Incidência e caracterização morfológica de Cladosporium herbarum em feijão comum cv. ‘Pérola’

Cladosporium spp. has been associated to the common bean seeds during storage, causing losses in the vigor and germination. The aim of this study was to estimate the incidence and perform micromorphological characterization of Cladosporium herbarum found on seeds of common bean cv. ‘Pérola’ in Ipameri, Goiás State, Brazil. Common bean seeds were obtained from plantations located at experimental areas of the Universidade Estadual de Goiás (UEG), Ipameri, were submitted to health analysis by the blotter test method and, later examined under a stereomicroscope aiming to prepare semi-permanent slides mounting by removing fungal mycelia and structures found on the infected plant tissue. After microscopic analysis of the cultural characteristics and measurement of the conidia, it was verified that they measured (length × width) of 7.2–10.4 × 3.6–4.2 μm (8.1 × 4 μm). These characteristics indicated that the fungus is C. herbarum, which occurred with an incidence of 59.5% on naturally contaminated seeds. Preparations on lactic acid, containing the structures and fungal spores were deposited in the slide collection of plant pathogens of the UEG. The common bean ‘Pérola’ provide high incidence of C. herbarum on the seeds.O fungo Cladosporium está associado às sementes de feijão comum durante o armazenamento, sendo capaz de infligir danos na germinação e vigor. O objetivo deste trabalho foi estimar a incidência e realizar a caracterização micromorfológica de Cladosporium herbarum encontrado em sementes de feijão comum cv. ‘Pérola’ no município de Ipameri, Goiás, Brasil. Para tanto, as sementes provenientes de plantios localizados em áreas experimentais da Universidade Estadual de Goiás (UEG), campus Ipameri, foram submetidas a análise sanitária pelo método blotter test e examinadas em estereomicroscópio para confecção de lâminas semi-permanentes para observação microscópica, mediante remoção de micélio e estruturas fúngicas encontradas sobre o tecido vegetal infectado. Após observações das características culturais e mensuração dos conídios, verificou-se que estes mediam (comprimento × largura) 7,2–10,4 × 3,6–4,2 μm (média 8,1 × 4 μm). Estas características indicaram o fungo tratar-se de C. herbarum, o qual ocorreu com incidência de 59,5% nas sementes naturalmente contaminadas. As preparações em ácido láctico contendo estruturas e esporos do fungo foram depositadas no Laminário Fitopatológico da UEG. A cultivar de feijão ‘Pérola’ proporciona alta incidência de C. herbarum nas sementes

Viability of equine bone marrow mononuclear fraction and adipose tissue-derived stromal vascular fraction after freezing and thawing process

Cinco cavalos adultos foram submetidos à coleta de medula óssea do esterno e de tecido adiposo da região glútea. As amostras foram processadas para obtenção da fração mononuclear da medula óssea e fração vascular estromal do tecido adiposo, o número de células obtidas e a viabilidade celular foram determinados. Em seguida, realizou-se o congelamento das amostras em solução contendo 20% de soro fetal bovino e 10% de dimetilsulfóxido. Depois de um mês, realizou-se o descongelamento das amostras e a viabilidade celular foi novamente mensurada. Os resultados revelaram que as técnicas utilizadas tanto para coleta de medula óssea quanto de tecido adiposo em equinos são simples, rápidas e seguras. As metodologias adotadas para o processamento das amostras foram eficientes, obtendo-se aproximadamente 95% de viabilidade celular. Após o descongelamento, a viabilidade média das amostras de células mononucleares da medula óssea foi de 86% e da fração vascular estromal do tecido adiposo de 64%. Frente à importância da terapia celular na clínica médica de equinos, concluiu-se que é necessária a realização de mais estudos, visando padronizar uma técnica de criopreservação que mantenha a integridade das células da fração mononuclear da medula óssea e da fração vascular estromal do tecido adiposo de equinos

Trichoderma harzianum no tratamento de sementes de Cladosporium herbarum, Sclerotinia sclerotiorum e no aumento de crescimento do feijoeiro no Brasil

O potencial de uso de Trichoderma para o controle biológico de patógenos em sementes, assim como no controle de doenças do feijoeiro em condições de campo, tem sido constatado. Além de possuir diferentes mecanismos de controle, tais como antibiose, competição e hiperparasitismo, o fungo Trichoderma possui habilidade para colonizar a rizosfera e as radículas das plântulas, podendo também atuar na promoção do crescimento inicial do feijoeiro. Esta revisão tem por finalidade levantar as recentes pesquisas realizadas no Brasil, acerca deste fungo como agente de biocontrole de Cladosporium sp., um importante patógeno de sementes e de Sclerotinia sclerotiorum, causador do mofo branco, abordando também seu efeito promotor sobre o crescimento do feijoeiro

Caracterização morfológica de isolados de Trichoderma harzianum

Variações morfológicas ou genéticas entre isolados de Trichoderma harzianum tem sido recentemente pesquisadas em muitos trabalhos, pois T. harzianum é considerado um agregado de espécies, agrupadas com base em padrões de ramificação de conidióforos e características particulares às fiálides e conídios. O objetivo deste trabalho foi verificar se existem variações micromorfológicas entre cinco isolados de T. harzianum, previamente identificados por sequenciamento das regiões ITS-1 e ITS- 4 do rDNA. Para obtenção dos dados, parte do micélio desenvolvido a 25ºC, em meio BDA e ausência de luz, por sete dias, foi removido para confecção de lâminas semi-permanentes. As fiálides tiveram dimensões de 3,7 ? 8,2 x 1,4 ? 3,8 µm (5,5 x 2,3 µm), com relação comprimento/largura (C/L) de 2,1 ? 2,4, enquanto que os conídios eram subglobosos e ovais com medidas médias de 1,6 ? 3,6 x 1,5 ? 3,2 µm (2,6 x 2,1 µm) e relação C/L de 1,02 ? 1,11. Embora seja um agregado de espécies, não houve variações morfológicas no formato ou nas medidas das estruturas mensuradas. As lâminas foram depositadas no Laminário Fitopatológico da Universidade Estadual de Goiás

Nursing diagnosis in caregivers of children with orofacial clefts and related problems admitted to semi-intensive care unit

Objective: To identify nursing diagnosis in caregivers of children with orofacial clefts and related anomalies, admitted to a semi-intensive care unit. Method: A prospective study, accomplished on the semi-intensive care unit at the Hospital for Rehabilitation of Craniofacial Anomalies of University of São Paulo, in the months May and June 2013. The sample consisted of 20 caregivers. The inclusion criterion was accepting to participate. Through a structured interview, the participants were assessed at two different moments, namely on child’s admittance and at hospital discharge. Diagnoses were formalized according to the NANDA-International taxonomy with psychosocial approach. Results: The sample was composed exclusively of mothers with mean age 28.35 years, completed high school (60%), middle socioeconomic class (60%) with stable marital union (75%) and living in owned homes (75%). At the moment of admission, there was predominance of domain roles and relationships (22%); class of roles of the caregiver (85%), and nursing diagnosis of stress about the caregiver role 100%), anxiety (100%), disposition for increased knowledge (85%), disposition for increased control of the therapeutic regimen (80%) and disturbed pattern of sleep (55%). At the moment of discharge, there was predominance of the domain of stress coping and tolerance (33%); class of coping responses (72%), and nursing diagnosis of disposition for improved maternity (50%), willingness to increased coping (50%), disposition for increased family coping (50%). Conclusion: Although the caregivers initially presented stress, possibly due to the need of learning for maintenance of care after hospital discharge, subsequently there was progression towards acceptance and coping of the situation

Functional infrared thermography imaging can be used to assess the effectiveness of Maxicam Gel® in pre-emptively treating transient synovitis and lameness in horses

IntroductionDiagnosing and treating lameness in horses is essential to improving their welfare. In equine orthopedic practice, infrared thermography (IRT) can indirectly detect soreness. Non-steroidal anti-inflammatory drugs can treat painful and inflammatory processes in horses. Using IRT, the efficacy of meloxicam (Maxicam Gel®) was evaluated in pre-treating transient synovitis in horses induced by a middle carpal joint injection of lipopolysaccharides (LPS) from E. coli 055:B5 at a dose of 10 endotoxin units.MethodsIn a cross-over design, six healthy horses were randomly assigned to receive either 0.6 mg/kg of oral Maxicam Gel® (MAXVO) or a mock administration (control group, C) following a two-week washout period. IRT of the middle carpal joint, visual lameness assessment and joint circumference were recorded over time. Clinical and hematological evaluations were performed. Synovial fluid aspirates were analyzed for total nucleated cell count, total protein, and prostaglandin E2. A mixed effects analysis of variance was performed for repeated measures over time, followed by Tukey’s test. A multinomial logistic regression was conducted to determine whether there is a relationship between a thermography temperature change and the lameness score.ResultsThere were no changes in joint circumference. The MAXVO group showed a lower rectal temperature 4 h after synovitis induction. The C group presented an increase in neutrophils and a decrease in total hemoglobin and hematocrit 8 h after induction. No changes were observed in the synovial fluid between groups. The horses that received meloxicam did not show clinically significant lameness at any time, while the C group showed an increase in lameness 2, 4, and 8 h after synovitis induction.DiscussionIRT indicated that the skin surface temperature of the middle carpal joint was lower in horses who received meloxicam, suggesting a reduction in the inflammatory process induced by LPS. It was observed that the maximum temperature peaks in the dorsopalmar and lateropalmar positions can be utilized to predict the severity of lameness, particularly when the temperature rises above 34°C. Horses pre-treated with meloxicam showed either reduced or no indication of mild to moderate pain and presented a lowehr thermographic temperature, which indicates the effectiveness of Maxicam Gel® as an anti-inflammatory

Células-tronco mesenquimais de equinos: isolamento, cultivo e caracterização

As células-tronco da linhagem mesenquimal representam uma fonte promissora para o tratamento de injúrias do sistema músculo-esquelético de equinos atletas. Objetivou-se com este trabalho avaliar técnicas de coleta e isolamento de células-tronco mesenquimais em equinos, determinar a caracterização morfológica e fenotípica e avaliar o comportamento celular sob diferentes condições de cultivo. Cinco cavalos foram submetidos à coleta de medula óssea do esterno e de tecido adiposo da região glútea. As amostras foram processadas para o isolamento de células mononucleares e cultivadas em dois tipos de meios de cultivo. No vigésimo quinto dia, foi adicionado TGF-β1, mantendo um grupo controle para cada meio. As técnicas de coleta e processamento foram avaliadas por meio de fatores como facilidade de obtenção, viabilidade celular e número de células obtidas. Características morfológicas qualitativas foram avaliadas semanalmente mediante observação das colônias por microscopia óptica de luz invertida. Características fenotípicas foram avaliadas testando-se marcadores de superfície. Os efeitos do TGF-β1 sobre as culturas de células foram determinados por meio de avaliação citoquímica, número de unidades formadoras de colônia e porcentagens de apoptose e necrose. Foram observadas diferenças entre as amostras em fatores como a viabilidade celular após descongelamento, formação de colônias e relação entre necrose e apoptose em meios de cultivo diferentes. O TGF-β1 apresentou um efeito indutor de apoptose e estimulou a formação de colônias e a produção de proteoglicanas sulfatadas confirmando o efeito condrogênicoMesenchymal stem cells could be a new treatment for healing musculo-skeletal injuries of equine athlete. The objectives of this study were: to analyze the harvest and isolation techniques of equine mesenchymal stem cells, to determine morphological and phenotypical characterization and to evaluate cellular behavior in different culture conditions. Five horses had sternal aspirates bone marrow and croup fat tissue harvest. Both of them harvested materials was processed for mononuclear cells isolation and cultivate in two different kinds of culture medium. Twenty-five days later TGF-β1 was add in both culture mediums, remains a control group for each one. The harvest and process techniques were evaluated through some factors like: easily of harvest, cellular viability and cellular number. Morphological qualitative characteristics were described weekly by culture microscopy observation. Phenotypical characteristics were evaluated testing cluster markers. The effects of TGF-β1 on the cells cultures were determined by histological evaluation, number of unit forming colony and relation between necrosis and apoptosis. Differences between bone marrow and fat tissue cells were observed in some factors like: cellular viability after freezing, unity colony forming and relation between necrosis and apoptosis in different mediums culture. TGF-β1showed apoptosis inductor effect and stimulated the unit forming colony and sulfated proteoglicans production confirming the chondrogenic effectCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES

Morphology, pathogenicity and fungicide sensitivity of isolates of Colletotrichum truncatum (Schw.) Andrus & WD Moore

Anthracnose from soy (Glycine max L.) occurs in all areas of soy production in the world. Among the factors that limit the achievement of high soybean yields are diseases. Anthracnose is one of the main diseases of the crop, being caused by the fungus Colletotrichum truncatum. In the first chapter, isolates of Colletotrichum truncatum were obtained from several hosts, coming from different soy producing regions. Pure cultures were obtained and inoculated in leaves, stems and pods detached. Regarding mycelial staining, there was variation in the appearance of the C. truncatum colony. The rate of mycelial growth among the isolates ranged from 8.5 mm.day-1 (isolated from Passo Fundo-RS) to 9.10 mm.day-1 (isolated from Passo Fundo-RS), demonstrating a smaller and greater physiological activity, respectively, of the isolates under artificial conditions. In the stem, the isolates that showed less injury and that differed statistically from the others were the isolates Passo Fundo-RS, Brasilia-DF and Urutaí-GO, 12 were less aggressive compared to the others with lesions ranging from 33.46 to 35.10 mm. length. The most aggressive produced injuries from 35.38 to 37.55 mm in length. On the leaf the most aggressive isolate was the Brasília-DF isolate, the lesion reached 79.99 mm in length, followed by the Passo Fundo-RS, Brasilia-DF and Urutaí-GO isolates. In the pod, the most aggressive isolate was the Brasília-DF isolate, the lesion reached 49.79 mm in length and the least aggressive were the Passo Fundo-RS and Urutaí isolates. In chapter 2, the objective was to evaluate the effect of temperature on the isolates. The plates were subjected to incubation at a temperature of 20º; 25th; 27th; 32nd; and 35ºC, under 12 h photoperiod, for seven days in BOD. The evaluation of mycelial growth was made by measuring every 24 h, recording the diameter in millimeters of the colonies in an orthogonal position, for seven days from the moment the mycelium discs containing the isolate were placed. Statistical analyzes were performed in the statistical program R. The significant variables in the F test of the analysis of variance were subjected to the means test and to the regression analysis. The isolates showed different behavior in the speed of mycelial growth with adaptive capacity at different temperatures. In chapter three, the objective of the work was to evaluate in vitro the sensitivity of different isolates of C. truncatum collected in different locations, the fungicides of different active ingredients incorporated to the BDA at concentrations of 0; 0.1; 1.0; 10 and 100 ppm. The percentage of the fungus was evaluated when subjected to fungicides: pyraclostrobin + fluxpyroxade + epoxiconazole, trifloxystrobin + protioconazole and pyraclostrobin + fluxpyroxade to establish which one had the highest control efficiency. It is possible to verify the great variability of sensitivity of C. truncatum isolates present before the different molecules and the importance of detecting resistant populations.Tese (Doutorado)A antracnose da soja (Glycine max. L.) ocorre em todas as áreas de produção de soja do mundo. Entre os fatores que limitam a obtenção de altos rendimentos da soja estão às doenças. A antracnose é uma das principais doenças da cultura, sendo causada pelo fungo Colletotrichum truncatum. No primeiro capítulo isolados de Colletotrichum truncatum foram obtidos de várias hospedeiras, oriundos de diferentes regiões produtoras de soja. Culturas puras foram obtidas e inoculadas em folhas, hastes e vagens destacadas. Em relação à coloração micelial houve variação do aspecto da colônia de C. truncatum. A taxa de crescimento micelial entre os isolados apresentou uma amplitude de 8,5 mm.dia-1 (isolado de Passo Fundo-RS) a 9,10 mm.dia-1 (isolado de Passo Fundo-RS), demonstrando menor e maior atividade fisiológica, respectivamente, dos isolados em condições artificiais. Na haste os isolados que apresentaram menor lesão e que diferiram estatisticamente das demais foram os isolados Passo Fundo-RS, Brasilia-DF e Urutaí-GO, 12 foram menos agressivos se comparados aos demais com lesões de 33,46 a 35,10 mm de comprimento. O mais agressivo produziu lesões de 35,38 a 37,55 mm de comprimento. Na folha o isolado mais agressivo foi o isolado Brasília-DF a lesão chegou a 79,99 mm de comprimento, sendo seguidos pelos isolados Passo Fundo-RS, Brasilia-DF e Urutaí-GO. Na vagem o isolado mais agressivo foi o isolado Brasília-DF a lesão chegou a 49,79 mm de comprimento e os menos agressivos foram os isolados Passo Fundo-RS e Urutaí. No capítulo 2, o objetivo foi avaliar o efeito da temperatura nos isolados. As placas foram submetidas à incubação com temperatura de 20º; 25º; 27º; 32º; e 35ºC, sob fotoperíodo de 12 h, durante sete dias em BOD. A avaliação do crescimento micelial foi feita pela medição, a cada 24 h, registrando-se o diâmetro em milímetros das colônias em posição ortogonal, durante sete dias a partir do momento em que foram colocados os discos de micélio contendo o isolado. As análises estatísticas foram realizadas no programa estatístico R. As variáveis significativas no teste F da análise de variância foram submetidas ao teste de médias e à análise de regressão. Os isolados apresentaram comportamento diferenciado na velocidade de crescimento micelial com capacidade adaptativa em diferentes temperaturas. No capítulo três objetivo do trabalho foi avaliar in vitro a sensibilidade de diferentes isolados de C. truncatum coletados em diferentes locais, os fungicidas de distintos ingredientes ativos incorporados ao BDA nas concentrações de 0; 0,1; 1,0; 10 e 100 ppm. Foi avaliada a porcentagem do fungo quando submetidos aos fungicidas: piraclostrobina + fluxapiroxade + epoxiconazol, trifloxistrobina + protioconazol e piraclostrobina + fluxapiroxade para estabelecer qual deles apresentou uma maior eficiência de controle. Pode-se verificar a grande variabilidade de sensibilidade de isolados C. truncatum apresentam perante as diferentes moléculas e a importância de detecção de populações resistentes