Loss of Endocan tumorigenic properties after alternative splicing of exon 2

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Endocan was originally described as a dermatan sulfate proteoglycan found freely circulating in the blood. Endocan expression confers tumorigenic properties to epithelial cell lines or accelerate the growth of already tumorigenic cells. This molecule is the product of a single gene composed of 3 exons. Previous data showed that endocan mRNA is subject to alternative splicing with possible generation of two protein products. In the present study we identified, and functionally characterized, the alternative spliced product of the endocan gene: the exon 2-deleted endocan, called endocanΔ2.</p> <p>Methods</p> <p>Stable, endocanΔ2-overexpressing cell lines were generated to investigate the biological activities of this new alternatively spliced product of endocan gene. Tumorigenesis was studied by inoculating endocan and endocanΔ2 expressing cell lines subcutaneously in SCID mice. Biochemical properties of endocan and endocanΔ2 were studied after production of recombinant proteins in various cell lines of human and murine origin.</p> <p>Results</p> <p>Our results showed that the exon 2 deletion impairs synthesis of the glycan chain, known to be involved in the pro-tumoral effect of endocan. EndocanΔ2 did not promote tumor formation by 293 cells implanted in the skin of severe combined immunodeficient (SCID) mice.</p> <p>Conclusion</p> <p>Our results emphasize the key role of the polypeptide sequence encoded by the exon 2 of endocan gene in tumorigenesis, and suggest that this sequence could be a target for future therapies against cancer.</p

Bronchoalveolar lavage cytological alveolar damage in patients with severe pneumonia

INTRODUCTION: Histological examination of lung specimens from patients with pneumonia shows the presence of desquamated pneumocytes and erythrophages. We hypothesized that these modifications should also be present in bronchoalveolar lavage fluid (BAL) from patients with hospital-acquired pneumonia. METHODS: We conducted a prospective study in mechanically ventilated patients with clinical suspicion of pneumonia. Patients were classified as having hospital-acquired pneumonia or not, in accordance with the quantitative microbiological cultures of respiratory tract specimens. A group of severe community-acquired pneumonias requiring mechanical ventilation during the same period was used for comparison. A specimen of BAL (20 ml) was taken for cytological analysis. A semiquantitative analysis of the dominant leukocyte population, the presence of erythrophages/siderophages and desquamated type II pneumocytes was performed. RESULTS: In patients with confirmed hospital-acquired pneumonia, we found that 13 out of 39 patients (33.3%) had erythrophages/siderophages in BAL, 18 (46.2%) had desquamated pneumocytes and 8 (20.5%) fulfilled both criteria. Among the patients with community-acquired pneumonia, 7 out of 15 (46.7%) had erythrophages/siderophages and 6 (40%) had desquamated pneumocytes on BAL cytology. Only four (26.7%) fulfilled both criteria. No patient without hospital-acquired pneumonia had erythrophages/siderophages and only 3 out of 18 (16.7%) had desquamated pneumocytes on BAL cytology. CONCLUSION: Cytological analysis of BAL from patients with pneumonia (either community-acquired or hospital-acquired) shows elements of cytological alveolar damage as hemorrhage and desquamated type II pneumocytes much more frequently than in BAL from patients without pneumonia. These elements had a high specificity for an infectious cause of pulmonary infiltrates but low specificity. These lesions could serve as an adjunct to diagnosis in patients suspected of having ventilator-associated pneumonia

The DIAMORFOSIS (DIAgnosis and Management Of lung canceR and FibrOSIS) survey. International survey and call for consensus

Background: Currently there is major lack of agreement on the diagnostic and therapeutic management of patients with idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) and lung cancer. Our aim was to identify variations in diagnostic and management strategies across different institutions and provide rationale for a consensus statement on this issue. Methods: This was a joint-survey by European Respiratory Society (ERS) Assemblies 8, 11 and 12. The survey consisted of 25 questions. Results: Four hundred and ninety-four (n=494) physicians from 68 different countries and five continents responded to the survey. Ninety-four per cent of participants were pulmonologists, 1.8% thoracic surgeons and 1.9% oncologists; 97.7% were involved in multidisciplinary team approaches on diagnosis and management. Regular low-dose high-resolution computed tomography (HRCT) scan was used by 49.5% of the respondents to screen for lung cancer in IPF. Positron emission tomography (PET) scan and endobronchial ultrasound (EBUS) is performed by 60% and 88% to diagnose nodular lesions with mediastinal lymphadenopathy in patients with advanced and mild IPF, respectively. Eighty-three per cent of respondents continue anti-fibrotics following lung cancer diagnosis; safety precautions during surgical interventions including low tidal volume are applied by 67%. Stereotactic radiotherapy is used to treat patients with advanced IPF (diffusing capacity of the lung for carbon monoxide (D LCO) <35%) and otherwise operable nonsmall cell lung cancer (NSCLC) by 54% of respondents and doublet platinum regimens and immunotherapy for metastatic disease by 25% and 31.9%, respectively. Almost all participants (93%) replied that a consensus statement for the management of these patients is highly warranted. Conclusion: The diagnosis and management of IPF-lung cancer (LC) is heterogeneous with most respondents calling for a consensus statement

Migration von /sw vom AFS ins DCE/DFS

/sw ist eine verteilte Softwarebereitstellung mit dem Ziel, jedem Benutzer Software zentral zur Verfügung zu stellen, ohne daß er sich darum kümmern muß, woher er seine Software bekommt. Für eine Außenstehenden ergibt sich somit das Bild eines großen Softwarepools, aus dem er sich fertig installierte Software für seine Plattform herunterladen kann. Voraussetzung dafür ist, daß ein Benuzter an seiner Workstation über AFS (Andrew File System), DFS (Distributed File System) oder ftp verfügt. Zur Zeit werden vom /sw für 18 verschiedenen Unix-Plattformen 594 Programme in 1024 verschiedenen Installationen angeboten. Die meisten Architekturen vom /sw liegen im AFS, bis auf die Architekturen DEC ALPHA, IRIX 4.0 und Linux, die im NFS liegen. In Zukunft wird es für die gesamte /sw Software nur noch eine Quelle geben, das DFS. Mit der Migration von /sw aus dem AFS ins DFS entfällt dann die Trennung von /sw in einen AFS-Teil und einem NFS-Teil und damit auch der AFS/NFS-Translators, der recht unstabil läuft. Die gesamte Software von /sw wurde aus dem AFS bzw. NFS ins DFS migriert, so daß für alle vom /sw unterstützten Architekturen nur noch eine Quelle zur Verfügung steht, die Stuttgarter DCE-Zelle. Jeder AFS-Klient hat über den AFS/DFS-Translator Zugriff auf /sw und für die NFS-Klienten wird das /sw-Fi-lesystem exportiert, so daß jeder NFS-Klient die Möglichkeit hat das DFS-Filesystem /sw zu mounten. Eine Workstation kann sowohl AFS- als auch DCE/DFS-Klient sein

Achieving Thoracic Oncology data collection in Europe: a precursor study in 35 Countries

Background: A minority of European countries have participated in international comparisons with high level data on lung cancer. However, the nature and extent of data collection across the continent is simply unknown, and without accurate data collection it is not possible to compare practice and set benchmarks to which lung cancer services can aspire.Methods: Using an established network of lung cancer specialists in 37 European countries, a survey was distributed in December 2014. The results relate to current practice in each country at the time, early 2015. The results were compiled and then verified with co-authors over the following months.Results: Thirty-five completed surveys were received which describe a range of current practice for lung cancer data collection. Thirty countries have data collection at the national level, but this is not so in Albania, Bosnia-Herzegovina, Italy, Spain and Switzerland. Data collection varied from paper records with no survival analysis, to well-established electronic databases with links to census data and survival analyses.Conclusion: Using a network of committed clinicians, we have gathered validated comparative data reporting an observed difference in data collection mechanisms across Europe. We have identified the need to develop a well-designed dataset, whilst acknowledging what is feasible within each country, and aspiring to collect high quality data for clinical research

ROLE D'ENDOCAN DANS LA CROISSANCE TUMORALE ET EFFETS DES ANTICORPS ANTI-ENDOCAN SUR LE DEVELOPPEMENT TUMORAL

Lung cancer is the leading cause of cancer mortality especially in developed countries. Despite multimodal therapy, prognosis is still dismal with an overall 5 year survival of 15%. Thus, efforts toward finding new potential therapeutic targets are important research directions. Tumoral development implies interaction between the tumor cell and its environment which contributes actively to tumor development. Tumor environment (or tumor stroma) comprises the extracellular matrix, stromal cells, tumor endothelium and immune cells.Endocan is a molecule present in this tumoral environment. Recently, it has been shown that endocan, a lung- and kidney-selective endothelial cell specific dermatan sulfate proteoglycan, binds through its glycan moiety to HGF/SF. In vitro, binding to endocan amplifies the growth factor mitogenic effect on cells of epithelial origin. Endocan also interacts by his protein with the LFA-1 integrin and modulate LFA-1/ICAM-1 interactions. Endocan is thus putatively involved in regulation of leucocytes transmigration from blood to tissues by blocking LFA-1/ICAM-1 interactions. This process is an essential step in firm adhesion of leukocytes to the endothelium and an important cofactor involved in cytotoxic leukocyte function. It has also been shown that endocan is expressed during an in vitro model of angiogenesis. Endocan is also overexpressed in various tumors as lung, breast, colon or kidney cancers. We show that, in vivo, endocan overexpression by non-tumorigenic epithelial cells induces tumor formation, while overexpression by tumorigenic cells sharply increases the growth rate of resulting tumors. However endocan alone does not influence proliferation of tumor or endothelial cells. Thus endocan tumor-promoting capabilities result from amplification of growth factor effects on tumor cells.While the tumorigenic effect requires the presence of the glycan chain, it also depends on the protein structure, as specific protein mutation results in loss of the tumor growth promotion effect. We show that the human endocan gene is transcribed into two alternatively-spliced variants which either retain (i.e. endocan) or exclude (i.e. endocan2) exon 2. This alternative spliced variant endocan2 does not participate at the endocan growth promotion effect. We also showed that; in a model of subcutaneous tumors in SCID mice; anti-endocan antibodies slow tumor growth and this effect is associated with intra-tumoral accumulation of leukocytes. In vitro, we show that VEGF represents a powerful inducer of endocan secretion by endothelial cells and that anti-VEGF antibodies abrogates VEGF induced endocan secretion.We also shown that, in non small cell lung cancer, endocan is overexpressed and this concerns mainly the tumorigenic, exon 2 containing endocan isoform. Endocan expression is correlated with VEGF expression. Moreover, serum endocan values are correlated with patient survival, with a shorter survival in patients with high circulating levels of endocan. Interestingly serum endocan levels were correlated with presence of metastasis and nodal involvement but not with the primary tumor size. We also investigated endocan levels in sepsis patients, were endothelial stimulation is an important pathological phenomenon. Serum endocan levels were elevated in patients with sepsis and they were correlated with another endothelial activation marker namely the von Willebradt factor. In this series high endocan levels were associated with increased sepsis severity and higher mortality.We also show that serum endocan levels are elevated in patients with adenocarcinoma metastatic to the pleura. Endocan had also a prognostic value in this setting. Interestingly endocan levels were low, and had no prognostic significance in patients with malignant pleural mesothelioma.We also investigated two putative diagnostic/prognostic markers of malignant pleural mesothelioma namely Soluble Mesothelin Related Peptides (SMRP) and osteopontin. SMRP are derived from membrane bound mesothelin (a molecule normally expressed by mesothelial cells) by either proteolitic cleavage or secretion of a mutated form. We show that SMRP is a good diagnostic marker for malignant pleural mesothelioma and offers a better diagnostic accuracy than osteopontin. However, both markers are independent prognostic factors in malignant pleural mesothelioma.In conclusion we show that endocan play an important role in tumoral development by amplifying growth factor effects on tumoral cells and by inhibiting immune cell recruitment into the tumor. Serum endocan levels reflect the tumoral angiogenic stimulation and represent a prognostic factor in non small cell lung cancers. Endocan is also expressed by the endothelium in sepsis and has also a prognostic significance. We also evaluated two new markers in patients with malignant pleural mesothelioma and showed that both could have a diagnostic and prognostic utility.Le développement tumoral implique non seulement la cellule cancéreuse mais aussi son environnement qui apporte les facteurs nutritifs nécessaires à la cellule tumorale, fourni le support sur lequel les cellules tumorales se développent mais aussi les facteurs de croissance dont la tumeur dépend.Endocan, une molécule de cet environnement tumoral, est un protéoglycane secrété spécifiquement par la cellule endothéliale et dont l'expression, à l'état normal, est limitée principalement à l'endothélium pulmonaire et rénal. Endocan, par son glycane, interagit avec les facteurs de croissance et stimule la prolifération des cellules épithéliales. Endocan pourrait également intervenir dans la régulation de la migration leucocytaire trans-endothéliale en modulant l'interaction des intégrines (comme par ex le LFA-1) avec leur ligand. Endocan est surexprimé dans un nombre important de localisations tumorales comme le poumon, le sein, le colon et le rein. Dans le cancer du poumon et du sein, endocan fait partie d'un cluster de gènes de mauvais pronostic, sa surexpression étant liée à une mortalité plus précoce ou à des métastases plus fréquentes. Nous avons montré qu'endocan a un effet de promotion de la croissance tumorale et que cette fonction est dépendante de l'interaction de son glycane avec les facteurs de croissance du microenvironnement tumoral.Dans les modèles expérimentaux de cancer chez la souris SCID, nous avons démontré que le blocage d'endocan par l'intermédiaire d'anticorps monoclonaux freine la croissance tumorale, est que ce freinage est associé à un recrutement de leucocytes intra-tumoraux. Dans les cancers broncho-pulmonaires humains nous avons démontré qu'endocan est surexprimé de manière importante et que cette expression est corrélée, avec celle du VEGF. Les taux circulants d'endocan sont également corrélés avec le pronostic des malades, avec une survie plus courte pour les patients ayant des taux élevés d'endocan. De manière intéressante les taux d'endocan étaient corrélés avec la présence de métastases à distance et au niveau ganglionnaire mais pas avec la taille tumorale. Endocan pourrait représenter un marqueur pronostique les cancers bronchopulmonaires et être le reflet de la stimulation angiogénique tumorale. Nous nous sommes également intéressés à une autre pathologie néoplasique pulmonaire qu'est le mésothéliome pleural et les métastases pleurales des carcinomes. Nous avons pu montrer que les taux sériques d'endocan sont aussi liés au pronostic dans les adénocarcinomes métastasés à la plèvre mais pas dans le mésothéliome pleural. Nous avons pu montrer que les peptides solubles dérivés de la mesotheline (SMRP) sont un bon marqueur diagnostique du mésothéliome pleural épithélioïde. L'ostéopontine (une molécule pléiotrope impliquée, entre autres, dans l'adhésion et la survie cellulaire), et qui a été proposée comme marqueur pour le diagnostic précoce du mésothéliome pleural malin n'a que peu d'utilité dans le diagnostic des pleurésies chez les patients exposés à l'amiante. Par contre les deux marqueurs sont des facteurs indépendants de pronostic pour les mésothéliomes pleuraux

Rôle d'endocan dans la croissance tumorale et effets des anticorps anti-endocan sur le développement tumoral

Endocan est l'une de ces molécules de l'environnement tumoral. Endocan est un protéoglycane secrété spécifiquement par la cellule endothéliale et dont l'expression, a l'état normal, est limité principalement à l'endothélium pulmonaire et rénal. In vitro, endocan, par l'intermédiaire de son glycane, est capable d'interagir avec les facteurs de croissance angiogéniques comme le HGF/SF et le FGF2 et de stimuler la prolifération des cellules épithéliales. Il est également capable d'interagir par l'intermédiaire de sa partie protéique, avec les intégrines (comme par ex le LFA-1) et de moduler l'interaction avec leur ligand. Endocan pourrait donc être impliqué dans la régulation de la migration leucocytaire du sang vers les tissus, en bloquant l'interaction ICAM-1/LFA-1 qui est une étape essentielle dans l'adhésion de ces cellules à l'endothélium et un cofacteur important dans les fonctions cytotoxiques des leucocytes. Il a été également démontré qu'endocan est exprimé dans un modèle d'angiogénèse in vitro. Endocan est surexprimé dans un nombre important de localisations tumorales comme le poumon, le sein, le colon et le rein. Dans le cancer du poumon et du sein, endocan fait partie d'un cluster de gènes de mauvais pronostic, dont la surexpression est liée à une mortalité plus précoce ou à des métastases plus fréquentes. Dans les modèles de cancer chez la souris, nous avons montré qu'endocan a un effet de promotion de la croissance tumorale et que cette fonction est dépendante de son glycane. Cet effet sur la cellule endothéliale est indirect puisque la surexpression d'endocan ne modifie par la prolifération des cellules tumorales ou la prolifération des cellules endothéliales. L'effet d'endocan est donc lié à l'interaction de son glycane avec les facteurs de croissance du microenvironnement tumoral, endocan ayant un rôle co-mitogène sur les cellules tumorales. Néanmoins l'effet d'endocan sur la croissance tumorale dépend aussi de sa partie protéique puisque la mutation (notamment de la séquence riche en phénylalanine situe dans l'exon 2) de la protéine aboli l'effet de promotion de croissance tumorale. Nous avons également démontré que le gène d'endocan subit un épissage alternatif avec la sécrétion de deux iso-formes différentes dont l'une n'inclut pas la séquence codée par l'exon 2 (endocan 2). Nous avons démontré que cette isoforme n'a pas d'effet de promotion de la croissance tumorale. Dans les modèles expérimentaux de cancer chez la souris SCID, nous avons démontré que le blocage d'endocan par l'intermédiaire d'anticorps monoclonaux freine la croissance tumorale, est que ce freinage est associe à un recrutement de leucocytes intra-tumoraux. In vitro, la production d'endocan par les cellules endothéliales humaines (au niveau ARNm et protéique) est stimulé par le VEGF et est inhibé par les anticorps anti-VEGF. En conclusion, nous avons montré qu'endocan est un acteur important dans le processus de croissance tumorale avec d'une part un rôle d'amplification de l'effet des facteurs de croissance et d'autre part un rôle de blocage du recrutement cellulaire intra-tumoral. Les taux sériques d'endocan reflètent la stimulation angiogénique tumorale et représentent un facteur de pronostic dans les cancers broncho-pulmonaires. Endocan est également exprimé dans le sepsis, pathologie où la stimulation endothéliale joue un rôle important dans la physiopathologie. Nous avons également étudié l'utile de deux nouveaux marqueurs, la SMRP et l'osteopontine dans le diagnostic et l'évaluation du pronostic des patients ayant un mésothéliome pleural malin et montré que c'est deux marqueurs, notamment la SMRP peuvent être utiles dans le diagnostic du mésothéliome pleural malin et ont également une valeur pronostique.LILLE2-BU Santé-Recherche (593502101) / SudocSudocFranceF

Management of extensive disease small cell lung cancer: Guidelines of clinical practice made by the European Lung Cancer Working Party

The present updated guidelines on the management of extensive disease small cell lung cancer (SCLC) formulated by the ELCWP are designed to answer the following questions :1) What is the definition of extensive disease? 2) What are the active drugs? 3) What is the best induction regimen? 4) Is there a role for maintenance chemotherapy? 5) Is there a role for dose-intensive chemotherapy (without administration of hematopoietic growth factors)-? 6) Is there a role for the use of haematopoietic growth factors and stem cells support? 7) Is there a role for alternating or sequential chemotherapy? 8) Is there a role for biological treatments? 9) Is there a place for second-line chemotherapy? 10) Is there a role for preventive brain irradiation (PCI)?Les présentes recommandations de pratique clinique mises à jour sur le traitement des cancers bronchiques à petites cellules de stade étendu réalisées par l’ELCWP visent à répondre aux questions suivantes :1) Quelle définition pour une maladie étendue ?2) Quels sont les médicaments actifs ?3) Quel est le meilleur traitement d’induction ?4) Y a-t-il un rôle pour la chimiothérapie d’entretien ?5) Y a-t-il une place pour la chimiothérapie intensive (sans administration de facteurs de croissance hématopoïétiques) ?6) Quel rôle pour les facteurs de croissance hématopoïétiques et le support par des cellules souches ?7) Y a-t-il une place pour la chimiothérapie alternée ou séquentielle ?8) Quel rôle pour les traitements biologiques ?9) Y a-t-il une place pour la chimiothérapie de deuxième ligne ?10) Y a-t-il une place pour l’irradiation cérébrale préventive (ICP) ?http://www.amub.be/revue-medicale-bruxelles/download/1003info:eu-repo/semantics/publishe