7 research outputs found
Valor de la expresi贸n del ARN mensajero de la isocitrato deshidrogenasa (IDH1) como predictor de agresividad en gliomas
Los gliomas son el tipo m谩s com煤n de tumor cerebral primario. En humanos, cinco genes codifican para la isocitrato deshidrogenasa: IDH1/2/3A/3B/3G. Mutaciones som谩ticas puntuales en el gen IDH1 son frecuentes en gliomas, la mayor铆a transiciones de una sola base: 395G-A y est谩n asociadas a una mayor supervivencia de esos pacientes con glioma cuando los comparamos con aquellos que no tienen la mutaci贸n. Entre las consecuencias funcionales de la mutaci贸n de la IDH1, estudios demuestran un fuerte descenso en la producci贸n de NADPH reducido dependiente de isocitrato en las c茅lulas. Investigamos la expresi贸n del ARNm del IDH1 y la presencia o ausencia de la mutaci贸n G395A en una serie de gliomas. En particular, estudiamos 38 casos de gliomas y 7 met谩stasis analizando el centro y la periferia de muestras en fresco y resecci贸n en bloque. No encontramos diferencias entre las regiones central y perif茅rica con respecto a la expresi贸n del ARNm y la mutaci贸n de IDH1. Sin embargo, podemos observar una mayor expresi贸n del ARNm de IDH1 y una menor incidencia de la mutaci贸n en tumores de alto grado cuando los comparamos con aquellos de bajo grado. Este estudio muestra que los gliomas con IDH1 normal tienen una mayor expresi贸n de ARNm independientemente de la zona del tumor. Esto podr铆a conducir a un aumento en la actividad enzim谩tica y mayor presencia de NADPH, lo cual se necesita para el crecimiento celular. As铆, el mayor poder de reducci贸n de estas c茅lulas podr铆a explicar la mayor agresividad de estos gliomas.Gliomas, are the most common type of primary brain tumors. In humans, five genes encode for isocitrate dehydrogenase: IDH1, IDH2, IDH3A, IDH3B, and IDH3G. Somatic point mutations in IDH1 are frequent in gliomas. Most mutations for IDH1 are single base transition substitutions: 395G_A and are associated with longer survival in patients with glioma when compared with those gliomas without IDH1 mutations. Among the functional consequences of IDH1 mutation, some studies have shown a strong decrease in the isocitrate dependent production of reduced NADPH production in the cells. We investigated mRNA expression of IDH1 and the presence or absence of the G395A mutation in a subset of gliomas. Specifically, we studied 38 cases of glioma and 7 methastasis analyzing central and peripheral regions from fresh and en block resection specimens. We found no differences between central and peripheral regions, in regard to IDH1 mRNA expression and G395A IDH1 mutation. However, we identified a significantly higher expression of IDH1 mRNA and a lesser incidence of mutation in high grade gliomas when compared with low grade ones. This study shows that those gliomas with IDH1 WT are associated with higher expression of IDH1 mRNA, independently of the tumor area. This could in turn lead to an increase in enzyme activity and more presence of NADPH which is needed for cellular growth. The greater reducing power in these cells could account for the greater aggressiveness of these gliomas
Factores pron贸sticos en astrocitomas anapl谩sicos
[spa] Los gliomas anapl谩sicos (grado III de la OMS) son gliomas infiltrativos y malignos que afectan fundamentalmente a pacientes adultos, y cuyo comportamiento y evoluci贸n cl铆nica son especialmente heterog茅neos. El avance en el conocimiento de la biolog铆a molecular acontecido en los 煤ltimos a帽os, ha permitido demostrar que muchas de las variables cl铆nicas, radiol贸gicas o histol贸gicas cl谩sicas pierden su valor pron贸stico si se analizan conjuntamente con los nuevos factores moleculares.
En la primera parte de la presente tesis se analiz贸 el valor pron贸stico de la expresi贸n inmunohistoqu铆mica de la prote铆na O6-Metilguanina ADN-metiltransferasa (MGMT) y de la metilaci贸n del promotor del gen (MGMT) en una serie homog茅nea de pacientes con diagn贸stico de glioma anapl谩sico, tratados de acuerdo a un protocolo preestablecido com煤n. La ausencia de inmunoexpresi贸n de MGMT result贸 factor pron贸stico independiente de supervivencia global en aquellos pacientes que recibieron tratamiento quimioter谩pico. Sin embargo, el estado de metilaci贸n del promotor determinado mediante PCR espec铆fica de metilaci贸n (MSP) no demostr贸 influencia pron贸stica. Contrariamente a lo esperado, los resultados de la serie estudiada no corroboraron la existencia de una buena correlaci贸n entre los datos de la inmunohistoqu铆mica y los de la MSP, es decir, no se hall贸 una asociaci贸n firme entre la presencia de metilaci贸n del promotor del gen y la ausencia de expresi贸n de la prote铆na.
Por ello, en la segunda parte de la tesis se realiz贸 una Revisi贸n Sistem谩tica y un Meta-an谩lisis sobre la precisi贸n diagn贸stica de la inmunohistoqu铆mica como t茅cnica de estudio y valoraci贸n de MGMT. Los resultados del mismo parecen confirmar la hip贸tesis de que el grado de expresi贸n de MGMT no siempre refleja el estado de metilaci贸n del promotor y a la inversa. Por ello ambos m茅todos diagn贸sticos no deben considerarse como intercambiables, ni emplearse indistintamente en la pr谩ctica cl铆nica diaria ya que no seleccionan el mismo subgrupo de pacientes.
La tercera parte de la tesis se centr贸 en el subgrupo de gliomas anapl谩sicos con componente oligodendroglial (oligodendrogliomas anapl谩sicos y oligoastrocitomas anapl谩sicos). En ella se analiz贸 la heterogeneidad regional de los par谩metros moleculares valorando la asociaci贸n entre el perfil gen茅tico de los tumores y determinadas caracter铆sticas radiol贸gicas. La p茅rdida de heterocigosidad de 1p, 19q y 1p19q se hallaron fuertemente asociadas a la localizaci贸n frontal de los tumores. Aunque las pruebas de neuroimagen nunca reemplazar谩n al an谩lisis histol贸gico, la identificaci贸n de aspectos cl铆nicos o caracter铆sticas radiol贸gicas que se asocien a determinados aspectos moleculares puede resultar de enorme utilidad en la pr谩ctica cl铆nica diaria.
El objetivo fundamental de clasificar los gliomas es definir subgrupos de pacientes con un pron贸stico similar. Para alcanzar este objetivo adem谩s del an谩lisis histol贸gico e inmunohistoqu铆mico convencionales, el estudio gen茅tico-molecular proporciona informaci贸n muy valiosa. Los esfuerzos deben por tanto dirigirse hacia la utilizaci贸n combinada de todos los recursos disponibles en nuestro entorno.[eng] The general term for the activities of donor screening, retrieval, processing, storage and distribution of bone allografts is 鈥淏one Banking". The Hospital Cl铆nic of Barcelona Bone Bank was instituted in 1987.
From December 1987 to December 1992 a total of 475 bone allografts were obtained of 270 bones; they belonged to 53 donors, all of them multi-organic or tissular donors. The grafts were obtained under strictly aseptic conditions and bacteriological cultures were performed of each bone. The grafts were packed in two sterile plastic bags and then stored by freezing in electrical freezers (-40掳C / -80掳C). The parameters studied have been: age and sex of the donor, cause of death, hospital of extraction, number of persons of the bone procurement team, previous organ procurements from the same donor, type of bone, culture of the bone, fragmentation, type of fragment, culture of the fragment, time of storage, hospital of implantation, diagnostic of the recipient, culture of the allograft, culture of the recipient bed, and clinical and radiographic results of the allograft.
The aim of this thesis is to optimize the results of a Regional Bone Bank.
The conclusions are: (1) Number of contaminated bones has been significantly higher in extractions outside of the main hospital, and in the procurements with more than 4 team members. (2) The age and sex of the donor, the cause of death, the number of previous organ procurements from the same donor and the type of bone weren't determinative factors contributing to bacterial contamination of the bones. (3) We justify fragmentation of the obtained bones. (4) The chronological evolution has been a determinative factor of the different distribution of the allogratts of the Hospital Cl铆nic Bone Bank. (5) Cancellous allograft is the type of fragment more implant. (6) Lang time of storage is a determinative factor to decrease de number of complications of the allografts. (7) Addition osteotomies have shown the best results of the bone allografts, and exposed fractures and lumbar arthrodeses the worst. (8) Age and sex of the donor, type of fragment, cultures of the allograft and the recipient bed aren鈥檛 determinative factors in the clinical and radiographic results of the bone allografts.[cat] Un Banc d'Ossos 茅s la organitzaci贸 encarregada de la selecci贸 de donants, obtenci贸n, processament, emmagatzemament i distribuci贸 d'al.loempelts d'aparell locomotor per a la seva posterior utilitzaci贸 m猫dica. El principi b脿sic 茅s obtenir teixit segur i efica莽 per als pacients. Un al.loempelt 茅s aquell empelt realitzat entre individus de la mateixa esp猫cie. per貌 amb genotip diferent.
La difusi贸 dels al.loempelts ossis es va iniciar amb Inclan (1942), qui public脿 la primera gran s猫rie utilitzant ossos conservats per a un per铆ode de fins dos mesos. A Fran莽a, Andr猫 Sicard estableix al 1946 una "reserva d'empelts" a l'Hospital de Beaujon. El centre m茅s important d'utilitzaci贸 dels al.loempelts, per貌, ha estat als Estats Units de l'Am猫rica del Nord. Mankin inicia l'any 1971, a l'Hospital General de Massachussets, una llarga s猫rie de resseccions tumorals amb substituci贸 per empelts massius obtinguts de cad脿vers i congelats a -80潞. Tamb茅 als Estats Units, Malinin (1976), a la Universitat de Miami, inicia una llarga s猫rie de m茅s de 900 al.loempelts massius, obtinguts de cad脿vers i conservats en nitr貌gen l铆quid, a -150掳. A fi d'unificar criteris i crear unes normes, el Consell Musculoesquel猫tic de la Societat Americana de Bancs de Teixits (AATB) publica la primera guia el 1979 per als bancs de teixits musculoesquel猫tics. Als Estats Units hi ha actualment 220.000 receptors anuals d'al.loempelts ossis o de parts toves, que prov茅nen de 5000 donants/any. A Europa, de manera semblant a l'AATB dels Estats Units apareixen la Societat Europea de Bancs de Teixits (EATB) l'any 1991 i la Societat Europea de Transplantament Musculo-esquel猫tic (EAMST) l'any 1992.
L'any 1951 es crea el primer banc d'ossos d'Espanya a l'Hospital Provincial de Madrid (Sanchis Olmos, 1953). Poc despr茅s, l'any 1953, es constitueix per Ordre Ministerial el Banco Nacional de Huesos (Gonz谩lez S谩nchez 1956). Els primers Bancs d'ossos que segueixen la metodologia establerta per l' AATB i els grans bancs americans sorgeixen en la d猫cada dels vuitanta. L'any 1992 L'Organizaci贸n Nacional de Trasplantes (ONT) publica unes recananacions per unificar els criteris de funcionament dels bancs d'ossos a Espanya.
Per a la realitzaci贸 d鈥檃questa tesi doctoral s'han valorat els 53 donants multiorganics generats per l'Hospital Cl铆nic de Barcelona i per altres centres coordinats amb aquest, des del desembre de 1987 fins al desembre de 1992, dels quals s'ha practicat l'extracci贸 de teixit esquel猫tic. El nombre total d'ossos obtinguts ha estat 270, i el d' al.loempelts 475. Els par脿metres estudiats han estat els seg眉ents: edat i sexe del donant, causa de mort, hospital d鈥檈xtracci贸, equips extractors d'altres 貌rgans i teixits previs, nombre de membres de l'equip extractor de teixit esquel猫tic, tipus d鈥檕s, cultiu de l鈥檕s a l'extracci贸, fragmentaci贸, tipus de fragment, cultiu del fragment, temps d'emmagatzemament, centre d'implantaci贸, diagn貌stic del receptor, cultiu del al.loempelt i del llit receptor, i resultat cl铆nic i radiol貌gic de l' empelt.
L鈥檕bjectiu general d鈥檃questa tesi 茅s optimitzar el funcionament, el rendiment i els resultats d'un Banc d鈥橭ssos que anomenem "Regional", 茅s a dir, que obt茅 els al.loempelts esquel猫tics de donants multiorg脿nics i tissulars, en contraposici贸 als Bancs d鈥橭ssos quir煤rgics, que es nodreixen b脿sicament de caps de f猫mur. Per obtenir aquest objectiu general hem establert els seg眉ents objectius particulars: (1) Avaluaci贸 dels factors que poden ser significatius en el resultat dels cultius realitzats en els ossos despr茅s de la seva obtenci贸: I鈥檋ospital d'extracci贸, les extraccions pr猫vies d'貌rgans I eixits, el nombre d'equips extractors previs, el nombre de membres de l'equip extractor de teixit esquel猫tic, la causa de mort, l'edat i el sexe del donant, i el tipus d'os obtingut. (2) Valoraci贸 de les possibles causes de contaminaci贸 dels al.loempelts obtinguts despr茅s de la fragmentaci贸 dels ossos, analitzant l鈥檕s d'origen i el tipus de fragment. (3) An脿lisi de la distribuci贸 geogr脿fica dels centres en els quals s'implanten els empelts generats pel Banc d'Ossos de l'Hospital Cl铆nic, i el nivell d'utilitzaci贸 dels diversos tipus de fragments. (4) Examen dels diferents par脿metres que poden determinar el comportament dels al.loempelts: edat i sexe del donant, tipus d'os d'origen, tipus de fragment, temps d'emmagatzemament, cultiu de l'al.loempelt, cultiu del llit receptor, i tipus d'intervenci贸.
Les conclusions s贸n: (1) Els factors que s'han mostrat determinants en la contaminaci贸 dels ossos obtinguts de donants multiorg脿nics s贸n: l'hospital d鈥檈xtracci贸 (menys mltius positius en els ossos obtinguts a l'hospital on est脿 ubicat el Banc amb relaci贸 als explantats en un altre centre), i el nombre de membres de l'equip extractor d鈥檃parell locomotor (m茅s contaminaci贸 quan hi ha 4 o m茅s membres). (2) Les extraccions pr猫vies dels diferents 貌rgans i teixits, el nombre d'equips extractors previs a l'obtenci贸 del teixit esquel猫tic, la causa de mort, l'edat i el sexe del donant, i el tipus d鈥檕s, no han presentat difer猫ncies significatives en la contaminaci贸 dels ossos obtinguts de donants multiorg脿nics. (3) Justifiquem la fragmentaci贸 dels ossos obtinguts, realitzada en condicions adequades, pel baix percentatge de contaminaci贸 dels segments, amb relaci贸 al benefici que aporta, ja que permet que m茅s receptors puguin gaudir dels avantatges dels al.loempelts. (4) L'evoluci贸 croncl貌gica ha estat un factor determinant en la diferent distribuci贸 geogr脿fica de la utilitzaci贸 dels al.loempelts generats pel Banc d'Ossos de l'Hospital Cl铆nic, i s'ha convertit en la pr貌pia d'un Banc regional. (5) El tipus d'al.loempelt m茅s sol.licitat i utilitzat 茅s el fragment esponj贸s. (6) El temps d' emnagatzernament, amb un m猫tode de conservaci贸 i d'embalatge idonis, no 茅s un factor determinant en la contaminaci贸 dels al.loempelts, i quant m茅s prolongat 茅s, menors s贸n les complicacions dels implants. (7) El millor resultat de les osteotomies metafis脿ries d鈥榓ddici贸 per un costat i l'augment de les complicacions en les fractures obertes i les artrodesis lumbars per l鈥檃ltra, indiquen que la qualitat del llit receptor i les condiciones biomec脿niques s贸n altres determinants en el comportament dels al.loempelts. (8) L'edat i el sexe del donant (amb una adequada selecci贸), el tipus d'os i de fragment (amb una correcta indicaci贸), els cultius de l'al.loempelt i del receptor, i la resta d鈥檌ndicacions analitzades no s贸n determinants en l'aparici贸 de complicacions del comportament dels al.loempelts
O6-Methylguanine-DNA methyltransferase protein expression by immunohistochemistry in brain and non-brain systemic tumours: systematic review and meta-analysis of correlation with methylation-specific polymerase chain reaction
Background: The DNA repair protein O6-Methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) confers resistance to alkylating agents. Several methods have been applied to its analysis, with methylation-specific polymerase chain reaction (MSP) the most commonly used for promoter methylation study, while immunohistochemistry (IHC) has become the most frequently used for the detection of MGMT protein expression. Agreement on the best and most reliable technique for evaluating MGMT status remains unsettled. The aim of this study was to perform a systematic review and meta-analysis of the correlation between IHC and MSP. Methods A computer-aided search of MEDLINE (1950-October 2009), EBSCO (1966-October 2009) and EMBASE (1974-October 2009) was performed for relevant publications. Studies meeting inclusion criteria were those comparing MGMT protein expression by IHC with MGMT promoter methylation by MSP in the same cohort of patients. Methodological quality was assessed by using the QUADAS and STARD instruments. Previously published guidelines were followed for meta-analysis performance. Results Of 254 studies identified as eligible for full-text review, 52 (20.5%) met the inclusion criteria. The review showed that results of MGMT protein expression by IHC are not in close agreement with those obtained with MSP. Moreover, type of tumour (primary brain tumour vs others) was an independent covariate of accuracy estimates in the meta-regression analysis beyond the cut-off value. Conclusions Protein expression assessed by IHC alone fails to reflect the promoter methylation status of MGMT. Thus, in attempts at clinical diagnosis the two methods seem to select different groups of patients and should not be used interchangeably
O6-Methylguanine-DNA methyltransferase protein expression by immunohistochemistry in brain and non-brain systemic tumours: systematic review and meta-analysis of correlation with methylation-specific polymerase chain reaction
Background: The DNA repair protein O6-Methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) confers resistance to alkylating agents. Several methods have been applied to its analysis, with methylation-specific polymerase chain reaction (MSP) the most commonly used for promoter methylation study, while immunohistochemistry (IHC) has become the most frequently used for the detection of MGMT protein expression. Agreement on the best and most reliable technique for evaluating MGMT status remains unsettled. The aim of this study was to perform a systematic review and meta-analysis of the correlation between IHC and MSP. Methods A computer-aided search of MEDLINE (1950-October 2009), EBSCO (1966-October 2009) and EMBASE (1974-October 2009) was performed for relevant publications. Studies meeting inclusion criteria were those comparing MGMT protein expression by IHC with MGMT promoter methylation by MSP in the same cohort of patients. Methodological quality was assessed by using the QUADAS and STARD instruments. Previously published guidelines were followed for meta-analysis performance. Results Of 254 studies identified as eligible for full-text review, 52 (20.5%) met the inclusion criteria. The review showed that results of MGMT protein expression by IHC are not in close agreement with those obtained with MSP. Moreover, type of tumour (primary brain tumour vs others) was an independent covariate of accuracy estimates in the meta-regression analysis beyond the cut-off value. Conclusions Protein expression assessed by IHC alone fails to reflect the promoter methylation status of MGMT. Thus, in attempts at clinical diagnosis the two methods seem to select different groups of patients and should not be used interchangeably
Implicaci贸n del patr贸n radiol贸gico en el pron贸stico de los tumores oligodendrogliales: correlaci贸n con el perfil gen茅tico
Introducci贸n. La codeleci贸n 1p19q (LOH1p19q) confiere a los tumores oligodendrogliales quimiosensibilidad y un mejor pron贸stico en relaci贸n con otros gliomas. La investigaci贸n dirigida a identificar caracter铆sticas radiol贸gicas asociadas a LOH1p19q ha despertado gran inter茅s en los 煤ltimos a帽os. Objetivos. Confirmar la existencia de heterogeneidad regional de los par谩metros moleculares en los gliomas oligodendrogliales, valorar la asociaci贸n entre el perfil gen茅tico y determinadas caracter铆sticas radiol贸gicas y cl铆nicas, y analizar el valor pron贸stico de 茅stas. Pacientes y m茅todos. Se incluyeron 54 pacientes tratados seg煤n un protocolo preestablecido com煤n. Se valoraron las secuencias T1, con/sin gadolinio, y T2 de la resonancia magn茅tica preoperatoria a ciegas de la informaci贸n molecular y cl铆nica. El an谩lisis de LOH se efectu贸 sobre muestras pareadas de ADN tumoral y gen贸mico. Resultados. La presencia de LOH1p se hall贸 fuertemente asociada a LOH19q (p < 0,0001). LOH1p19q result贸 m谩s frecuente en los tumores situados en el l贸bulo frontal (odds ratio, OR = 5,38; intervalo de confianza del 95%, IC 95% = 1,51-19,13; p = 0,007) y sin necrosis radiol贸gica (OR = 0,17; IC 95% = 0,03-0,80; p = 0,02). La localizaci贸n frontal (riesgo relativo, RR = 4,499; IC 95% = 1,027-193,708; p = 0,046), la necrosis radiol贸gica (RR = 0,213; IC 95% = 0,065-0,700; p = 0,011) y el grado de resecci贸n (RR = 9,231; IC 95% = 1,737-49,050; p = 0,009) resultaron factores pron贸sticos independientes de supervivencia global. Conclusiones. En los tumores oligodendrogliales, adem谩s del an谩lisis histol贸gico y el estudio gen茅tico-molecular, la valoraci贸n de determinadas caracter铆sticas radiol贸gicas puede resultar de gran utilidad para definir subgrupos de pacientes con pron贸stico y respuesta al tratamiento similares. Los esfuerzos deben dirigirse, por tanto, hacia la utilizaci贸n combinada de todos los recursos disponibles en cada centro
NS-11LOW-FIELD POLESTAR N20 MOBILE iMR SYSTEM AS AN ADJUNCT FOR PEDIATRIC BRAIN TUMOR RESECTION: FEASIBILITY, USEFULNESS AND SAFETY
Implicaci贸n del patr贸n radiol贸gico en el pron贸stico de los tumores oligodendrogliales: correlaci贸n con el perfil gen茅tico
Introducci贸n. La codeleci贸n 1p19q (LOH1p19q) confiere a los tumores oligodendrogliales quimiosensibilidad y un mejor pron贸stico en relaci贸n con otros gliomas. La investigaci贸n dirigida a identificar caracter铆sticas radiol贸gicas asociadas a LOH1p19q ha despertado gran inter茅s en los 煤ltimos a帽os. Objetivos. Confirmar la existencia de heterogeneidad regional de los par谩metros moleculares en los gliomas oligodendrogliales, valorar la asociaci贸n entre el perfil gen茅tico y determinadas caracter铆sticas radiol贸gicas y cl铆nicas, y analizar el valor pron贸stico de 茅stas. Pacientes y m茅todos. Se incluyeron 54 pacientes tratados seg煤n un protocolo preestablecido com煤n. Se valoraron las secuencias T1, con/sin gadolinio, y T2 de la resonancia magn茅tica preoperatoria a ciegas de la informaci贸n molecular y cl铆nica. El an谩lisis de LOH se efectu贸 sobre muestras pareadas de ADN tumoral y gen贸mico. Resultados. La presencia de LOH1p se hall贸 fuertemente asociada a LOH19q (p < 0,0001). LOH1p19q result贸 m谩s frecuente en los tumores situados en el l贸bulo frontal (odds ratio, OR = 5,38; intervalo de confianza del 95%, IC 95% = 1,51-19,13; p = 0,007) y sin necrosis radiol贸gica (OR = 0,17; IC 95% = 0,03-0,80; p = 0,02). La localizaci贸n frontal (riesgo relativo, RR = 4,499; IC 95% = 1,027-193,708; p = 0,046), la necrosis radiol贸gica (RR = 0,213; IC 95% = 0,065-0,700; p = 0,011) y el grado de resecci贸n (RR = 9,231; IC 95% = 1,737-49,050; p = 0,009) resultaron factores pron贸sticos independientes de supervivencia global. Conclusiones. En los tumores oligodendrogliales, adem谩s del an谩lisis histol贸gico y el estudio gen茅tico-molecular, la valoraci贸n de determinadas caracter铆sticas radiol贸gicas puede resultar de gran utilidad para definir subgrupos de pacientes con pron贸stico y respuesta al tratamiento similares. Los esfuerzos deben dirigirse, por tanto, hacia la utilizaci贸n combinada de todos los recursos disponibles en cada centro