Organogenesis and transient genetic transformation of the hybrid Eucalyptus grandis × Eucalyptus urophylla

O híbrido Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla apresenta alta produtividade e potencial para indústrias de papel, celulose e fibras. A organogênese de explantes foliares de dois clones de E. grandis × E. urophylla foi estudada para verificar fatores como tempo de repicagem das plântulas matrizes em meio de multiplicação; tipo de explantes, folhas inteiras e de meias-folhas (porções basais e apicais) e dos dias que os explantes foliares permaneceram em meio de regeneração. Foram observadas diferenças na capacidade organogênica dos dois clones testados. A parte basal das folhas, coletadas de brotações repicadas a cada 17 dias, apresentou superioridade organogênica. Explantes foliares devem ser transferidos para novo meio de indução de brotações a cada cinco dias. Este estudo também teve como objetivo avaliar fatores que afetam a transformação genética de explantes foliares com o gene uidA, via co-cultivo com Agrobacterium tumefaciens, tais como a pré-cultura, a duração da co-cultura e a adição da acetoseringona no meio de cultura. As melhores condições para a expressão do gene uidA foram a cada dois dias de pré-cultura de explantes foliares, três dias de co-cultura com a bactéria e a adição de acetoseringona nos meios de pré e co-cultura.The hybrid Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla presents high levels of productivity and potential for use in paper, cellulose and fiber industries. The bud organogenesis from leaf explants of two clones of E. grandis × E. urophylla was studied in order to verify the effect of several factors: subculture duration on multiplication medium, type of explants, entire and half leaves: basal and apical portions, and duration of the culture on a regeneration medium. Differences in organogenic capacity of the two clones tested were observed. The explant most recommended for organogenesis is the basal section of the leaf collected from shoot clusters subcultured every 17 days. Moreover, the leaf explants must be transferred to a fresh bud induction medium every five days. This study also aimed at evaluating factors affecting the genetic transformation of leaf explants with the uidA gene, via co-cultivation with Agrobacterium tumefaciens, such as the pre-culture of the explants on a specific medium, the duration of their co-culture with the bacteria and the addition of acetosyringone to the culture media. The best conditions for the expression of the uidA gene were two days of pre-culture of the leaf tissues, three days of co-culture with the bacteria and the addition of acetosyringone in pre- and co-culture media

Multiplicação, alongamento e enraizamento de brotações in vitro de clones de cana-de-açúcar submetidos a diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina e ácido giberélico

The culture of meristems allows obtaining plant sugarcane healthy with genetic stability and enables the production of a large number of seedlings during the year. The aim of this work was to establish suitable conditions for seedling production in vitro by meristems of three potential clones sugarcane (RB036091, RB036152 and RB036066). The multiplication and elongation of shoot buds were evaluated. The BAP (0, 0.444, 0.888 and 1.776 mM) was added in the medium for multiplication of shoot buds and GA3 (0, 0.3 and 0.6 mM) for elongation of shoot buds. Presence of BAP in the medium had an inhibitory influence on shoot buds height. The BAP in the medium promoted the tillering for the three clones. The GA3 increased the height of shoots for clones RB036152 and RB036066. The GA3 promoted the formation of a greater plant, however, fewer roots were formed for all clones tested. It was concluded that the concentration of 0.444 mM BAP promotes the multiplication of clones RB036091, RB036066 and RB036052. The clone RB036091 showed the higher multiplication rate. The GA3 promotes the elongation of the seedlings for clones RB036152 and RB036066.A cultura de meristemas possibilita a obtenção de plantas de cana-de-açúcar sadias, além de garantir a estabilidade genética e a produção de um grande número de mudas, durante o ano inteiro. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer condições adequadas para a produção de mudas in vitro por meio de meristemas de três clones potenciais de cana-de-açúcar (RB036091, RB036152 e RB036066), sendo avaliados a multiplicação e o alongamento de suas brotações. Para a multiplicação das brotações foram aplicadas concentrações de BAP (0; 0,444; 0,888 e 1,776 μ M) e para o alongamento das brotações foram testadas as concentrações de 0; 0,3 e 0,6 μ M de GA3. As concentrações crescentes de BAP reduziram a altura das brotações, dos três genótipos avaliados e a adição de BAP no meio de multiplicação foi eficiente, na promoção de perfilhos para os três clones. O uso do ácido giberélico (GA3) favoreceu o aumento na altura das brotações, para os clones RB036152 e RB036066, contribuindo para a formação de uma planta maior e de melhor qualidade e o uso do GA3 provocou menor número de raízes formadas para todos os clones testados. Conclui-se que a concentração de 0,444 μ M de BAP apresentou-seadequada para a multiplicação dos clones RB036091, RB036066 e RB036052. Dos três clones avaliados, o clone RB036091 apresentou maior taxa de multiplicação. O padrão de resposta do GA3 no alongamento das mudas varia de acordo com o genótipo, para os clones RB036152 e RB036066, ele promove a formação de mudas maiores

ENRAIZAMENTO DE ESTACAS CAULINARES DE BRINCO-DE-PRINCESA COM DIFERENTES COMPRIMENTOS

Fuchsia regia, conhecida como brinco-de-princesa, é nativa do Brasil, sendo cultivada como ornamental nas regiões Sul e Sudeste do país. A demanda por espécies ornamentais tem crescido ao longo dos anos, devido à utilização no paisagismo, gerando aumento no uso de técnicas de propagação vegetativa. Este trabalho teve por objetivo avaliar o enraizamento de estacas caulinares de F. regia com diferentes comprimentos. Ramos semilenhosos de F. regia foram coletados e confeccionadas estacas com 7, 14 e 21 cm de comprimento, com corte em bisel na base e reto acima da última gema axilar, sendo mantido um par de folhas no ápice. O plantio foi realizado em tubetes contendo vermiculita de granulometria fina como substrato. O experimento foi conduzido em casa-de-vegetação com nebulização intermitente. Aos 40 dias após a instalação do experimento foram avaliadas as variáveis: porcentagem de estacas enraizadas, número de raízes formadas por estaca e comprimento das três maiores raízes, massa fresca e seca das raízes (g), porcentagem de estacas com brotações, número de brotações formadas por estaca e porcentagem de estacas com folhas retidas. Foi observada média de 97,08% de estacas enraizadas, não sendo verificada diferença significativa entre os tratamentos. Estacas de 14 cm apresentaram resultados superiores aos demais tratamentos para o número médio de raízes (29,69) e porcentagem de estacas com brotações (93,75%). Conclui-se que o comprimento da estaca não afeta o enraizamento desta espécie, sendo a Fuchsia regia considerada de fácil enraizamento.Fuchsia regia, called earring princess, is native to Brazil and cultivated as ornamental species in the south and southwest regions of this country. The demand for ornamental species has been increasing during last years, due to their use in landscape gardening. Techniques of vegetative propagation are thus frequently used to supply plant material. The purpose of this work was to evaluate the rooting of F. regia stem cuttings of several sizes. Semi-hardwood ramifications of F. regia were collected and cuttings with 7, 14 and 21 cm were prepared with cut obliquely at the base and straight above the last axilar bud. They were planted in plastic tubes with fine vermiculite. Experiment was carried out in a greenhouse under intermittent mist. After 40 days they were evaluated concerning with: percentage of rooted cuttings, number of roots and length of the three biggest roots, roots fresh and dry weight (g), percentage of cuttings with branches, number of branches per cutting and percentage of cuttings with retained leaves. The percentage of rooted cuttings were 97.08%, with no statistical difference among the treatments. Cuttings with 14 cm length were the best for average number of roots (29.69) and percentage of cuttings with buds (93.75%). It was concluded that the cutting length didn’t affect the rooting percentage and Fuchsia regia is considered an easy rooting specie

<b>Plant regeneration and histological study of the somatic embryogenesis of sugarcane (<i>Saccharum</i> spp.) cultivars RB855156 and RB72454</b> - doi: 10.4025/actasciagron.v36i1.16342

The development of an efficient regeneration system is crucial for the genetic transformation of sugarcane. The aims of this study were to regenerate plants from somatic embryos and analyze the origin and division pattern of cells during the different embryonic developmental stages of the sugarcane cultivars RB855156 and RB72454. For both cultivars, the best results for embryogenic callus induction were obtained with explant cultures on culture medium containing 13.5 µM 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) followed by callus culture on solid medium with 4.5 µM 2,4-D. A higher rate of shoot induction was observed in RB855156 with the addition of 8.9 and 17.8 µM benzylaminopurine (BAP); this higher rate was also observed in RB72454 with the addition of 17.8 µM BAP. Murashige and Skoog (1962) (MS) medium containing 2.5 and 5.0 µM indolebutyric acid (IBA) for RB855156 and RB72454, respectively, was suitable for rooting. The plantlets were successfully acclimatized and the plant survival rate was 100% for both cultivars. Histological analysis revealed that the shoots in both cultivars originated from somatic embryogenesi

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars Otimização do protocolo e análise histológica da regeneração in vitro de plantas dos cultivares de cana-de-açúcar RB92579 e RB93509

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.<br>Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta