Sobrevivência de minicepas e produtividade de miniestacas de erva-mate em sistema de minijardim seminal

A propagação vegetativa é uma alternativa para a produção de mudas de erva-mate, no entanto há escassez de informações na literatura que abordem a viabilidade da cultivar Cambona 4 em sistema de mini-jardim, a qual se destaca no mercado consumidor devido a alta produtividade e sabor suave das folhas. Assim, diante do exposto, objetivou-se com o presente trabalho avaliar a sobrevivência de minicepas e a produtividade de miniestacas de erva-mate cultivar Cambona 4 em diferentes coletas realizadas em minijardim seminal tipo ‘canaletão’, em estrutura de fibra de vidro. Após 60 dias do estabelecimento do minijardim de erva-mate, foram realizadas quatro coletas de brotações das minicepas, executadas em março, abril, junho e julho de 2015, totalizando 137 dias entre a primeira e a última coleta. Em cada coleta foram avaliadas a porcentagem de sobrevivência das minicepas, o número e o comprimento dos brotos (cm) e a produtividade das minicepas (número de miniestacas de gema única produzidas por minicepa). O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, contendo quatro tratamentos (épocas de coleta), cada qual com 40 repetições. As minicepas apresentaram 100% de sobrevivência no decorrer do período experimental. Para o comprimento de brotos, verificou-se que as coletas realizadas em março, abril e julho de 2015 foram estaticamente superiores, bem como apresentaram maiores médias de produção de miniestacas por minicepa. O sistema de minijardim seminal tipo ‘canaletão’ em estrutura de fibra de vidro é tecnicamente viável, pois permite a obtenção de altos índices de sobrevivência das minicepas e produtividade de miniestacas de erva-mate, cultivar Cambona 4, nas coletas realizadas nos meses de março, abril e julho

Regeneração in vitro de louro-pardo (Cordia trichotoma (Vellozo) Arrabida ex Steudel).

This study was carried out aiming at evaluating the in vitro regeneration of louro-pardo (Cordia trichotoma (Vellozo) Arrabida ex Steudel). Nodal segments were desinfested and innoculated in two basal media: WPM (Wood Plant Médium, 1981) and MS (Murashige & Skoog, 1962) supplemented with BAP (6-Benzylaminopurine), TDZ (Thidiazuron), NAA (Naphthaleneacetic Acid), GA3 (Gibberellic Acid), IBA (Indole-3-Butyric Acid) and  A.C. (Activated Charcoal) in different combinations and concentrations for each developmental step. The regeneration rate and the shoot elongation were higher in the WPM medium containing 0,1 mg.l-1 of BAP and GA3. The rooting of regenerated shoots was observed in IBA (0,5 mg.l-1) and Ativated Charcoal (1,5 g.l-1).A regeneração in vitro foi desenvolvida para louro-pardo (Cordia trichotoma (Vellozo) Arrabida ex Steudel).  Segmentos nodais foram desinfestados e inoculados em dois meios básicos de cultura: WPM (Wood Plant Médium, 1981) e MS (Murashige & Skoog, 1962) suplementados com BAP (6-Benzilaminopurina), TDZ (Thidiazuron), ANA (Ácido-1-Naftaleno Acético), GA3 (Ácido Giberélico), AIB (Ácido Indol-3-Butírico) e CA (Carvão Ativado) em diferentes combinações e concentrações para cada fase de desenvolvimento.  As maiores taxas de multiplicação e alongamento de brotações foram obtidas com o meio WPM acrescido de 0,1 mg.l-1 de BAP e GA3. O melhor enraizamento das brotações foi obtido com AIB (0,5 mg.l-1) combinado ao Carvão Ativado (1,5 g.l-1) acrescidos ao meio de cultura

Resgate vegetativo por alporquia de genótipos adultos de urucum (Bixa orellana L.)

This study aimed to evaluate the usefulness of an air layering technique for vegetative rescue of annatto (Bixa orellana L.) genotypes and obtainment of propagules for vegetative propagation. Ten 12 year-old annatto stock plants, whose genotypes are derived from artificial crossing between “Hairy-green capsule” X “Smooth-red capsule” were used in this study. Air layering adventitious roots were induced in branches (1-2 cm diameter) using as substrate a mixture of vermiculite and moss. The effects of (1) the type of girdling (total or partial), 1 cm in length, (2) IBA (indole-3-butyric acid at 0 and 4.92 mM) solution in paper filter and (3) the covering with either transparent or dark plastic films and tencel were evaluated. The technique of air layering provided rooted branches for the 10 genotypes evaluated, with efficiency ranging from 20 to 100%, and a genotype effect was observed on rooting frequency. Under greenhouse conditions, the survival of layers derived from totally girdled stems treated with IBA and protected with transparent plastic was 100%. Established layers provided vigorous branching from which shoot apexes or nodal segment explants were obtained for in vitro establishment and propagation of this species.Este trabalho teve por objetivos avaliar a técnica de alporquia visando ao resgate vegetativo de genótipos de urucum (Bixa orellana L.) e a obtenção de plantas fornecedoras de propágulos para processos de propagação clonal. Foram utilizadas dez plantas matrizes de urucum, com 12 anos de idade, obtidas partindo do cruzamento artificial entre os genótipos "Fruto Verde Piloso" X "Fruto Vermelho Liso". Os alporques foram realizados em ramos de 1 a 2 cm de diâmetro, utilizando-se como substrato uma mistura de vermiculita e musgo. Foi avaliado o efeito (1) do tipo de anelamento da casca dos ramos (total ou parcial), com 1 cm de comprimento, (2) do AIB (ácido indol-3-butírico a 0 e 4,92 mM) aplicado em papel filtro e (3) do tipo de proteção dos alporques (filmes plásticos transparente ou preto ou tecido tencel), no enraizamento de alporque dos dez genótipos. A técnica de alporquia proporcionou o enraizamento de ramos dos dez genótipos avaliados, com eficiência variável de 20 a 100%, havendo efeito do genótipo sobre a frequência de enraizamento. A sobrevivência desses alporques foi de 100% após o plantio quando estes foram produzidos com anelamento total, tratados com AIB e protegidos com plástico transparente. Em casa de vegetação os alporques desenvolveram ramos partindo da brotação de gemas caulinares constituindo estoques de explantes apropriados para serem utilizados como estacas ou como fontes de segmentos nodais para a propagação in vitro desta espécie

Micropropagação de caixeta, Didymopanax morototoni (Aubl.) Dcne. et Planch.

This study was carried out aiming to study the in vitro regeneration of caixeta (Didymopanax morototoni (Aubl.) Dcne. et Planch.). In order to establish a basic micropropagation protocol axillary buds and nodal segments were desinfested with sodium hipochlorite 10 % and innoculated in two basal media: WPM (Lloyd & McCown, 1981) and MS (Murashige & Skoog, 1962) supplemented with BAP, TDZ, NAA, GA3, IBA and activated charcoal in defferent combinations and concentrations for each developmental step. The desinfestation method based on sodium hipochlorite during 10 minutes allowed the best results for the establishment of aseptic cultures in nodal segments. With these explants the regeneration rate and the shoot elongation were higher in the WPM medium containing 1,0 mg.l-1 BAP. However after three subcultures it was observed a reduction in the regeneration rate. The  rooting   of  regenerated  shoots  was  observed  in  a   WPM medium supplemented with 1,0 mg.l-1 IBA. The acclimatization process allowed  the plantlet survival in ex vitro conditions.O presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo básico para a micropropagação da caixeta Didymopanax morototoni (Aubl.) Dcne. et Planch. Segmentos nodais foram desinfestados em hipoclorito de sódio 10 % por diferentes periodos de exposição, e inoculados em dois meios básicos: WPM (Lloyd & McCown, 1981) e MS (Murashige & Skoog, 1962) suplementados com BAP, TDZ, ANA, GA3 , AIB e carvão ativado em diferentes combinações e concentrações para cada estádio de desenvolvimento. A desinfestação dos segmentos nodais com hipoclorito de sódio por 10 minutos proporcionou os melhores resultados para o estabelecimento asséptico das culturas. A maior taxa de regeneração e alongamento de brotações foi obtida com o meio WPM contendo 1,0 mg.l-1 de BAP. Contudo após três subcultivos neste mesmo meio observou-se redução na taxa de multiplicação. O enraizamento das brotações foi obtido no meio WPM suplementado com 1,0 mg.l-1 de AIB. O processo de aclimatização possibilitou a sobrevivência das plântulas micropropagadas às condições ex vitro

Vegetative propagation and in vitro culture of Bixa orellana L. and Ginkgo biloba L.

Bixa orellana L. e Ginkgo biloba L. são espécies lenhosas que sintetizam compostos medicinais exclusivos e de relevante importância econômica. Esta pesquisa teve como objetivos: (1) avaliar e selecionar genótipos de B. orellana com altos teores de bixina nas sementes; (2) resgatar vegetativamente genótipos de B. orellana, visando à produção de explantes para o cultivo in vitro; (3) estabelecer um sistema de propagação in vitro de B. orellana, a partir de brotos axilares em segmentos nodais de plantas adultas, e de brotos adventícios em explantes juvenis; (4) induzir a formação de calos em explantes foliares de G. biloba e avaliar a produção de metabólitos secundários in vitro e, (5) estabelecer um sistema de propagação in vitro de G. biloba, a partir de brotos axilares em segmentos nodais de plantas adultas. Genótipos de B. orellana, com alto teor de bixina, foram resgatados por alporquia e propagados in vitro a partir da indução de brotos axilares em segmentos nodais. Os explantes foram desinfestados com soluções de hipoclorito de sódio (10 minutos a 1,25%) e PPMTM (20 minutos a 20%), e cultivados em meio MS. Nestas condições foram eliminados os contaminantes fúngicos, porém, em concentrações mais altas, as soluções desinfestantes provocaram necrose e morte dos explantes. A adição de PPMTM 1%, Timentin® 600 mg.L-1 e Agrimicina® 300 mg.L-1 ao meio de cultura, controlou parcialmente o desenvolvimento de bactérias nos explantes. O desenvolvimento de brotos axilares ocorreu em 28% dos segmentos nodais. Brotos adventícios foram induzidos em discos cotiledonares, segmentos hipocotiledonares e radiculares, cultivados nos meios MS e WPM, com 4,56 µM de ZEA. Identificou-se um gradiente de potencial morfogênico, que cresce do ápice em direção à base, em hipocótilos e raízes. Altas freqüências de regeneração de brotos foram induzidas em segmentos hipocotiledonares, cultivados em meio WPM, com 4,56 µM de TDZ (85%) e com 4,56 µM de ZEA (80%). O AIB a 4,9 µM induziu maior freqüência de brotos enraizados (25%) e número de raízes (2). Plantas completas produzidas in vitro foram transferidas para substrato e aclimatizadas com sucesso em casa de vegetação. As análises histológicas comprovaram a origem adventícia dos brotos, a partir da organização de centros meristemáticos em células corticais de segmentos de hipocótilo, caracterizando a organogênese direta em B. orellana. Em G. biloba, a calogênese em explantes foliares, é dependente de uma fonte exógena de auxina. Altas freqüências calogênicas foram induzidas em discos foliares, cultivados no meio MS, com ANA 4,4 µM combinada com BAP a 0,4 µM (100%) ou 4,4 µM (92%). A máxima produção de massa fresca de calos foi obtida com o carboidrato sacarose (394,57 mg) e o subcultivo na ausência de luz (678,3 mg). O BAP alterou o padrão dos calos primários, branco amarelados e friáveis, para verdes e compactos, quando utilizado por três subcultivos. As lactonas terpênicas ginkgolídeos A e B, e os glicosídeos flavonóides quercetina, camferol e rutina, não foram detectados nos calos ou folhas de G. biloba, através dos métodos de TLC e HPLC. A propagação in vitro de G. biloba foi obtida a partir da indução e multiplicação de brotos axilares em segmentos nodais, excisados de ramos herbáceos de plantas matrizes adultas cultivadas em casa de vegetação. A caseína hidrolisada (500 mg.L-1), no meio MS, foi essencial para a indução de altas taxas de emissão de brotos axilares nos segmentos nodais (85%), de multiplicação (66,6%), e de formação de múltiplos brotos nos explantes. A cinetina e o carvão ativado apresentaram efeitos inibitórios neste processo.Bixa Orellana L. and Ginkgo biloba L. are woody species that synthesize exclusive medicinal components of economic importance. The objectives of this study were: (1) to evaluate and select genotypes of B. orellana with high bixin content; (2) to rescue vegetative genotypes of B. orellana aiming the production of explants for the in vitro culture; (3) to establish a system of in vitro propagation of B. orellana from axillaries shoots in nodal segments of adult plants, and adventitious shoots from juvenile explants; (4) to induce the formation of calli from leaf explants of G. biloba and to evaluate the in vitro production of secondary metabolites; (5) to establish a system of in vitro propagation of G. biloba from axillaries shoots in nodal segments of adult plants. Genotypes of B. orellana with high bixin content had been rescued by air layering technique and propagated in vitro by the induction and growth of axillaries shoots from nodal segments. The explants were disinfested with of sodium hipochloride solution (10 minutes 1.25%) and PPMTM (20 minutes 20%), and cultivated on MS medium culture. The addition of PPMTM 1%, Timentin® 600 mg.L-1 and 300 Agrimicin® mg.L-1 to the culture medium partially controlled the development of bacteria on the explants. The development of axillaries shoots was observed in 28% of the nodal segments. Adventitious shoots were induced in cotyledon discs, hypocotyl and root segments cultivated on MS and WPM media with ZEA 4.56 µM. It was identified a gradient of morphogenic potential that increase from the apex in direction to the base of the hypocotyls and roots explants. High frequencies of regeneration of shoots were induced in cultivated hypocotyl segments on WPM medium culture with 4.56 µM TDZ (85%) and with 4.56 µM ZEA (80%). The AIB 4.9 µM induced greater frequency of rooted shoots (25%) and roots number (2). Complete plants in vitro produced were transferred to substract and successfully acclimatized in a greenhouse. The histological analysis had proven the adventitious origin of the shoots from the organization of meristematic centers in cortical cells of hypocotyl segments, characterizing direct organogenesis in B. orellana. In G. biloba leaf explants callogenesis is dependent of an exogenous source of auxin. Greater callus frequencies had been induced from leaf discs cultivated on MS medium with ANA 4.4 µM combined with 0.4 BAP µM (100%) or 4.4 µM (92%). The maximum production of callus fresh mass was observed with carbohydrate sucrose (394,57 mg) and the subcultivation in the dark (678,3 mg). The BAP modified the pattern of the primary callus from white yellowish friable to green compact one when used by three subcultivation period. The terpene trilactones ginkgolides A and B, and the flavonol glycosides quercetin, kaempferol and rutin have not been observed in calli cultivated in vitro and in leaves of G. biloba through TLC and HPLC methods. The in vitro propagation of G. biloba was carried out by means of axillary shooting in nodal segments excised from herbaceous branches, harvested from adult plants maintained in greenhouse. The hydrolyzed casein (500 mg.L-1) in MS medium, was essential for the induction of higher frequencies of axillary shoots in nodal segments (85%), for multiplication of these shoots (66.6%), and also for formation of multiple shoots in the explants. The kinetin and the activated charcoal were inhibitory to this process.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio

IN VITRO REGENERATION OF LOURO-PARDO (Cordia trichotoma (Vellozo) Arrabida ex Steudel)

<p>This study was carried out aiming at evaluating the <em>in vitro </em>regeneration of louro-pardo (<em>Cordia trichotoma </em>(Vellozo) Arrabida ex Steudel). Nodal segments were desinfested and innoculated in two basal media: WPM (Wood Plant Médium, 1981) and MS (Murashige &amp; Skoog, 1962) supplemented with BAP (6-Benzylaminopurine), TDZ (Thidiazuron), NAA (Naphthaleneacetic Acid), GA₃(Gibberellic Acid), IBA (Indole-3-Butyric Acid) and  A.C. (Activated Charcoal) in different combinations and concentrations for each developmental step. The regeneration rate and the shoot elongation were higher in the WPM medium containing 0,1 mg.l^-1 of BAP and GA₃. The rooting of regenerated shoots was observed in IBA (0,5 mg.l^-1) and Ativated Charcoal (1,5 g.l^-1).</p

Vegetative rescue of adult genotypes of annatto ( Bixa orellana L.) by air layering

Este trabalho teve por objetivos avaliar a técnica de alporquia visando ao resgate vegetativo de genótipos de urucum ( Bixa orellana L.) e a obtenção de plantas fornecedoras de propágulos para processos de propagação clonal. Foram utilizadas dez plantas matrizes de urucum, com 12 anos de idade, obtidas partindo do cruzamento artificial entre os genótipos "Fruto Verde Piloso" X "Fruto Vermelho Liso". Os alporques foram realizados em ramos de 1 a 2 cm de diâmetro, utilizando-se como substrato uma mistura de vermiculita e musgo. Foi avaliado o efeito (1) do tipo de anelamento da casca dos ramos (total ou parcial), com 1 cm de comprimento, (2) do AIB (ácido indol-3-butírico a 0 e 4,92 mM) aplicado em papel filtro e (3) do tipo de proteção dos alporques (filmes plásticos transparente ou preto ou tecido tencel), no enraizamento de alporque dos dez genótipos. A técnica de alporquia proporcionou o enraizamento de ramos dos dez genótipos avaliados, com eficiência variável de 20 a 100%, havendo efeito do genótipo sobre a frequência de enraizamento. A sobrevivência desses alporques foi de 100% após o plantio quando estes foram produzidos com anelamento total, tratados com AIB e protegidos com plástico transparente. Em casa de vegetação os alporques desenvolveram ramos partindo da brotação de gemas caulinares constituindo estoques de explantes apropriados para serem utilizados como estacas ou como fontes de segmentos nodais para a propagação in vitro desta espécie.This study aimed to evaluate the usefulness of an air layering technique for vegetative rescue of annatto ( Bixa orellana L.) genotypes and obtainment of propagules for vegetative propagation. Ten 12 year-old annatto stock plants, whose genotypes are derived from artificial crossing between "Hairy-green capsule" X "Smooth-red capsule" were used in this study. Air layering adventitious roots were induced in branches (1-2 cm diameter) using as substrate a mixture of vermiculite and moss. The effects of (1) the type of girdling (total or partial), 1 cm in length, (2) IBA (indole-3-butyric acid at 0 and 4.92 mM) solution in paper filter and (3) the covering with either transparent or dark plastic films and tencel were evaluated. The technique of air layering provided rooted branches for the 10 genotypes evaluated, with efficiency ranging from 20 to 100%, and a genotype effect was observed on rooting frequency. Under greenhouse conditions, the survival of layers derived from totally girdled stems treated with IBA and protected with transparent plastic was 100%. Established layers provided vigorous branching from which shoot apexes or nodal segment explants were obtained for in vitro establishment and propagation of this species