Hidrólise ácida e enzimática de pectina para crescimento celular de Cupriavidus necator e Pseudomonas putida

Substâncias pécticas são encontradas em grandes quantidades nos resíduos da industrialização de sucos de frutas. Esses compostos são susceptíveis à hidrólise por métodos ácidos e enzimáticos, podendo ser empregados como substratos de baixo custo em processos de conversão biológica para obtenção de bioprodutos, como os biopolímeros. Cupriavidus necator e Pseudomonas putida são micro-organismos conhecidos por sua capacidade de acumular poli-hidroxialcanoatos (PHAs) como fonte de carbono e energia, em condições desfavoráveis de crescimento e excesso de fonte de carbono. Foram estudadas as hidrólises ácida e enzimática de uma pectina comercial, e os hidrolisados foram empregados como substrato para crescimento celular de ambos os micro-organismos. O substrato obtido por hidrólise ácida, realizada em sistema de rotaevaporador com refluxo, permitiu o crescimento celular de C. necator após uma fase adaptativa de 12 horas. Os ensaios de hidrólise enzimática foram realizados com a enzima poligalacturonase utilizando-se a pectina esterificada e não esterificada como substrato, obtendo-se ao final de 24 horas mais de 5 g/L de redutores. O hidrolisado obtido permitiu apenas o crescimento celular de C. necator, após uma fase adaptativa de 8 horas, enquanto P. putida não apresentou crescimento celular em nenhuma das condições de hidrólise avaliadas. Palavras-chave: Pectina. Hidrólise. Poligalacturonase. Poli-hidroxialcanoatos

PARADOXOS DA RESOLUÇÃO CFO N. 196/2019: "EU TÔ TE EXPLICANDO, PRÁ TE CONFUNDIR"

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Identificação de bactérias da rizosfera de inhame, macaxeira e batata-doce potencialmente produtoras de polihidroxialcanoatos

Yam, sweet potatoes and cassava are important cultures in northeastern Brazil once these tubercles are full of starch. Polyhydroxyalkanoates are biodegradable polymers made ​​from starch used in the production of plastics. The objective of this work was isolate and identify bacterial communities with potential biotechnological applications from rhizosphere and surface soil of yam, cassava and sweet potatoes tubers. The bacterial cultures collection occurred through the removal of rhizosphere and surface soil from the tubers. After serial dilutions and soil sowing in culture medium, bacteria with distinct morphological characteristics were selected for analysis by colony PCR. Of the 214 bacteria analyzed, 11 samples were positive for phaC gene, a key factor for PHA synthesis. Nine bacteria showed satisfactory results for the production of PHAs granules after staining with Sudan Black. Among the bacteria positive in PCR and Sudan Black, eight were identified by sequencing to genus or species, such as: Pseudomonas, Bacillus, Agrobacterium, Stenotrophomonas, Cupriavidus e Microvirga flocculans. Microvirga flocculans was described first time in the literature as producing PHA. The application of colony PCR with Sudan Black staining was efficient and rapid selection of bacteria potentially producing PHAs from soil samples.Inhame, macaxeira e batata-doce são vegetais importantes no Nordeste brasileiro, uma vez que esses tubérculos são ricos em amido. Os Polihidroxialcanoatos (PHAs) são polímeros biodegradáveis produzidos a partir de amido e utilizados na produção de plásticos. O objetivo deste trabalho foi isolar e identificar bactérias com potencial aplicação biotecnológica para produção de polihidroxialcanoatos a partir da rizosfera e superfície de túberas de inhame, macaxeira e batata-doce. A coleta das culturas bacterianas ocorreu por meio da retirada do solo da rizosfera e da superfície das túberas. Após diluições seriadas e semeio do solo em meio de cultura, bactérias com características morfológicas distintas foram selecionadas para análise através do PCR de colônia. Das 214 bactérias analisadas, 11 amostras foram positivas para o gene phaC, fator fundamental para síntese de PHA. Nove bactérias apresentaram resultado satisfatório para produção de grânulos de PHAs após coloração de Sudan Black. Dentre as bactérias positivas no PCR e Sudan Black, oito foram identificadas por sequenciamento ao nível de gênero ou espécie, como: Pseudomonas, Bacillus, Agrobacterium, Stenotrophomonas, Cupriavidus e Microvirga flocculans, sendo esta última descrita pela primeira vez na literatura como produtora de PHA. A aplicação de PCR de colônia com coloração por Sudan Black mostrou-se eficiente e rápida para a seleção de bactérias potencialmente produtoras de PHAs a partir de amostras de solo

Utilização do potencial de óxido-redução para o monitoramento de culturas de Ralstonia Eutropha visando a produção de polihidroxibutirato

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Curso de Pós-Graduação em Engenharia de AlimentosO homopolímero polihidroxibutirato (P(3HB)) é um poliéster acumulado no interior de células bacterianas como reserva de energia e carbono. A síntese de P(3HB) por Ralstonia eutropha ocorre a partir da via Entner-Doudoroff, em condições de limitação de algum nutriente (nitrogênio, fósforo, magnésio, entre outros) e excesso de carbono. Sabe-se que a condição óxido-redutora da célula é um reflexo das condições ambientais nas quais esta está inserida. Assim, objetivou-se avaliar as variações do potencial óxido-redutor (Eh) e a possibilidade de utilizá-lo para o monitoramento de culturas de Ralstonia eutropha DSM 545 para produção de P(3HB). Para tanto, análises de proteína, açúcar redutor, fosfato, P(3HB) e biomassa total foram realizadas, bem como o monitoramento do potencial de óxido-redução. Isto permitiu observar que, quando o Eh atinge um valor mínimo, ocorre a exaustão do nutriente ou de fonte de carbono, a máxima concentração de NADPH e o início da fase de desaceleração do crescimento da cultura. A sinalização desta fase é fundamental para realizar as intervenções (alimentação de fosfato, adição de propionato) em processo envolvendo produção de PHAs. As mesmas conclusões foram observadas em cultura de R. eutropha DSM 545 em meio complexo, no caso, um efluente da indústria de processamento de repolho. A fim de verificar a ação do meio sobre a condição óxido-redutora intracelular, o agente redutor ditiotreitol (DTT) foi adicionado na forma de pulso e observou-se que o mesmo interferiu na condição redutora do cofator NADPH, bem como, no crescimento celular

Orange and Passion Fruit Wastes Characterization, Substrate Hydrolysis and Cell Growth of Cupriavidus necator, as Proposal to Converting of Residues in High Value Added Product

Abstract: Brazil is the world’s largest producer of orange and passion fruit, which are destined mainly for industrialization, generating grand volumes of wastes. The solid portion of these residues is a rich source of pectin - composed mainly of galacturonic acid and neutral sugars, which through the hydrolysis process can be used in biological conversion processes, as the production of polyhydroxyalkanoates (PHAs). This way, we characterized these wastes, followed by the extraction and hydrolysis of pectin for employ as a substrate for the cell growth of Cupriavidus necator. The results confirmed the large portion of pectin (almost 40 g.100g-1) and soluble sugars, present in these wastes. The hydrolyzed extract showed as a good source of carbon for the cell growth of C. necator with YX/S 0.56 and 0.44, µMax 0.27 and 0.21 for orange and passion fruit wastes respectively, similar to other carbon sources. This way, the extraction and hydrolysis of orange and passion fruit wastes for the cellular growth of C. necator, can be a good alternative to converting of residues in high value added product

Concepções de ética por farmacêuticos de uma rede municipal de Atenção Básica à Saúde: entre o dito e o não dito.

It is a qualitative research that aimed to analyse the ethical conceptions of a group of pharmacists working in the context of Primary Health Care in a southern city in Brazil. We interviewed 19 pharmacists with the help of a semi-structured script. The interviews were transcribed and data analysed through the Thematic Content Analysis technique. It was observed that most participants showed some degree of difficulty to express their understanding of ethics, however the analysis showed different concepts and explanations, with predominance of a deontological conception. The deficiencies in professional education, especially in undergraduate, "where professional ethics" are still the hegemonic paradigm, wrere pointed out as an important critical node to be overcome. This limitations and distortions in the way of understanding ethics may contributes to failures in competence to identify, describe and explain the ethical problems present in daily life of health services and, consequently, also in the ability to deal with them.  Trata-se de pesquisa qualitativa que objetivou analisar as concepções sobre ética de um grupo de farmacêuticos atuantes no âmbito da Atenção Básica à Saúde em um município do Sul do País. Foram entrevistados 19 profissionais com auxílio de um roteiro semiestruturado. As entrevistas foram transcritas e os dados analisados por meio da técnica de Análise Temática de Conteúdo. Observou-se que a maioria dos participantes demonstrou algum grau de dificuldade para expressar sua compreensão sobre ética. Ainda assim, a análise revelou diferentes conceitos e fundamentações, com predomínio de uma concepção deontológica. As deficiências na formação profissional, especialmente na graduação, onde a chamada “ética profissional” ainda é o paradigma hegemônico, são apontadas como um importante nó crítico a ser superado. As limitações e distorções na compreensão da ética podem contribuir para falhas na competência de identificar, descrever e explicar os problemas éticos que se apresentam no cotidiano em saúde e, consequentemente, na habiliade de lidar com os mesmos

Comparative analyses of response surface methodology and artificial neural networks on incorporating tetracaine into liposomes

This study evaluated the incorporation of tetracaine into liposomes by RSM (Response Surface Methodology) and ANN (Artificial Neural Networks) based models. RCCD (rotational central composite design) and ANN were performed to optimize the sonication conditions of particles containing 100 % lipid. Laser light scattering was used to perform measure hydrodynamic radius and size distribution of vesicles. The liposomal formulations were analyzed by incorporating the drug into the hydrophilic phase or the lipophilic phase. RCCD and ANN were conducted, having the lipid/cholesterol ratio and concentration of tetracaine as variables investigated and, the encapsulation efficiency and mean diameter of the vesicles as response variables. The optimum sonication condition set at a power of 16 kHz and 3 minutes, resulting in sizes smaller than 800 nm. Maximum encapsulation efficiency (39.7 %) was obtained in the hydrophilic phase to a tetracaine concentration of 8.37 mg/mL and 79.5:20.5% lipid/cholesterol ratio. Liposomes were stable for about 30 days (at 4 °C), and the drug encapsulation efficiency was higher in the hydrophilic phase. The experimental results of RCCD-RSM and ANN techniques show ANN obtained more refined prediction errors that RCCD-RSM technique, therefore, ANN can be considered as an efficient mathematical method to characterize the incorporation of tetracaine into liposomes

Hidrólise ácida e enzimática de pectina para crescimento celular de Cupriavidus necator e Pseudomonas putida

Substâncias pécticas são encontradas em grandes quantidades nos resíduos da industrialização de sucos de frutas. Esses compostos são susceptíveis à hidrólise por métodos ácidos e enzimáticos, podendo ser empregados como substratos de baixo custo em processos de conversão biológica para obtenção de bioprodutos, como os biopolímeros. Cupriavidus necator e Pseudomonas putida são micro-organismos conhecidos por sua capacidade de acumular poli-hidroxialcanoatos (PHAs) como fonte de carbono e energia, em condições desfavoráveis de crescimento e excesso de fonte de carbono. Foram estudadas as hidrólises ácida e enzimática de uma pectina comercial, e os hidrolisados foram empregados como substrato para crescimento celular de ambos os micro-organismos. O substrato obtido por hidrólise ácida, realizada em sistema de rotaevaporador com refluxo, permitiu o crescimento celular de C. necator após uma fase adaptativa de 12 horas. Os ensaios de hidrólise enzimática foram realizados com a enzima poligalacturonase utilizando-se a pectina esterificada e não esterificada como substrato, obtendo-se ao final de 24 horas mais de 5 g/L de redutores. O hidrolisado obtido permitiu apenas o crescimento celular de C. necator, após uma fase adaptativa de 8 horas, enquanto P. putida não apresentou crescimento celular em nenhuma das condições de hidrólise avaliadas. Palavras-chave: Pectina. Hidrólise. Poligalacturonase. Poli-hidroxialcanoatos