Avaliacao das atividades antimicrobiana e citotoxica de extratos de plantas do Cerrado do Sul de Minas Gerais

Foi avaliada a atividade antimicrobiana de extratos hidroetanólicos de plantas sobre bactérias Gram positiva, Gram negativa, leveduras, Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis pela técnica de difusão em Agar e microdiluição em caldo. Dentre os extratos avaliados pelo método de difusão em Agar, o extrato da folha de Bidens pilosa apresentou a mais expressiva média de halos de inibição de crescimento frente aos microrganismos, seguido pelo extrato da flor de B. pilosa, da folha e semente de Eugenia pyriformis, da folha de Plinia cauliflora que apresentaram estatisticamente a mesma média de formação de halos inibitórios sobre bactérias Gram positivas, Gram negativas e leveduras. Os extratos de Heliconia rostrata não apresentaram atividade. Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium bovis (BCG) mostraram-se resistentes a todos os extratos. O perfil de sensibilidade dos fungos Candida albicans e Saccharomyces cerevisiae foram comparáveis entre si e entre as bactérias Gram positivas Bacillus subtilis, Enterococcus faecalis e Gram negativa Salmonella typhimurium (p >; 0.05). A avaliação da citotoxicidade foi realizada sobre células C6-36 de larvas de mosquito Aedes albopictus. Os extratos de caule e flor de H. rostrata, folha e caule de P. cauliflora, semente de Anonna crassiflora e caule, flor e raiz de B. pilosa não apresentaram toxicidade nas concentrações avaliadas. Os maiores índices de seletividade foram apresentados pelos extratos de caule de A. crassiflora e flor de B. pilosa para Staphylococcus aureus, apresentando potencial para estudos como futuros candidatos a fármacos.The antimicrobial activity of plant hidroethanolic extracts on bacteria Gram positive, Gram negative, yeasts, Mycobacterium tuberculosis H37 and Mycobacterium bovis was evaluated by using the technique of Agar diffusion and microdilution in broth. Among the extracts evaluated by Agar diffusion, the extract of Bidens pilosa leaf presented the most expressive average of haloes of growth inhibition to the microorganisms, followed by the extract of B. pilosa flower, of Eugenia pyriformis' leaf and seed, of Plinia cauliflora leaf which statistically presented the same average of haloes inhibitory formation on bacteria Gram positive, Gram negative and yeasts. The extracts of Heliconia rostrata did not present activity. Mycobacterium tuberculosis H37 and Mycobacterium bovis (BCG) appeared resistant to all the extracts. The susceptibility profile of Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae fungi were compared to one another and to the Gram positive Bacillus subtilis, Enterococcus faecalis and the Gram negative Salmonella typhimurium bacteria (p >; 0.05). The evaluation of cytotoxicity was carried out on C6-36 larvae cells of the Aedes albopictus mosquito. The extracts of stem and flower of Heliconia rostrata, leaf and stem of Plinia cauliflora, seed of Anonna crassiflora and stem, flower and root of B. pilosa did not present toxicity in the analyzed concentrations. The highest rates of selectivity appeared in the extracts of stem of A. crassiflora and flower of B. pilosa to Staphylococcus aureus, presenting potential for future studies about a new drug development

Triagem in vitro da atividade antibacteriana de Bidens pilosa Linné e Annona crassiflora Mart. contra Staphylococcus aureus resistente à oxacilina (ORSA) provenientes do ambiente aéreo na clínica odontológica

Currently multiresistant Staphylococcus aureus is one common cause of infections with high rates of morbidity and mortality worldwide, which directs scientific endeavors in search for novel antimicrobials. In this study, nine extracts from Bidens pilosa (root, stem, flower and leaves) and Annona crassiflora (rind fruit, stem, leaves, seed and pulp) were obtained with ethanol: water (7:3, v/v) and their in vitro antibacterial activity evaluated through both the agar diffusion and broth microdilution methods against 60 Oxacillin Resistant S. aureus (ORSA) strains and against S. aureus ATCC6538. The extracts from B. pilosa and A. crassiflora inhibited the growth of the ORSA isolates in both methods. Leaves of B. pilosa presented mean of the inhibition zone diameters significantly higher than chlorexidine 0.12% against ORSA, and the extracts were more active against S. aureus ATCC (p < 0.05). Parallel, toxicity testing by using MTT method and phytochemical screening were assessed, and three extracts (B. pilosa, root and leaf, and A. crassiflora, seed) did not evidence toxicity. On the other hand, the cytotoxic concentrations (CC50 and CC90) for other extracts ranged from 2.06 to 10.77 mg/mL. The presence of variable alkaloids, flavonoids, tannins and saponins was observed, even though there was a total absence of anthraquinones. Thus, the extracts from the leaves of B. pilosa revealed good anti-ORSA activity and did not exhibit toxicity.Atualmente Staphylococcus aureus multirresistente é causa comum de infecções com altas taxas de morbidade e mortalidade mundialmente, o que direciona esforços científicos na busca de novos antimicrobianos. Neste estudo, nove extratos de Bidens pilosa (raiz, caule, flor e folhas) e de Annona crassiflora (casca do fruto, caule, folha, semente e polpa) foram obtidos com etanol:água (7:3, v/v) e suas atividades antibacteriana in vitro avaliadas através de difusão em agar e microdiluição em caldo contra 60 cepas de Oxacillin Resistant S. aureus (ORSA) e contra S. aureus ATCC 6538. Os extratos de B. pilosa e A. crassiflora inibiram o crescimento dos isolados ORSA em ambos os métodos. O extrato da folha de B. pilosa apresentou média dos diâmetros dos halos de inibição significativamente maior que a clorexidina 0,12%, contra os isolados ORSA, e os extratos foram mais ativos contra S. aureus ATCC (p < 0,05). Paralelamente, teste de toxicidade pelo método MTT e triagem fitoquímica foram avaliadas, e três extratos (raiz e folha de B. pilosa e semente de A. crassiflora) não apresentaram toxicidade. Por outro lado, as concentrações citotóxicas (CC50 e CC90) para os outros extratos variaram de 2,06 a 10,77 mg/mL. Observou-se variável presença de alcalóides, flavonóides, taninos e saponinas, apesar de total ausência de antraquinonas. Portanto, os extratos das folhas de B. pilosa revelaram boa atividade anti-ORSA e não exibiram toxicidade

Molecular identification of Candida dubliniensis isolated from oral lesions of HIV-positive and HIV-negative patients in São Paulo, Brazil

Candida dubliniensis é uma nova espécie recentemente descrita. Este patógeno oral emergente compartilha muitas características fenotípicas e bioquímicas com C. albicans dificultando assim a diferenciação entre elas. As mesmas, porém, mostram-se genotipicamente distintas. Este trabalho tem como objetivo identificar, pela técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction), a possível presença de C. dubliniensis dentre amostras isoladas de candidose oral eritematosa, provenientes de pacientes HIV positivos e HIV negativos. Em um total de 37 amostras identificadas anteriormente, por método clássico, como C. albicans encontramos duas amostras de C. dubliniensis (5,4%) utilizando a técnica do PCR. Esta técnica mostrou-se útil, prática e com identificação taxonômica mais acurada.Candida dubliniensis is a new, recently described species of yeast. This emerging oral pathogen shares many phenotypic and biochemical characteristics with C. albicans, making it hard to differentiate between them, although they are genotypically distinct. In this study, PCR (Polymerase Chain Reaction) was used to investigate the presence of C. dubliniensis in samples in a culture collection, which had been isolated from HIV-positive and HIV-negative patients with oral erythematous candidiasis. From a total of 37 samples previously identified as C. albicans by the classical method, two samples of C. dubliniensis (5.4%) were found through the use of PCR. This study underscores the presence of C. dubliniensis, whose geographical and epidemiological distribution should be more fully investigated

Low-level Laser Therapy to the Mouse Femur Enhances the Fungicidal Response of Neutrophils against Paracoccidioides brasiliensis

Neutrophils (PMN) play a central role in host defense against the neglected fungal infection paracoccidioidomycosis (PCM), which is caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb). PCM is of major importance, especially in Latin America, and its treatment relies on the use of antifungal drugs. However, the course of treatment is lengthy, leading to side effects and even development of fungal resistance. the goal of the study was to use low-level laser therapy (LLLT) to stimulate PMN to fight Pb in vivo. Swiss mice with subcutaneous air pouches were inoculated with a virulent strain of Pb or fungal cell wall components (Zymosan), and then received LLLT (780 nm; 50 mW; 12.5 J/cm2; 30 seconds per point, giving a total energy of 0.5 J per point) on alternate days at two points on each hind leg. the aim was to reach the bone marrow in the femur with light. Non-irradiated animals were used as controls. the number and viability of the PMN that migrated to the inoculation site was assessed, as well as their ability to synthesize proteins, produce reactive oxygen species (ROS) and their fungicidal activity. the highly pure PMN populations obtained after 10 days of infection were also subsequently cultured in the presence of Pb for trials of protein production, evaluation of mitochondrial activity, ROS production and quantification of viable fungi growth. PMN from mice that received LLLT were more active metabolically, had higher fungicidal activity against Pb in vivo and also in vitro. the kinetics of neutrophil protein production also correlated with a more activated state. LLLT may be a safe and non-invasive approach to deal with PCM infection.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)National Institute of Health (US NIH)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fed Univ Alfenas UNIFAL MG, Inst Biomed Sci, Dept Microbiol & Immunol, Alfenas, MG, BrazilFed Univ Alfenas UNIFAL MG, Inst Biomed Sci, Dept Biochem, Alfenas, MG, BrazilState Univ Campinas UNICAMP, Inst Biol, Dept Struct & Funct Biol, São Paulo, BrazilFed Univ São Paulo UNIFESP, Dept Microbiol Immunol & Parasitol, São Paulo, SP, BrazilMassachusetts Gen Hosp, Wellman Ctr Photomed, Boston, MA 02114 USAHarvard Univ, Sch Med, Dept Dermatol, Boston, MA 02115 USAMIT, Harvard Mit Div Hlth Sci & Technol, Cambridge, MA 02139 USAFed Univ Alfenas UNIFAL MG, Inst Biomed Sci, Dept Pathol & Parasitol, Alfenas, MG, BrazilFed Univ São Paulo UNIFESP, Dept Microbiol Immunol & Parasitol, São Paulo, SP, BrazilCNPq: 486135/2012-8CNPq: 304827/2012-6FAPEMIG: CBB-PPM-00119-14National Institute of Health (US NIH): R01AI050875CAPES: AEX-9765-14-0Web of Scienc

EVALUATION OF ANTIMICROBIAL AND CYTOTOXIC ACTIVITIES OF PLANT EXTRACTS FROM SOUTHERN MINAS GERAIS CERRADO

The antimicrobial activity of plant hidroethanolic extracts on bacteria Gram positive, Gram negative, yeasts, Mycobacterium tuberculosis H37 and Mycobacterium bovis was evaluated by using the technique of Agar diffusion and microdilution in broth. Among the extracts evaluated by Agar diffusion, the extract of Bidens pilosa leaf presented the most expressive average of haloes of growth inhibition to the microorganisms, followed by the extract of B. pilosa flower, of Eugenia pyriformis' leaf and seed, of Plinia cauliflora leaf which statistically presented the same average of haloes inhibitory formation on bacteria Gram positive, Gram negative and yeasts. The extracts of Heliconia rostrata did not present activity. Mycobacterium tuberculosis H37 and Mycobacterium bovis (BCG) appeared resistant to all the extracts. The susceptibility profile of Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae fungi were compared to one another and to the Gram positive Bacillus subtilis, Enterococcus faecalis and the Gram negative Salmonella typhimurium bacteria (p > 0.05). The evaluation of cytotoxicity was carried out on C6-36 larvae cells of the Aedes albopictus mosquito. The extracts of stem and flower of Heliconia rostrata, leaf and stem of Plinia cauliflora, seed of Anonna crassiflora and stem, flower and root of B. pilosa did not present toxicity in the analyzed concentrations. The highest rates of selectivity appeared in the extracts of stem of A. crassiflora and flower of B. pilosa to Staphylococcus aureus, presenting potential for future studies about a new drug development

AVALIAÇÃO “IN VITRO” DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA BENZIDAMINAhttp://dx.doi.org/10.5892/ruvrv.2011.92.171181

Com o objetivo de avaliar a provável atividade antibacteriana e antifúngica da benzidamina, determinou-se a Concentração Inibitória Mínima e a Concentração Bactericida/Fungicida Mínima, sobre várias amostras de microrganismos. Foram usadas as técnicas de difusão no agar (técnica do poço) e a da diluição em tubo. A avaliação da sensibilidade dos microrganismos à benzidamina, na técnica do poço, foi feita pela leitura dos halos de inibição e na técnica de diluição em tubo, pela inibição do crescimento. Os resultados mostraram que a benzidamina possui atividade antimicrobiana sobre as amostras de leveduras e bactérias testadas. Comparando as duas técnicas verificou-se que pela técnica de difusão em agar, o valor da concentração inibitória mínima (CIM) foi maior   do que pela  técnica de diluição em tubo

Avaliação da atividade antimicrobiana in vitro de pastas à base de hidróxido de cálcio.

The objective of this study was to verify �in vitro� antibacterial action of pastes based calcium hydroxide through method of agar diffusion. Agar plates were excavated and subsequently spread with microorganisms: Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Klebsiella pneumonie, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus mirabilis, Bacillus subtilis and Enterococcus faecalis. After sowing, isolated pastes and components of same used as control substances were prepared and placed on excavations. Plates were taken to heater at 37°C for 24 hours. The existing of inhibitation halos was analysed using millimeter ruler. The results showed that all of control pastes and substances introduced inhibitation halos, except L&C pastes, calcium hydroxide + sun-flower oil, calcium hydroxide + sun-flower oil + paramonoclorophenol canphored, and sun-flower oil and physiologic serum.Neste trabalho avaliou-se a ação antimicrobiana � in vitro� de pastas à base de hidróxido de cálcio através do método de difusão em ágar. Amostras de Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Bacillus subtilis e Enterococcus faecalis foram usadas nos experimentos. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela presença de halos de inibição do crescimento. Os resultados mostraram que os produtos avaliados apresentaram halos de inibição, exceto as pastas L & C, hidróxido de cálcio + óleo de girassol, hidróxido de cálcio + óleo de girassol + paramonoclorofenol canforado e óleo de girassol. Baseado no diâmetro dos halos, Enterococcus faecalis mostrou-se o mais resistente

Avaliação "in vitro" da atividade antimicrobiana da benzidamina.

This paper aims the evaluation of the possible antibacterial an antifungical activity of benzydamine.Minimum inhibitory Concentration and Minimum Bactericide/Fungicide concentration in several microorganism samples were determined. Agar Difusion (tecnic of well)and tube dilution were the techniques used. Evaluation of microorganisms sensibility to benzydamine , was made through the reading of the inhibition halos in the agar difusion and growth inhibition n the tube dilution technique. The results showed that benzydamine has an antimicrobial activity in the yeast samples and in the tested bacteria. The comparison of the two techniques showed that in agar difusion technique the minimum inhibitory concentration value (MIC) was higher than in the tube dilution one.Com o objetivo de avaliar a provável atividade antibacteriana e antifúngica da benzidamina, determinou-se a Concentração Inibitória Mínima e a Concentração Bactericida/Fungicida Mínima, sobre várias amostras de microrganismos. Foram usadas as técnicas de difusão no agar (técnica do poço) e a da diluição em tubo. A avaliação da sensibilidade dos microrganismos à benzidamina, na técnica do poço, foi feita pela leitura dos halos de inibição e na técnica de diluição em tubo, pela inibição do crescimento. Os resultados mostraram que a benzidamina possui atividade antimicrobiana sobre as amostras de leveduras e bactérias testadas. Comparando as duas técnicas verificou-se que pela técnica de difusão em agar, o valor da concentração inibitória mínima (CIM) foi maior do que pela técnica de diluição em tubo

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA IN VITRO DE PASTAS À BASE DE HIDRÓXIDO DE CÁLCIOhttp://dx.doi.org/10.5892/ruvrv.2011.92.328336

Neste trabalho avaliou-se a ação antimicrobiana “ in vitro” de pastas à base de hidróxido de cálcio através do método de difusão em ágar. Amostras de  Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans,  Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Bacillus subtilis e Enterococcus faecalis foram usadas nos experimentos.  A atividade antimicrobiana foi avaliada pela presença de halos de inibição do crescimento. Os resultados mostraram que os produtos avaliados apresentaram halos de inibição, exceto as pastas L &amp; C, hidróxido de cálcio + óleo de girassol, hidróxido de cálcio + óleo de girassol + paramonoclorofenol canforado e  óleo de girassol. Baseado no diâmetro dos halos, Enterococcus faecalis mostrou-se o mais resistente