Structural Characterization of Serine Protease Complexes with Novel Inhibitors

Human Neutrophil Elastase (HNE) is a serine protease responsible for cleavage of peptide bonds conferring elasticity to the connecting tissues. For this reason, this enzyme is mainly found in the lungs, arteries and ligaments [1-2]. In case of over-expression, HNE enables the appearance of some diseases, such as Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD), Rheumatoid Arthritis, Psoriasis and Arteriosclerosis [3-4]. Currently, diseases affecting the respiratory tract are one of the major causes of death in the world, so HNE is a potential drug target of considerable interest [4]. Porcine Pancreatic Elastase (PPE) is commonly used as a model for HNE, sharing 37% of amino acid sequence identity [5]. According to previous studies, the catalytic serine performs a nucleophilic attack on a carbonyl group present in the inhibitors [6]. The focus of this work was the three-dimensional structure determination of elastases (PPE and HNE) in complex with inhibitors by X-ray crystallography to characterize their interactions at atomic level. The rational is to correlate structure and function and contribute to the design of more potent and specific inhibitors. These newly synthetic compounds were provided by the group of Prof. Rui Moreira, Instituto de Investigação do Medicamento, Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa. X-ray diffraction data of PPE crystals were collected at a synchrotron source and three 3D-structures of PPE in complex with inhibitors were determined at resolutions around 1.4 Ǻ. Analysis of the electron density maps revealed that the nucleophilic attack occurred at the sulfonyl group of the inhibitors, contrary to what was initially expected (which would be in the carbonyl group). In silico energy minimization studies of the docked ligand structure into the active site of HNE, show no relevant structural modifications of the protein structure upon ligand binding. Finally, crystals of HNE have already been obtained and experiments are ongoing to grow complexes of HNE with various inhibitors. References: [1] A. Thomson and S. B. Kapadia, “The specificity of the S1 and S2 subsites of elastase,” Eur. J. Biochem., vol. 102, pp. 111–116, 1979. [2] Z. Werb, M. J. Banda, J. H. McKerrow, and R. A. Sandhaus, “Elastases and elastin degradation.,” J. Invest. Dermatol., vol. 79 Suppl 1, p. 154s–159s, Jul. 1982. [3] E. F. P. Ruivo, L. M. Gonåalves, L. A. R. Carvalho, R. C. Guedes, S. Hofbauer, J. A. Brito, M. Archer, R. Moreira, and S. D. Lucas, “Clickable 4-Oxo- b -lactam-Based Selective Probing for Human Neutrophil Elastase Related Proteomes,” pp. 1–7, 2016. [4] L. R. P. Areias, E. F. P. Ruivo, M. T. Duarte, R. Moreira, S. D. Lucas, and R. C. Guedes, “RSC Advances PAPER A uni fi ed approach toward the rational design of selective low nanomolar human neutrophil elastase,” pp. 51717–51721, 2015. [5] “Uniprot.” [Online]. Available: http://www.uniprot.org/. [Accessed: 16-Aug-2017]. [6] W. Huang, Y. Yamamoto, Y. Li, D. Dou, K. R. Alliston, R. P. Hanzlik, T. D. Williams, and W. C. Groutas, “X-ray Snapshot of the Mechanism of Inactivation of Human Neutrophil Elastase by 1,2,5-Thiadiazolidin-3-one 1,1-Dioxide Derivatives.,” Society, pp. 2003–2008, 2008.Elastase Neutrófila Humana (HNE) é uma protease de serina responsável pela clivagem das ligações peptídicas que conferem elasticidade aos tecidos de conexão. Por esta razão, esta enzima é encontrada principalmente nos pulmões, artérias e ligamentos [1-2]. Em casos de sobre-expressão, esta permite o aparecimento de algumas doenças, como Doença Pulmonar Obstrutiva Crónica (DPOC), Artrite Reumatóide, Psoríase e Arteriosclerose [3-4]. Atualmente, as doenças que afetam o trato respiratório são uma das principais causas de morte no mundo, sendo então a HNE um potencial alvo terapêutico de considerável interesse [4]. A Elastase Pancreática Suína (PPE) é normalmente usada como modelo para HNE, compartilhando 37% de identidade de sequência primária [5]. De acordo com estudos anteriores, a serina catalítica realiza um ataque nucleofílico ao grupo carbonilo presente nos inibidores [6]. O foco deste trabalho foi a determinação por cristalografia de raios-X da estrutura tridimensional de elastases (HNE e PPE) complexadas com inibidores, de modo a caracterizar as respetivas interações a nível atómico. O racional é correlacionar a estrutura com a função e contribuir para o desenho de inibidores mais fortes e mais específicos. Estes novos compostos sintéticos foram fornecidos pelo grupo do Prof. Rui Moreira, Instituto de Investigação do Medicamento, Faculdade de Farmácia, Universidade de Lisboa. Os dados de difração de raios-X dos cristais de PPE foram recolhidos numa fonte de sincrotrão e três estruturas 3D de três complexos da PPE com inibidores foram determinadas com resoluções em torno dos 1,4 Å. A análise dos mapas de densidade eletrónica revelaram que o ataque nucleofílico ocorreu no grupo sulfonilo dos inibidores ao contrário do que era inicialmente esperado (que seria no grupo carbonilo). A minimização de energia in silico da estrutura do ligando acoplado no centro ativo da HNE não mostra modificações relevantes na estrutura da proteína após a ligação do ligando. Finalmente, já foram obtidos cristais de HNE, estando já em curso experiencias para o crescimento de cristais de complexos de HNE com vários inibidores. Referências: [1] A. Thomson and S. B. Kapadia, “The specificity of the S1 and S2 subsites of elastase,” Eur. J. Biochem., vol. 102, pp. 111–116, 1979. [2] Z. Werb, M. J. Banda, J. H. McKerrow, and R. A. Sandhaus, “Elastases and elastin degradation.,” J. Invest. Dermatol., vol. 79 Suppl 1, p. 154s–159s, Jul. 1982. [3] E. F. P. Ruivo, L. M. Gonåalves, L. A. R. Carvalho, R. C. Guedes, S. Hofbauer, J. A. Brito, M. Archer, R. Moreira, and S. D. Lucas, “Clickable 4-Oxo- b -lactam-Based Selective Probing for Human Neutrophil Elastase Related Proteomes,” pp. 1–7, 2016. [4] L. R. P. Areias, E. F. P. Ruivo, M. T. Duarte, R. Moreira, S. D. Lucas, and R. C. Guedes, “RSC Advances PAPER A uni fi ed approach toward the rational design of selective low nanomolar human neutrophil elastase,” pp. 51717–51721, 2015. [5] “Uniprot.” [Online]. Available: http://www.uniprot.org/. [Accessed: 16-Aug-2017]. [6] W. Huang, Y. Yamamoto, Y. Li, D. Dou, K. R. Alliston, R. P. Hanzlik, T. D. Williams, and W. C. Groutas, “X-ray Snapshot of the Mechanism of Inactivation of Human Neutrophil Elastase by 1,2,5-Thiadiazolidin-3-one 1,1-Dioxide Derivatives.,” Society, pp. 2003–2008, 2008

Body, Health and Society: Socioanthropological Considerations

This text presents a sociological reflection on the biomedical discourse on the body and health in our society We propose to address the sociological anthropological and historical studies on body health illness and the scientific field of Health The objective is to provide a discussion on the processes of society medicalization and of social inequalities in healt

Principais desafios que se colocam a Portugal e intervenções prioritárias no âmbito dos Oito Objectivos do Milénio

O presente texto centra-se nos resultados que se pretendem alcançar inerentes a um Projecto que está a ser desenvolvido desde Março de 2008 e pelo período de um ano intitulado “Oito Maneiras de Mudar o Mundo” e que é financiado pelo Ministério dos Negócios Estrangeiros através do Instituto Português de Apoio ao Desenvolvimento (I.P.A.D.). Está a ser executado pela URB-África (Associação para a Cooperação e o Desenvolvimento Urbano) e pela U.C.C.L.A. (União das Cidades Luso-Afro-Américo- Asiáticas) em parceria com o Departamento de Geografia da Universidade do Minho pressupondo várias iniciativas no domínio da Educação para o Desenvolvimento e no âmbito dos Oito Objectivos do Milénio. Estes objectivos, inseridos na Declaração do Milénio, foram aprovados no ano 2000, na Assembleia-Geral da O.N.U., por 189 chefes de Estado e de Governo. A principal finalidade deste projecto é fomentar uma mudança de valores e comportamentos no âmbito da cidadania, solidariedade e participação social no espaço público português

Questão de mérito: o acesso às vagas remanescentes em uma escola pública municipal Gonçalense

Este estudo objetiva apresentar os resultados de uma pesquisa realizada em uma escola pública do município de São Gonçalo no Estado do Rio de Janeiro no ano de 2019, evidenciando os pressupostos da ação do gestor/burocrata diante das vagas remanescentes da escola e a influência de sua discricionariedade nos resultados da política educacional. Em uma perspectiva interpretativista de estudos, analisamos o ato discricionário do gestor/burocrata como fator de confrontação ou consolidação das desigualdades educacionais, por meio dos dados resultantes da entrevista semiestruturada com o gestor da escola, refletindo sobre a interação do burocrata com o cidadão que busca as benesses da política e a garantia de direitos. Decorrentes de tal interação, observamos formas distintas de discricionariedade, enraizadas nas microculturas da prática burocrática, expondo processos includentes e excludentes, a partir da interferência de fatores endógenos e exógenos resultantes das relações do burocrata com a comunidade

Desenvolvimento de um Curso Ensinando a Criação de Apps Inteligentes para a Classificação de Imagens com Machine Learning e Design Thinking

TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro Tecnológico. Sistemas de Informação.O Machine Learning se torna cada vez mais onipresente em nossas vidas, desde experiências diárias como redes sociais, sistemas de geolocalização até aplicações em indústrias, segurança, saúde entre outras. Levando em conta essa presença e o impacto que causa em nossas vidas, observa-se a importância de preparar cidadãos aptos a lidar e criar tais tecnologias. Embora existam várias abordagens que visam promover a educação de Machine Learning no mundo, no Brasil essas iniciativas ainda são escassas, ainda mais voltadas a levar o estudante a desenvolver a sua própria solução inteligente. Observando esta lacuna, o objetivo deste trabalho é desenvolver um curso online para o ensino de Machine Learning na educação básica brasileira. O curso propõe ensinar o desenvolvimento de aplicativos inteligentes voltados à classificação de imagens usando design thinking. Tais soluções são desenvolvidas no nível de create do ciclo Use-Modify-Create visando a adoção da estratégia de ação computacional, que tem por objetivo criar soluções úteis em suas vidas e comunidade. O curso é elaborado alinhado aos currículos de referência contemplando todo o processo de ML usando e a ferramenta Google Teachable Machine. O curso ensina também o design thinking para desenvolver soluções inteligentes por meio de aplicativos Android, utilizando o ambiente de programação visual App Inventor. Com base numa revisão da literatura, o curso online é projetado e o material didático desenvolvido. Visa-se que os resultados do presente trabalho possam ser utilizados no contexto da educação básica brasileira para disseminação do conhecimento sobre Machine Learning

Avaliação on-going e ex-post da Braga Capital Europeia da Juventude 2012 por parte dos seus participantes e residentes

O presente texto tem como objetivos principais aferir os impactes da Braga Capital Europeia da Juventude 2012 (CEJ 2012) percecionados pelos seus participantes e residentes, assim como a opinião dos mesmos sobre a programação e tipo de participação planeada e efetivada. Para atingir estes objetivos foram realizados dois inquéritos por entrevista diretiva em dois momentos. O primeiro, no período on-going (2012), foi aplicado a 110 participantes. O segundo, no período ex-post (2013), foi realizado junto de 73 residentes/visitantes. A análise comparativa dos dois inquéritos permite-nos retirar as seguintes conclusões: i) a internet e os amigos/familiares foram os principais meios utilizados para acesso à programação da CEJ 2012; ii) os eventos da CEJ 2012 com maior participação foram os musicais e a Noite Branca; iv) o grosso dos inquiridos teve uma perceção positiva da CEJ 2012, embora tenha sido mais positiva por parte dos do sexo feminino e dos que detinham até 9 anos de escolaridade

La importancia de la Navidad en los destinos de Gramado (Brasil) y Rovaniemi (Finlandia): un estudio de la percepción de stakeholders

Partindo do princípio de que o turismo é uma atividade que envolve um amplo grupo de atores, este artigo propõe a análise da percepção de stakeholders dos destinos de Gramado (Brasil) e de Rovaniemi (Finlândia), em relação ao turismo de cada cidade, especialmente no que se relaciona à principal atração dos destinos, o Natal. Para tanto, adota-se como metodologia de pesquisa a entrevista estandardizada, aplicada à atores ligados direta e indiretamente com a atividade turística dos destinos. Como resultado da pesquisa, observa-se a importância assumida pelo turismo, em especial do atrativo Natal, para o desenvolvimento dos destinos pesquisados, traduzida nas políticas públicas instituídas nos destinos e na inter-relação estabelecida entre os diferentes atores para a consolidação da marca “Natal” em cada destino.Accepting that tourism is an activity that involves a wide group of stakeholders, this paper proposes the analysis of the perception of stakeholders from the destinations of Gramado (Brazil) and Rovaniemi (Finland) related to tourism in each city, especially related to Christmas attraction. The research methodology consists of a standard interview applied to actors directly and indirectly linked to the tourist activity in the destinations. As a result of the research, it is observed the importance of tourism, especially Christmas related, for the development of the researched destinations. This success is closely related to the implementation of the public policies for the consolidation of the “Christmas” brand in both destinations and the inter-relationships established between the different stakeholders.Suponiendo que el turismo es una actividad que implica un amplio grupo de actores, el presente trabajo propone el análisis de la percepción de las partes interesadas de los destinos de Gramado (Brasil) y Rovaniemi (Finlandia), en relación con el turismo, especialmente en la principal atracción delos destinos, la Navidad. Así, se adopta la entrevista estandarizada como metodología de investigación, aplicada a los actores conectados directa y indirectamente con el turismo. Como resultado de la investigación, está la importancia adquirida por el turismo, especialmente la atracción de la Navidad para el desarrollo de los destinos, traducido en las políticas públicas establecidas y en las interrelaciónes entre los diferentes actores para la consolidación de la marca "Navidad" en cada destino

Políticas públicas para o turismo no Brasil: uma análise do Plano Nacional de Turismo para as cidades

Este estudo tem como objetivo discutir o Plano Nacional do Turismo Brasileiro - PNT 2007/2010, no que diz respeito às políticas públicas para o desenvolvimento turístico das cidades. Os Macros Programas Nacionais de infra-estrutura, equipamentos, transporte, informação, difusão, entre outros temas e programas do PNT são analisados através de pesquisa documental e discutidos. Esta discussão é baseada numa revisão de literatura. Como resultado, observa-se que o Plano Nacional do Turismo prioriza diretrizes de desenvolvimento do turismo regional, através da adopção de programas nacionais de macro estratégias que visam reforçar as regiões de turismo do Brasil. Conclui-se que apesar dos avanços nas políticas nacionais, é importante considerar a necessidade de maior diálogo entre os municípios e o Governo. Isto pode ser alcançado através da implementação de mecanismos para monitorar o processo de desenvolvimento do turismo nos centros de turismo importantes, dado o importante papel das cidades na eficácia das políticas nacionais.This study aims to discuss the Brazilian National Tourism Plan - PNT 2007/2010, with regard to public policies for tourism development of cities. The National Macro Programs on Infrastructures, Equipments, Transportation, Information Diffusion among other topics and the programs on the PNT are analyzed through documentary research and discussed. This discussion is based on a literature review. As a result, it is noted that the National Tourism Plan prioritizes regional tourism development guidelines, through the adoption of National Macro Programs aimed at strengthening the tourism regions of Brazil. It is concluded that despite the advances in the national policies, it is important to consider the need for greater dialogue between the Municipalities and the Government. This can be attained through the implementation of mechanisms to monitor the process of tourism 356 development in the major tourism centers, given the important role of cities in the effectiveness of national policies

The use of photos of the social networkis in shaping a new tourist destination: analysis of clusters in a GIS environment

The use of new photo-sharing services in social networks has favoured a perception of the interests of locals and visitors. The photos presented in these networks are geocoded by the users, residents or visitors, allowing extensive databases to be obtained. The research that was conducted between 2015 and 2016 followed an essentially quantitative approach. Based on the georeferenced photos on social networks, the main distribution patterns of places of interest to tourists, visitors and residents were analysed in a rural emergent tourist destination in northeastern Portugal. We used geographical information systems (GISs) to apply various spatial and statistical analysis techniques. One the main conclusions was that there is a high number of natural and cultural heritage locations with tourism potential, and, in some cases, their accessibility standards make them favourable destinations for tourists.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Mythes et croyances pendant la grossesse dans la région Nord-Ouest du Portugal et ses implications dans la santé des femmes

Tout au long de sa vie, la femme est confrontée à des récits narrant des expériences et des histoires qui se transmettent successivement de parents à enfants et qui, sauf en de rares cas, préfigurent des croyances et des mythes déterminants de ses comportements. Ceux-ci sont générateurs de craintes et de peurs à partir desquelles elle commence à construire la représentation de sa propre grossesse. Le présent article a pour base une étude que nous avons menée dans la région du Nord-Ouest du Portugal et qui a eu pour objectifs de rechercher si les femmes enceintes fréquentant les services de santé sont influencées par les mythes ou croyances et d´identifier des comportements découlant des croyances. L’élément principal de cette étude est que 82 % des femmes interrogées déclarent avoir été, plus ou moins, influencées par les mythes et les croyances.Throughout her life, the woman is confronted with tales of experiences and stories which are eternally passed on from parents to children, which in rare cases precede beliefs and myths determinants of their behaviours. These beliefs and myths generate fears and worries from which a woman bases the representation of her pregnancy. The main objective of this study held in the north-western region of Portugal is to confirm if the pregnant women who attend the public health services are, or not, influenced by myths or beliefs and to identify behaviours expressed by these woman that are directly dependent on the beliefs. The main conclusion that we may learn from this study is that 82 % of the one hundred women whom were interviewed mentioned to have been influenced, in greater or less importance, by myths and beliefs