Avaliação da actividade enzimática da cadeia respiratória mitocondrial na esclerose múltipla

Dissertação de mestrado em Biologia Celular e Molecular, apresentada ao Departamento de Zoologia da Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade de Coimbra.Multiple sclerosis is a neurological, autoimmune disorder of the Central Nervous System, which involves the immune system. It is characterized by demyelisation and neurodegeneration. Major pathological characteristics include the loss of oligodendrocytes, demyelisation and neuroaxonal depletion in association with inflammation and possibly mitochondrial dysfunction. Onset of multiple sclerosis typically occurs during early adulthood and can develop in an episodic fashion with phases without clinical manifestations followed by clinical disease called “relapsing-remitting” multiple sclerosis. Over time, patients may develop chronic lesions that promote irreversible axonal injury, resulting in a secondary progressive multiple sclerosis. This phase is characterized by minimal or no intermittent recovery. Clinical presentation of multiple sclerosis is heterogeneous, principal symptoms include impaired vision, extreme fatigue, spasms and paralysis of a variety of muscles. Multiple sclerosis affects more than 2 million people all over the world. Several authors refer multiple sclerosis as an inflammatory autoimmune disease mediated by specific T-cells sensitization against putative myelin antigens of the Central Nervous System. Immune-mediated loss of myelin and mitochondrial dysfunction have been also associated with the disease. The present work focuses on the functional involvement of mitochondrion, particularly the process of oxidative phosphorylation, on the development of multiple sclerosis lesions. That intracellular organelle plays a central role in the energy metabolism and homeostasis of the cell. Mitochondrial respiratory chain dysfunctionmay be a cause or a consequence of mitochondrion lesions, such as mitochondrial DNA, protein or lipids oxidation or even mitochondrial pore transition impairment, which has been associated with neurodegeneration and cell death. The main goals of this work are: i) analyse the involvement of the mitochondrial respiratory chain in multiple sclerosis ii) investigate the correlation of these data with mtDNA molecular genetics studies. This work involves the spectrophotometric evaluation of the enzymatic activity of the mitochondrial respiratory chain complexes II, III and IV, as well as the mitochondrial marker citrate synthase, in isolated lymphocytes from peripheral blood from multiple sclerosis patients followed in Neurology Department of the Hospitais da Universidade de Coimbra and a control group without any known degenerative disease. The results obtained put in evidence an impairment of oxidative phosphorylation, particularly in complex IV, in 48% of the patients affected with multiple sclerosis investigated. Biochemical data were analysed in correlation with genetic information available in our laboratory, for the same patients. It was observed that there is no association with mitochondrial genome haplogroups, but we have found a statistically significant difference for the correlation of mitochondrial respiratory chain deficiencies, with mtDNA alterations found in patients groups. Our data suggest that mtDNA and mitochondrial dysfunction play an important role in pathogenesis of multiple sclerosis, supporting some results available in literature and giving a novel contribution concerning mitochondrial respiratory chain complexes activity in cells derived from patients affected with that pathology.A Esclerose Múltipla é uma doença do Sistema Nervoso Central, que envolve o sistema imunitário e que se caracteriza por desmielinização e neurodegenerescência. As principais características neuropatológicas são a perda de oligodendrócitos, desmielinização, diminuição neuroaxonal associada à inflamação e, possivelmente, à disfunção mitocondrial. O início da doença ocorre geralmente no início da vida adulta e o curso da doença agrava-se com o tempo, podendo ocorrer períodos sem manifestações clínicas (remissões), que alternam com surtos da doença (exarcerbações), que se denomina por relapsing-remitting. Com o decorrer do tempo, os doentes podem desenvolver lesões crónicas, que promovem a lesão axonal irreversível, daqui resultando que a fase relapsing-remitting evolui para uma fase secundária progressiva, que é caracterizada por não haver recuperação ou recuperação mínima. A apresentação clínica é heterogénea, os principais sintomas incluem alteração da visão, fadiga extrema, espasmos e paralisia de vários músculos. Esta doença afecta mais de dois milhões de pessoas em todo o mundo. É geralmente aceite na literatura que a Esclerose Múltipla é uma doença inflamatória auto-imune, mediada por células T específicas, que reagem contra a mielina do Sistema Nervosos Central, levando à sua perda, que, em conjunto com a disfunção mitocondrial poderá estar na origem da doença. O presente trabalho foca-se no envolvimento funcional da mitocôndria, em particular do processo de fosforilação oxidativa, no desenvolvimento das lesões nesta doença, uma vez que este organelo intracelular desempenha um papel central no metabolismo energético e na homeostase da célula. A disfunção da cadeia respiratória mitocondrial poderá ser a causa ou a consequência de lesões na mitocôndria, tais comoa oxidação de DNA mitocondrial, de proteínas e lípidos, ou alterações ao nível do poro de transição mitocondrial, um fenómeno que tem sido associado à neurodegenerescência e morte celular. Os objectivos deste estudo são: i) analisar o envolvimento da disfunção da cadeia respiratória mitocondrial na Esclerose Múltipla; ii) investigar a correlação destes dados com os estudos de genética molecular do mtDNA. O presente trabalho envolve a avaliação espectrofométrica da actividade enzimática dos complexos II, III e IV da cadeia respiratória mitocondrial, bem como da enzima marcadora mitocondrial citrato sintetase, em linfócitos isolados a partir de sangue periférico, proveniente de doentes, afectados com Esclerose Múltipla, seguidos no Serviço de Neurologia dos Hospitais da Universidade de Coimbra, em comparação com um grupo controlo. Os resultados obtidos evidenciam um défice da fosforilação oxidativa em 48% dos doentes com esclerose múltipla investigados, maioritariamente do complexo IV. Os dados bioquímicos foram analisados em correlação com a informação genética existentes no laboratório, para os mesmos doentes. Verificou-se que não há associação com os haplogrupos do gene mitocondrial, mas encontrámos uma diferença estatisticamente significativa para a correlação dos défices da cadeia respiratória mitocondrial com as alterações do mtDNA investigadas no grupo dos doentes. Os nossos dados sugerem que o mtDNA e a disfunção mitocondrial desempenham um papel importante na patogenia de esclerose múltipla, reforçando alguns dados já existentes na literatura e dando um novo contributo no que diz respeito à actividade dos complexos da cadeia respiratória mitocondrial em células de doentes com aquela patologia

UMA MODALIDADE DE PERGUNTA MISSIONÁRIA

“Comprehension check” is a dialogue which occurs simultaneously to biblical translation for indigenous languages at Summer Institute of Linguistics. During this stage, the missionary verifies, by way of question and answer, the native’s comprehension of the translated biblical text. This kind of questioning acts as a form of biblical teaching during the process of missionary translation. The analysis of this missionary interviewing technique is conducted by the precepts of Pragmatics and the Ethnography of Communication

A missão Summer Institute of Linguistics e o indigenismo latino-americano: história de uma aliança (décadas de 1930 a 1970)

This work outlines the history of the alliance between the Evangelical Mission Summer Institute of Linguistics and Latin American scholars between the 1930s and 1970s, aiming to reconstruct the political and intellectual context of this alliance in Mexico, Peru and Brazil. Particular focus will be drawn to the role that the Interamerican Indigenist Institute played in providing links between the Mission and Latin American governments.O trabalho aborda a história da aliança entre a missão evangélica Summer Institute of Linguistics e os intelectuais latino-americanos entre as décadas de 1930 e 1970. A proposta é reconstruir o contexto político e intelectual em que essa aliança ocorreu no México, Peru e Brasil. Em particular, será focalizado o papel do Instituto Indigenista Interamericano como espaço de contato da missão com os governos latino-americanos

A RELAÇÃO ENTRE MANUSCRITOS E IMPRESSOS EM TUPI COMO FORMA DE ESTUDO DA POLÍTICA LINGÜÍSTICA JESUÍTICA NO SÉCULO XVIII NA AMAZÔNIA

O trabalho analisa a política jesuítica de estandardização do tupi no período colonial a partir do estudo da relação entre impressos e manuscritos tupi. O artigo examina a posição de um conjunto de catecismos, gramáticas e dicionários manuscritos, produzidos na Amazônia no século XVIII, em relação à diglossia língua geral verdadeira, identificada com a variante usada nas obras impressas nos séculos XVI e XVII (Anchieta, 1959; Figueira, 1621; 1698; Araújo, 1618; 1686) e a língua geral corrupta, identificada pela variante tupi oral falada nas missões. O trabalho levanta a hipótese de que as obras apresentam diferentes posições segundo o tipo de gênero textual: os catecismos foram mais conservadores, ao se manterem fiéis à variante empregada nas obras tupi impressas, diferentemente dos dicionários e gramáticas, que documentaram a variante tupi em uso nas missões. Abstract This paper analyses the Jesuitss policy of standardization of the Tupi language during Colonial times, and is based on the study of the nexus between manuscript and printed material in Tupi. It positions an ensemble of manuscript catechisms, grammars and dictionaries, composed in 18th centurys Amazon, between the true Língua geral diglossia identified with the variant used in 17th and 18th centuries printed works (Anchieta, 1959; Figueira, 1621; 1698; Araújo, 1618; 1686) , and the corrupt Língua geral identified with the Tupi variation spoken in the Missions. We make the assumption that these compositions are differently settled in the scale regarding the textual genre: catechisms are more conservative, since they were faithful to the variety used in printed Tupi works, while dictionaries and grammars reflects the oral Tupi variant used in the Missions

DERMATOSE FEBRIL – UM DIAGNÓSTICO A NÃO ESQUECER

A 46 year-old male patient with HIV-1/HCV coinfection and liver cirrhosis admitted with fever, prostration, and asthenia. On physical examination, scarce necrotic pustules on an erythematous base on the fingers and toes with swelling, pain and functional limitation of the left tibiotarsal joint were noted. Laboratory revealed only slight elevation of liver enzymology and CRP. We admitted the diagnostic hypotheses of endocarditis, meningococcemia or gonococcemia. After isolation of Neisseria gonorrhoeae from a blood culture, intravenous ceftriaxone was started with clinical improvement. Pharyngeal swab PCR positivity for N. gonorrhoeae confirmed the diagnosis of pharyngeal origin disseminated gonococcemia. Gonorrhea is a sexually transmitted infection caused by Gram-negative diplococcus Neisseria gonorrhoeae. Disseminated gonococcemia in the form of the classical "arthritis-dermatitis" syndrome accompanies only 1-2% of mucosal infections. Pharyngeal gonorrhea is often asymptomatic in men and women, probably constituting an important reservoir of the agent. The rise in gonorrhea incidence makes this case very pertinent in any dermatologist’s clinical practice today.Apresenta-se o caso de um doente de 46 anos, com coinfecção VIH-1/VHC e cirrose hepática, internado por febre, prostração e astenia. Ao exame objetivo, observavam-se escassas pústulas necróticas em base eritematosa acantonadas aos dedos das mãos e pés com edema, dor e limitação funcional dos mesmos e da articulação tíbio-társica esquerda. Analiticamente, apenas elevação ligeira da enzimologia hepática e da PCR. Admitiram-se as hipóteses diagnósticas de endocardite, meningococcémia ou gonococcémia. Após isolamento de Neisseria gonorrhoeae em hemocultura, iniciou-se ceftriaxone 1g/dia EV com melhoria clínica. A positividade da PCR para N. gonorrhoeae no exsudado orofaríngeo confirmou o diagnóstico de gonococcémia disseminada de ponto de partida orofaríngeo. A gonorreia é uma infeção sexualmente transmitida causada pelo diplococo Gram negativo Neisseria gonorrhoeae. A gonococcémia disseminada na forma da síndrome clássica “dermatite-artrite” acompanha apenas 1-2% das infeções mucosas. A gonorreia orofaríngea é geralmente assintomática em homens e mulheres, constituindo provavelmente um reservatório importante do agente. O aumento da incidência de gonorreia torna este caso pertinente na prática clínica actual do dermatologista

Lingüística como padrão de escrita missionária

This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models.This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models.This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models.This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models.This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models.This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models.This paper presents the history of two models of orthography for unwritten languages created by evangelical missions, using linguistic concepts. Their diffusion will be analysed as well as the linguistic concepts adopted for the notion of letter and the alliances established between scholars and missionaries in the formulation of these models

Preoperative nursing consultations: implementation and evaluation

Enquadramento: O programa Enhanced Recovery After Surgery (ERAS) é um programa de cuidados perioperatórios, que objetiva melhorar resultados cirúrgicos e a recuperação do cliente. O enfermeiro tem uma intervenção importante nomeadamente na consulta pré-operatória. Objetivos: Planear, implementar e avaliar a consulta de enfermagem pré-operatória inserida no ERAS®. Metodologia: Estudo descritivo, quantitativo com três fases: planeamento (elaborados documentos orientadores); implementação (realizadas as consultas); avaliação, (através questionário e plataforma de auditoria). Duas amostras não probabilísticas, uma sem consulta e temporalmente anterior ao programa ERAS (n = 65) e outra com consulta (n = 93). Resultados: Realizadas 96 consultas, em que 74,2% dos clientes ficaram muito satisfeitos e 59,1% consideraram as informações transmitidas muito importantes. Se necessidade de nova cirurgia todos os clientes (100,0%) gostariam de voltar a ter consulta. Tempo médio de internamento reduziu de 7,09 para 6,73 dias (p = 0,044). Tempo de retorno à autonomia na mobilização diminuiu de 3,48 para 2,00 dias (p < 0,001). Conclusão: A consulta foi importante para os clientes, com elevados níveis de satisfação e com efeitos positivos no retorno à autonomia.Background: The Enhanced Recovery After Surgery (ERAS®) program is a perioperative care pathway that aims to improve surgical outcomes and patient recovery. Nurses have a key role, particularly in preoperative consultations. Objectives: To plan, implement and evaluate the preoperative nursing consultation included in the ERAS® program. Methodology: This is a descriptive, quantitative study with three phases: planning (development of guidance documents), implementation (consultations), and evaluation (through a questionnaire and audit platform). The study was conducted with two non-probability samples, one without consultations before the ERAS® program implementation (n = 65) and the other with consultations (n = 93). Results: Ninety-six consultations were held, with 74.2% of the patients reporting they were very sat-isfied and 59.1% considering the information transmitted very important. If new surgery was needed, all patients (100.0%) stated they would want a consultation. The mean length of hospital stay reduced from 7.09 to 6.73 days (p = 0.044), and the time to recover autonomy in mobilization decreased from 3.48 to 2.00 days (p < 0.001). Conclusion: The consultations were important for patients, had high levels of satisfaction, and posi-tively impacted the recovery of autonomy.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Traumatismos de dentes permanentes em crianças e adolescentes: uma revisão de literatura

O trauma dental é compreendido como uma agressão na qual a sua potência supera a resistência presente nos tecidos duros ósseos e dentários, podendo ser térmica, química ou mecânica. O tipo, a duração e a intensidade do impacto definem a extensão da lesão. As fraturas nos elementos dentários podem envolver somente a coroa do dente, a coroa e a raiz ou apenas a raiz, configurando-se como uma situação de urgência frequente nos consultórios odontológicos e odontopediátricos. Podem-se citar: fratura de esmalte, fratura não complicada da coroa, fratura complicada da coroa, fratura coronoradicular e fratura radicular. Quando o tecido de sustentação é envolvido, os traumas são classificados em concussão, subluxação, luxação lateral, intrusão, extrusão e avulsão. Além disso, os traumas dentais são, em sua maioria, causados por acidentes cotidianos, envolvendo situações passíveis de prevenção. Dessa forma, o cirurgião-dentista frente a um traumatismo dental deve agir de forma imediata e segura. Esses atendimentos são desafiadores, pois muitas vezes necessitam, principalmente, de técnicas para o manejo do comportamento, já que esses pacientes apresentam maior grau de estresse devido à sintomatologia dolorosa. O presente estudo objetivou fazer uma revisão de literatura sobre os traumatismos dentais que ocorrem com mais frequência com crianças e adolescentes e como os mesmos podem ser prevenidos

A “mulher casada” nos confessionários Tupí (séculos XVI-XVII)

The confession manuals made up for the Indians of the New World in the sixteenth and seventeenth centuries were organized in the form of questions on the ten commandments. Due to the great number of detailed questions, the sixth commandment, which is related to sexuality, apparently had been the most important to the Jesuits who applied it among the Tupinambá settled under the Portuguese crown. The penitents, who were classified in categories, according to their sex and marital condition (single or married), had to answer questions related to their condition. The questions directed to the married woman in two of the Jesuit confession manuals, those by José de Anchieta (Cardoso 1992) and Antônio de Araújo (1686), allow us to perceive the representation of the feminine behavior by the confessors, which was projected into the questions on improper actions, discourse and thoughts.Os manuais de confissão aplicados aos índios do Novo Mundo entre os séculos XVI e XVII eram estruturados na forma de perguntas sobre os dez mandamentos da Lei de Deus. Devido à grande quantidade de perguntas e a seu detalhamento, o sexto mandamento, relacionado à sexualidade, aparentemente era o mais importante para os jesuítas que o aplicaram entre os penitentes Tupinambá aldeados sob o domínio da coroa portuguesa. Classificados em categorias, os penitentes tinham de responder a perguntas específicas do seu sexo e de sua condição (casado ou solteiro). As perguntas direcionadas às mulheres casadas em dois confessionários Tupí jesuíticos, o de José de Anchieta (Cardoso 1992) e o de Antônio de Araújo (1686) nos permitirão apreender a representação do comportamento feminino construída pelos confessores, projetada nas perguntas relativas às ações, palavras e pensamentos impróprios