A rapid, novel High Performance Liquid Chromatography method for the purification of Glutathione S-transferase: An application to the human placental enzyme

A simple High Performance Liquid Chromatography procedure is detailed for the purification of Glutathione S-transferase. The human placental transferase was used to assess its potential. Unlike conventional methods of purification, the procedure is rapid and resolution of the various forms is achieved in less than 20 min. Since recovery is essentially complete, it is possible to isolate different minor forms. Three forms, one major and two minor, were separated. The major form represented about 97% of the total recovered activity and exhibited a specific activity of 254.94 [mu]moles/min/mg protein with a purification of 1342-fold. Electrophoresis of the major form revealed the presence of a single band, suggesting homogeneity.Peer Reviewedhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/25703/1/0000257.pd

Cellular Effects of HER3-Specific Affibody Molecules

Recent studies have led to the recognition of the epidermal growth factor receptor HER3 as a key player in cancer, and consequently this receptor has gained increased interest as a target for cancer therapy. We have previously generated several Affibody molecules with subnanomolar affinity for the HER3 receptor. Here, we investigate the effects of two of these HER3-specific Affibody molecules, Z05416 and Z05417, on different HER3-overexpressing cancer cell lines. Using flow cytometry and confocal microscopy, the Affibody molecules were shown to bind to HER3 on three different cell lines. Furthermore, the receptor binding of the natural ligand heregulin (HRG) was blocked by addition of Affibody molecules. In addition, both molecules suppressed HRG-induced HER3 and HER2 phosphorylation in MCF-7 cells, as well as HER3 phosphorylation in constantly HER2-activated SKBR-3 cells. Importantly, Western blot analysis also revealed that HRG-induced downstream signalling through the Ras-MAPK pathway as well as the PI3K-Akt pathway was blocked by the Affibody molecules. Finally, in an in vitro proliferation assay, the two Affibody molecules demonstrated complete inhibition of HRG-induced cancer cell growth. Taken together, our findings demonstrate that Z05416 and Z05417 exert an anti-proliferative effect on two breast cancer cell lines by inhibiting HRG-induced phosphorylation of HER3, suggesting that the Affibody molecules are promising candidates for future HER3-targeted cancer therapy

Glutathione S-transferase activity during pregnancy in the mouse: effects of trans-stilbene oxide pretreatment

Peer Reviewedhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/24665/1/0000078.pd

Massaframställningsprocessens påverkan på egenskaper hos nanopartiklar av lignin

Lignin valorization is a key component of the total utilization of biomass in the biorefinery industry. Lignin has seen some use in several different applications, but a breakthrough is still yet to happen, and there is still a need to find more areas where lignin can be used as an alternative feedstock or as the main component. Lignin nanoparticles (LNPs) could be an alternative route towards lignin valorization offering many areas of application. However, research around LNPs still has to overcome many challenges, primarily related to the complex structure of lignin, with composition and structure of lignin depending on its botanical origin and on the pulping process used to isolate the lignin from other components in biomass. This study investigates how spruce lignin originating from Kraft and Organosolv pulping will affect the properties of lignin nanoparticles. Particles from organosolv spruce lignin were prepared using a solvent exchange method with acetone/water as solvent and water as antisolvent. This resulted in spherical LNPs with hollow centers, sizes ranging from 104.6- 270.3 depending on initial lignin concentration and average zeta-potential of -35mV. Comparing Organosolv LPN’s with Kraft LNPs produced with the same experimental procedure, reviled that Organosolv LNPs were larger in and had lower absolute zeta potential, presumably due to the kraft lignin having higher phenolic-OH content. Furthermore, a larger comparison is made with LNPs from previous studies which indicated that LNP properties are further dependant Mw of lignin raw material, phenolic-OH content, and the method applied to produce the particles. In conclusion, this study proves that the pulping process used to isolate lining will affect the properties of NPs. But to strengthen and generalize this conclusion beyond the limitations of this study, more experimental data are needed, to further investigate the relationship between LNP properties and the properties of lignin raw material.En av utmaningarna för framtidens bioraffinaderier är att fullständigt utnyttja samtliga komponenter av råvaran. Historiskt sett har cellulosa varit den mest värdefulla komponenten av biomassan medan lignin har klassats som en biprodukt och har därför primärt bränts som bränsle vid framställning av pappersmassa. Även om lignin produceras på industriell skala saknas idag värdeskapande applikationsområden där lignin kan utnyttjas ur ett ekonomiskt hållbart perspektiv. Ett alternativ till valorisering av lignin är att använda det som råmaterial för framställande av nanopartiklar , vilket är ett relativ nytt område med stor potential framförallt inom biomedicin. Dock kvarstår en del utmaningar i forskningen runt lignin nanopartiklar. Framförallt relaterat till lignins komplexa och inhomogena struktur, som varierar beroende på botaniskt ursprung och vilken typ av massaframställningsprocess som används för att isolera ligninet från biomassan. Den här studien undersöker hur granlignin från två olika massaframställningsprocesser, Organosolv- och Kraftprocessen, påverkar egenskaper hos NP av lignin. Under den experimentella delen av arbetet framställdes NP från Organosolv granlignin, vilket resulterade i sfäriska och ihåliga partiklar som varierade i storlek mellan 104.5–270.3 nm, beroende på den initiala lignin koncentrationen, samt en genomsnittlig zeta potential kring -35 mV. Egenskaperna hos Organosolv nanopartiklarna som jämfördes med nanopartiklar av Kraflignin som producerats med samma metod. Slutsatsen drogs att organosolv partiklar var större och hade lägre absolut zeta-potential. Vilket troligtvis kan förklaras med den betydligt högre halten av fenoliska-OH enheter i Kraft ligninet. En bredare jämförelse med tidigare studier som producerat olika lignin nanopartiklar visar dessutom att molekylvikten, fenolisk-OH halt och produktionsmetoden, är bidragande faktorer till lignin nanopartiklars egenskaper. Sammanfattnings visar den här studien att den massaframställningsprocess som används för att isolera lignin kommer påverka egenskaperna hos lignin nanopartiklar. Men för att kunna generalisera och stärka slutsatsen krävs dock utökad experimentella, för att vidare undersöka hur lignin nanopartiklars egenskaper beror på egenskaperna hos ligninet som använts för att producera partiklarna

Massaframställningsprocessens påverkan på egenskaper hos nanopartiklar av lignin

Lignin valorization is a key component of the total utilization of biomass in the biorefinery industry. Lignin has seen some use in several different applications, but a breakthrough is still yet to happen, and there is still a need to find more areas where lignin can be used as an alternative feedstock or as the main component. Lignin nanoparticles (LNPs) could be an alternative route towards lignin valorization offering many areas of application. However, research around LNPs still has to overcome many challenges, primarily related to the complex structure of lignin, with composition and structure of lignin depending on its botanical origin and on the pulping process used to isolate the lignin from other components in biomass. This study investigates how spruce lignin originating from Kraft and Organosolv pulping will affect the properties of lignin nanoparticles. Particles from organosolv spruce lignin were prepared using a solvent exchange method with acetone/water as solvent and water as antisolvent. This resulted in spherical LNPs with hollow centers, sizes ranging from 104.6- 270.3 depending on initial lignin concentration and average zeta-potential of -35mV. Comparing Organosolv LPN’s with Kraft LNPs produced with the same experimental procedure, reviled that Organosolv LNPs were larger in and had lower absolute zeta potential, presumably due to the kraft lignin having higher phenolic-OH content. Furthermore, a larger comparison is made with LNPs from previous studies which indicated that LNP properties are further dependant Mw of lignin raw material, phenolic-OH content, and the method applied to produce the particles. In conclusion, this study proves that the pulping process used to isolate lining will affect the properties of NPs. But to strengthen and generalize this conclusion beyond the limitations of this study, more experimental data are needed, to further investigate the relationship between LNP properties and the properties of lignin raw material.En av utmaningarna för framtidens bioraffinaderier är att fullständigt utnyttja samtliga komponenter av råvaran. Historiskt sett har cellulosa varit den mest värdefulla komponenten av biomassan medan lignin har klassats som en biprodukt och har därför primärt bränts som bränsle vid framställning av pappersmassa. Även om lignin produceras på industriell skala saknas idag värdeskapande applikationsområden där lignin kan utnyttjas ur ett ekonomiskt hållbart perspektiv. Ett alternativ till valorisering av lignin är att använda det som råmaterial för framställande av nanopartiklar , vilket är ett relativ nytt område med stor potential framförallt inom biomedicin. Dock kvarstår en del utmaningar i forskningen runt lignin nanopartiklar. Framförallt relaterat till lignins komplexa och inhomogena struktur, som varierar beroende på botaniskt ursprung och vilken typ av massaframställningsprocess som används för att isolera ligninet från biomassan. Den här studien undersöker hur granlignin från två olika massaframställningsprocesser, Organosolv- och Kraftprocessen, påverkar egenskaper hos NP av lignin. Under den experimentella delen av arbetet framställdes NP från Organosolv granlignin, vilket resulterade i sfäriska och ihåliga partiklar som varierade i storlek mellan 104.5–270.3 nm, beroende på den initiala lignin koncentrationen, samt en genomsnittlig zeta potential kring -35 mV. Egenskaperna hos Organosolv nanopartiklarna som jämfördes med nanopartiklar av Kraflignin som producerats med samma metod. Slutsatsen drogs att organosolv partiklar var större och hade lägre absolut zeta-potential. Vilket troligtvis kan förklaras med den betydligt högre halten av fenoliska-OH enheter i Kraft ligninet. En bredare jämförelse med tidigare studier som producerat olika lignin nanopartiklar visar dessutom att molekylvikten, fenolisk-OH halt och produktionsmetoden, är bidragande faktorer till lignin nanopartiklars egenskaper. Sammanfattnings visar den här studien att den massaframställningsprocess som används för att isolera lignin kommer påverka egenskaperna hos lignin nanopartiklar. Men för att kunna generalisera och stärka slutsatsen krävs dock utökad experimentella, för att vidare undersöka hur lignin nanopartiklars egenskaper beror på egenskaperna hos ligninet som använts för att producera partiklarna

Kan ett utvecklande ledarskap dämpa anställningsotrygghetens negativa hälsoeffekter?

Anställningsotrygghet har tidigare kopplats till olika former av ohälsa bland anställda. Syftet med föreliggande tvärsnittsstudie var att studera sambanden mellan anställningsotrygghet (kvantitativ, kvalitativ) och ohälsovariablerna utbrändhet (utmattning, distansering) och psykisk ohälsa samt huruvida ett utvecklande/transformativt ledarskap modererar dessa hypotetiska samband. Deltagare i studien var fackligt anslutna akademiker. Analyserna visar att kvalitativ anställningsotrygghet är en kraftfullare prediktor av ohälsa jämfört med kvantitativ anställningsotrygghet samt att utvecklande/transformativt ledarskap modererar sambanden mellan kvantitativ anställningsotrygghet och ohälsa

Analysis of Data from a Smart Home Research Environment

This thesis projects presents a system for gathering and using data in the context of a smarthome research enviroment. The system was developed at the Human Health and ActivityLaborty, H2Al, at Luleå University of Technology and consists of two distinct parts. First, a data export application that runs in the H2Al enviroment. This application syn-chronizes data from various sensor systems and forwards the data for further analysis. Thisanalysis was performed in the iMotions platform in order to visualize, record and export data.As a delimitation, the only sensor used was the WideFind positional system installed at theH2Al. Secondly, an activity recognition application that uses data generated from the iMotionsplatform and data export application. This includes several scripts which transforms rawdata into labeled datasets and translates them into activity recognition models with the helpof machine learning algorithms. As a delimitation, activity recognition was limited to falldetection. These fall detection models were then hosted on a basic server to test accuracyand to act as an example use case for the rest of the project. The project resulted in an effective data gathering system and was generally successful asa tool to create datasets. The iMotions platform was especially successful in both visualizingand recording data together with the data export application. The example fall detectionmodels trained showed theoretical promise, but failed to deliver good results in practice,partly due to the limitations of the positional sensor system used. Some of the conclusions drawn at the end of the project were that the data collectionprocess needed more structure, planning and input from professionals, that a better positionalsensor system may be required for better fall detection results but also that this kind of systemshows promise in the context of smart homes, especially within areas like elderly healthcare.  

Anställningsotrygghet, utbrändhet och psykisk ohälsa samt den modererande effekten av utvecklande ledarskap

Anställningsotrygghet har inom tidigare forskning framträtt som en förhållandevis kraftfull stressor som kan orsaka såväl psykisk som fysisk ohälsa. Samtidigt har det framkommit att individer drabbas olika hårt beroende på en rad faktorer. På senare år har transformativt, motsvarande utvecklande, ledarskap kopplats till välmående och hälsa bland anställda. Syftet med föreliggande tvärsnittsstudie, beståendes av fackligt anslutna akademiker (N=468), var att studera sambanden mellan anställningsotrygghet (kvantitativ, kvalitativ) och ohälsovariablerna utbrändhet (utmattning och distansering) och psykisk ohälsa samt huruvida utvecklande ledarskap (UL) modererar dessa hypotetiska samband. Analyserna visar att kvalitativ anställningsotrygghet är en kraftfullare prediktor av ohälsa jämfört med kvantitativ anställningsotrygghet samt att UL modererar sambanden mellan kvantitativ anställningsotrygghet och ohälsa. Gruppen som rapporterade att deras närmaste chef utövar låga nivåer av UL hade kraftigast samband mellan kvantitativ anställningsotrygghet och såväl psykisk ohälsa som utmattning. Effekten var dock mindre uttalad för utfallsvariabeln distansering