Manutenção in vitro, sob condições de crescimento lento, de germoplasma de palma de óleo obtido com o resgate de embriões

O objetivo deste trabalho foi avaliar a manutenção in vitro de acessos de óleo de palma (Elaeis guineenses e E. oleifera) sob condições de crescimento lento. Plantas produzidas pelo resgate de embriões foram submetidas ao meio de cultura 1/2MS, acrescido dos carboidratos sacarose, manitol e sorbitol nas concentrações de 1, 2 e 3%, em 20 e 25±2ºC. Após 12 meses, a temperatura de 20°C retardou o crescimento das plantas. A sacarose é o carboidrato mais adequado para a manutenção da qualidade das plantas, enquanto o manitol e o sorbitol resultam em menor sobrevivência das plantas.The objective of this work was to evaluate the in vitro maintenance of oil palm (Elaeis guineensis and E. oleifera) accessions under slow-growth conditions. Plants produced by embryo rescue were subject to 1/2MS culture medium supplemented with the carbohydrates sucrose, mannitol, and sorbitol at 1, 2, and 3% under 20 and 25±2ºC. After 12 months, the temperature of 20°C reduced plant growth. Sucrose is the most appropriate carbohydrate for maintaining the quality of the plants, whereas mannitol and sorbitol result in a reduced plant survival

Micropropagação, estimativa da produção de mudas e análise da fidelidade genética baseada em marcadores ISSR de Guadua magna e G. angustifolia

Os bambus Guadua magna e G. angustifolia têm sido propagados vegetativamente quase que exclusivamente por técnicas convencionais de propagação. Objetivou-se micropropagar, estimar a produção de mudas e analisar a fidelidade genética de G. magna e G. angustifolia por marcadores moleculares ISSR. Plantas matrizes de ambas as espécies foram cultivadas em casa-de-vegetação e pulverizadas ou não com fungicida. Em laboratório, microestacas foram desinfestadas e estabelecidas em meio MS com 3,0 mL L-1 de Plant Preservative Mixture (PPM®) e 1 mL L-1 de Carbendazin®. As brotações livres de contaminação foram multiplicadas em meio MS líquido ou semissólido com 3,0 mg L-1 de BAP, por cinco subcultivos. O enraizamento foi realizado em meio de MS1/2 líquido ou semissólido, acrescido de 3,0 mg L-1 de AIB. A aclimatização foi realizada em substrato comercial, em câmara de crescimento, sendo a fidelidade genética dos clones produzidos analisada por marcadores ISSR. A adição de fungicida e PPM® ao meio reduziu a contaminação em G. magna, mas não em G. angustifolia. O meio líquido foi mais eficiente que o semissólido para multiplicação das espécies, as quais mostraram potenciais de produção entre 760 e 920 plantas por microestaca inicial, após cinco subcultivos. Plantas enraizadas apresentaram sobrevivência de até 100 % na aclimatização. Não foram observadas regiões polimórficas nos clones analisados por ISSR ao final do quinto subcultivo, sugerindo que a micropropagação é uma técnica segura para a multiplicação de bambus em larga escala.The bamboo species Guadua magna and G. angustifolia have been propagated nearly exclusively by conventional techniques of vegetative propagation. Micropropagation is a promising technique and an alternative to conventional ones. This study aimed to micropropagate plants, estimate the plantlets production and analyze the genetic fidelity of G. magna and G. angustifolia by ISSR molecular markers. Mother plants of both species were cultivated in a greenhouse, and either sprayed or not with fungicide. In the laboratory, microcuttings were disinfested and established in MS culture medium with 3.0 mL L-1 of Plant Preservative Mixture (PPM®) and 1 mL L-1 of Carbendazin®. The contamination-free shoots were multiplied in liquid or semi-solid MS medium with 3.0 mg L-1 of BAP for five subcultures. Rooting was performed in liquid or semi-solid MS1/2 medium, plus 3.0 mg L-1 of IBA. Acclimatization was performed on a commercial substrate, in a growth chamber, and the genetic fidelity of the clones produced was analyzed via ISSR markers. The addition of fungicide and PPM® to the medium reduced the contamination in G. magna, but not in G. angustifolia. The liquid medium was more efficient than the semi-solid one for the multiplication of both species, which showed production potentials between 760 and 920 plants per initial microcutting, after five subcultures. Rooted plants exhibited a survival rate of up to 100 % in acclimatization. No polymorphic regions were found in the clones analyzed by ISSR at the end of the fifth subculture, suggesting that micropropagation is a safe technique for the large-scale multiplication of bamboos

Anatomical characteristics of leaves from Teak (Tectona grandis L.f.)

The in vitro culture promotes changes anatomical, physiological and morphological in plants. The objective of this work was to compare the structural characteristics of leaves of Tectona grandis in in vitro culture and ex vitro. Paradermic and cross sections of the leaf blade from in vitro and ex vitro culture, hand made free, were made for the measurement of anatomical structures in the light microscope. The stomata in ex vitro culture showed smaller dimensions, while the thickness of the cuticle, the epidermal cells and parenchyma of the palisade were thicker leaves developed in ex vitro. The results indicate adaptive plasticity of T.grandis, which could allow the acclimatization of micropropagated plants under conditions of south-western Amazon

A rapid in vitro protocol for propagation of Piper aduncum and Piper hispidinervum, two species from Amazon region with multipurpose uses

The morphogenic potential of nodal explants of Piper aduncum and Piper hispidinervum (Piperaceae) was investigated and a protocol for rapid micropropagation is described. An experiment based on the saline formulation of Murashige and Skoog (MS) and Wood Plant medium (WPM) combined with different N6-benzylaminopurine (BAP) and 1-naphthalene acetic acid (NAA) concentrations was evaluated. After determining the optimal concentration of growth regulators, the multiplication rates for the species, which were distributed in five subcultures, was assessed, and the number of plantlets produced in this period was recorded. After assessing the plants from all five subcultures, plantlets with well-developed root and shoot systems were transferred to pots containing substrate for acclimatization. The culture of nodal segments of P. aduncum and P. hispidinervum on hormone-free medium was shown to be a suitable method for micropropagation due to the high multiplication rate and good plant development. The use of BAP or BAP + NAA resulted to formation of vitrified multiple shoots and callus formation at the base of the microcuttings. Even at concentrations lower than 1 mg L-1, the use of BAP resulted in vitrified multiple shoot and callus formation, without significantly improving the multiplication rates. For both species, the first subculture resulted in the greatest number of axillary buds, and mainly for P. hispidinervum, the MS medium was the most appropriate for in vitro multiplication of microcuttings. The species showed 100% root formation, and acclimatization of plants from the fifth subculture in a greenhouse resulted in 100% survival.Key words: Spiked pepper, long pepper, micropropagation, dillapiol, safrole, morphogenesis,  organogenesis

Antibiotics toxicity on the in vitro potato cultivation in semi-solid and liquid media

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos fitotóxicos de antibióticos no crescimento e na taxa de multiplicação in vitro da batata. Brotações da cultivar Baronesa foram cultivadas em meio de multiplicação de consistência semi-sólida e líquida. O meio de multiplicação foi formado pelos sais e vitaminas de MS ao qual adicionou-se um dos seguintes antibióticos: ampicilina, cloranfenicol, estreptomicina e tetraciclina, previamente selecionados em razão da ação bactericida sobre contaminantes da cultura, nas concentrações de 0, 32, 64, 128, 256, 512 e 1.024 mg L-1. Por 21 dias os materiais foram mantidos em sala de crescimento a 25±2°C, 16 horas de luz e fluxo de radiação de 35 μmol m-2 s-1. Nos tratamentos em que se utilizou meio de cultura líquido, os frascos foram mantidos sob constante agitação em mesa agitadora do tipo orbital. A ampicilina foi o único antibiótico que não afetou a sobrevivência e o desenvolvimento dos explantes de batata em meio de multiplicação, podendo ser indicada para trabalhos de descontaminação in vitro dessa espécie. O aumento das concentrações de cloranfenicol, estreptomicina e tetraciclina no meio de cultura apresentou efeitos fitotóxicos severos sobre o crescimento e taxa de multiplicação do material vegetal.The objective of this work was to evaluate the effects of antibiotics on the in vitro growth and multiplication rate of potato. Potato explants, cv. Baronesa, were cultivated in semi-solid and liquid multiplication culture medium. The medium was formed by MS salts, vitamins and one of the following antibiotics: ampicillin, chloramphenicol, streptomycin or tetracycline, previously selected by the bactericidal action on some culture contaminants, at 0, 32, 64, 128, 256, 512 and 1,024 mg L-1. Each treatment had three replicates of ten explants. The materials were incubated for 21 days in a growth room at 25±2°C temperature, 16-hour-light and 35 mmol m-2 s-1 radiation. The flasks with liquid culture medium were kept under continuous agitation in an orbital shaker. Only ampicillin has not affected the survival and the normal development of potato explants in the culture medium, thereby being indicated for decontamination works in vitro of this specie. The increase of the concentrations of chloramphenicol, tetracycline and streptomycin presented severe phytotoxic effects on the growth and multiplication rate of potato explants

Protocolo para produção de material propagativo de batata em meio líquido

Semi-solid media are more commonly used in studies of micropropagation, but the physical state of the culture media seems to influence the growth and multiplication rate of the cultivation. The objective of this work was to establish a protocol for in vitro multiplication of potato in liquid culture media. Potato explants, cultivar Eliza, with an axillary bud, were cultivated in six different culture media, with (semi-solid) or without (liquid) the addition of agar. After 21 days, the culture medium that provided the best results for growth and multiplication rate had the composition modified with the objective of improving the efficiency of in vitro multiplication of five cultivars in liquid medium. The need of agitation was also evaluated in liquid culture medium. There was high efficiency of the in vitro potato multiplication when it was cultivated in liquid medium. The MS salt medium in the full concentration, added by gibberellic acid (0.25 mg de Luces Fortes), panthotenic acid (5.0 mg L-1), thiamine (1.0 mg L-1) and sucrose (20 g L-1), and under constant agitation, showed to be suitable for this purpose.Os meios semi-sólidos são os mais utilizados em trabalhos de micropropagação, mas há indícios de que o estado físico dos meios de cultura influencia a multiplicação dos cultivos. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo para a multiplicação de material propagativo de batata em meio de cultura líquido. Explantes de batata da cultivar Eliza, com uma gema axilar, foram cultivados em seis diferentes meios de cultura, com (semi-sólido) ou sem (líquido) a adição do solidificante ágar. Após 21 dias de cultivo, o meio de cultura que proporcionou os melhores resultados para crescimento e taxa de multiplicação teve sua composição modificada com o objetivo de melhorar a eficiência de multiplicação de cinco cultivares em meio líquido. Foi também avaliada a necessidade de agitação dos cultivos em meio líquido. Houve ganho na eficiência de multiplicação in vitro da batata, quando se utiliza meio de cultura líquido. Os melhores resultados são obtidos quando o material é cultivado em meio constituído pelos sais de MS na concentração plena, acrescido de ácido pantotênico (5,0 mg L-1), tiamina (1,0 mg L-1), ácido giberélico (0,25 mg L-1) e sacarose (20 g L-1), sob agitação constante

Oil palm seeds tolerance to cryopreservation

O objetivo deste trabalho foi avaliar a tolerância de sementes de dendezeiro (Elaeis guineensis) à criopreservação. Cinco genótipos – CM589, C7201, C2528, C2001, C2501 – foram avaliados quanto à exposição ao nitrogênio líquido por sete dias. Os tratamentos foram repetidos três vezes e cada repetição foi formada por dez sementes. Cortes anatômicos foram realizados para comparação do efeito dos tratamentos nos embriões durante a germinação. A exposição ao nitrogênio líquido acelerou a germinação das sementes do genótipo CM589 e aumentou o potencial de germinação das sementes do genótipo C2528. A exposição ao nitrogênio líquido não teve efeito no genótipo C2501 e reduziu a germinação das sementes do genótipo C7201. A exposição ao nitrogênio líquido não interferiu na diferenciação e no desenvolvimento dos tecidos embrionários durante a germinaçãoThe aim of this work was to evaluate the oil palm (Elaeis guineensis) seed tolerance to cryopreservation. Five genotypes (CM589, C7201, C2528, C2001, and C2501) were evaluated with or without exposure to liquid nitrogen for seven days. Treatments were replicated three times with ten seeds per replicate. Serial anatomical cuts were made to compare the effect of treatments on zygotic embryos. For CM589 and C2528, the exposition to liquid nitrogen accelerated and increased seed germination, respectively. For C2501, liquid nitrogen had no effect. For C7201, liquid nitrogen reduced seed germination (90.7%) compared to the check (100%). Anatomically, the liquid nitrogen did not interfere with embryonic tissue differentiation or development during germinatio

IN VITRO GERMINATION AND PROPAGATION OF CEREJEIRA ( Amburana acreana (Ducke) A.C. Smith - FABACEAE)

A cerejeira ( Amburana acreana (Ducke) A.C. Smith) \ue9 uma esp\ue9cie arb\uf3rea nativa da Amaz\uf4nia Sul- Ocidental de grande import\ue2ncia madeireira, no entanto, encontra-se amea\ue7ada de extin\ue7\ue3o. A propaga\ue7\ue3o por cultura de tecidos desta esp\ue9cie \ue9 de grande import\ue2ncia devido \ue0s dificuldades de coleta de sementes. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a germina\ue7\ue3o in vitro e estabelecer protocolos para multiplica\ue7\ue3o e enraizamento in vitro de brotos de cerejeira. Para a germina\ue7\ue3o in vitro foram avaliadas diferentes concentra\ue7\uf5es salinas do meio MS e WPM (Woody Plant Medium). Foram utilizados segmentos nodais de pl\ue2ntulas germinadas in vitro para a multiplica\ue7\ue3o de brotos, onde se testaram diferentes concentra\ue7\uf5es de BAP (0; 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 mg.L-1) combinadas com ANA (0,1 mg.L-1). O enraizamento in vitro foi induzido com meio WPM/2, acrescido de 0,2 mg.L-1 de carv\ue3o ativado, suplementado com diferentes concentra\ue7\uf5es de AIB (0; 0,5; 1,0; 2,0 mg.L-1). O maior percentual de germina\ue7\ue3o in vitro foi obtido com o meio MS/2. A forma\ue7\ue3o do maior n\ufamero de brotos ocorreu com a concentra\ue7\ue3o de BAP de 4,0 mg.L-1. A forma\ue7\ue3o do maior n\ufamero de ra\uedzes ocorreu com 0,5 mg.L-1 de AIB. As pl\ue2ntulas foram aclimatizadas em casa de vegeta\ue7\ue3o com percentual de 54% de sobreviv\ueancia. A propaga\ue7\ue3o in vitro da cerejeira \ue9 uma tecnologia vi\ue1vel para a produ\ue7\ue3o de mudas apesar das dificuldades na sobreviv\ueancia de plantas em casa de vegeta\ue7\ue3o.Cerejeira ( Amburana acreana ) is a woody native tree species from south-western Amazon Region of a great importance and endangered. The propagation by tissue culture of this species is of a great importance because the difficulties of its seed collection. The purpose of this study was to evaluate the in vitro germination and to establish a protocol for in vitro multiplication and rooting. For in vitro germination, the salt concentrations of MS and WPM (Woody Plant Medium) were evaluated. For in vitro multiplication of shoots it was used nodal segments of in vitro seedlings. The propagation media were composed of WPM salts, supplemented with different BAP concentrations (0, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0 mg.L-1) and 0.1 mg L-1 of NAA. The in vitro rooting was induced in half strength WPM salts, plus 0.2 mg L-1 activated charcoal and supplemented with different IBA concentrations (0, 0.5, 1.0, 2.0 mg.L- 1). The highest percentage of in vitro germination was obtained in the MS/2 medium. The formation of largest number of shoots occurred with 4.0 mg L-1 BAP. The formation of a greater number of roots occurred with 0.5 mg L-1 of IBA. The plantlets were air-conditioned in a greenhouse with 54% of survival rate. The in vitro propagation of Cerejeira is a viable technology for the production of seedlings in spite of the difficulties in the survival of plants in the greenhouse

Sobrevivência de ápices caulinares de cana‑de‑açúcar após criopreservação por “droplet-vitrification”

The objective of this work was to evaluate the phytotoxicity of a plant vitrification solution (PVS2), and the survival of shoot tips of the sugarcane variety SP716949, after cryopreservation by droplet‑vitrification. Shoot tips were precultured for 24 hours in MS medium containing 0.3 mol L-1 sucrose, and exposed to PVS2 for 0, 20 or 30 min. Shoot tips were then immersed in liquid nitrogen. Thawing was fast in concentrated sucrose solution (1.2 mol L-1). PVS2 is a nontoxic to shoot tips, which in turn are sensitive to liquid nitrogen. The best results occurred when shoot tips were maintained for up to 20 min in PVS2 solution, before freezing, with 20% survival.O objetivo deste trabalho foi avaliar a fitotoxicidade da solução de vitrificação de plantas (PVS2) e a sobrevivência de ápices caulinares de cana‑de‑açúcar, variedade SP716949, após criopreservação por “droplet‑vitrification”. Ápices caulinares foram pré‑cultivados por 24 horas em meio MS com sacarose a 0,3 mol L-1 e expostos por 0, 20 ou 30 min a PVS2. Em seguida, os ápices foram mergulhados em nitrogênio líquido. O descongelamento em solução concentrada de sacarose (1,2 mol L-1) foi rápido. A PVS2 não tem efeito tóxico aos ápices que, no entanto, são sensíveis ao nitrogênio líquido. O melhor resultado ocorreu, quando os ápices foram mantidos por 20 min na solução PVS2, antes do congelamento, com 20% de sobrevivência