The Structure of the Transcriptional Repressor KstR in Complex with CoA Thioester Cholesterol Metabolites Sheds Light on the Regulation of Cholesterol Catabolism in Mycobacterium tuberculosis

Cholesterol can be a major carbon source for Mycobacterium tuberculosis during infection, both at an early stage in the macrophage phagosome and later within the necrotic granuloma. KstR is a highly conserved TetR family transcriptional repressor that regulates a large set of genes responsible for cholesterol catabolism. Many genes in this regulon, including kstR, are either induced during infection or are essential for survival of M. tuberculosis in vivo. In this study, we identified two ligands for KstR, both of which are CoA thioester cholesterol metabolites with four intact steroid rings. A metabolite in which one of the rings was cleaved was not a ligand. We confirmed the ligand-protein interactions using intrinsic tryptophan fluorescence and showed that ligand binding strongly inhibited KstR-DNA binding using surface plasmon resonance (IC50 for ligand = 25 nM). Crystal structures of the ligand-free form of KstR show variability in the position of the DNA-binding domain. In contrast, structures of KstR·ligand complexes are highly similar to each other and demonstrate a position of the DNA-binding domain that is unfavorable for DNA binding. Comparison of ligand-bound and ligand-free structures identifies residues involved in ligand specificity and reveals a distinctive mechanism by which the ligand-induced conformational change mediates DNA release

Long-term azithromycin therapy in patients with severe COPD and repeated exacerbations

The aim of this study was to determine whether long-term intermittent azithromycin therapy reduces the frequency of exacerbation in severe chronic obstructive pulmonary disease (COPD). We retrospectively investigated the clinical benefits of long-term azithromycin (500 mg orally three times per week) over 12 months in patients with severe COPD and a minimum of four acute exacerbations (AECOPD) per year or chronic bronchial colonization by Pseudomonas aeruginosa, comparing the number of AECOPD, hospitalizations due to respiratory disease, days of hospital stay, and bacterial infections during azithromycin treatment and in the year prior to this therapy. Twenty patients who completed the 12-month treatment period were analyzed. No clinically significant adverse events were observed during azithromycin treatment. Compared with baseline data, azithromycin therapy significantly reduced the number of AECOPD (2.8 ± 2.5 versus 6.8 ± 2.8, P < 0.001), hospitalizations (1.4 ± 1.5 versus 3.6 ± 1.4, P < 0.001), and cumulative annual days of hospital stay (25 ± 32.2 versus 43.7 ± 21.4, P = 0.01). The improvement was particularly significant in patients with exacerbations caused by common potentially pathogenic microorganisms, who had 70% fewer AECOPD and hospitalizations. Patients colonized by P. aeruginosa had reductions of 43% in AECOPD and 47% in hospitalizations. Long-term azithromycin is well tolerated and associated with significant reductions in AECOPD, hospitalizations, and length of hospital stay in patients with severe COPD

Afectació respiratòria en la camptocòrmia

La camptocòrmia és una malaltia neurològica molt infreqüent de la que fins ara es desconeixien les seves implicacions a nivell respiratori. En el nostre estudi, hem pogut observar una elevada prevalença d'alteracions espiromètriques i gasomètriques que en un 46% dels casos eren moderades o greus. Aquests trastorns també s'observaven durant la nit en forma d'hipoventilació alveolar. Tots aquests trastorns eren més greus en els malalts diagnosticats de camptocòrmies secundàries que en pacients amb distròfia aïllada de la línia mitja

Synthèse de HPr(Ser-P)(His~P) chez Streptococcus Salivarius

HPr fait partie du système de transport phosphoénolpyruvate: sucre phosphotransferase (PTS). HPr peut être phosphorylée sur Hisis, par l'enzyme I (El) du PTS, et sur Sér46, par la HPr(Ser) kinase/phosphorylase (HprK/P). Finalement, HPr peut être phosphorylée sur les deux résidus, ce qui génère HPr(Ser-P)(His~P). L'objectif principal de l'étude présentée dans cette thèse était de déterminer par quelle(s) voie(s) HPr(Ser-P)(His~P) est synthétisée chez les streptocoques. Théoriquement, HPr(Ser-P)(His~P) peut être synthétisée via la phosphorylation de HPr(Ser-P) par El et/ou de HPr(His-P) par HprK/P. Nous avons étudié la cinétique de ces voies de synthèse chez Streptococcus salivarius. Les résultats de l'étude avec El ont montré que (i) la kcat/Km pour HPr(Ser-P) était ~5 OOOx plus faible que pour HPr à pH 7,9 et 37°C, (ii) aucun intermédiaire glycolytique ne stimulait la synthèse de HPr(Ser-P)(His~P), (iii) la synthèse de HPr(Ser-P)(His~P) était ~8x plus efficace à pH acide, des conditions retrouvées dans le cytoplasme des streptocoques en croissance, et (iv) la synthèse du HPr(Ser-P)(His~P) de Bacillus subtilis par El de cet organisme était aussi stimulée à pH acide. Les résultats suggèrent que la synthèse de HPr(Ser-P)(His~P) chez les streptocoques résulterait des concentrations élevées en HPr(Ser-P) et de la stimulation de la réaction à pH acide. L'absence de HPr(Ser-P)(His~P) chez B. subtilis cultivée en présence de glucose s'expliquerait en partie par le fait que cette bactérie maintient son pH intracellulaire constamment au-dessus de la neutralité. Les résultats de l'étude avec HprK/P ont montré que les kQJKm pour les HPr(H15D) et HPr(H15E) étaient ~13x plus faibles que pour HPr à pH 7,4 et 37°C. Dans des conditions où HPr(His~P) était stable (pH 8,6 et 15°C), les kcJKm pour HPr(H15D) et HPr(His~P) Ill étaient respectivement neuf et 26 fois plus faibles que pour HPr. Finalement, la phosphorylation de HPr(H15D) n'était que marginalement stimulée à pH acide et le FBP ne stimulait pas la synthèse de HPr(Ser-P)(His~P). Les résultats suggèrent que (i) l'inefficacité de la phosphorylation de HPr(His~P) résulterait de la présence de la charge négative en position 15 et d'autres éléments structuraux et (ii) la contribution de HprK/P à la synthèse de HPr(Ser-P)(His~P) chez les streptocoques serait marginale

Afectació respiratòria en la camptocòrmia

La camptocòrmia és una malaltia neurològica molt infreqüent de la que fins ara es desconeixien les seves implicacions a nivell respiratori. En el nostre estudi, hem pogut observar una elevada prevalença d’alteracions espiromètriques i gasomètriques que en un 46% dels casos eren moderades o greus. Aquests trastorns també s’observaven durant la nit en forma d’hipoventilació alveolar. Tots aquests trastorns eren més greus en els malalts diagnosticats de camptocòrmies secundàries que en pacients amb distròfia aïllada de la línia mitja

La Compétence émotionnelle en classe de français langue étrangère dans le cadre de la LOMLOE grâce à la numérisation des pratiques orales.

Au moment de s’exprimer en classe, les élèves sont souvent sujets au stress et à des angoisses, en particulier lorsqu’il s’agit de français langue étrangère. Ils doivent être capables de pouvoir parler et développer des idées dans une langue autre que la leur et faire face à un auditoire composé des autres élèves et du professeur. Cette gestion des émotions est primordiale afin de pouvoir développer et améliorer les activités langagières en lien avec la production orale. Afin de pouvoir favoriser cet apprentissage, il est intéressant d’utiliser différents outils et formes d’enseignement et pour cela, les nouvelles technologies s’avèrent être une bonne alternative à l’apprentissage traditionnel. À travers le texte de la nouvelle loi d’enseignement en Espagne, il est important de préciser que l’on retrouve ces compétences et c’est un objectif qui doit être maîtrisé par les élèves. L’apprentissage de la langue étrangère se fera donc grâce aux nouvelles technologies et le développement et l’acquisition des compétences seront alors facilités par la pratique orale de la langue française.Au moment de s’exprimer en classe, les élèves sont souvent sujets au stress et à des angoisses, en particulier lorsqu’il s’agit de français langue étrangère. Ils doivent être capables de pouvoir parler et développer des idées dans une langue autre que la leur et faire face à un auditoire composé des autres élèves et du professeur. Cette gestion des émotions est primordiale afin de pouvoir développer et améliorer les activités langagières en lien avec la production orale. Afin de pouvoir favoriser cet apprentissage, il est intéressant d’utiliser différents outils et formes d’enseignement et pour cela, les nouvelles technologies s’avèrent être une bonne alternative à l’apprentissage traditionnel. À travers le texte de la nouvelle loi d’enseignement en Espagne, il est important de préciser que l’on retrouve ces compétences et c’est un objectif qui doit être maîtrisé par les élèves. L’apprentissage de la langue étrangère se fera donc grâce aux nouvelles technologies et le développement et l’acquisition des compétences seront alors facilités par la pratique orale de la langue française

Estrategias para la comprension lectora a partir de la noticia para los estudiantes del grado 3-2 de la institución educativa Luis delfín Insuasty Rodriguez INEM - Pasto.

Este trabajo de investigación tiene como objetivo fortalecer la comprensión lectora a partir de la noticia para los estudiantes del grado 3-2 de la Institución Educativa Municipal INEM de Pasto, año 2016. La pregunta del problema surge a raíz de las observaciones realizadas en el aula 3-2 encontrando en los educandos debilidades en la comprensión lectora por esa razón, se procede a realizar un diagnóstico con base a la siguiente reflexión ¿Cómo deben leer mis estudiantes? ; De esta pregunta se rediseñaron ocho indicadores que nos sirve para detectar en que incurren equivocadamente, luego se realizaron siete estrategias para la comprensión lectora en noticias usando como base teórica la propuesta de Colombia Aprende, luego se procedió a crear la propuesta llamada: Me informo comprendo y aprendo, el cual permite que los estudiantes fortalezcan su comprensión lectora a través de la noticia como estrategia metodológica realizando ejercicios para grado tercero