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    O efeito coadjuvante dos receptores semelhantes a toll ( TLRs) na estimulação de macrófagos murinos infectado com leishmania amazonesis

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    Dissertação de Mestrado apresentada ao programa de pós-­graduação em Biologia Experimental stricto sensu da Universidade Federal de Rondônia para obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. orientador (a): Prof.ª Drª. Giselle Martins GonçalvesAs leishmanioses são doenças que ocorrem em diversos países localizados nos trópicos e subtrópicos do Velho e Novo mundo que constituem um importante problema de saúde pública em diversos continentes como Ásia, Europa, África e as Américas. No Brasil, a Leishmaniose Tegumentar Americana consiste em uma doença de elevada prevalência causada por diferentes agentes etiológicos do gênero Leishmania e transmitida por insetos vetores. O Leishmania é considerado um parasita do sistema fagocítico mononuclear (SFM), tendo como principal célula hospedeira em mamíferos, o macrófago. Os receptores semelhantes a toll (TLR) são uma classe de receptores que fazem o reconhecimento de diversos padrões moleculares que possuem propriedades antigênicas. Uma vez que os atuais tratamentos costumam produzir diversos efeitos adversos e levam ao desenvolvimento de resistência parasitária com o uso prolongado, dificultando a adesão ao tratamento, é fundamental, que se explore novas estratégias terapêuticas para o controle da infecção por Leishmania, inclusive com o auxílio do sistema imunológico do hospedeiro, para que uma resposta imunológica mais eficiente possa combater o parasita. Assim, o objetivo geral deste trabalho foi avaliar o efeito coadjuvante dos receptores semelhantes a toll (TLR) na estimulação de macrófagos murinos infectados com L. amazonensis. Macrófagos de linhagem J774.A1 foram utilizados para avaliar a citotoxicidade dos agonistas de TLR (LPS, Pam3CSK4 e CL075) e Glucantime®. Para avaliar o efeito sobre o crescimento/sobrevida das formas amastigotas foram utilizados macrófagos peritoneais infectados com L. amazonensis incubados por 24h ou 72h (LPS: 25ng/mL, Pam3CSK4: 25ng/mL, CL075: 50ng/mL) e o sobrenadante foi recuperado para dosar a quantidade de citocinas (TNF-­alfa, IL-­10 e IL-­12) pelo método ELISA. O Glucantime® produziu citotoxicidade em todas as concentrações testadas (23 a 39% de morte em células J774.A1). Os ligantes de TLR não produziram toxicidade significativa quando utilizados isoladamente ou em associação ao Glucantime®. O LPS, Pam3CSK4 e CL075 diminuíram o número de amastigotas intracelulares e o índice fagocítico e causaram alteração na morfologia dos parasitos fagocitados quando comparadados com o controle (MØ infectados sem tratamento) após 24h e 72h. Resultado semelhante foi observado quando associados ao Glucantime®. Os ligantes LPS e CL075 induziram aumento nos níveis de TNF-­alfa após 72h, mas não houve produção significativa de outras citocinas após os dois tempos observados. Esses resultados confirmam dados da literatura que mostram um papel importante dos TLR na infecção por parasitas do gênero Leishmania. Todavia, faz-­se necessária a realização de estudos posteriores para avaliar a contribuição dos TLR na infecção por L. amazonensis e possíveis aplicações desses ligantes

    Reconhecer ou não reconhecer títulos estrangeiros? A questão posta aos tribunais brasileiros

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    Resumo: O artigo tem como objetivo revelar o posicionamento do poder judiciário frente aos processos de reconhecimento de títulos de pós-graduação estrangeiros. Justifica-se a importância dessa temática, em virtude do movimento crescente de estudantes brasileiros que buscam reconhecer seus títulos de pós-graduação. Os embates entre os interessados no reconhecimento dos títulos e a recusa ou demora das instituições em promover o processo, ainda considerando a letargia do legislativo e do executivo em promover soluções, implicaram em diversos processos de interpelação junto ao judiciário. Esses processos chegam às instâncias recursais máximas do judiciário brasileiro, o Superior Tribunal de Justiça (STJ) e o Supremo Tribunal Federal (STF). Para atender ao objetivo proposto, adotou-se como procedimentos metodológicos a análise documental, tendo como fonte primária as decisões emanadas dos dois tribunais, disponibilizadas nos sítios eletrônicos oficiais. Foi possível observar que das dezoito decisões encontradas no STJ e das dez ações no STF não houve interferência do judiciário, que indeferiu todos os pedidos. Inclusive as quatro Ações Diretas de Inconstitucionalidade julgadas pelo STF foram acatadas, o que levou à declaração de inconstitucionalidade das legislações estaduais que garantiam a promoção na carreira dos servidores por meio de obtenção desses títulos. Conclui-se que o judiciário ao ser interpelado sobre o reconhecimento de títulos estrangeiros responde dando às próprias universidades esse direito. E, portanto, cabe a elas, agora, decidir.  

    Expressão de receptores "toll-like" no músculo gastrocnêmio de camundongos induzida pela peçonha de Bothrops jararacussu e por duas fosfolipases A2 (BthTX-I e BthTX-II) isoladas

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    Dissertação apresentada ao programa de Pós- Graduação em Biologia Experimental/UNIR como requisito para a obtenção do título de mestre em Biologia Experimental. Orientadora: Drª. Giselle Martins Gonçalves Co-orientadora: Drª. Juliana Pavan ZulianiOs acidentes ofídicos se caracterizam como um grave problema de saúde pública devido a sua alta incidência, afetando principalmente pessoas de baixa renda que vivem em áreas isoladas ou de difícil acesso a unidades de tratamento, podendo ocasionar assim, incapacidade do membro atingido, amputações ou em casos mais graves a morte do indivíduo. No Brasil, as serpentes do gênero Bothrops, são causadoras de 90% dos envenenamentos, sendo a Bothrops jararacussu, uma das que mais se destaca por inocular grandes quantidades de peçonha na sua presa provocando ações miotóxicas, proteolíticas, coagulantes e hemorrágicas. Dados na literatura mostram que as fosfolipases A2 isoladas de toxinas de serpentes do gênero Bothrops estão envolvidas na resposta inflamatória local. No entanto, os mecanismos pelos os quais as toxinas de serpentes desencadeiam esse processo, ainda não foram elucidados. Os receptores Toll-Like (TLRs) são proteínas transmembrana que reconhecem padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs), ou ainda, padrões moleculares associados a danos (DAMPs). Após esse reconhecimento, é ativada uma cascata de sinalização que resulta na produção de citocinas proinflamatórias e consequente resposta imune inata. Dessa forma, a proposta deste trabalho foi estudar a participação de diferentes TLRs durante o processo inflamatório local induzido pela peçonha e duas fosfolipases A2 isoladas da serpente B. jararacussu. Para isso, doses sub-letais de peçonha de B. jararacussu, ou BthTX-I ou BthTX-II foram aplicados por via i.m em modelos murinos. A atividade miotóxica foi avaliada por análise histológica e pela quantificação dos níveis plasmáticos de CKtotal. A produção das citocinas pró-inflamatórias TNF-α e IL-1β foi dosada do tecido muscular e do plasma por método imunoenzimático – ELISA. Foi realizada a quantificação da expressão gênica dos TLRs 2, 4, 5 e 9 nos tecidos pelo método da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RTq-PCR). De acordo com os resultados, pode-se observar que a peçonha e suas toxinas provocaram alterações teciduais caracterizando mionecrose e infiltrado neutrofílico; também induziram a um significativo aumento de CK na corrente sanguínea dos murinos; assim como, levaram a um aumento de TNF-α e IL-1β nos animais testados quando comparados ao controle. Ainda, os resultados apontaram importante aumento na expressão dos TLR2 e TLR4. A participação desses receptores na inflamação provocada pela peçonha de B.jararacussu e suas fosfolipases sugere que os TLRs são importantes alvos para o desenvolvimento de futuras terapias no que diz respeito a inflamação provocada pelos envenenamentos ofídicos ou por fosfolipases A2 miotóxicas

    Estudo da lesão renal aguda (LRA) secundária à SEPSE por meio do modelo experimental murino de ligação e perfusão do ceco (CLP) / Study of acute kidney injury (LRA) second to SEPSIS through the experimental murine cecum binding and perfusion model (CLP)

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    A lesão renal aguda (LRA) é uma síndrome definida pela diminuição, em horas a dias, da taxa de filtração glomerular (TFG), o que resulta num considerável desequilíbrio hidroeletrolítico. Sua fisiopatologia gira em torno de um processo inflamatório que pode ser desencadeado, principalmente, por duas etiologias distintas: isquemia e sepse. Esta última é o objetivo de estudo deste trabalho. Para isso, administrou-se anestesia de Ketamina-Xilazina em camundongos (230ul da solução final para cada animal) e, logos após, utilizou-se a técnica de ligação e perfusão do ceco (CLP) a fim de induzir sepse nos animais do grupo experimental. Para isso, com uma linha cirúrgica, realizou-se a ligação desta região e, com o auxílio de uma agulha 23G, realizaram-se três furos no ceco de cada camundongo. Então, o abdômen foi fechado, os animais foram mantidos aquecidos e foram observados até a completa recuperação da anestesia.  As coletas de sangue dos camundongos (cerca de 600 uL da aorta abdominal de cada indivíduo) foram realizadas, com exceção do grupo normal, em três tempos distintos: 24h, 48h e 72h. Em seguida, realizaram-se as dosagens bioquímicas dos seguintes componentes: ureia (via método colorimétrico) e creatinina (via método de Jaffé modificado). Os resultados desses exames revelaram alterações desses dois principais marcadores da lesão renal aguda. Via análises estatísticas, observaram-se que as alterações dos valores de creatinina só tiveram associação causal com a sepse nas coletas de 48h. Enquanto isso, a dosagem de ureia não teve associação causal com nenhum caso de sepse nos três tempos de coleta. Logo após, realizou-se a investigação microbiológica, via coleta de material da cavidade abdominal e da região peritoneal, para verificar quais espécies bacterianas são encontradas na sepse polimicrobiana desenvolvida nessa população de animais estudada. Observou-se, em todas as amostras de 48h que sofreram sepse, presença da bactéria Escherichia coli que, em consonância com a literatura científica pesquisada, é o principal patógeno presente em casos de sepse. Assim sendo, por intermédio deste trabalho, evidencia-se a necessidade de existência de mais estudos que tenham o objetivo de elucidar os processos fisiopatológicos envolvidos na lesão renal aguda secundária à sepse

    NATAÇÃO INFANTIL: EFEITOS NA FASE DO DESENVOLVIMENTO MOTOR: UMA PERCEPÇÃO DOS PAIS.

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    O presente estudo buscou identificar os benefícios da natação para o desenvolvimento motor infantil. Para tanto, foi realizada uma pesquisa de campo de cunho quali-quanti, com recorte transversal, onde inicialmente foi feito um apanhado bibliográfico sobre a temática em questão, com finalidade de dar subsídio metodológico para a pesquisa, em seguida aplicado um questionário junto aos pais de crianças de 3 a 7 anos praticantes de natação no sentido de que se perceberam mudanças no sistema motor dos filhos. A maioria dos pais disseram que houve melhora na coordenação motora geral dos filhos e com isso, podemos concluir que a natação proporciona evolução no aspecto motor das crianças nessa fase de desenvolvimento

    ÓBITOS NEONATAIS NO MUNICÍPIO DE SÃO LUÍS: CAUSAS BÁSICAS E FATORES ASSOCIADOS AO ÓBITO NEONATAL PRECOCE NEONATAL / DEATH IN THE CITY OF SÃO LUÍS: CAUSES AND FACTORS ASSOCIATED WITH EARLY NEONATAL DEATH

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    ResumoIntrodução: Apesar de a taxa de mortalidade infantil no Brasil ter diminuído significativamente, o período neonatal ainda concentrao maior número de óbitos. Esta taxa, porém, é considerada sensível a ações dirigidas à qualificação da atenção prestada àmulher e ao recém-nascido. Objetivo: Analisar os óbitos neonatais do município de São Luís (MA). Métodos: Estudo descritivo eanalítico transversal, quantitativo. Os dados foram obtidos das declarações de óbito de Julho/2012 a Junho/2014 e analisadosno Stata 12. Resultados: Foram encontrados 410 óbitos neonatais, 78,5% precoces e 21,5%, tardios. A taxa de mortalidadeneonatal foi de 11,6/1000 nascimentos e a neonatal precoce de 9,1/1000 nascimentos. As causas mais frequentes foram respiratórias(32,7%), sepse (25,4%) e malformações (8,0%). Foi encontrada associação entre raça/cor parda com óbito neonatalprecoce. O Muito Baixo Peso ao Nascer mostrou associação limítrofe como risco para óbito precoce, assim como a escolaridadematerna entre 8 e 11 anos. A escolaridade entre 1 e 3 anos se mostrou como fator de proteção para óbito precoce. Conclusões:Dentre as causas de óbito, as respiratórias e as mortes por sepse se mostraram as mais frequentes, possivelmente por estaremligadas à prematuridade. Quanto aos óbitos precoces, a associação com raça/cor parda, como risco, provavelmente apontapara influência de fatores sociais. A associação com baixa escolaridade, como proteção, pode estar ligada ao fato de essas mãesterem tido pré-natal de menor qualidade, favorecendo a ocorrência de restrição de crescimento fetal e, assim, havendo nascimentode crianças cujo desfecho fatal tenha se postergado.Palavras-chave: Mortalidade Infantil. Mortalidade Neonatal. Causas de Morte. Fatores de risco.AbstractIntroduction: Despite the infant mortality rate in Brazil having a significant decrease, the neonatal period still concentrates mostnumber of deaths. This rate, however, is sensitive to actions directed to the qualification of the care provided to the woman and thenewborn. Objective: Analyze the neonatal deaths in the city of São Luís, Maranhão, Brazil. Methods: Quantitative, descriptive andtransversal analytic study. The data was obtained from the death certificates from July/2012 to July/2014 and analysed in Stata12. Results: In this study, 410 neonatal deaths were found, being 78,5% early deaths and 21,5%, late. The mortality rate wasfound to be 11,6/1000 births and the early neonatal death rate, in 9,1/1000 births. The most frequent causes were respiratory,(32,7%), sepsis (25,4%) and malformations (8,0). It was found association between brown skin color and early neonatal death.Very Low Birth Weight showed limitrophe association as a risk for early death, as maternal schooling between 1 to 3 years showeditself as a protection factor to early death. Conclusions: The respiratory causes and the deaths from sepsis were the most frequentcauses of death, possibly for being associated to prematurity. As for the early deaths, the association with brown skin color,as a risk, probably points out to the influence of social factors. The association with low schooling, as a protection, may beexplained by the fact that perhaps those mothers have less intellectual advantage, therefore they might have had a poor prenatalcare, thus being more likely to occur fetal growth restriction that in some way might have collaborated to delaying their death.Keywords: Infant Mortality. Neonatal Mortality. Cause of death. Risk factors

    PREFERENCIA DE MICROHÁBITAT Y ESTACIONALIDAD DE MONOGENEOS BRANQUIALES DE LA TILAPIA DEL NILO CULTIVADA EN EL SURESTE DE BRASIL

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    Few studies have been done to evaluate the monogenean microhabitat preference. This study evaluated the monogenean distribution among different gill arches of Nile tilapia Oreochromis niloticus and seasonality. A total of 89 fish were captured in a pond located in Chapecó, Santa Catarina, for parasitological analysis. After fish euthanasia, the gill arches were removed, separated from the most external to the most internal and named as I, II, III and IV. Transparency, pH, oxygen, temperature, alkalinity, conductivity, ammonia, iron, orthophosphate, sulfide, nitrite and nitrate of water pond were measured. In spring 2008 the mean abundances of the monogeneans (Scutogyrus longicornis, Cychlidogyrus sclerosus, C. thurstonae and C. tilapiae) in the arches I, II, III and IV were, respectively, 11.45, 14.45, 13.8, 13.15, in summer 2008 theywere 13.12, 12.25, 14.94, 21.53, in summer 2009 they were 2.75, 3.25, 2.45, 2.45, in autumn 2009 they were 13.44, 18.78, 11.78, 9.22 and in winter 2009 they were 0.35, 0.5, 0.3, 0.5. Monogenean preference for microhabitat in the gills of farmed Nile Tilapia was not observed. A significant increase of parasites in spring and summer 2008 and autumn 2009 was observed. The highest number of parasites coincided with seasons of high water temperature. The lack of microhabitat preference among the gill arches suggest homogenous distribution of parasites combined with water quality parameters.Pocos estudios han sido hechos para evaluar la preferencia por el microhabitat de monogenea. Este estudio evaluó la distribución y estacionalidad de monogenea entre los diferentes arcos branquiales de tilapia del Nilo. Un total de 89 peces fueron capturados en una laguna en la ciudad de Chapecó, Santa Catarina, para el análisis parasitológico. Después de la eutanasia de los peces, fueron extraídos los arcos branquiales separadamente a partir de la región externa hasta la interna y numerados como I, II, III e IV. Fueron evaluadas la transparencia del agua, el pH, el oxigeno disuelto, la temperatura, la alcalinidad, la conductividad, el amonio, el hierro, el ortofosfato, el sulfato, el nitrito y el nitrato. En la primavera de 2008 las abundancias promedio de monogenea (Scutogyrus longicornis, Cychlidogyrus sclerosus, C. thurstonae y C. tilapiae) en los arcos I, II, III y IV fueron, respectivamente, 11,45; 14,45; 13,8; 13,15; en el verano de 2008 de 13,12; 12,25; 14,94; 21,53; en el verano de 2009 de 2,75; 3,25; 2,45; 2,45; en el otoño de 2009 de 13,44; 18,78; 11,78; 9,22 y en el invierno de 2009 de 0,35; 0,5; 0,3; 0,5. No fue observada preferencia por monogenea por el microhabitat en las branquias de la tilapia del Nilo en cultivo. Fue observado un aumento significativo de los helmintos en la primavera y verano de 2008 y otoño de 2009. El mayor número de parásitos coincidió con las estaciones de mayor temperatura del agua. La falta de preferencia por microhabitat entre los arcos branquiales sugiere una distribución homogénea de los parásitos combinados con los parámetros de calidad de agua

    Design Thinking como ferramenta para o público interno das empresas

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    Este artigo aborda o uso do Design Thinking como ferramenta de aproximação e interação entre empresa e colaboradores. A metodologia é explorada como um processo interno de inovação organizacional. O uso de representações visuais, como tabela e mapa, contextualizam as ferramentas de Design Thinking sob o escopo da gestão de pessoas. Nesta abordagem, o público interno é exposto como primeiro cliente da empresa e agente estratégico para promoção da inovação. Dessa forma, os colaboradores são considerados os clientes mais próximos da marca da organização, contribuindo para o desenvolvimento de processos, clima organizacional e lucratividade

    Transcriptome Analysis of Renal Ischemia/Reperfusion Injury and Its Modulation by Ischemic Pre-Conditioning or Hemin Treatment

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    Ischemia/reperfusion injury (IRI) is a leading cause of acute renal failure. The definition of the molecular mechanisms involved in renal IRI and counter protection promoted by ischemic pre-conditioning (IPC) or Hemin treatment is an important milestone that needs to be accomplished in this research area. We examined, through an oligonucleotide microarray protocol, the renal differential transcriptome profiles of mice submitted to IRI, IPC and Hemin treatment. After identifying the profiles of differentially expressed genes observed for each comparison, we carried out functional enrichment analysis to reveal transcripts putatively involved in potential relevant biological processes and signaling pathways. The most relevant processes found in these comparisons were stress, apoptosis, cell differentiation, angiogenesis, focal adhesion, ECM-receptor interaction, ion transport, angiogenesis, mitosis and cell cycle, inflammatory response, olfactory transduction and regulation of actin cytoskeleton. In addition, the most important overrepresented pathways were MAPK, ErbB, JAK/STAT, Toll and Nod like receptors, Angiotensin II, Arachidonic acid metabolism, Wnt and coagulation cascade. Also, new insights were gained about the underlying protection mechanisms against renal IRI promoted by IPC and Hemin treatment. Venn diagram analysis allowed us to uncover common and exclusively differentially expressed genes between these two protective maneuvers, underscoring potential common and exclusive biological functions regulated in each case. In summary, IPC exclusively regulated the expression of genes belonging to stress, protein modification and apoptosis, highlighting the role of IPC in controlling exacerbated stress response. Treatment with the Hmox1 inducer Hemin, in turn, exclusively regulated the expression of genes associated with cell differentiation, metabolic pathways, cell cycle, mitosis, development, regulation of actin cytoskeleton and arachidonic acid metabolism, suggesting a pleiotropic effect for Hemin. These findings improve the biological understanding of how the kidney behaves after IRI. They also illustrate some possible underlying molecular mechanisms involved in kidney protection observed with IPC or Hemin treatment maneuvers
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