economy of Communication as a theoretical basis

Mortalidade infantil no Brasil : tendências, componentes e causas de morte no período de 2000 a 2010

Objetivos: Descrever a tendência da mortalidade infantil e dos seus componentes entre 2000 e 2010, destacando as características dos óbitos ocorridos no primeiro dia de vida e as causas de morte dos óbitos infantis. Métodos: Para o calculo da taxa de mortalidade infantil (TMI) e de seus componentes foram utilizados os dados sobre nascimentos do Sistema de Informações sobre Nascidos Vivos (Sinasc) e sobre óbitos infantis do Sistema de Informações sobre Mortalidade (SIM) para os anos de 2000 a 2010, corrigidos por fatores obtidos por pesquisa de busca ativa realizada em 2008. Foram analisados o peso ao nascer e a duração da gestação para os óbitos ocorridos no primeiro dia de vida. Para a analise de causas de morte utilizou-se uma lista reduzida especifica de tabulação de óbitos infantis. Resultados: A TMI caiu de 26,6 para 16,2 por mil nascidos vivos entre 2000 e 2010, mas ainda persistem importantes desigualdades regionais. Uma queda mais acentuada no período pós-neonatal, especialmente no Nordeste, foi constatada. O período neonatal apresenta maior risco (11,2/1000 NV) e concentrou 69% dos óbitos infantis em 2010. A prematuridade e as malformações congênitas são as principais causas de morte no período neonatal precoce, bem como as infecções da criança – principalmente pneumonias e diarréias – e as malformações congênitas, no pós-neonatal. Verificaram-se diferentes perfis de mortalidade por causas segundo as regiões e a cor-raça do recém-nascido. Nas regiões Norte e Nordeste, as infecções da criança representam a principal causa de mortalidade pós-neonatal, ao contrario das demais regiões, onde as malformações congênitas foram mais importantes. Entre os brancos, as malformações congênitas representam a principal causa de óbito; entre os pardos e negros, a prematuridade alcança uma importância relativa maior; entre os indígenas, são as infecções da criança que representam a principal causa de mortes infantis. Conclusão: Persistindo a tendência de queda da TMI, o Pais devera alcançar a Meta 4 dos Objetivos do Milênio em 2015. Entretanto os níveis ainda elevados e as persistentes desigualdades regionais e segundo a cor-raca do recém-nascido evidenciam a necessidade da melhoria do acesso e da qualidade da atenção a saúde da mulher na gestação e no parto e na atenção ao recém-nascido e a criança

Efeito de três diferentes diluidores sobre o sêmen canino submetido a dois protocolos de descongelamento

Com objetivo de avaliar o efeito de dois protocolos de descongelação do sêmen canino congelado em três diluidores foram coletados ejaculados de nove cães. Cada ejaculado foi dividido em 3 amostras, centrifugado e os pellets tratados sob diferentes protocolos: 1º - meio á base de glicina e gema de ovo; 2º - meio á base de TRIS e 3º - meio M9. Foram envasadas 28 palhetas de 0,5ml segundo cada protocolo. Amostras tratadas sob cada protocolo foram avaliadas (M1) quanto a motilidade, vigor e integridade das membranas. As palhetas foram refrigeradas a 5ºC por 60 min. e congeladas em N2. Uma amostra de cada protocolo foi avaliada quanto: motilidade, vigor e integridade das membranas após o equilíbrio (M2). Eram sempre descongeladas três pares de palhetas, sendo que cada par havia sido congelado sob um mesmo protocolo. Uma das palhetas de cada par era descongelada a 37ºC por 30 segundos e outra a 72ºC por 8 segundos. Cada grupo foi avaliado após o descongelamento (M3) quanto a motilidade e vigor espermático, avaliação computadorizada do movimento, integridade das membranas e avaliação acrossomal por meio de Fitc-PNA e PI. As amostras foram mantidas em banho Maria a 37ºC por 1h para o teste de longevidade espermática e reavaliadas (M4) quanto à motilidade e vigor espermáticos, integridade das membranas. Após análise estatística concluímos que as células espermáticas caninas descongeladas a 72ºC por 8 segundos apresentaram um maior somatório de bons resultados quanto aos testes de viabilidade espermática in vitro empregados.To verify the effect of three different extenders and two thawing temperatures on frozen-thawed canine sperm characteristics, one ejaculate from nine dogs were separately collected and processed (n=9). Each ejaculate was divided into 3 equal samples and centrifuged. The pellets were re-suspended using: 1st pellet - Glicyne-egg yolk extender (GEY), 2nd pellet - TRIS extender and 3rd pellet - M9 extender and all samples were filled in 0.5ml straws. A total of 84 straws (28 for each protocol) were done. The sperm motility, vigour and plasma membrane integrity from each protocol were immediately evaluated (M1) and the straws were brought to a refrigerator at 5ºC for 60 minutes. After that, a sample from each protocol was warmed up in a water bath 37ºC for 5 min. and sperm motility, vigour and plasma membrane integrity were evaluated (M2). The straws were frozen in liquid nitrogen. One straw from each protocol was thawed at 37ºC for 30 sec and another at 72ºC for 8 sec and the sperm motility; vigour, CASA and plasmatic membrane integrity and acrossomal status using FITC-PNA stain were evaluated (M3). Plasma membrane, sperm motility and vigour were evaluated after a 1-hour incubation at 37ºC (M4). Statistical analysis showed that the higher temperature had positive effect on froze-thawed canine sperm characteristics. The best results were taken when canine semen was frozen in GEY extender and thawed 72ºC for 8 sec

Avaliação da maturação nuclear in vitro de oócitos de gatas domésticas (Felis catus) pré-púberes e púberes

O objetivo do trabalho foi avaliar a taxa de maturação nuclear in vitro de oócitos provenientes de gatas doméstica púbere e pré-púbere. Foram utilizadas 15 fêmeas felinas, 10 púberes e 5 pré-púberes; sendo os oócitos obtidos por aspiração quantificados e classificados. Os oócitos classificados como excelentes e regulares foram reunidos em grupos de 10, em meio de cultura, recobertos em óleo mineral em Placas de Petri siliconizadas e descartáveis. Após permanência em estufa, a 38°C e 5% de CO2 por 48 horas, os oócitos foram submetidos a duas lavagens com solução de hialuronidase a 0,4%, fixados em metanol/acido acético e corados com orceína acética. A avaliação da configuração cromossômica de oócitos maturados in vitro resultou em 44,68% das células em metáfase II no grupo das fêmeas púberes e 25,32% no grupo das doadoras pré-púberes, indicando que a puberdade influencia a capacidade dos oócitos se desenvolverem in vitro.This study assessed the in vitro oocyte nuclear maturation in adult and young domestic cats. Fifteen ovaries were used; 10 from adult females and 5 from young females. The oocytes collected by aspiration were quantified and classified. The oocytes classified as excellent and/or regular were grouped (10 oocyte /drop) in culture medium covered with mineral oil in disposable Petri dishes. The oocyte were incubated at 38°C and 5% de CO2 for 48 hours and then washed with 0,4% hyaluronidase, fixed in methanol/acetic acid and stained with acetic orcein. Evaluation of chromosomal configuration of oocytes matured in vitro showed 44,68% of oocyte in metaphase II in the adult female group and 25,32% in the young donor group, showing that puberty influences oocyte capacity for in vitro development

O ESTATUTO DA INTERPRETAÇÃO EM PSICANÁLISE

O presente artigo examina o estatuto da interpretação em Psicanálise. Para tanto, utilizou-se alguns pontos da obra de Freud que tratam da interpretação dos sonhos. Tal escolha de percurso se justifica pela equivalência entre os sonhos e os sintomas. A partir desta leitura investigativa foi possível verificar que a interpretação em psicanálise não se desvincula de seus fundamentos conceituais e que o conceito de interpretação é corolário ao conceito que se faz de inconsciente – o que não é sem consequências para a direção de cura.Palavras-Chave: Inconsciente; Interpretação; Psicanálise; Sonhos; Sintoma

Effect of transport temperature of ovaries on in vitro maturation of canine oocytes collected in different stages of the estrous cycle

This study evaluated the influence of estrous cycle stage and transport temperature of ovaries on in vitro maturation of canine oocytes. The bitches were categorized into two groups based on stage of estrus cycle: diestrus or anestrus. One ovary of each pair collected was transported in saline solution at 4°C while the other was transported at 37°C. Thus, ovarian tissue was sliced in PBS to release cumulus oocyte complexes (COCs). A total of 345 COCs (n = 186 oocytes from ovaries of bitches in anestrus and 159 in diestrus) were cultivated in TCM 199 supplemented with HEPES, sodium pyruvate, cysteine, follicle stimulating hormone (FSH), human chorionic gonadotropin (hCG), estrogen (E2) and epidermal growth factor (EGF). After 72h of maturation, the COCs were denuded, fixed and stained to assess nuclear maturation. The Fisher test was applied to examine the differences between the groups. The significance level adopted was 0.05. The oocytes obtained from the ovaries from bitches in diestrus transported at 4°C shown increased frequency of oocytes in metaphase II stage than those maintained at 37°C (p < 0.01). Similarly, there was increased frequency of oocytes in metaphase II (11.1%) stage from the ovaries of bitches in anestrus and transported at 4°C, than those maintained at 37°C (p < 0.05). It was concluded that transport temperature influences the results of canine oocyte viability and in vitro maturation, regardless of reproductive stage of the female.Foi avaliada a influencia do ciclo estral e temperatura de transporte de ovários na maturação in vitro de oócitos caninos. As cadelas foram categorizadas em dois grupos baseados no estagio do ciclo estral – anestro ou diestro. Um ovário por par coletado foi transportado em solução fisiológica 0,9% a 4°C enquanto o outro foi transportado a 37°C. Então, os ovários foram seccionados em PBS para a liberação dos complexos cumulus oocito (COCs). Um total de 345 COCs (n = 186 oocitos obtidos de cadelas em anestro e 159 em diestro) foi cultivado em TCM 199 suplementado com HEPES, piruvato de sódio, cisteina, hormônio folículo estimulante (FSH), gonadotrofina coriônica humana (hCG), estrógeno (E2) e fator de crescimento epidermal (EGF). Apos 72h de maturação, os COCs foram desnudados, fixados e corados para avaliação da maturação nuclear. O teste de Fisher foi utilizado para avaliar as diferenças entre os grupos. O nível de significância adotado foi de 0,05. Os oócitos obtidos de cadelas em diestro transportados a 4°C apresentaram maior frequência de oócitos no estagio de metáfase II (21,1%) que os mantidos na temperatura de 37°C (p < 0,01). De forma similar, houve maior frequência de oócitos nos estágios de metáfase II (11,2%) nos ovários obtidos de cadelas em anestro e transportados a 4°C que nos ovários mantidos a 37°C (p < 0,05). Concluiu-se que a temperatura de transporte influencia os resultados de viabilidade oocitária canina e a maturação in vitro, independentemente do estagio reprodutivo da fêmea

Influência da temperatura de transporte de ovários na maturação in vitro de oócitos caninos coletados em diferentes estágios do ciclo estral

Foi avaliada a influencia do ciclo estral e temperatura de transporte de ovários na maturação in vitro de oócitos caninos. As cadelas foram categorizadas em dois grupos baseados no estagio do ciclo estral – anestro ou diestro. Um ovário por par coletado foi transportado em solução fisiológica 0,9% a 4°C enquanto o outro foi transportado a 37°C. Então, os ovários foram seccionados em PBS para a liberação dos complexos cumulus oocito (COCs). Um total de 345 COCs (n = 186 oocitos obtidos de cadelas em anestro e 159 em diestro) foi cultivado em TCM 199 suplementado com HEPES, piruvato de sódio, cisteina, hormônio folículo estimulante (FSH), gonadotrofina coriônica humana (hCG), estrógeno (E2) e fator de crescimento epidermal (EGF). Apos 72h de maturação, os COCs foram desnudados, fixados e corados para avaliação da maturação nuclear. O teste de Fisher foi utilizado para avaliar as diferenças entre os grupos. O nível de significância adotado foi de 0,05. Os oócitos obtidos de cadelas em diestro transportados a 4°C apresentaram maior frequência de oócitos no estagio de metáfase II (21,1%) que os mantidos na temperatura de 37°C (p < 0,01). De forma similar, houve maior frequência de oócitos nos estágios de metáfase II (11,2%) nos ovários obtidos de cadelas em anestro e transportados a 4°C que nos ovários mantidos a 37°C (p < 0,05). Concluiu-se que a temperatura de transporte influencia os resultados de viabilidade oocitária canina e a maturação in vitro, independentemente do estagio reprodutivo da fêmea