Temporal consistency in the traumatic events and stress inventory in a sample of vulnerable adolescents: yes or no?

Dissertação de mestrado em Psicologia da JustiçaIn a lifetime every human experiences moments that alters their perception and comprehension of the environment that surrounds them. There are some events that can altercate a life´s course, especially if they are adverse events that can be potentially traumatic to a person. The consistency of the reports related to these experiences is based on its stability, by analyzing if the same subject recounts the same report on two (or more) time moments without significant changes. The fact that consistency may impact studies that involve reports of adverse events, makes it imperative to comprehend and clarify this phenomenon. As such the focus of this investigation is to analyze the temporal consistency of self-reports, given by a vulnerable sample of adolescents from North Portugal, on the Traumatic Events and Stress Inventory, thus comparing if the reports given in a first moment of evaluation will be consistent with a second moment. Through the analysis of the reports provided by the participants, it was possible to verify temporal consistency, ICC=0.757, 95% CI [0.659-0.830], p = 0.00, and identify which types of trauma (associated with TESI) exhibited more temporal consistency (for example, Traumatic Separation of Primary Caregiver(s) – k = .59, SE = .08, 80.6% agreement).No decorrer de uma vida, o ser humano vivencia momentos que alteram a sua perceção e compreensão do ambiente que o rodeia. Existem eventos que podem modificar o curso da sua vida, especialmente se esses eventos forem adversos, visto que estes podem ser potencialmente traumáticos para essa pessoa. O estudo da consistência dos relatos dos indivíduos que experienciaram tais eventos é baseado na sua estabilidade, analisando se um indivíduo relata, mais do que uma vez, o acontecimento da mesma forma sem grandes alterações. O facto de a consistência poder impactar nas conclusões dos estudos que envolvem relatos de experiências adversas, torna imperativo compreender e clarificar este fenómeno. Assim, o objetivo deste estudo é, numa amostra de adolescentes vulneráveis do Norte de Portugal, analisar a consistência temporal dos seus autorrelatos no instrumento Traumatic Events and Stress Inventory, comparando se os relatos fornecidos em dois momentos diferentes são consistentes entre si. Através da análise dos relatos dados pelos participantes, foi possível verificar consistência temporal, ICC=0.757, 95% CI [0.659-0.830], p = 0.00, e distinguir quais os tipos de trauma (associados à TESI) com mais consistência temporal (p.e. e.g., Traumatic Separation of Primary Caregiver(s) – k = .59, SE = .08, 80.6% agreement)

Satisfação com o atendimento em farmácias comunitárias: um estudo no distrito de Braga

Dissertação de mestrado em Gestão de Unidades de SaúdeA presente dissertação tem como objetivo avaliar a satisfação dos clientes com o atendimento em farmácias comunitárias do distrito de Braga. A satisfação é um resultado do marketing de uma empresa e sendo a farmácia uma empresa é uma área importante a ser estudada. Para a realização desta dissertação, realizamos um inquérito. Baseamo-nos em estudos já realizados em relação à satisfação dos clientes em farmácias comunitárias para o desenvolvimento do questionário, de forma a usar escalas previamente validadas. Este inquérito foi aplicado online via email e redes sociais, tendo obtido no total 102 respostas. Os dados obtidos foram analisados no sistema IBM SPSS Statistics 23. Os resultados obtidos mostram que o maior número de inquiridos são pessoas do género feminino, tem idades compreendidas entre os 26 e os 50 anos, vivem em zona rural e como habilitações literárias possuem licenciatura. De forma geral, os resultados mostram que a satisfação é atingida quando parâmetros da qualidade e literacia são alcançados. Avaliou-se também a correlação existente entre variáveis como qualidade, tempo de espera, atendimento e aconselhamento, literacia e lealdade. As variáveis tempo de espera, atendimento e aconselhamento, serviços disponíveis e literacia afetam a satisfação dos clientes com o atendimento, da mesma forma que a satisfação apresenta uma correlação, ainda que fraca, com a lealdade. Deste modo pode-se concluir que a satisfação dos clientes com o atendimento em farmácias comunitárias do distrito de Braga encontra-se saciada e esta está relacionada com várias variáveis.The goal of this dissertation is to evaluate costumer satisfaction regarding the service provided in community pharmacies in the Braga district. Satisfaction results of a company’s marketing and, since a pharmacy is a company, this is an important field to be studied. To perform this dissertation, we conducted a survey. We based our work in studies that had already been performed, pertaining to the satisfaction of clients in community pharmacies, for the development of the questionnaire in order to use previously validated scales. This survey was done online, by email and social networks, obtaining a total of 102 responses. The obtained data was analyzed by the IBM SPSS Statistics 23 system. The obtained results demonstrate that the largest amount of costumers are female, aged between 26 and 50 years old, living in rural areas and possessing as educational qualifications a graduate degree. In general, the results demonstrate that satisfaction is achieved when given quality and literacy parameters are reached. The correlation between variables such as quality, waiting time, service provided, counseling, literacy and loyalty were also evaluated. The variables waiting time, service provided, counseling, available services and literacy affect customer satisfaction pertaining to the service provided, the same way that there is a correlation, although a weak one, between satisfaction and loyalty. Hence it can be concluded that the satisfaction of clients regarding the service provided in community pharmacies of Braga district is satiated and that (that) it is related to several variables

New strategies for the decellularization of biological tissues

O início do século 21 tem sido marcado pelo aumento das doenças crónicas. Este desenvolvimento resultou num crescimento do interesse na criação de novas terapias, com foco na recuperação de tecidos através da transplantação do tecido danificado por matrizes “inteligentes” desenvolvidas recorrendo ao uso da Engenharia Biomédica. A descelularização, um processo que visa a remoção de material celular imunogénico de um tecido ou órgão, tem-se tornado num meio atraente para o desenvolvimento de novas matrizes funcionais e bioativas. A presente tese teve como objetivo explorar novas metodologias para a descelularização de tecidos biológicos. Para este propósito, é apresentada uma revisão da literatura relevante e um estudo que investiga o potencial de três diferentes protocolos para a descelularização de osso trabecular porcino usando o fosfato de tri-n-butilo (TnBP), dióxido de carbono supercrítico (scCO2), e uma combinação de ambos. O uso do TnBP como um agente de descelularização, ao invés do uso de produtos químicos mais prejudiciais como os detergentes, pode levar a uma maior preservação da matriz extracelular (ECM), tal como a propriedades bioquímicas e mecânicas mais desejáveis para a matriz resultante. O uso do scCO2 pode, também, resultar num processo de descelularização mais rápido, levando não só a uma redução do tempo de exposição dos tecidos a produtos químicos potencialmente prejudiciais, mas também a uma redução do preço financeiro deste processo. No total foram implementados e examinados cinco protocolos diferentes: 1% (v/v) TnBP durante 48 horas, scCO2 durante 1 hora e 3 horas, e scCO2 com 0.1% (p/v) TnBP com durante 1 hora e 3 horas. Devido à natureza inovadora deste projeto, usaram-se variáveis temporais para estudar qualquer efeito prejudicial devido ao efeito da exposição prolongada ao scCO2. Os resultados obtidos revelaram que tanto o TnBP como o scCO2 conseguiram diminuir a quantidade de DNA presente nas amostras, mas esta diminuição foi maior nos protocolos que onde o TnBP foi usado. A análise às propriedades mecânicas dos tecidos sujeitos a TnBP revelaram um aumento da força máxima e da tensão de limite elástico, o que poderá significar que ocorreu crosslinking das fibras de colagénio. Já o uso do scCO2 resultou na desidratação das amostras, aumentado os valores para o módulo de Young e força máxima. O protocolo de combinação scCO2-TnBP causou uma diminuição para metade da quantidade de DNA presente nas amostras tratadas em comparação a não-tratadas, demonstrado o potencial desta metodologia inovadora e abrindo novas possibilidade para otimizações futuras.The beginning of the 21st century has been marked by the rise of chronic diseases. This development has led to increased interest in the development of new therapies that focus on restoring normal tissue function through transplantation of injured tissue with biomedically engineered smart matrices. Decellularization, a process that focuses on the removal of immunogenic cellular material from a tissue or organ, has become an appealing methodology for the creation of functional and bioactive scaffolds. The present thesis focused on the creation of new methodologies for the decellularization of biological tissues. For this purpose, the author reviewed current decellularization literature and put forward a study that investigated the potential of three different decellularization protocols for porcine trabecular bone tissue using Tri(n-butyl) phosphate (TnBP), supercritical carbon dioxide (scCO2), and a combination of both. The use of TnBP as a decellularization agent, instead of harsh chemicals such as detergents, could lead to better preservation of the extracellular matrix (ECM), and better biochemical and mechanical properties to the resulting scaffold. As well, the use of supercritical fluids could lead to faster decellularization times, not only reducing the time tissues are exposed to potentially harmful agents, but also reducing the financial cost of the process. In total, five different protocols were implemented and examined: 1% (v/v) TnBP treatment for 48 hours, scCO2 treatment for 1 hour and 3 hours, and scCO2 treatment with 0.1% (w/v) TnBP for 1 hour and 3 hours. Due to the innovative nature of this work, time variants to protocols were implemented to investigate any possible harmful effects caused by prolonged exposure to scCO2 treatment. Results revealed that both TnBP and scCO2 led to the removal of DNA content, but this effect was more pronounced in treatments that used TnBP. Mechanical analysis of TnBP-treated samples revealed a higher ultimate strength and yield strain, suggesting some degree of crosslinking of collagen fibers occurred. Meanwhile, the use of scCO2 led to dehydration of samples, increasing values for Young’s Modulus and ultimate strength. The combined protocol of scCO2-TnBP led to a decrease in DNA content to about half of that measured for untreated samples, demonstrating the potential of this methodology and opening new possibilities for future optimizations that could achieve required decellularization levels

Development of an in vitro platform for a 3D microphysiological systems of human iPS-derived endothelial cells

ix In this work, we presented the original development of a chip for co-culture of cells to build up a 3D microvascular networks. The chip layout was designed in Auto-desk AutoCAD2020 to obtain three interconnected tissue chambers where the cells will be seeding and growing. The cell compartments are interconnected and fed with culture medium through the hourglass shaped side pores of the chamber (two pores for each chamber). The cell chambers are connected with inlet/outlet pairs for medium, which is delivered by an automatic feeding system. One of the initial goals for this work was to have the vessels grow towards both pores, so a pressure gradient was necessary. A medium delivery system was designed in, built with a 3D printer, and operated by a digital actuator connected to a microcon-troller board. The oscillating system maintains a difference of level (static pressure) be-tween the two culture medium containers, changing their positions automatically by previously defined time intervals, promoting uniform cell growth. The level height difference of culture medium and the time between changes can be adjusted by the programmable control system. Furthermore, the design of the chip layout allows for the growth of cells towards mimicking a 3D network of blood vessels. After seeding and polymerization of the fibrin gel, the cells grew occupying all the chamber space. That can be observed by microscopy without stopping the culture, as the chip support is transparent. These indicate that a suitable platform for biological assays using different cell types in co-culture (e.g. fibro-blast with human endothelial cells) can be carried on.Neste trabalho apresentamos o desenvolvimento original de um chip para co-cultura de células para a construção de redes microvasculares 3D. O layout do chip foi projetado no Autodesk AutoCAD2020 para obter 3 câmaras de tecido interconectadas onde as células serão semeadas e irão crescer. Os compartimentos das células são interligados e alimentados com o meio de cultura através dos poros laterais em forma de ampulheta (dois poros para cada câmara). As câmaras celulares estão conectadas à entrada/saída de meio, que é entregue por um sistema de alimentação automático. Um dos objetivos iniciais deste trabalho era fazer com que os vasos crescessem em direção a ambos os poros, para isso um gradiente de pressão era necessário. Um sistema de entrega de meio foi projetado e construído com uma impressora 3D e operado por um atuador digital com uma placa microcontrolador. O sistema oscilante mantém uma diferença de nível (pressão estática) entre os dois recipientes do meio de cultura, mudando as suas posições automaticamente por intervalos de tempo previamente definidos, promovendo um crescimento celular uniforme. A diferença de altura do meio de cultura e o tempo entre as mudanças podem ser ajustados pelo sistema de controle programável. Para além disso, o design do layout do chip permite o crescimento de células para simular uma rede 3D de vasos sanguíneos. Após a semeação e polimerização do gel de fibrina, as células cresceram ocupando todo o espaço da câmara. Isto pode ser observado por microscopia sem interrupção da cultura, pois o suporte do chip é transparente. Estes indicam que, uma plataforma adequada para ensaios biológicos usando diferentes tipos de células em co-cultura (por exemplo, fibroblasto com células endoteliais humanas) pode ser realizada

Evolution in agricultural systems: Moving toward the understanding of complexity

Agricultural fields are typically simplified ecosystems compared to natural sites, a characteristic that has long-attracted researchers in Ecology and Evolution. In recent years, there has been a rising interest in understanding how agricultural systems are shaped by evolution in the context of changing agricultural practices by integrating biological information of crop systems. This editorial introduces the special issue “Evolution in agricultural systems,” incorporating the articles published within this issue into three general areas of research: phenotypic and genetic responses to the environment, biotic interactions and the role of microbes. Together, this body of work unveils unforeseen complexity at all levels, from microbes to trophic chains. Understanding such complexity is critical not only to better understand natural systems, but also if we wish to improve the sustainability of the food system.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

The impact of clothing experience as a child when buying clothes for our own children

Dissertation presented as the partial requirement for obtaining a Master's degree in Information Management, specialization in Marketing IntelligenceChildhood processes have a strong impact on identity formation but there is still poor understanding about how these process works as children grow. From early ages an individual is constantly being shaped by who surrounds him and that brings consequences for his development as a child and later as an adult. My particular question of the shopping habits of children clothing gives me the chance to explore childhood process and contribute with my research to this topic. To be able to take conclusions I will make a survey with a few open-ended questions almost as if it was a reflective interview. My target are Portuguese parents who have children under de age of 12. My research aims to understand how the experience these parents had during their childhood about how they were dressed by their parents shaped the way they dress their own children. Are these parents doing to their children the same as their parents did with them? Is it different? In what way? And why is that? Would they like to change something in the way they were raised? Are they making that change on how they are raising their children

Caracterização de enzimas em peçonhas animais : identificação de fosfolipases do escorpião Hadrurus gerstchi e atividades enzimáticas da arraia Potamotrygon falkneri

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2017.Peçonhas animais são misturas complexas de componentes cuja função está relacionada com a defesa ou captura/digestão da presa e essa composição é variável de acordo com o grupo filogenético, distribuição geográfica, ontogenia, sexo, habitat, dieta. Dentre os componentes estão proteínas com atividade enzimática ou não, peptídeos vasoativos, aminas biogênicas, aminoácidos livres, lipídeos, carboidratos, ânions e cátions. Este estudo isolou duas fosfolipases presentes na peçonha do escorpião Hadrurus gerstchi e analisou a composição enzimática da peçonha da arraia Potamotrygon falkneri com o objetivo de contribuir para o conhecimento da composição enzimática dessas peçonhas. Na peçonha de Hadrurus gerstchi foram isoladas duas fosfolipases. A primeira delas como massa molecular de 14 kDa, atividade específica de 13.529 U/mg, pH ótimo de atividade em 8,5, temperatura ótima de atividade entre 35-40ºC, com estabilidade mantida até temperatura de 30ºC. A segunda fosfolipase apresentou massa molecular de 11 kDa, atividade específica de 7.135 U/mg, pH ótimo de atividade 8,0 e estável até a temperatura de 10ºC. As duas enzimas são cálcio dependentes o que sugere pertencerem ao grupo das fosfolipase A2 e mostraram importante atividade hemolítica e edematogênica. A peçonha de P. falkneri foi testada frente às atividades enzimáticas de fosfolipase, hialuronidase, 5’nucleotidase, fosfodiesterase, L-aminoácido oxidase e atividades proteolíticas de colagenase, elastase, substratos cromogênicos de azocaseina e azoalbumina e atividade fibrinogenolítlica. A peçonha apresentou resultados positivos para a maioria dos ensaios, com exceção de fosfodiesterase, L-aminoácido oxidase e atividade fibrinogenolítica, sendo que hialuronidase foi a enzima com maior atividade, seguida das enzimas proteolíticas, indicando a participação destas enzimas na fisiopatologia do envenenamento. Desta forma pode se concluir, que apesar de componentes comuns entre as duas espécies, a função destes componentes é diferente, quando se considera a biologia do animal. As arraias possuem uma peçonha com composição aparentemente mais simples do que a dos escorpiões, no sentido de qualidade e quantidade dos componentes. As moléculas, apesar de complexas, uma vez que possuem alta massa molecular e de arranjos estruturais complexos, parecem estar voltadas apenas para a função de defesa, provocando uma sintomatologia muito específica, caracterizada por um processo inflamatório grave, porém local, enquanto que a peçonha escorpiônica, além da defesa, também é utilizada para a captura e paralisia da presa.Animal venoms are complex mixtures of components whose function is related to the defense or capture/digestion of prey and this composition is variable according to the phylogenetic group, geographic distribution, ontogeny, sex, habitat, diet. Among the components are proteins with enzymatic activity or not, vasoactive peptides, biogenic amines, free amino acids, lipids, carbohydrates, anions and cations. This study isolated two phospholipases present in the venom of the scorpion Hadrurus gerstchi and analyzed the enzymatic composition of the venom from Potamotrygon falkneri streak with the objective of contributing to the knowledge of the enzymatic composition of these venoms. In the venom of Hadrurus gerstchi two phospholipases were isolated. The first one had a molecular mass of 14 kDa, a specific activity of 13,529 U/mg, optimum activity pH of 8.5, optimal activity temperature of 35-40ºC, with a stability maintained at a temperature of 30ºC. The second phospholipase had molecular mass of 11 kDa, specific activity of 7,135 U/mg, optimum pH of activity 8.0 and stable until the temperature of 10ºC. The two enzymes are calcium dependent, suggesting that they belong to the group of phospholipase A2 and showed important hemolytic and edematogenic activity. The P. falkneri venom was tested against the enzymatic activities of phospholipase, hyaluronidase, 5'nucleotidase, phosphodiesterase, L-amino acid oxidase and proteolytic activities of collagenase, elastase, chromogenic substrates of azocasein and azoalbumin, and fibrinogenolytic activity. The venom presented positive results for most of the tests, with the exception of phosphodiesterase, Lamino acid oxidase and fibrinogenolytic activity, and hyaluronidase was the enzyme with the highest activity, followed by proteolytic enzymes, indicating the participation of these enzymes in the physiopathology of the poisoning. In this way it can be concluded that despite the common components between the two species, the function of these components is different when considering the biology of the animal. Streaks have a venom with composition apparently simpler than that of scorpions, in the sense of quality and quantity of the components. The molecules, although complex, since they have high molecular mass and complex structural arrangements, seem to be oriented only to the defense function, provoking a very specific symptomatology, characterized by a severe but local inflammatory process, while the venom scorpion, besides the defense, is also used for the capture and paralysis of the prey

Estudo da atividade antimicobacteriana e ativação biológica de ésteres de ácidos orgânicos fracos

Tese de mestrado em Bioquímica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2012A tuberculose é uma das doenças mais prevalecentes no mundo. Nos últimos anos surgiram multirresistências aos fármacos usados no tratamento da tuberculose Surge a necessidade de desenvolver novos antimicobacterianos. Uma abordagem interessante consiste no uso de pró-fármacos de compostos que tenhma demonstrado actividade mas tenham alguns problemas associados como por exemplo deficiente absorção ou entrada nas células de micobactérias. , Estudos anteriores demonstraram que alguns ácidos fracos apresentam uma atividade antimicobacteriana significativa contra o M.tuberculosis, resultado da sua acumulação na célula devido a um mecanismo de efluxo deficiente. Essa atividade é maior a pH acídico. Os ésteres são mais ativos que os ácidos, uma vez que se difundem ao longo da membrana, dentro da qual são convertidos em ácidos. Para serem efectivos os pró-fármacos necessitam ser resistentes à hidrólise no plasma, capazes de sofrer ativação pelas micobactérias. Foram estudados ésteres derivados do BA, com modificações na cadeia alcoxílica, com cadeias propílicas, fenílicas e hexílicas, de modo a estudar o efeito da lipofilia na estabilidade e atividade destes., foram também introduzidos substituintes na porção acilo da molécula, para estudar o efeito do pKa na estabilidade e atividade destes prófármacos. Os estudos de atividade foram monitorizados em três estirpes bacterianas: Mycobacterium smegmatis, Mycobacterium bovis BCG e Mycobacterium tuberculosis RA e a dois valores pH 6,5 e 5,9. Também foi estudada a hidrólise química em tampão fosfato 7,4 e tampão 5,9, bem como a hidrólise enzimática em plasma humano e ainda ativação dos pró-fármacos pelas micobactérias. Os compostos estudados demonstraram ser estáveis em plasma humano e suficientemente ativados pelas micobactérias. Também demonstraram atividade significativa contra o M.tuberculosis sendo os compostos mais interessantes os derivados do ácido 3,5-dinitrobenóico Com base nestes estudos, pretende-se aumentar a série de ésteres estudados, de modo a desenvolver potenciais pró-fármacos eficazes no tratamento da tuberculose.Tuberculosis is one of the most prevalent diseases in the world. However, in the past few years, resistances to this antimicrobial drug have emerged. One interessant appoarch is the use of prodrugs that have showed some significant activity but have some problems relate to a poor absorption and difficulty to pass over membranes. Previous studies have showed that weak acids demonstrated significant antimycobacterial activity, probably as a result of accumulation inside the cell, due to a deficient efflux mechanism. This antimicrobial activity increases at acidic pH. Esters are more active than acids, suggesting that these compounds diffuse over the membrane layer into the cell, where they are converted to acids To be effective they must be resistant to hydrolysis in human plasma and be activated in mycobacteria. We studied BA esters with electron withdrawing groups on the acyloxy portion of the molecule, in order to assess effect of the pKa of the acyloxy portion on the activity of those derivatives. Modifications have been done also within the alkyl portion of the ester molecule, with propyl, phenyl and hexyl alcoxyl chains, in order to study the effect of the lipophily in the activity of those derivatives. The activity was assayed against three mycobacterium species: M. smegmatis , M. bovis BCG and M.tuberculosis at two different media pH values: pH 6,5 and pH 5,9. The chemical stability has been studied in phosphate buffer pH 7.4, enzymatic stability in human plasma and the activation was evaluated using a M. smegmatis homogenate. We observed that most of the compounds show high stability in human plasma and fast hydrolysis in mycobacteria homogenate. Future development of new antituberculosis drugs will take in account the observed conclusions

Novel cell models to study breast tumour microenvironment and disease progression

Breast cancer is the most prevalent and deadly in woman. ER+ breast cancer represents around two-thirds of all cases and has a favourable prognosis due to good response to endocrine therapy. However, these tumours present 25% of disease relapse due to drug resistance and metastatic behaviour. Tumour progression and acquired drug resistance are modulated by the interactions between tumour cells and the surrounding microenvironment. Most models employed to address these mechanisms fail to reflect the complex tumour microenvironment and do not allow long-term monitoring of tumour progression. (...