Effects of substrate-derived cues in driving the selforganization of organoid-derived intestinal epithelia

[eng] Intestinal cells self-organize into 3-dimensional (3D) organoids that recapitulate the in vivo structural and functional characteristics when embedded in a 3D cell-derived protein mixture (Matrigel). However, these very same cells self-organize into 2-dimensional (2D) intestinal epithelial monolayers that recapitulate the in vivo-like cell organization when seeded on thin layers of the same cell-derived protein mixture. Moreover, in vivo, the intestine integrates regulation from paracrine signals to establish its characteristic crypt-villus axis self- organization. However, direct experimental manipulation of these paracrine signals, as well as their functional concentrations and effects at the cellular level, has been hampered by limitations of the in vivo and in vitro currently available systems. In general, changes in epithelial cell organization are characterized by a cross-talk between cell-substrate and cell-cell interactions, but the role of the ECM dimensionality, protein composition and spatial distribution in the intestinal epithelial cells’ organization is not fully understood. In this thesis, we show that intestinal epithelial cells self-organize in 2D-monolayers or 3D-tubular networks depending on the Matrigel protein concentration when the dimensionality is fixed. This self-assembles tubular networks have inner apical polarization and are similar to soap foams or de-wetted collagen networks. They have well defined topological and metrical properties and become spontaneously ordered at large length scales. Interestingly, stem cells have a particular dynamic during the formation of each self-organized patterns. On low Matrigel concentration, stem cells present a confined random movement to form a 2D-monolayer. In contrast, on higher Matrigel concentration, stem cells perform a direct motion towards a specific target to form the 3D- tubular networks. By reducing the proportion of stem cells in the culture, the formation of 3D-tubular networks is impaired. Instead, primary cells form aggregates when seeded above the transition protein concentration, similar to two other epithelial cell types (Caco-2 and MDCK cells). On the other hand, the 2D-monolayers formed on low Matrigel concentration contain crypt- and villus-like domains resembling those found in vivo. These compartments are randomly distributed and their shape is not uniform. However, by producing localized micropatterns of immobilized Wnt and ephrin factors on freeze-dried Matrigel-coated substrates by microcontact printing, we can drive the compartmentalization of the intestinal epithelial monolayers by spatially positioning the crypt- and villus-like domains. Finally, by changing the shape and dimension of the patterns we can control the distance between the crypt-like domains as well as their dimensions and shape. Overall, our experiments illustrate how Matrigel concentration regulates intestinal epithelial cell organization as a function of cell-substrate adhesion, and show that primary intestinal epithelial cells self-organize in structures with well-defined sizes and shapes independently of dimensionality or external signaling gradients. Also, we show that the amount of stem cells in the culture regulates the geometry of those self-organized structures. On the other hand, micropatterns of immobilized proteins to the ECM provides accurate control of the crypt-villus domain positioning in our epithelial monolayers. Thus, our work could yield insights about the roles of stem cells and protein concentration in tissue morphogenesis and their influence in the in vivo tissue morphological features such as the dimension of the crypts. In addition, we believe our platform will allow an easy and reliable manner to analyze the effect of relevant proteins on the epithelial cell compartmentalization, as well as the study of important intestinal epithelial processes such as stem cells proliferation, cell migration and differentiation both in homeostasis and pathological processes.[spa] Las células intestinales cultivadas dentro de Matrigel se auto-organizan en organoides tridimensionales (3D) que recapitulan la organización del tejido in vivo. Sin embargo, estas mismas células cultivadas sobre láminas del mismo sustrato se auto-organizan en monocapas bidimensionales (2D) que también recapitulan la organización del tejido in vivo. Además, in vivo, el intestino integra señales paracrinas para establecer su característica auto- organización en criptas y vellosidades. Sin embargo, la manipulación de estás señalizaciones se ha visto obstaculizada por limitaciones en los sistemas in vivo e in vitro actuales. En general, la organización epitelial se caracteriza por interacciones célula-célula y célula-sustrato. Sin embargo, no se acaba de entender el rol de la dimensión, la composición y la distribución de la matriz extracelular (ECM) sobre la organización de las células epiteliales del intestino. En esta tesis, se analiza la organización de células epiteliales en monocapas 2D o redes tubulares 3D en función de la adhesión célula-sustrato. De esta manera, se ilustra la organización en estructuras con tamaños y formas bien definidas independientemente de la dimensionalidad o señalizaciones externas. Además, la proporción de células madre regula la geometría de dichas estructuras. Por otro lado, en contraste con lo que se observa in vivo, los dominios de cripta de las monocapas están desordenados y su forma no es uniforme. Mediante una plataforma que localiza micropatrones de proteínas sobre la ECM, controlamos el posicionamiento de los dominios de cripta-vellosidad. Para concluir, nuestro trabajo proporciona información sobre como influencia la composición y la distribución de la ECM y las células madre en la morfología del tejido in vivo, como la dimensión de las criptas. Además, la plataforma permite analizar el efecto de diferentes proteínas en la compartimentación de las células y en otros procesos epiteliales como proliferación, migración o diferenciación celular, tanto en homeostasis como en proceso patológicos

Proyecto de planta fotovoltaica flotante de 10 MWp en el embalse de Alange (provincia de Badajoz)

Actualmente gran parte del mundo en el que vivimos está apostando por una transición energética hacia fuentes más limpias de cara a afrontar el grave problema climático del planeta. Esta transición energética actualmente pasa, principalmente, por instalar grandes plantas de energía eólica y de energía fotovoltaica a lo largo de todo el territorio de un país. La ocupación de grandes extensiones de terreno (especialmente en el caso de la fotovoltaica) puede provocar conflicto de intereses en el uso del suelo y eliminación de parte del hábitat de especies sensibles. Es por esto por lo que se está comenzando a desarrollar a día de hoy proyectos de fotovoltaica flotante a escala industrial. Esta tecnología consiste en la colocación de módulos fotovoltaicos sobre estructuras flotantes. Las estructuras se ubican sobre balsas o embalses y son sujetadas mediante unos cabos que evitan su desplazamiento a lo largo de la lámina de agua. Este trabajo fin de máster busca realizar un proyecto técnico completo de una planta flotante con intención de mostrar todos los puntos clave y característicos de este tipo de instalaciones. Para ello, se comienza mostrando las ventajas de este tipo de instalaciones sobre las terrestres convencionales. Posteriormente, se muestra el estado del arte de la tecnología flotante, exponiendo los diferentes fabricantes y tecnologías. Una vez mostrada la tecnología existente, se selecciona el embalse para la ubicación de la planta en base a unos criterios específicos. Ya en la parte técnica, se dimensiona una instalación fotovoltaica con una potencia pico de 10 MW y una potencia nominal de 7,77 MW. En este apartado técnico se dimensionan y calculan todos los equipos e instalaciones eléctricas relativas al campo fotovoltaico. Seguidamente, se han realizado diferentes estudios respecto a la instalación propuesta. Estos estudios abarcan desde la influencia del decremento de temperatura por la influencia del agua en los módulos fotovoltaicos a un estudio de sombras proyectadas sobre el pantano pasando por un estudio económico que asegure la viabilidad económica del Proyecto acompañado de su correspondiente presupuesto. Con todo ello, se muestra a través de los estudios técnicos, energéticos y financieros como esta nueva tecnología es una alternativa real y viable frente a proyectos más convencionales en terrenos donde exista un problema con la disponibilidad del suelo.Currently, a large part of the world in which we live is opting for a transition towards cleaner energy sources in order to face /tackle the planet's serious environmental challenge. The current energy transition is mainly carried out by installing large wind and photovoltaic power plants throughout a country's territory. The occupation of large tracts of land (especially in the case of photovoltaic) can lead to conflicts of interest in land use and the elimination of part of the habitat of sensitive species. This is why floating photovoltaic projects are now being developed on an industrial scale. This technology consists of placing photovoltaic modules on floating structures. The structures are placed on ponds or reservoirs and are held in place by ropes that prevent them from moving along the sheet of water. This project aims to carry out a complete technical project of a floating plant with the intention of showing all the key and characteristic points of this type of installation. For this purpose, the advantages of this type of installations over conventional land-based ones are presented in the first place. Then, the state of the art of floating technology is shown, exposing the different manufacturers and technologies. Once the existing technology has been shown, the reservoir for the location of the plant is selected on the basis of specific criteria. In the technical part, a photovoltaic plant with a peak power of 10 MW and a nominal power of 7.77 MW is dimensioned. In this technical section, all the equipment and electrical installations related to the photovoltaic plant are dimensioned and calculated. Subsequently, various studies have been carried out with regard to the proposed installation. These studies range from the influence of the decrease in temperature due to the influence of the water on the photovoltaic modules to a study of the shadows cast on the reservoir, including an economic study to ensure the economic viability of the project and its corresponding budget. Technical, energy and financial studies show that this new technology is a real and viable alternative to more conventional projects in areas where there is a problem with the availability of land.Universidad de Sevilla. Máster en Ingeniería Industria

Marketing de influencers, una nueva estrategia publicitaria

Con la llegada de la web 2.0 surgió la bidireccionalidad en la red y con ello, el auge de las redes sociales y blogs. Tras la irrupción de la era digital, han aparecido nuevas estrategias de marketing que muchos anunciantes están sabiendo aprovechar. El presente trabajo se centra en el marketing de influencia, una herramienta relativamente nueva, que permite al anunciante llegar a su target a través de la red mediante los influencers, los cuales han llegado a convertirse en prescriptores de las marcas. Estos nuevos asesores de los consumidores aportan más credibilidad y confianza que la comunicación por parte de la propia empresa, por este motivo se pretende investigar la gestión de esta estrategia de comunicación cada vez más utilizada por los anunciantes y analizar por qué se ha convertido en una estrategia de referencia hoy en día.Grado en Publicidad y Relaciones Pública

Continuous infusion of ceftazidime in critically ill patients undergoing continuous venovenous haemodiafiltration: pharmacokinetic evaluation and dose recommendation

INTRODUCTION: In seriously infected patients with acute renal failure and who require continuous renal replacement therapy, data on continuous infusion of ceftazidime are lacking. Here we analyzed the pharmacokinetics of ceftazidime administered by continuous infusion in critically ill patients during continuous venovenous haemodiafiltration (CVVHDF) in order to identify the optimal dosage in this setting. METHOD: Seven critically ill patients were prospectively enrolled in the study. CVVHDF was performed using a 0.6 m(2 )AN69 high-flux membrane and with blood, dialysate and ultrafiltration flow rates of 150 ml/min, 1 l/hour and 1.5 l/hour, respectively. Based on a predicted haemodiafiltration clearance of 32.5 ml/min, all patients received a 2 g loading dose of ceftazidime, followed by a 3 g/day continuous infusion for 72 hours. Serum samples were collected at 0, 3, 15 and 30 minutes and at 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24, 36, 48 and 72 hours; dialysate/ultrafiltrate samples were taken at 2, 8, 12, 24, 36 and 48 hours. Ceftazidime concentrations in serum and dialysate/ultrafiltrate were measured using high-performance liquid chromatography. RESULTS: The mean (± standard deviation) elimination half-life, volume of distribution, area under the concentration-time curve from time 0 to 72 hours, and total clearance of ceftazidime were 4 ± 1 hours, 19 ± 6 l, 2514 ± 212 mg/h per l, and 62 ± 5 ml/min, respectively. The mean serum ceftazidime steady-state concentration was 33.5 mg/l (range 28.8–36.3 mg/l). CVVHDF effectively removed continuously infused ceftazidime, with a sieving coefficient and haemodiafiltration clearance of 0.81 ± 0.11 and 33.6 ± 4 mg/l, respectively. CONCLUSION: We conclude that a dosing regimen of 3 g/day ceftazidime, by continuous infusion, following a 2 g loading dose, results in serum concentrations more than four times the minimum inhibitory concentration for all susceptible pathogens, and we recommend this regimen in critically ill patients undergoing CVVHDF

Biblioteca virtual redELE

Memoria de máster (Universidad Nebrija, 2006)Se expone una propuesta didáctica para la enseñanza de la pronunciación a estudiantes de español como lengua extranjera. Se enmarca dentro de un enfoque orientado a la acción, concretamente la enseñanza mediante tareas y el uso de la música como elemento lúdico y facilitador. Los alumnos tienen como objetivo elaborar una tarea final: la grabación de un texto publicitario. Esta actividad está centrada en la producción oral y en la escucha, también incluye creatividad y observación previa de modelos reales. Para la consecución del objetivo se presentan tareas posibilitadoras tanto de comunicación como de apoyo lingüístico, así como un entrenamiento rítmico-musical para la superación de algunos problemas articulatorios.MadridES

Propuesta did\ue1ctica para la pr\ue1ctica de tenis de mesa en centros escolares de Educaci\uf3n Primaria /

Trabajo Fin de Grado-Universidad Pontificia de Salamanca, Grado en Ciencias de la Actividad F\uedsica y del Deporte, Facultad de Educaci\uf3n, 2022En este trabajo se realiza una propuesta para acercar el tenis de mesa a los centros escolares como alternativa deportiva, incluyendo esta pr\ue1ctica en los cursos superiores de Educaci\uf3n Primaria, de forma escolar y extraescolar y en la poblaci\uf3n de Salamanca

Etude de la diffusion des b-lactamases à spectre étendu de type CTX-M chez les entérobactéries dans la région stéphanoise

LYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF