41 research outputs found
Wahrnehmungspsychologische und neurophysiologische Aspekte des Musiklernens
WĂ€hrend Detailforschungen ĂŒber Merkmale und FĂ€higkeiten speziell des Musikhörens beim Kinde durch zahlreiche verschiedenartige Tests und andere Verfahren bekannt sind, bleiben Forschungen ĂŒber Relationen der HörfĂ€higkeit zu intermodalen und integrierenden sensorischen Leistungen eine Seltenheit. Der Autor will nach mehrjĂ€hrigen Unterrichtsversuchen wissen, warum die Kinder mit einem nicht traditionellen Lernangebot und mit einem nicht direktiven Lehrverfahren in ihm unbekannter Weise reagierten. Dieser Vorgang setzt den Willen und die FĂ€higkeit voraus, "erfahren zu wollen, was ein Kind erfahrbar macht", wie Lernstrukturen zustande kommen und sich aufbauen. Auf der Basis theoretischer Arbeit ĂŒber Entwicklung und EinfluĂbereiche der Sinnesorgane - der Wahrnehmungs- und ErkenntnistĂ€tigkeit -, das VerstĂ€ndnis der Funktion intermodaler Leistungen und integrierender Hirnfunktionen sowie der unterschiedlichen, aber sich ergĂ€nzenden Informationsverarbeitung beider HemisphĂ€ren ergaben sich fĂŒr den Autor nicht nur eine KlĂ€rung der Lernstrukturen beim Kinde, sondern ebenso Konsequenzen fĂŒr eine zu verĂ€ndernde LehrtĂ€tigkeit. (DIPF/Orig.
Biochemische, strukturelle und kinetische Charakterisierung des ungewöhnlichen <em>c</em>-Typ Cytochroms Thiosulfatdehydrogenase
Thiosulfatdehydrogenasen sind DihĂ€m c-Typ Cytochrome mit einer ungewöhnlichen His/Cys-Koordination eines HĂ€mes und weit verbreitet unter Bakterien. TsdA-Proteine kommen in allen Gruppen der Proteobakterien und auch in grampositiven Organismen vor. Im Rahmen dieser Arbeit wurden die TsdA-Proteine aus A. vinosum und C. jejuni als typische Vertreter dieser Enzymklasse heterolog in E. coli produziert und biochemisch charakterisiert. Die Enzyme aus diesen beiden Organismen dienen als Beispiel fĂŒr die zwei Funktionsweisen der TsdA-Proteine, die Oxidation von Thiosulfat und die Reduktion von Tetrathionat. In Enzymtests konnte gezeigt werden, dass die TsdA aus A. vinosum als Thiosulfatdehydrogenase fungiert, Ă€hnlich wie homologe Proteine aus T. intermedia oder P. stutzeri. Im Gegensatz dazu ist die TsdA aus C. jejuni ein bifunktionales Enzym mit einer primĂ€ren Funktion als Tetrathionatreduktase. Diese Funktion verleiht dem Enzym zusĂ€tzliche, physiologische Relevanz, da die TsdA humanpathogenen Bakterien wie C. jejuni einen Wachstumsvorteil in der Darmflora verschaffen könnte. Am Beispiel der TsdA aus A. vinosum konnte ĂŒber UV-Vis Spektren gezeigt werden, dass das konservierte Cystein, das als distaler Ligand eines HĂ€mes fungiert, pH-abhĂ€ngigen und Redox-abhĂ€ngigen VerĂ€nderungen unterliegt. Anhand von AvTsdA Cystein96-Varianten wurde bewiesen, dass das Cystein essentiell fĂŒr die katalytische AktivitĂ€t ist und eine stabilisierende Funktion innerhalb der TsdA hat. Das zweite HĂ€m wird in der oxidierten AvTsdA His/Lys-ligiert und vollfĂŒhrt einen Redox-abhĂ€ngigen Ligandenwechsel zu einer His/Met-Koordination im reduzierten Zustand des Proteins. Anhand von TsdA Lysin- und Methionin-Varianten konnte gezeigt werden, dass die HĂ€m-Eisen Koordination dieses HĂ€mes einen starken Einfluss auf, sowohl die maximale spezifische AktivitĂ€t als auch die SubstrataffinitĂ€t zu Thiosulfat und Tetrathionat, hat. Die AvTsdA ĂŒbertrĂ€gt Elektronen vermutlich zunĂ€chst auf ein DihĂ€m c-Typ Cytochrom, von dem die Elektronen auf das Eisen-Schwefel Cluster Protein HiPIP (Alvin_2274) und schlieĂlich auf das photosynthetische Reaktionszentrum weitergeleitet werden. C. jejuni dagegen betreibt keine Photosynthese und die Elektronen werden von der CjTsdA auf ein MonohĂ€m c-Typ Cytochrom und dann vermutlich auf die terminale cb-Oxidase ĂŒbertragen. Mehrere Organismen wie z. B. T. intermedia, exprimieren ein weiteres c-Typ Cytochrom (TsdB), welches als Elektronenakzeptor fĂŒr die TsdA dienen kann
Detection of EBV, HBV, HCV, HIV-1, HTLV-I and -II, and SMRV in Human and Other Primate Cell Lines
The high prevalence of contaminated cell cultures suggests that viral contaminations might be distributed among cultures. We investigated more than 460 primate cell lines for Epstein-Barr (EBV), hepatitis B (HBV), hepatitis C (HCV), human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), human T-cell leukemia/lymphoma virus I and II (HTLV-I/-II), and squirrel monkey retrovirus (SMRV) infections for risk assessment. None of the cell lines were infected with HCV, HIV-1, or HTLV-I/-II. However, one cell line displayed reverse transcriptase activity. Thirty-nine cell lines harbored EBV DNA sequences. Studies on the lytic phase of EBV revealed that five cell lines produce EBV particles and six further cell lines produced EBV upon stimulation. One cell line contained an integrated HBV genome fragment but showed no virus production. Six cell lines were SMRV-infected. Newly established cell lines should be tested for EBV infections to detect B-lymphoblastoid cell lines (B-LCL). B-LCLs established with EBV from cell line B95-8 should be tested for SMRV infections
Influence of haem environment on the catalytic properties of the tetrathionate reductase TsdA from Campylobacter jejuni
Bifunctional diheme cytochrome c thiosulÂfate dehydrogenases/tetrathionate reductases (TsdA) exhibit different catalytic properties dependÂing on the source organism. In the human food-borne intestinal pathogen Campylobacter jejuni , TsdA functions as a tetrathionate reductase enÂabling respiration with tetrathionate as an alÂternative electron acceptor. Here, evidence is provided that Cys138 and Met255 serve as the sixth ligands of Heme 1 and Heme 2, respecÂtively, in the oxidized Cj TsdA wt protein. ReÂplacement of Cys138 resulted in a virtually inacÂtive enzyme, confirming Heme 1 as the active site heme. Significantly, TsdA variants carrying amino acid exchanges in the vicinity of the elecÂtron-transferring Heme 2 (Met255, Asn254 and Lys252) exhibited markedly altered catalytic properties of the enzyme, showing these residues play a key role in the physiological function of TsdA. The growth phenotypes and tetrathionate reductase activities of a series of Î tsdA/*tsdA complemenÂtation strains constructed in the original host C. jejuni 81116, showed that in vivo , the TsdA variants exhibited the same catalytic properties as the pure, recombinantly produced enzymes. However, variants that catalyzed tetrathionate reduction more effectively than the wild-type enzyme did not allow better growth
Electron Accepting Units of the Diheme Cytochrome c TsdA, a Bifunctional Thiosulfate Dehydrogenase/Tetrathionate Reductase
The enzymes of the thiosulfate dehydrogenase (TsdA) family are wide-spread diheme c-type cytochromes. Here, redox carriers were studied mediating the flow of electrons arising from thiosulfate oxidation into respiratory or photosynthetic electron chains. In a number of organisms, including Thiomonas intermedia and Sideroxydans lithotrophicus the tsdA gene is immediately preceded by tsdB encoding for another diheme cytochrome. Spectrophotometric experiments in combination with enzymatic assays in solution showed that TsdB acts as an effective electron acceptor of TsdA in vitro when TsdA and TsdB originate from the same source organism. While TsdA covers a range from -300 mV to +150 mV, TsdB is redox active between -100 to +300 mV, thus enabling electron transfer between these hemoproteins. The three-dimensional structure of the TsdB-TsdA fusion protein from the purple sulfur bacterium Marichromatium purpuratum was solved by X-ray crystallography to 2.75 Ă
resolution providing insights into internal electron transfer. In the oxidized state, this tetraheme cytochrome c contains three hemes with axial His/Met ligation, while heme 3 exhibits the His/Cys coordination typical for TsdA active sites. Interestingly, thiosulfate is covalently bound to Cys330 on heme 3. In several bacteria including Allochromatium vinosum, TsdB is not present, precluding a general and essential role for electron flow. Both, AvTsdA and the MpTsdBA fusion react efficiently in vitro with high potential iron sulfur protein from A. vinosum (Em +350 mV). HiPIP not only acts as direct electron donor to the reaction center in anoxygenic phototrophs but can also be involved in aerobic respiratory chains
Performance-Art - Versuch einer Orientierung
[Die Autorin] orientiert ĂŒber die UrsprĂŒnge, Entwicklungen, Intentionen und den derzeitigen Stand der Performance-Szene. [...] Eine Definition, was Performance Art eigentlich sei, ist vom Begriff so schwierig wie von ihren vielfĂ€ltigen Erscheinungsformen - von ihren historischen UrsprĂŒngen wie von der unterschiedlichen Entwicklung, die sie in den verschiedenen LĂ€ndern, seiâs in den USA oder in Europa erfahren hat. Als eine \u27hybride\u27 Kunstform, schillernd zwischen Aktionskunst, Living Art oder Body Art, widerstrebt sie einem theoretischen Ansatz, der sie analytisch einer Bestimmung zufĂŒhren möchte. (DIPF/Orig.
Curating as Care in Hohenlockstedt: FĂŒrsorgearbeit als kuratorisches Konzept
Vor zwei Monaten traf ich Sascia Bailer, die KĂŒnstlerischen Leiterin des M.1 der Arthur Boskamp-Stiftung in Hohenlockstedt, um ĂŒber ihr Programm âCareâ zu sprechen. Seitdem haben die dramatischen Geschehnisse uns gezwungen, die RealitĂ€t neu zu ĂŒberdenken. Bailers Konzept hat in der gegenwĂ€rtigen Krise nur an AktualitĂ€t gewonnen: Wir alle werden uns noch lange erinnern, wie sich die Care-Arbeitenden â Krankenschwestern, Pfleger*innen, Ărzt*innen und Sozialarbeiter*innen â in den Zeiten der höc..
Curating as Care in Hohenlockstedt: FĂŒrsorgearbeit als kuratorisches Konzept
Vor zwei Monaten traf ich Sascia Bailer, die KĂŒnstlerischen Leiterin des M.1 der Arthur Boskamp-Stiftung in Hohenlockstedt, um ĂŒber ihr Programm "Care" zu sprechen. Seitdem haben die dramatischen Geschehnisse uns gezwungen, die RealitĂ€t neu zu ĂŒberdenken. Bailers Konzept hat in der gegenwĂ€rtigen Krise nur an AktualitĂ€t gewonnen: Wir alle werden uns noch lange erinnern, wie sich die Care-Arbeitenden â Krankenschwestern, Pfleger*innen, Ărzt*innen und Sozialarbeiter*innen â in den Zeiten der höchsten Not, um uns gekĂŒmmert haben. Das Programm in der Ausstellungshalle M.1 hat das Ziel, die Unsichtbarkeit der FĂŒrsorge und ihre Ăberlastung zu thematisieren und dieser entgegenzuwirken. Im Moment sind die RĂ€ume des M.1 sowie alle anderen Museen in Deutschland geschlossen, es lohnt sich aber, genau hinzuschauen, wie neue Dialoge in unserer Gemeinschaft hergestellt werden und welche Rolle dabei die Kunst spielen kann
Treatment of Mycoplasma Contamination in Cell Cultures with Plasmocin
A high percentage of cell lines are chronically infected with various mycoplasma species. The addition of antibiotics that are particularly effective against these contaminants to the culture medium during a limited period of time is a simple, inexpensive, and very practical approach for decontaminating cell cultures. Here, we examined the effectiveness of the new antimycoplasma compound Plasmocin that has been employed routinely to cleanse chronically infected cell lines. In a first round of treatment 45 out of 58 (78%) mycoplasma-positive cell lines could be cured. In a second attempt using back-up cryopreserved original cells, four additional cell lines were cured; thus, the overall cure rate was 84%. Even if the mycoplasma contamination was not eradicated by Plasmocin, the parallel treatment with several other antibiotics (Baytril, BM-Cyclin, Ciprobay, MRA, or MycoZap) led to the cure of all 58 cell lines. The successful decontamination was permanent as mycoplasmas were no longer detected at day +14 posttreatment and at later time points as examined by PCR which is the most sensitive and specific mycoplasma detection method. Collectively, our results highlight certain antibiotics as effective antimycoplasma reagents and support the therapeutic rationale for their use in the eradication of this notorious cell culture contaminant
Screening human cell lines for viral infections applying RNA-Seq data analysis.
Monitoring viral infections of cell cultures is largely neglected although the viruses may have an impact on the physiology of cells and may constitute a biohazard regarding laboratory safety and safety of bioactive agents produced by cell cultures. PCR, immunological assays, and enzyme activity tests represent common methods to detect virus infections. We have screened more than 300 Cancer Cell Line Encyclopedia RNA sequencing and 60 whole exome sequencing human cell lines data sets for specific viral sequences and general viral nucleotide and protein sequence assessment applying the Taxonomer bioinformatics tool developed by IDbyDNA. The results were compared with our previous findings from virus specific PCR analyses. Both, the results obtained from the direct alignment method and the Taxonomer alignment method revealed a complete concordance with the PCR results: twenty cell lines were found to be infected with five virus species. Taxonomer further uncovered a bovine polyomavirus infection in the breast cancer cell line SK-BR-3 most likely introduced by contaminated fetal bovine serum. RNA-Seq data sets were more sensitive for virus detection although a significant proportion of cell lines revealed low numbers of virus specific alignments attributable to low level nucleotide contamination during RNA preparation or sequencing procedure. Low quality reads leading to Taxonomer false positive results can be eliminated by trimming the sequence data before analysis. One further important result is that no viruses were detected that had never been shown to occur in cell cultures. The results prove that the currently applied testing of cell cultures is adequate for the detection of contamination and for the risk assessment of cell cultures. The results emphasize that next generation sequencing is an efficient tool to determine the viral infection status of human cells