AVALIAÇÃO DO USO DE SANGUE EM PAPEL-FILTRO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS PARA O VÍRUS DA DOENÇA DE NEWCASTLE

O presente trabalho descreve a utilização de sangue total em papel-filtro para avaliação dos níveis de anticorpos específicos contra o vírus da doença de Newcastle (NDV) através da técnica de inibição da hemaglutinação (HI). Coletaram-se e analisaram-se por HI amostras de sangue de noventa e oito galinhas, com um histórico conhecido de vacinação contra o NDV HI. O sangue foi impregnado em papel-filtro Wathman n° 1 com 3cm2 e também coletado em tubos para a obtenção de soro. Armazenaram-se os papéis à temperatura ambiente e procedeu-se a sua análise num período de até quarenta e cinco dias. A sensibilidade, a es¬pecificidade, o valor preditivo positivo e o valor preditivo negativo do HI mediante o uso de papel-filtro, comparado com o HI em que se utilizou soro, foram de 89%, 73%, 76% e 87 %, respectivamente. Detectaram-se um índice de pre¬cisão de 80% e um coeficiente de correlação r = 0,81%. O título médio geométrico de anticorpos foi 33,1% e 33,6 para eluídos de papel-filtro e os soros, respectivamente. A asso¬ciação entre os dois métodos foi altamente significativa (p< 0.001) quando analisada pelo teste de Fisher. Os resultados indicam o potencial da utilização do sangue em papel-filtro como uma alternativa ao soro para detecção de anticorpos contra o NDV. PALAVRAS-CHAVES: Galinha, inibição da hemaglutinação, sorologia

Risk Factors Associated with the Presence of Viral Diseases in Domestic Poultry in the Southern Region of Rio Grande do Sul, Brazil

Background: The introduction of any infectious agent into an industrial or subsistence farm worries agribusiness owners in Brazil because it reduces product quality and increases treatment costs, although most diseases are untreatable, thus causing economic losses with morbidity and mortality. Therefore, an epidemiological survey of viral diseases associated with poultry was developed by performing a detailed description of the risk factors that may be related to existing diseases using domestic poultry sample data recorded in the Regional Diagnostic Laboratory (LRD) of College of Veterinary Medicine of the Federal University of Pelotas (UFPel), Rio Grande do Sul, Brazil, from 2000 to 2016.Materials, Methods & Results: Epidemiological and clinical-pathological data were collected and then compared with disease data by multivariate analysis using statistical EpiInfo version 6.04 and Microsoft Office Excel 2010 software. The frequencies and 95% confidence intervals (CI), association measures (odds ratio=OR and relative risk=RR), Chi-square test, and the results considered significant with a value of P ≤ 0.05 were described. A total of 410 samples of domestic poultry were tested, and the results showed 66 (16.1%) viral diseases. The following conditions were the most commonly found diseases in this study: Marek’s disease (42.4%), Infectious bursal disease (31.8%), Avian leukosis (16.6%), Avian pox (7.5%) and Avian infectious bronchitis (1.5%). In this article we discuss the most frequent viral diseases: Marek’s disease (DM) and Gumboro disease. It was also possible to conclude that birds with Marek's disease presented higher odds of developing nerve, tegumentary and locomotors signs (P ≤ 0.05).  As well as, more likely to present tumoriform lesions in the liver, spleen, kidneys and heart P ≤ 0.05, as well as lesions in the proventriculus, muscle lesions and in the sciatic nerve P ≤ 0.05. Laying poultry, backyard poultry production and young poultry constitute risk factors for DM (P ≤ 0.05).  The results showed that samples with mycotoxicoses were at higher risk of developing DM (P ≤ 0.05). Poultry from industrial system had a higher risk of developing Gumboro disease (P ≤ 0.05). Besides that, domestic poultry with Gumboro disease were more likely to develop signs of depression, nerve signals, tegumentary changes, bursitis, hepatomegaly, renal lesions and splenomegaly (P ≤ 0.05).Discussion: In this research we can observe the domestic poultry with DM presenting tumoriform lesions in several organs, this finding is common in this disease, because it is one of the most frequent viral diseases of neoplastic characteristic. The results show that young birds are a risk factor for DM. In fact, previous works already affirm young birds as being susceptible to disease in relation to adult birds. In this study, laying hens presented a risk factor for DM, however other authors also observed in cut birds or in both types of production. Industrial poultry are at higher risk for DM, this was also reported by other authors, because the disease is of high contagion and morbidity, industrial birds are under high density which facilitates the contact and dissemination of the virus among sick and susceptible birds. In this study, industrial poultry were a risk factor for Gumboro disease, however, other studies show that there is no difference between types of breeding and can also occur in backyard birds. Young poultry and laying hens are more susceptible, and the clinical signs found in the study are compatible with those described in the literature. Through this research on viral diseases, we conclude that our study may complement the already existing official data, since, in a research conducted in the same period, it did not identify the presence of viral diseases in the Southern of RS, but with our research it was possible to register this disease

Chemical characterization, antioxidant, cytotoxic, and antibacterial activities of Eugenia uniflora L. and Psidium cattleianum Sabine essential oils against Klebsiella pneumoniae and Acinetobacter baumannii/ Caracterização química, antioxidante, citotóxica e antibacteriana dos óleos essenciais de Eugenia uniflora L. e Psidium cattleianum Sabine contra Klebsiella pneumoniae e Acinetobacter baumannii

INTRODUCTION: Eugenia uniflora L. and Psidium cattleianum Sabine essential oils (EO) can be biologically active and serve as novel sources of antibiotics for Klebsiella pneumoniae and Acinetobacter baumannii bacteria.METHODS: The EO of E. uniflora L. (EOE) and P. cattleianum Sabine (EOP) were extracted from de leaves of the plants and chemically characterized by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The antioxidant potential was evaluated by the DPPH (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazyl-hydrate) technique and the cytotoxicity evaluated in mammalian VERO cell line by MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay. The antibacterial activity of EOE and EOP was assessed by the broth microdilution method.RESULTS: The major compounds of EOE were benzofuran (24.38%), germacrene B (20.12%), ?-elemene (9.33%) and ?-cubebene (8.55%), and for EOP were ?-pinene (24.25%), ?-caryophyllene (20.45%), and eucalyptol (10.43%). Both EO tested showed low antioxidant effect and dose-dependent cytotoxicity in VERO cell line. The EOE was less toxic for the mammalian cells with an IC50 (half maximal inhibitory concentration) index of 75.0 mg.mL-1. The EOP and EOE were more active against A. baumannii, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 14.0 and 56.0 mg.mL-1 and a minimal bactericide concentration (MBC) of 14.0 and 112.0 mg.mL-1, respectively.  CONCLUSIONS: Although EOE and EOP have low antioxidant and antibacterial activity against A. baumanni and K. pneumoniae new approaches can be applied to improve this effect in vivo.  

Efeito do extrato etanólico de própolis verde sobre a produção de anticorpos após imunização contra parvovírus canino (CPV) e coronavírus canino (CCoV)

Este estudo foi realizado para avaliar se extrato etanólico de própolis verde (EEP) pode interferir na produção de anticorpos específicos após imunização contra parvovírus (CPV) e coronavírus canino (CCoV). Camundongos foram vacinados com CPV e CCoV (0.75, 1.5 e 3 x 106 TCID50) com ou sem 400 μg/dose de EEP. Vinte e um dias após a terceira dose foi mensurado IgG sérica. A coadministração de EEP aumentou significativamente os níveis de IgG específica para o CPV em animais inoculados com a maior concentração do antígeno, e não teve influência sobre os níveis de anticorpos para CCoV. Os resultados indicam que o EEP tem ação imunomoduladora intimamente dependente do tipo e concentração do antígeno utilizado, sendo capaz de aumentar os níveis de anticorpos contra CPV.This study was designed to evaluate whether an ethanolic extract of green propolis (EEP) can interfere with production of specific antibodies after immunization against parvovirus (CPV) and canine coronavirus (CCoV). Mice were vaccinated with CPV and CCoV (0.75, 1.5 and 3 x 106 TCID50) with or without 400 μg/dose of the EEP. Twenty one days after the third dose was measured serum IgG. The co-administration of the EEP significantly enhanced serum specific IgG responses to CPV in animals inoculated with the highest concentration of the antigen, and had no influence on levels of antibodies to CCoV. The results indicate that the EEP has immunomodulatory action closely dependent on the type and concentration of antigen used, being able to increase the levels of antibodies to CPV

Diagnóstico positivo de bouba aviária em pomba doméstica no município de Pelotas, RS: relato de caso

A Bouba Aviária, também conhecida como Varíola Aviária, acomete aves, tanto domésticas, quanto selvagens. O presente trabalho demonstra um relato de caso acerca de uma Pomba doméstica (Columba livia) encontrada caída no chão nas dependências de um condomínio residencial de Pelotas com suspeita clínica de Bouba Aviária

Efeito do óleo essencial de Ocimum basilicum L. contra isolados clínicos de Klebsiella spp. produtores de carbapenemases (KPC)/ Effect of Ocimum basilicum L. essential oil against clinical isolates of Klebsiella spp. carbapenemase producers (KPC)

O controle de bactérias como Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemases (KPC) é bastante difícil e a busca por novos antibacterianos necessária. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade antibacteriana do óleo essencial de Ocimum basilicum L. (OEM), como alternativa terapêutica no controle de KPC e sua citotoxicidade em células de mamífero. Dessa forma, foram avaliados 48 isolados clínicos de Klebsiella spp. confirmados como K. pneumoniae através do gene dnaA, e avaliados quanto a produção de carbapenemase (gene blaKPC e teste de Hogde). O perfil de sensibilidade dos isolados foi avaliado frente a treze diferentes antimicrobianos. O OE foi testado em concentrações variando de 1,8 a 306,6 mg.mL-1 para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM), frente aos isolados de K. pneumoniae. Dos 48 isolados, 45 foram confirmados como K. pneumoniae e 15 isolados como positivos para a presença do gene blaKPC e teste de Hodge para presença da enzima carbapenemase. No teste de difusão em disco os antibacterianos meropenem e imipenem demonstraram o menor grau de resistência, enquanto as classes cefalosporinas e betalactâmicos apresentaram alta resistência. A CIM foi observada em concentrações variando de 3,6 a 131,4 mg.mL-1 nos isolados KPC, enquanto a CBM variou entre 3,6 a 306,6 mg.mL-1. O OEM demonstrou-se tóxico nas concentrações de CIM e CBM frente às células MDBK, contudo, alternativas como elaboração de nanoemulsões, podem diminuir sua citotoxicidade e potencializar sua ação antibacteriana. Os resultados obtidos são promissores e potenciais alternativas terapêuticas frente a este importante patógeno

Atividade do extrato etanólico e compostos de Origanum vulgare contra o virus da arterite equina

The equine arteritis virus (EAV) is responsible by an important respiratory and reproductive disease in equine populations and there is no specific antiviral treatment available. The objective of this study was to investigate the activity of an ethanolic crude extract of Origanum vulgare (EEO) and of isolated compound caffeic acid, p-coumaric acid, rosmarinic acid, quercetin, luteolin, carnosol, carnosic acid, kaempferol and apigenin against EAV. The assays were performed using non-cytotoxic concentrations. The antiviral activity was monitored initially by cytopathic effect inhibition (CPE) assay in RK13 cells in the presence or absence of EEO. Pre-incubated cells with EEO were also examined to show prophylactic effect. Direct viral inactivation by EEO and isolated compounds was evaluated by incubation at 37°C or 20°C. After the incubation period, the infectivity was immediately determined by virus titrations on cell cultures and expressed as 50% tissue culture infective dose (TCID50)/100 µL. There was significant virucidal activity of EEO and of the compounds caffeic acid, p-coumaric acid, quercetin, carnosic acid and kaempferol. When EEO was added after infection, EEO inhibited the virus growth in infected cells, as evidenced by significant reduction of the viral titre. The results provide evidence that the EEO exhibit an inhibitory effect anti-EAV. Among the main compounds evaluated, caffeic acid, p-coumaric acid, carnosic acid, kaempferol and mainly quercetin, contributed to the activity of EEO. EEO may represent a good prototype for the development of a new antiviral agent, presenting promising for combating arteriviruses infections.O virus da arterite equine (EAV) é responsável por uma importante doença respiratória e reprodutiva na população de equinos e não há tratamento antiviral específico disponível. O objetivo desse estudo foi investigar a atividade de um extrato etanólico de Origanum vulgare (EEO) e dos compostos isolados ácido caféico, ácido p-cumarico, ácido rosmarínico, quercetina, luteolina, carnosol, ácido carnósico, campferol e apigenina contra o EAV. Os ensaios foram realizados com concentrações não citotóxicas. A atividade antiviral foi monitorada inicialmente por um ensaio de inibição de efeito citopático (CPE) em células RK13 na presença ou ausência do EEO. Células pré-incubadas com o EEO foram também examinadas para a presença de efeito profilático. Inativação direta do EAV pelo EEO e pelos compostos isolados foi avaliada mediante incubação a 37°C ou 20°C. Após o período de incubação, a infectividade foi imediatamente determinada por titulação viral em cultivo celular sendo expresso como dose infectiva a 50% (TCID50)/100 µL. Houve significativa atividade virucida do EEO e dos compostos ácido caféico, ácido p-cumarico, quercetina, ácido carnósico e campferol. Quando o EEO foi adicionado após a infecção, o EEO inibiu a replicação do vírus nas células infectadas, o que foi evidenciado pela redução significativa do título viral. Os resultados fornecem evidências de que o EEO possui efeito anti-EAV. Entre os principais compostos presentes avaliados, ácido caféico, ácido p-cumarico, ácido carnósico, campferol e, principalmente, quercetina, contribuíram para a atividade antiviral do extrato. O EEO pode representar um bom protótipo para o desenvolvimento de um novo agente antiviral, sendo promissor para combater infecções por arterivírus