Adubação verde em tomateiro cultivado em sistema de agricultura orgânica

O objetivo desse trabalho foi avaliar a produtividade de tomate-cereja em sistema de agricultura orgânica cultivado sob diferentes doses e épocas de aplicação da fitomassa de ervilha forrageira, ervilhaca comum e crotalaria spectabilis. O experimento foi conduzido no município de Guarapuava, PR, no período de outubro de 2005 a fevereiro de 2006 em delineamento de blocos ao acaso. Os tratamentos foram: ØFT – sem adição de resíduos de adubos verdes; 3EF – 3,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilha forrageira (Pisum sativum var. arvense); 6EF – 6,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilha forrageira; 9EF – 9,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilha forrageira; 3EF+3EC – 3,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilha forrageira + 3,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilhaca (Vicia sativa); 3EF+3EC+3CS – 3,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilha forrageira + 3,0 Mg ha-1 de fitomassa de ervilhaca + 3,0 Mg ha-1 de fitomassa de crotalária (Crotalaria spectabilis). Houve resposta crescente linear nos tratamentos ØFT, 3EF, 6EF, 9EF para as variáveis produtividade de tomate, número de tomates por planta e massa média do fruto de tomate-cereja. Os resultados evidenciaram que a adição de fitomassa de leguminosas foi  eficiente para aumentar a produtividade de tomateiro-cereja em sistema de agricultura orgânica. A aplicação de fitomassa em uma única aplicação foi mais eficiente do que o parcelamento da fitomassa ao longo do ciclo da cultura

Bovine in vitro embryo production protocol: does it really influence embryo cryotolerance?

The protocol of  in vitro production (IVP) of bovine embryos is one of the critical factors determining embryo viability after cryopreservation. In this study were used two differents protocols to produce IVP bovine embryos, with variations in protein source, oocyte/zygote density per media volume, with the aim to determine the in vitro and in vivo embryo survival after vitrification using hand-pulled glass micropipettes. Expanded blastocysts (D7) were morphologically selected by size (?180 ?m) and osmotic behavior before they were randomly allocated to sub-groups by protocol: non-vitrified embryos (control; C) and vitrified embryos (V). For the evaluation of the in vitro survival, control embryos and a group of warmed vitrified embryos were in vitro-cultured (IVC) for 72 h. Re-expansion rates of warmed embryos at 24 h of IVC were 94.8% and 93.2% for Protocols 1 and 2, respectively. Hatching rates at 72 h of IVC of embryos from Protocol 1 (C=80% and V=75.8%) tended to be higher (P=0.0561, Chi2 test) than those from Protocol 2 (C=67.2% and V=59.3%). For the evaluation of in vivo survival, 21 vitrified embryos per protocol were singly non-surgically transferred to synchronized recipients (n=42) after the in-straw cryoprotectant dilution, resulting in 4 (19%) pregnancies per group on Day 60 of gestation. In conclusion, despite a lower variation on in vitro embryo development between both IVP protocols, the use of different protocols under the same laboratory conditions did not afect the in vitro and in vivo embryo viability after vitrification into hand-pulled glass micropipettes

INFESTAÇÃO DE Bemisia tabaci BIÓTIPO B E TEORES DE AÇÚCARES NAS FOLHAS DE CULTIVARES DE TOMATEIRO FERTIRRIGADO COM CLORETO E SULFATO DE POTÁSSIO

Bemisia tabaci B biotype (whitefly) has been responsible for many losses on tomatoes, mainly due to irregular ripening of the fruits and decrease on yield potential. The aim of this study was to evaluate the effect of different potassium sources (K-sources), fertirrigated by drip irrigation system, on the infestation of B. tabaci B biotype and on the sugar content on the leaves of three different tomato cultivars.The experiment was carried out on greenhouse at the Experimental Station of the Instituto Agronômico (IAC), São Paulo, Brazil, between September 2000 and January 2001. Potassium Chlorate (KCl) and Potassium Sulphate (K 2 SO 4 ) were used as K-sources. Sweet Million, Rocio and Densus were the selected cultivars. Plants were cultivated on slabs filled with agricultural substratum and fertirrigated with nutritive solution. Evaluated parameters were: number of eggs and nymphs on the plants at 20 and 40 days after whitefly infestation; and reducing sugars, sucrose and total sugars on the leaves. Results showed that K-sources did not have influence on the number of eggs and nymphs. On the second evaluation date, cultivar effect was significant on oviposition. Leaf sugar content were influenced by K-sources. Tomato plants fertirrigated with K 2 SO 4 on nutritive solution presented higher values, for total sugar content on the leaves, in comparison with the plants treated with KCl on nutritive solution.A mosca branca Bemisia tabaci biótipo B é um inseto que tem causado inúmeros prejuízos ao tomateiro, principalmente devido ao amadurecimento irregular dos frutos e diminuição do potencial produtivo. Assim, objetivou-se estudar o efeito da aplicação de sulfato e cloreto de potássio, via fertirrigação por gotejamento, na infestação B. tabaci biótipo B e os teores de açúcares nas folhas de tomateiro. O experimento foi conduzido em estufa plástica no Núcleo Experimental de Campinas (IAC) em Campinas, São Paulo, no período de setembro de 2000 a janeiro de 2001. Utilizou-se cloreto de potássio (KCl) e sulfato de potássio (K 2 SO 4 ) como fontes de potássio e três cultivares de tomateiro, Sweet Million, Rocio e Densus. Estas três cultivares foram cultivadas em “slabs” contendo substrato agrícola e fertirrigadas com solução nutritiva. Foram avaliados o número de ovos e ninfas de mosca branca nas plantas de tomateiro em duas épocas distintas, aos 20 e 40 dias após a infestação com moscas brancas. Avaliaram-se também, açúcares redutores, sacarose e açúcares totais das folhas de tomateiro. Verificou-se que as fontes de potássio não influenciaram no número de ovos + ninfas de mosca branca. Porém, nas avaliações realizadas na segunda época de amostragem, verificou-se influência varietal sobre a oviposição da mosca branca. Já os açúcares contidos nas folhas de tomateiro foram influênciados pelo tipo de fonte de potássio. Os tomateiros fertirrigados com solução nutritiva de K 2 SO 4 obtiveram os maiores teores de açúcares totais nas folhas, comparados com os tomateiros fertirrigados com KCl

PRODUTIVIDADE E QUALIDADE DE FRUTOS DE CULTIVARES DE TOMATEIRO FERTIRRIGADO COM CLORETO E SULFATO DE POTÁSSIO

The objective of this work was to evaluate the yield and fruit quality of tomato fertigated with potassium chlorate and potassium sulphate by a drip system irrigation. The experiment was carried out in a plastic greenhouse at the Campinas Experimental Station, IAC, Campinas, São Paulo, Brazil, from September 2000 to January 2001. The tomato cultivars used were Sweet Million, Rocio and Densus that were cultivated on slabs with agricultural substratum. The yield and the quality of tomato fruits were evaluated. The fruit quality was evaluated by the determination of total soluble solids content (TSS), total tritable acidity (TTA), pH, dry matter (DM) and the TSS/TTA ratio. The different sources of potassium affected tomato yield only for the genotype Densus. The pH of tomato juice was also influenced by potassium sources. The TSS, TTA, DM, and TSS/TTA values were only affected by the genotype.O objetivo deste trabalho foi de avaliar o efeito da aplicação de sulfato e cloreto de potássio, via fertirrigação por gotejamento, na produtividade e nas características de qualidade de frutos de tomateiro. O experimento foi instalado em estufa plástica no Núcleo Experimental de Campinas (IAC), em Campinas, São Paulo, no período de setembro de 2000 a janeiro de 2001. Foram utilizados cloreto de potássio (KCl) e sulfato de potássio (K2SO4) como fontes de potássio e as cultivares de tomateiro Sweet Million, Rocio e Densus. As três cultivares foram cultivadas em "slabs" contendo substrato agrícola, em condições de ambiente protegido. Avaliou-se a produtividade do tomateiro e a qualidade dos frutos. Para avaliação da qualidade dos frutos determinaram-se os teores de sólidos solúveis totais (SST), acidez total titulável (ATT), pH, massa seca (MS) e a relação SST/ATT. Verificou-se que a fonte de potássio influenciou na produtividade do tomateiro de forma significativa somente para a cultivar Densus. Com relação aos parâmetros referentes a qualidade de frutos, somente o pH teve efeito da nutrição. Os valores de SST, ATT, MS e SST/ATT somente tiveram influência da cultivar utilizada

Transferência intrafalopiana de gametas (GIFT) em eqüínos

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Otimização do sistema de produção de clones por transferência nuclear de célula somática (NTSC)

A técnica de transferência nuclear é uma ferramenta que possibilita a produção de embriões clones que podem ser utilizados tanto na clonagem reprodutiva como no modelo para o estudo de diversos mecanismos fisiológicos durante o desenvolvimento embrionário. Neste sentido, embriões clones bovinos foram produzidos por transferência nuclear, com o objetivo de estabelecer a técnica de clonagem, bem como otimizála para as condições do Laboratório de Embriologia e Biotécnicas de Reprodução da UFRGS. Durante este estudo, 1.123 estruturas foram reconstruídas em diferentes condições, sendo que 95 blastocistos foram produzidos em 56 replicações. O primeiro blastocisto foi produzido na 5ª rotina. Após a transferência de parte destes embriões, 13 prenhezes foram estabelecidas, entretanto, a maioria delas foi interrompida no terço inicial da gestação. Uma prenhez gemelar alcançou 260 dias, momento em que os fetos foram abortados. Outra gestação foi a termo, com o nascimento de um clone vivo, porém, o animal veio a óbito 42 horas após o nascimento

Uso de oócitos bovinos como citoplasma receptor na produção de embriões por transferência nuclear de célula somática interespécie (NTSCi) Use of bovine oocytes as recipient cytoplasm in the production of embryos through nuclear transfer of interspecies so

ABSTRACT Interspecies embryo clones have been produced by research groups with relative success in some species. Bovine oocytes matured in vitro and enucleated by micromanipulation were used in three experiments as recipeient cytoplasm in nuclear transfer of ovine, caprine and porcine fibroblasts. The fibroblasts were cultivated until the third passage before being frozen and used. The electrofusion was induced by an application of a 20V pulse during 45 ms. The activation was done with 5 mM ionomycin and subsequently 2 mM 6DMAP. NTSC bovine embryos, NTSCi caprine and ovine embryos were cultivated in SOF medium and NTSCi porcine embryos were cultivated in NCSU23 medium. The fusion rates of the reconstructed complexes with bovine cells did not differ from those observed with ovine cells (88.2%), caprine cells (74.1%) and porcine cells (79.4%). The cleavage rates in ovine (60.3%), caprine (68.4%) and porcine (57.1%) NTSCi groups did not differ from the control group NTSC bovine. The blastocyst rate observed in the group of NTSCi ovine embryos (10.3%) was similar to the group of NTSC bovine embryos (12.7%). In NTSCi caprine embryos, 5.3% of the embryos developed up to the blastocyst stage, while in the NTSCi porcine group there was no development up to the blastocyst stage. In conclusion, the bovine cytoplasm was able to support the embryo development in NTSCi up to the blastocyst stage using ovine and caprine fibroblasts as donor cells. Keywords: Embryo, Clones, Interspecies, Nuclear Transfer, In vitro. RESUMO Embriões clones interespécie vêm sendo produzidos por diferentes grupos de pesquisa, com relativo sucesso em algumas espécies. Oócitos bovinos maturados in vitro e enucleados por micromanipulação foram utilizados em três experimentos como citoplasma receptor na transferência nuclear de fibroblastos ovinos, caprinos e suínos. Os fibroblastos foram cultivados até a terceira passagem antes de serem congelados e utilizados. A eletrofusão foi induzida pela aplicação de um pulso de 20 V durante 45 ms. A ativação foi realizada com 5 mM de ionomicina e 2 mM de 6DMAP. Embriões NTSC bovinos, NTSCi caprinos e ovinos foram cultivados em meio SOF, e embriões NTSCi suínos foram cultivados em NCSU23. As taxas de fusão dos complexos reconstruídos com células bovinas não diferiram daquelas observadas com células ovinas (88,2%), caprinas (74,1%) e suínas (79,4%). As taxas de clivagem nos grupos NTSCi ovino (60,3%), caprino (68,4%) e suína (57,1%) não diferiram dos grupos controles NTSC bovino. A taxa de blastocisto observada nos embriões NTSCi ovinos (10,3%) foi semelhante à taxa observada no grupo NTSC bovino (12,7%). No grupo NTSCi caprino, 5,3% dos embriões chegaram ao estádio de blastocisto, enquanto que no grupo NTSCi suíno não houve desenvolvimento até o estádio de blastocisto. O citoplasma bovino foi capaz de suportar o desenvolvimento de embriões NTSCi até o estádio de blastocisto utilizando-se núcleo de fibroblatos ovinos e caprinos

In Vitro Development and Cell Allocation After Aggregation of Syngeneic Wild Type and Fluorescence-Expressing Bovine Cloned Embryos

Background: The in vitro production (IVP) of embryos by in vitro fertilization or cloning procedures has been known to cause epigenetic changes in the conceptus that in turn are associated with abnormalities in pre- and postnatal development. Handmade cloning (HMC) procedures and the culture of zona-free embryos in individual microwells provide excellent tools for studies in developmental biology, since embryo development and cell allocation patterns can be evaluated under a wide range of embryo reconstruction arrangements and in in vitro embryo culture conditions. As disturbances in embryonic cell allocation after in vitro embryo manipulations and unusual in vivo conditions during the first third of pregnancy appear to be associated with large offspring, embryo aggregation procedures may allow a compensation for epigenetic defects between aggregated embryos or even may influence more favorable cell allocation in embryonic lineages, favoring subsequent development. Thus, the aim of this study was to evaluate in vitro embryo developmental potential and the pattern of cell allocation in blastocysts developed after the aggregation of handmade cloned embryos produced using syngeneic wild type and/or transgenic somatic cells. Materials, Methods & Results: In vitro-matured bovine cumulus-oocyte complexes (COC) were manually bisected after cumulus and zona pellucida removal; then, two enucleated hemi-oocytes were paired and fused with either a wild type (WT) or a GFP-expressing (GFP) fetal skin cell at the 11th and 19th passages, respectively. Following chemical activation, reconstructed cloned embryos and zona-free parthenote embryos were in vitro-cultured in microwells, for 7 days, either individually (1 x 100%) or after the aggregation of two structures (2 x 100%) per microwell, as follows: (G1) one WT cloned embryo; (G2) two aggregated WT embryos; (G3) one GFP cloned embryo; (G4) two aggregated GFP embryos; (G5) aggregation of a WT embryo and a GFP embryo; (G6) one parthenote embryo; or (G7) two aggregated parthenote embryos. Fusion (clones), cleavage (Day 2), and blastocyst (Day 7) rates, and embryonic cell allocation were compared by the. 2 or Fisher tests. Total cell number (TCN) in blastocysts was analyzed by the Student's test (P < 0.05). Fusion and cleavage rates, and cell allocation were similar between groups. On a per WOW basis, development to the blastocyst stage was similar between groups, except for lower rates of development seen in G3. However, when based on number of embryos per group (one or two), blastocyst development was higher in G1 than all other groups, which were similar between one another. Cloned GFP embryos had lower in vitro development to the blastocyst stage than WT embryos, which had more TCN than parthenote or aggregated chimeric WT/GFP embryos. Aggregated GFP embryos had fewer cells than the other embryo groups. Discussion: The in vitro development of GFP cloned embryos was lower than WT embryos, with no effects on cell allocation in resulting blastocysts. Differences in blastocyst rate between groups were likely due to lower GFP-expressing cell viability, as GFP donor cells were at high population cell doublings when used for cloning. On a per embryo basis, embryo aggregation on Day 1 resulted in blastocyst development similar to non-aggregated embryos on Day 7, with no differences in cell proportion between groups. The use of GFP-expressing cells was proven a promising strategy for the study of cell allocation during embryo development, which may assist in the elucidation of mechanisms of abnormalities after in vitro embryo manipulations, leading to the development of improved protocols for the in vitro production (IVP) of bovine embryos.Universal Grant [2008-2010/CNPq/Brazil]Universal GrantCAV/UDESC [1.01.717/06]CAV/UDESCCNPq (Brazil)CNPq/Brazi