Understanding how capping protein cooperates with aPKC to maintain epithelial integrity in Drosophila imaginal disc

Tese de mestrado, Biologia (Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento), Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2010Epithelial integrity generally depends on the balance between the stability and remodelling of adherens junctions (AJs). Growing evidence indicates that endocytosis has a central role in maintaining AJs in a state of dynamic equilibrium. However, it is not currently understood how AJs remodelling is achieved without losing epithelial integrity. In this work, I found that Capping Protein (CP), which prevents extension of the barbed ends of actin filaments, interacts genetically with atypical protein kinase C (aPKC), a major effector of the Par-aPKC complex, to maintain epithelial integrity in Drosophila wing imaginal disc. This genetic interaction appears to have differential requirements along the wing disc, since decreasing CP and aPKC levels induce extrusion and death of wing blade cells, whereas cells in the distal hinge region seem to overproliferate. Interestingly, loss of CP results in a significant reduction of aPKC from the apical membrane, suggesting that CP may restrict apical localization of aPKC, which in turn, is required to control AJs dynamics. In addition, similar to apkc mutant tissues, loss of CP leads to decreased apical levels of the AJs components, E-Cadherin (E-Cad) and Armadillo (Arm), suggesting that both CP and aPKC promote AJs stability by regulating early endocytic events. Therefore, by promoting the formation of a highly branched actin network, CP could have a putative role in AJs stability and remodelling by restricting aPKC to the apical membrane and by promoting early endocytic events. Taken together, the presented data highlight the crucial synergy between polarity complexes and actin cytoskeleton in regulating AJs dynamics, which is intimately linked to the maintenance of epithelial integrity.Os tecidos epiteliais possuem duas propriedades contraditórias: têm uma arquitectura robusta, necessária para a sua estabilidade, porém exibem uma extensa plasticidade de modo a permitir eventos celulares tais como divisão e morte celular [1, 2]. Quando ocorre uma perda na regulação deste balanço entre estabilidade e plasticidade, as células epiteliais perdem a adesão entre elas e adquirem a capacidade de sobreproliferar. De facto, a maioria dos tumores malignos surge apartir de epitélios com defeitos no controlo da adesão e proliferação [3, 4]. A adesão entre células epiteliais é em parte devida à acção coesiva das junções aderentes (AJs), cuja principal função é ligar o citoesqueleto de actina entre células vizinhas. As AJs circundam a região apical das células e são principalmente compostas pela proteína transmembranar E-Caderina (E-Cad). Através do seu domínio citoplasmático, E-Cad associa-se a β-catenina (em Drosophila codificada por armadillo, arm) e α-catenina, que por sua vez, promove a ligação ao citoesqueleto de actina [5]. Apesar de terem um papel crucial na manutenção da integridade epitelial, recentes estudos têm revelado que as AJs são constantemente remodeladas através de endocitose [6-8], processo celular pelo qual moléculas extracelulares ou associadas à membrana são internalizadas para o interior das células [9, 10]. No entanto, ainda não é compreendido como é que a remodelação das AJs é estabelecida sem que a integridade do epitélio seja perdida. Na região apical às AJs existem dois complexos proteicos que interactuam entre si de modo a promover a polaridade dos tecidos epiteliais: o complexo composto por Crumbs (Crb), Stardust and Discs lost, denominado por complexo Crb, e o complexo constituído por Bazooka/Par3, proteína cinase C atípica (aPKC) e Par6, designado por complexo Par-aPKC [11]. O complexo Par-aPKC é activado através da associação entre Par6 e a Rho-like GTPase Cdc42. Após esta activação, aPKC fosforila Crb, que por sua vez, promove a estabilização das Ajs [12, 13]. Curiosamente, foi demonstrado que a remoção de cdc42 ou apkc em tecidos epiteliais de Drosophila, resulta na acumulação de proteínas apicais associadas à membrana, tais como Crb, em vesículas endocíticas e à redução dos níveis apicais de E-Cad e Arm. Análises genéticas adicionais sugerem que aPKC actua como efector de Cdc42, regulando a endocitose de proteínas apicais, que por sua vez, tem um efeito estabilizador nas AJs durante processos dinâmicos de reorganização celular [14, 15]. Nos tecidos epiteliais, a região apical das células contém uma banda de filamentos de actina, essencial para o suporte das Ajs [2]. O citoesqueleto de actina desempenha um papel fundamental em numerosos processos celulares, tais como regulação da morfologia celular e manutenção da polaridade celular [16]. Dada a sua dinâmica, é necessária uma regulação eficaz, que é desempenhada por proteínas que se ligam à actina (ABPs) [17, 18]. Uma dessas proteínas é o heterodímero Capping Protein (CP), composto pelas subunidades α (Cpa) e β (Cpb), que se ligam à região terminal dos filamentos de actina, prevenindo a perda ou adição de monómeros de actina e, desta forma, a sua polimerização excessiva [19]. A remoção de CP no disco imaginal da asa de Drosophila leva a diferentes fenótipos celulares que são dependentes da região do disco. Enquanto clones de células mutantes para CP mantêm a polaridade e sobrevivem nas regiões do hinge e notum, células mutantes na wing blade sofrem extrusão basal e morrem por apoptose [20]. Semelhante ao fenótipo observado em epitélios mutantes para apkc, diminuição dos níveis proteicos de CP usando a técnica ARN de interferência (RNAi), resulta na acumulação de Crb em estruturas vesiculares [21]. Isto sugere que, tal como aPKC, CP parece regular a endocitose de proteínas apicais. Curiosamente, foi postulado que CP interactua geneticamente com aPKC no disco imaginal da asa [21]. No entado, a ferramenta genética usada para diminuir a activade de aPKC pode ter efeitos inespecíficos [22] e portanto, a possível interacção genética entre CP e aPKC foi novamente analisada. Desta forma, o presente trabalho tinha como objectivo compreender o mecanismo pelo qual CP pode cooperar com aPKC na manutenção da integridade epitelial do disco imaginal da asa de Drosophila. De modo atingir este objectivo, a técnica RNAi sob o controlo do sistema UAS-Gal4, foi usada para diminuir os níveis proteicos de CP em regiões específicas do tecido (García Fernández, B. and Janody, F. et al., unpublished data), e um alelo mutante termosensível para aPKC (apkcts) foi usado para modular a actividade cinásica de aPKC consoante a temperatura (Martinho, R. et al., unpublished data). Quando comparado com o fenótipo anteriormente descrito para células com níveis reduzidos de CP, ao diminuir ambos os níveis de CP e aPKC no disco de asa, uma maior quantidade de células sofreram extrusão basal e morreram por apoptose. Pelo contrário, células mutantes para apkcts encontraram-se mantidas no epitélio, sem nenhum indício de morte celular. Estes resultados confirmam que CP interactua geneticamente com aPKC na manutenção da integridade epitelial do disco da asa. Esta interacção genética parece ter diferentes requerimentos ao longo do disco da asa. Enquanto que a diminuição dos níveis de CP e aPKC levou à morte das células da wing blade, as células na região distal do hinge pareceram proliferar. Isto sugere que CP e aPKC mantêm a integridade epitelial e previnem a morte celular na wing blade, ao passo que na região do hinge, CP e aPKC parecem restringir o crescimento, possivelmente através da regulação da sinalização Hippo [23]. Curiosamente, a diminuição dos níveis de CP resultou numa redução significativa dos níveis apicais de aPKC, sugerindo que, através da sua função como regulador da dinâmica do citoesqueleto de actina, CP restringe a localização de aPKC na membrana apical das células epiteliais. Além disso, semelhante ao fenótipo observado em epitélios mutantes para apkc, diminuição dos níveis de CP levou a um decréscimo acentuado dos níveis apicais de E-Cad e Arm. Isto sugere que CP tem um papel putativo na dinâmica das AJs. Por último, o efeito nos níveis apicais de E-Cad após diminuição dos níveis de CP foi semelhante ao observado após sobreexpressão de Src64B, um importante regulador da estabilidade das AJs. Uma vez que a actividade de Src parece ser regulada por CP (García Fernández, B. and Janody, F. et al., unpublished data), este resultado sugere que o efeito de CP nas AJs pode ser dependente da actividade de Src. Baseando nestas observações, são apresentadas no presente trabalho diferentes hipóteses que pretendem explicar o papel de CP na manutenção da estabilidade das AJs, e de como esta função putativa de CP pode estar interligada com a função conhecida de aPKC na regulação da dinâmica das AJs. VII É importante referir que as diferentes hipóteses não são mutuamente exclusivas e por isso, de um modo geral, através da sua principal função, prevenir a polimerização dos filamentos de actina, CP parece ter um papel putativo na manutenção da estabilidade das AJs por: (a) restringir a localização de aPKC na membrana apical; (b) regular eventos iniciais de endocitose; e (c) regular a actividade de Src. No conjunto, os dados apresentados neste trabalho apontam para uma crucial sinergia entre complexos de polaridade e o citoesqueleto de actina na regulação da dinâmica das AJs, o qual está intimamente ligado à manutenção da integridade dos tecidos epiteliais

Algorithmic composer, an unconventional music classification system

Dissertation presented as the partial requirement for obtaining a Master's degree in Data Science and Advanced AnalyticsMusic is an inherent part of the human existence. As an art, it has mirrored its evolution and captured its thinking and creative process over the years. Given its importance and complexity, machine learning has long embraced the challenge of analyzing music, mainly through recommendation systems, classification and composition tasks. Current classification systems work on the base of feature extraction and analysis. The same applies for music classification algorithms, which require the formulation of characteristics of the songs. Such characteristics can be of varying degrees of complexity, from spectrogram analysis to simpler rhythmic and melodic features. However, finding characteristics to faithfully describe music is not only conceptually hard, but mainly too simplistic and restrictive given its complex nature. A new methodology for music classification systems is proposed in this thesis, which aims to show that the knowledge learned by state of the art composition systems can be used for classification, without need for direct feature extraction. Using an architecture of recurrent neural networks (RNN) and long-short term memory cells (LSTMs) for the composition systems and implementing a voting scheme between them, the classification accuracy of the experiments between classes of the Nottingham dataset ranged between 60% and 95%. These results provide strong evidence that composition systems do indeed possess valuable information to distinguish between classes of music. They also prove that an alternative method to standard classification is possible, as classification targets are not directly used for training. Finally, the extent to which these results can be used for other applications is discussed, namely its added value to more complex classification systems, as well as to recommendation systems.A Música é uma componente inerente à existência humana. Enquanto arte, tem refletido a sua evolução e captado o seu processo cognitivo e criativo ao longo dos tempos. Tendo em conta a sua importância e complexidade, a área do Machine Learning desde há muito abraçou este desafio, sobretudo através de sistemas de recomendação, classificação e composição musical. Os sistemas de recomendação atuais funcionam na base de extração de features e respetiva análise. O mesmo se aplica a algoritmos de classificação musical, que requerem a formulação de características musicais. Estas podem ter diferentes graus de complexidade, desde análise de espectros a simples features melódicas e rítmicas. Contudo, formular caracteríticas musicais não só é conceptualmente difícil, como sobretudo simplista e restritivo dada a sua natureza complexa. Uma nova metodologia para sistemas de classificação musical é proposta nesta tese, com o objectivo de demonstrar que o conhecimento aprendido por sistemas de composição pode ser utilizado para classificação, sem que haja necessidade de um processo de conceptualização e extração de características. Utilizando uma arquitectura de redes neuronais recorrentes e células de memória longa e curta para os sistemas de composição e implementando um sistema de votação entre eles, a precisão para classificações binárias entre as classes do Nottingham dataset variou entre 60% e 95%. Estes resultados demonstram uma forte evidência de que os algoritmos de composição podem ser utilizados para tarefas de classificação e provam ainda que um método alternativo à classificação convencional é possível. Finalmente, a aplicabilidade destes resultados para outros projetos é discutida, nomeadamente o valor acrescentado que pode trazer para sistemas de classificação mais complexos, assim como a sistemas de recomendação

Poder de mercado e dominância no mercado dos vedantes de cortiça

Mestrado em EconomiaA base deste relatório foi o estágio curricular desenvolvido na Amorim Cork Composites, uma das empresas do Grupo Amorim. Relativamente ao Grupo Amorim muitas são as afirmações de que este Grupo é dominante no mercado da cortiça mas, não existem estudos realizados que o comprovem. Daqui surgiu, então, a ideia de realizar um estudo para o mercado dos vedantes de cortiça, entre 2008 e 2012, sobre a concentração de mercado e dominância. Neste estudo é utilizada uma medida alternativa ao índice Herfindahl-Hirschman, que é baseada nas quotas de mercado das duas maiores empresas do mercado. Esta situação deriva do facto deste índice não poder, por si só, ser usado para estabelecer o exercício de poder de mercado ou dominância. Os resultados deste estudo mostram que o Grupo Amorim é a empresa dominante durante todo o período em análise, mesmo depois de testada a possibilidade de variação das barreiras à entrada existentes.The base of this report was a curricular internship developed in Amorim Cork Composites, one of the Amorim Group companies. Concerning the Amorim Group, there are many claims that this Group is dominant in the cork market, but there are no studies that prove it. That is what gave the idea to realize a study on the cork stoppers market, between 2008 and 2012, about market concentration and dominance. This study used an alternative measure to Herfindahl-Hirschman Index, which is based on the market shares of the two largest companies in the market. This stems from the fact that this index can not, by itself, be used to establish the exercise of market power or dominance. The results show that Amorim Group is the dominant firm throughout the analyzed period, even after tested the variation possibility of the entry barriers

Simulated discounted cash flow valuation for a financial institution: Millennium BCP

Valuing a bank is not an easy challenge. The only similarities with the valuation of other companies are the different approaches and models that can be used to valuate both. That variety, frequently, leads to different outcomes and/or interpretations and, thus, there is not a consensual agreement between financial analysts. This report aims to valuate a financial institution using the discounted cash flow valuation model, known to be the most appropriate and used amongst the financial and academic community. Knowing the particularities of a financial institution bank, the purpose of this report is to valuate Millennium BCP, one of the biggest Portuguese private banks, determining a share price on 31th December, 2018, and then compare it to the real price. To remind the sensitivity of banking institutions and to consider an eminent economic and financial crisis, the values will be estimated using probabilistic distributions and statistical simulations. Firstly, the present project presents a theoretical information regarding the discounted cash flow model and the simulation process, as well as presenting all probability distributions. Secondly, to contextualize the reader a brief presentation about Millennium BCP business model and an economic presentation about the countries where is mainly present is made. Following, all the assumptions, results and interpretations are be presented. In the end of this report, it was concluded that Millennium BCP’s shares were traded above its real price, at our valuation date.Avaliar um banco não é um desafio fácil. As únicas parecenças com o processo de avaliação de outras empresas são os diferentes métodos e modelos que podem ser usados para as avaliarem. Frequentemente, essa variedade leva a diferentes resultados e/ou interpretações, não sendo por essa razão uma decisão consensual entre os analistas financeiros. Este relatório propõe avaliar uma instituição financeira usando o método de avaliação de Fluxo de Caixa Descontados, conhecido por ser o mais apropriado e usado entre a comunidade financeira e académica. Sabendo as particularidades de uma instituição financeira bancária, o propósito deste relatório é de avaliar o Millennium BCP, um dos maiores bancos privados portugueses, determinar o preço da ação no dia 31 dezembro de 2018 e compará-lo com o preço real. Para relembrar a sensibilidade das instituições bancárias e para considerar uma crise económica e financeira eminente, os valores vão ser estimados usando distribuições probabilísticas e simulações estatísticas. Primeiramente, este projeto apresenta informação teórica sobre o método de avaliação de Fluxo de Caixa Descontados e processo de simulação, bem como a apresentação de todas as distribuições probabilísticas. Segundamente, para contextualizar o leitor, será feita uma breve apresentação sobre o modelo de negócios do Millennium BCP e uma apresentação económica sobre os principais países onde está presente. Para concluir, todas as premissas, resultados e interpretações serão apresentadas. No final deste relatório, concluiu-se que as ações do Millennium BCP estavam a ser negociadas acima do seu preço real, à data da presente avaliação

Interaction between a Chlamydia trachomatis inclusion membrane protein (Inc) and host cell 14-3-3 proteins

Chlamydia trachomatis is an obligate intracellular bacterium that causes genital and ocular infections in humans. Its multiplication in host cells occurs exclusively inside a membrane-bound compartment, known as inclusion. To enter, multiply and exit host cells, C. trachomatis transports proteins through a type III secretion system into the host cell. These proteins include Incs, which insert into the inclusion membrane, modifying it, and manipulating the host cell in various ways. In this work, the interaction of an Inc protein (CT006) from C. trachomatis with 14-3-3 proteins of the host cell was studied. There are seven isoforms of 14-3-3 proteins known in mammals that in general have the capacity to bind to several signaling proteins, being able to regulate several cellular processes. It was observed that all 14-4-3 isoforms (β/ε/η/γ/σ/τ/ζ) are recruited to the periphery of the inclusion membrane, probably in an Inc CT006-independent-manner, but only 14-3-3β/η/γ/σ interact with Inc CT006. By analyzing the primary structure of Inc CT006 it was realized that although the protein has potential 14-3-3 binding motifs, none seems to be exclusively necessary for the interaction. However, any one of the motifs when present and active can promote the interaction. 14-3-3 proteins are also thought to interact with Inc CT006 through their conserved binding groove. In summary, this work supports the idea that 14-3-3 proteins have a relevant role in the intracellular multiplication of C. trachomatis. Future studies with C. trachomatis with the gene encoding Inc CT006 inactivated or overexpressed, and/or with host cell with reduced levels of 14-3-3 proteins, might clarify how the interaction of Inc CT006 with 14-3-3 proteins contribute to the intracellular multiplication of C. trachomatis

How Portuguese consumers perceive the sustainable dimension of the brand1?

The Beauty and Personal Care Market has been moving towards a sustainable path. During the past few years, companies have taken on initiatives to reduce their environmental footprint, and Brand 1is at its forefront in the mass market. This Field Lab Project aims to analyse how Portuguese consumers perceive the sustainable dimension of the Brand 1. We concluded that most Portuguese consumers are not up-to-date with sustainability, showing incongruencies between their stated opinions and their actions. Their misunderstanding of the topic extends to their reliability of the sustainability concept on packaging, granting it greater importance than any other factors

Business Analytics Solutions´ Implementation in the Insurance Market: Focus on Commercial Property Line of Business

Internship Report presented as the partial requirement for obtaining a Master's degree in Data Science and Advanced Analytics, specialization in Business AnalyticsBusiness Intelligence solutions are becoming increasingly more and more important for organizations as they allow them to gain a deeper understanding of their operations and make more informed decisions. This report will explore the process of creating a Data Mart from start to finish is explored, as well as the consequent Technical Dashboard development for Ageas Seguros. The Data Mart was designed to offer support, mainly to the company's Pricing and Business Analytics team, where the internship was developed, and occasionally to the Underwriting team. On the other hand, the Technical Dashboard serves a broader purpose, allowing several company departments to easily access and analyze the line of business intended. The benefits and challenges of implementing such a system are discussed, as well as its impact on the company's overall performance. This internship report aims to provide a detailed understanding of all the steps involved in creating and developing both tasks and can serve as a valuable resource for organizations looking to improve their data-driven internal processes and instruments of analysis. The study finds that Business Intelligence solutions such as Data Marts and Technical Dashboards are two essential complementary tools for companies looking to expand their transversal data structures along with their decision-making processes, while staying competitive in today's business environment. They enable organizations to gain valuable insights from their data, ultimately leading to improved performance, increased efficiency, and overall company growth

Sweet cherries from Fundão as health promotors: chemical characterization and biological potential

Cherries are one of the most appreciated summer fruits by consumers because of their attractive color, sweet taste, high water content, low level of calories and due to the presence of numerous bioactive compounds in their constitution, which produce metabolic and physiological effects, that are important to prevent some pathologies, such as diabetes, cardiovascular diseases and cancer. Portugal produces about 15 thousand tons of cherries per year, most of them cultivated in the northeast of the country, more specifically in the regions of Beira Interior (Fundão, Covilhã and Belmonte). In this work, we evaluated the phenolic profile and biological potential of five varieties of sweet cherries from Fundão region (Saco, Sweetheart, Satin, Maring e Hedelfinger). The analysis performed by liquid chromatography with diode-array detection allowed to identify a total of twenty-three phenolic compounds, including one hydroxybenzoic acid, eight hydroxycinnamic acids, five flavonols, three flavan-3-ols and six anthocyanins, confirming that cherries are an excellent natural source of bioactive compounds, mainly hydroxycinnamic acids and anthocyanins. The antioxidant potential was assessed by FRAP, and against DPPH and nitric oxide radicals. After a detailed analysis of the obtained results, it was possible to infer that Sweetheart cultivar showed the highest antioxidant potential in FRAP (26.7 µM Fe2+), while Hedelfinger and Maring were the most active against DPPH and nitric oxide radicals (IC50 = 12.1 µg/mL e IC50 = 140.9 µg/mL, respectively). Thereafter, it was studied the antidiabetic potential of cherries extracts by determination of the inhibitory capacity of a-glucosidase, highlighting Hedelfinger cultivar as the most active (IC50 = 10.3 µg/mL). Subsequently, it was assessed the capacity of the extracts from Saco to inhibit the oxidation of hemoglobin and the hemolysis of human erythrocytes. Both assays revealed an inhibitory effect dependent on the concentration (IC50 = 38.6 µg/mL e IC50 = 73.0 µg/mL, respectively). In a general way, it was found that Saco and Hedelfinger were the most active, having been found a correlation between the phenolic content of the different varieties of cherries and the biological potential displayed by extracts. The results obtained with this study allowed us to conclude that sweet cherries possess a great biological potential, being necessary to carry out further investigations in order to encourage the use of cherries extracts in food supplements and in new pharmaceutical and nutraceutical applications.As cerejas são um dos frutos de verão mais apreciados pelos consumidores devido à sua cor, sabor doce, elevado conteúdo em água, baixo teor em calorias e por possuírem numerosos compostos bioativos na sua constituição, que produzem efeitos metabólicos e fisiológicos importantes para a prevenção de algumas patologias, tais como diabetes, doenças cardiovasculares e cancro. Portugal produz cerca de 15 mil toneladas de cerejas por ano, sendo a maioria destas cultivadas no nordeste do País, nomeadamente na região da Beira Interior (Fundão, Covilhã e Belmonte). Neste trabalho, procedeu-se à determinação do perfil fenólico e do potencial biológico de cinco variedades de cereja do Fundão (Saco, Sweetheart, Satin, Maring e Hedelfinger). A avaliação por cromatografia líquida com deteção por arranjo de díodos permitiu a identificação de um total de vinte e três compostos fenólicos, incluindo um ácido hidroxibenzóico, oito ácidos hidroxicinâmicos, cinco flavonóis, três flavan-3-óis e seis antocianinas, comprovando-se que as cerejas são uma excelente fonte natural de compostos bioativos, principalmente ácidos hidroxicinâmicos e antocianinas. O potencial antioxidante foi avaliado através do FRAP e contra os radicais DPPH e óxido nítrico. Após a análise dos resultados obtidos, constatou-se que a variedade Sweetheart foi a que apresentou maior potencial antioxidante no FRAP (IC50 = 26,7 µM Fe2+). As variedades Hedelfinger e Maring foram as mais ativas contra os radicais DPPH e óxido nítrico (IC50 = 12,1 µg/mL e IC50 = 140,9 µg/mL, respetivamente). Seguidamente, avaliou-se o potencial antidiabético dos extratos das cerejas através da determinação da capacidade inibitória da a-glucosidase, destacando-se a variedade Hedelfinger como a mais ativa (IC50 = 10,3 µg/mL). Posteriormente, analisou-se a capacidade dos extratos da variedade Saco para inibir a oxidação da hemoglobina e da hemólise dos eritrócitos humanos. Ambos os ensaios revelaram um efeito inibitório dependente da concentração (IC50 = 38,57 µg/mL e IC50 = 73,03 µg/mL, respetivamente). Em suma, verificou-se que a Saco e a Hedelfinger foram as variedades mais ativas, tendo-se verificado uma correlação entre o conteúdo fenólico das diferentes variedades de cereja e o potencial biológico apresentado. Os resultados obtidos neste estudo permitiram concluir que as cerejas possuem um grande potencial biológico, sendo ainda necessária a realização de mais estudos para incentivar a utilização dos extratos de cereja em suplementos alimentares e em novas aplicações terapêuticas, farmacológicas e nutracêuticas

Nutritional plasticity and evolutionary divergence in the Drosophila ovary

The environment can modify developmental trajectories and generate a range of distinct phenotypes without altering an organism’s genome, a widespread phenomenon called developmental plasticity. The past decades have seen a resurgent interest in understanding how developmental plasticity contributes to evolutionary processes, as it can produce phenotypic variation among individuals and facilitate diversification among populations that inhabit distinct ecological niches. To better understand the importance of plastic responses for evolutionary change, we need to explore how the environment alters development to produce phenotypic variation and then compare this to how genetic variation influences these same developmental processes.(...