Regulación epigenética del IFN-y en tuberculosis

M. tuberculosis (Mtb) es el principal asesino microbiológico en el mundo. Las modificaciones epigenéticas son claves en la plasticidad del sistema inmune y como mediadores entre el ambiente y los fenotipos celulares. El IFN-v, media la respuesta protectiva frente a Mtb, pero se desconocen los mecanismos epigenéticos que regularían su activación y mediarían la susceptibilidad a la tuberculosis.Área: Ciencias Biológicas, Ambiente y Salud

Association of IFN-γ +874 A/T SNP and hypermethylation of the -53 CpG site with tuberculosis susceptibility

Introduction: Tuberculosis (TB) is now the 2nd leading infectious killer after COVID-19 and the 13th leading cause of death worldwide. Moreover, TB is a lethal combination for HIV-patients. Th1 responses and particularly IFN-γ are crucial for immune protection against Mycobacterium tuberculosis infection. Many gene variants for IFNG that confer susceptibility to TB have been described in multiple ethnic populations. Likewise, some epigenetic modifications have been evaluated, being CpG methylation the major epigenetic mark that makes chromatin inaccessible to transcription factors, thus avoiding the initiation of IFNG transcription. Methods: We evaluated both genetic and epigenetic changes involved in IFN-γ production and TB susceptibility in Argentine population. Amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction (ARMS-PCR) was performed for the IFN-γ +874 A/T polymorphism (rs2430561) genotyping in 199 healthy donors (HD) and 173 tuberculosis (TB) patients. IFN-γ levels from M. tuberculosis-stimulated PBMCs were measured by ELISA. The methylation status at the -53 CpG site of the IFNG promoter in individuals with latent infection (LTBI), TB and HD was determine by pyrosequencing. Results: Using a case-control study, we found that A allele and, consequently, AA genotype were overrepresented in patients with active disease. Moreover, HD carrying T allele (AT or TT genotype) evidenced an augmented IFN-γ secretion compared to TB patients. Codominance was the genetic model that best fits our results according to the Akaike information criterion (AIC). In addition, increased methylation levels at the -53 CpG site in the IFN-γ promoter were observed in whole blood of patients with active TB compared to LTBI individuals. Discussion: IFN-γ is regulated by genetic variants and epigenetic modifications during TB. Besides, AA genotype of the rs2430561 single nucleotide polymorphism could be considered as a potential TB susceptibility genetic biomarker in Argentina and the methylation of the -53 CpG site could result in a useful predictor of TB reactivation.Fil: Alvarez, Guadalupe Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Hernández del Pino, Rodrigo Emanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Barbero, Angela Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Estermann, Martín Andrés. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Celano, Josefina. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Musella, Rosa María. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Infecciosas "Dr. Francisco Javier Muñiz"; ArgentinaFil: Palmero, Domingo Juan. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Infecciosas "Dr. Francisco Javier Muñiz"; ArgentinaFil: García, Verónica Edith. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Pasquinelli, Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; Argentin

Informe cinetífico de Beca Doctortoral 1º año: Esternmann, Martín Andrés (2016)

La Tuberculosis (TB), enfermedad producida por Mycobacterium tuberculosis (Mtb) es, junto con el VIH, una de las principales causas de mortalidad en el mundo. La respuesta Th1 es crucial en la defensa del hospedador contra Mtb. La marca registrada de las células Th1 es su habilidad de secretar de IFN-γ. La expresión del gen IFNG durante la diferenciación Th1 es regulada por múltiples elementos, incluyendo metilación de sitios CpG, y acetilación y/o metilación de las histonas. Ha sido sugerido que las alteraciones epigenéticas podrían tener un rol causal en los procesos patogénicos o podrían también ocurrir como una consecuencia directa o indirecta de la enfermedad y servir como marcadores de actividad de la enfermedad. Así el objetivo general de nuestro trabajo es determinar las modificaciones epigenéticas que regulan la producción de IFN-γ durante la infección por Mtb y su impacto en la susceptibilidad/severidad de la enfermedad

SLAMF1 signaling induces Mycobacterium tuberculosis uptake leading to endolysosomal maturation in human macrophages

Tuberculosis dates back to ancient times but it is not a problem of the past. Each year, millions of people die from tuberculosis. After inhalation of infectious droplet nuclei, Mycobacterium tuberculosis reaches the lungs where it can manipulate the immune system and survive within host macrophages, establishing a persistent infection. The signaling lymphocytic activation molecule family member 1 (SLAMF1) is a self-ligand receptor that can internalize gram-negative bacteria and regulate macrophages’ phagosomal functions. In tuberculosis, SLAMF1 promotes Th1-protective responses. In this work, we studied the role of SLAMF1 on macrophages’ functions during M. tuberculosis infection. Our results showed that both M. tuberculosis and IFN-γ stimulation induce SLAMF1 expression in macrophages from healthy donor and Tohoku Hospital Pediatrcs-1 cells. Costimulation through SLAMF1 with an agonistic antibody resulted in an enhanced internalization of M. tuberculosis by macrophages. Interestingly, we found that SLAMF1 interacts with M. tuberculosis and colocalizes with the bacteria and with early and late endosomes/lysosomes markers (EEA1 and LAMP2), suggesting that SLAMF1 recognize M. tuberculosis and participate in the endolysosomal maturation process. Notably, increased levels of SLAMF1 were detected in CD14 cells from pleural effusions of tuberculosis patients, indicating that SLAMF1 might have an active function at the site of infection. Taken together, our results provide evidence that SLAMF1 improves the uptake of M. tuberculosis by human monocyte-derived macrophages.Fil: Barbero, Angela Maria. Universidad Nacional de San Antonio de Areco; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Trotta, Aldana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Genoula, Melanie. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Hernández del Pino, Rodrigo Emanuel. Universidad Nacional de San Antonio de Areco; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Estermann, Martín Andrés. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Monash University; AustraliaFil: Celano, Josefina. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Fuentes, Federico. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: García, Verónica Edith. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Balboa, Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Barrionuevo, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Pasquinelli, Virginia. Universidad Nacional de San Antonio de Areco; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Universidad Nacional del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigaciones y Transferencia del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires; Argentin