Study of lipid profile and parieto-temporal lipid peroxidation in AlCl3 mediated neurotoxicity. modulatory effect of fenugreek seeds

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Peroxidation of lipid (LPO) membrane and cholesterol metabolism have been involved in the physiopathology of many diseases of aging brain. Therefore, this prospective animal study was carried firstly to find out the correlation between LPO in posterior brain and plasmatic cholesterol along with lipoprotein levels after chronic intoxication by aluminium chloride (AlCl₃). Chronic aluminum-induced neurotoxicity has been in fact related to enhanced brain lipid peroxidation together with hypercholesterolemia and hypertriglyceridemia, despite its controversial etiological role in neurodegenerative diseases. Secondly an evaluation of the effectiveness of fenugreek seeds in alleviating the engendered toxicity through these biochemical parameters was made.</p> <p>Results</p> <p>Oral administration of AlCl₃to rats during 5 months (500 mg/kg bw i.g for one month then 1600 ppm via the drinking water) enhanced the levels of LPO in posterior brain, liver and plasma together with lactate dehydrogenase (LDH) activities, total cholesterol (TC), triglycerides (TG) and LDL-C (Low Density Lipoproteins) levels. All these parameters were decreased following fenugreek seeds supplementation either as fenugreek seed powder (FSP) or fenugreek seed extract (FSE). A notable significant correlation was observed between LPO_brainand LDL-C on one hand and LDH_liveron the other hand. This latter was found to correlate positively with TC, TG and LDL-C. Furthermore, high significant correlations were observed between LDH_brainand TC, TG, LDL-C, LPO_brainas well as LDH_liver.</p> <p>Conclusion</p> <p>Aluminium-induced LPO in brain could arise from alteration of lipid metabolism particularly altered lipoprotein metabolism rather than a direct effect of cholesterol oxidation. Fenugreek seeds could play an anti-peroxidative role in brain which may be attributed in part to its modulatory effect on plasmatic lipid metabolism.</p

Etude sur le diabète aigu cétosique inaugural dans un hôpital du Centre-Est Tunisien

La cétose est une complication aiguë du diabète qui consiste en une accumulation de corps cétoniques sanguins. Malgré la haute prévalence du diabète cétosique décrite, il existe très peu d’informations concernant l’épidémiologie de cette complication inaugurale du diabète en Tunisie. L’objectif était de déterminer les caractéristiques épidémiologiques et clinico-biologiques des cétoses inaugurales dans un hôpital du Centre-Est tunisien. Il s’agit d’une étude rétrospective, transversale et exhaustive, à propos de patients admis pour une cétose inaugurale sur une période allant de janvier 2010 à août 2016. La population d’étude a été divisée en 2 groupes selon la présence ou pas d’une auto-immunité anti pancréatique: groupe DAI (diabète de type 1 auto-immun) regroupe tous les patients avec une auto-immunité, et le groupe DNAI (diabète cétosique non auto-immuns) sans auto-immunité. Il s’agit de 391 patients, de sex ratio 266 hommes/125 femmes, d’âge moyen de 34±14,33 ans. La prédominance masculine était nette: 68% dans la population générale. L’âge de la cétose était significativement plus précoce dans le groupe DAI. Un facteur précipitant la cétose était retrouvé chez 77,7% de la population globale d’étude, significativement plus fréquent dans le groupe DAI que dans le groupe DNAI. Le facteur le plus retrouvé était les infections virales. Les Anticorps anti thyroïdiens étaient significativement importants dans le groupe DAI. La cétose est un facteur de décompensation inaugurale fréquent du diabète en Tunisie. La population la plus importante a été décrite chez l’adulte jeune masculin, avec l’absence d’une auto-immunité, et un profil clinique du diabète de type 2

Hemocyte defense mechanisms in Mytilus edulis : interactions with Vibrio Splendidus sp. and MXR phenotype modulation by environmental contaminants

Mytilus edulis est un mollusque bivalve de grand intérêt économique et écotoxicologique. Cette espèce sentinelle est connue pour sa résistance aux contaminants chimiques et biologiques. Néanmoins, depuis quelques années la moule bleue est touchée par des mortalités dans les élevages des Pertuis Charentais ayant pour dénominateur commun la présence de bactéries virulentes de type Vibrio. Le premier axe de cette thèse décrit les interactions des isolats de V. Splendidus avec la moule bleue au niveau cellulaire et physiologique. Les infections expérimentales ont permis la sélection de deux isolats bactériens affiliés à V. splendidus/V. hemicentroti : une souche virulente codée 10/068 1T1 et une souche inoffensive codée 12/056 M24T1. Ces deux bactéries ont été marquées à la GFP et validées en tant que modèles authentiques d’exposition à travers leurs caractéristiques de croissance et de virulence. Par ailleurs, V. hemicentroti 10/068 1T1 est capable d’altérer différentes fonctions hémocytaires incluant la motilité, l’adhésion, l’internalisation, la production de ROS, la maturation du phagosome et la viabilité contrairement à la bactérie non virulente. Les produits extracellulaires bactériens semblent être toxiques et inhibent certaines réponses cellulaires (internalisation et production de ROS). Enfin, nous avons reproduis avec succès l’infection des animaux par le pathogène via un modèle expérimental de cohabitation. Le suivi de l’infection montre que V. hemicentroti 10/068 1T1 a pour cible principale les branchies. Le deuxième axe explore le fonctionnement du système MXR (MultiXenobiotic Resistance) chez la moule bleue. La séquence codante complète d’un nouveau transporteur ABCG2 a été établie et la protéine résultante a été identifiée. La caractérisation moléculaire montre la présence du transcrit dans les hémocytes ainsi que dans les branchies et son homologie avec les autres protéines appartenant à diverses espèces. L’utilisation des sondes fluorescentes bodipy prazosin et pheophorbide A, combinées avec des bloqueurs spécifiques, démontre l’activité d’efflux de ce transporteur et son hétérogénéité dans les tissus et cellules. Par ailleurs, il est également démontré que l’expression des trois transporteurs ABC (abcb, abcc, abcg2) identifiés chez la moule bleue est modulée par les contaminants chimiques. Les animaux exposés au BaP au laboratoire ou prélevés sur un terrain contaminé montrent une surexpression des transcrits abc dans les branchies et une sous expression dans les hémocytes. La saisonnalité, sur le terrain, a également un effet sur les niveaux des transcrits et interfère avec les réponses liées aux contaminants. Seul le transporteur abcb exprimé dans les branchies n’est pas affecté par des variations saisonnières et montre une surexpression dans le site contaminé tout au long de l’année. En conclusion, nos résultats démontrent la vulnérabilité de la moule bleue face un pathogène. L'impact immunotoxique des xénobiotiques et le rôle que peuvent jouer les transporteurs ABC dans le fonctionnement du système immunitaire des moules reste à explorer.Mytilus edulis is a bivalve mollusc representing an economic and ecotoxicological interest. This sentinel species is known for its resistance to chemical and biological contaminants. However, for few years, abnormal mortality events have been reported for farmed blue mussels in France where different Vibrio strains were isolated. The first section of this thesis describes cellular and physiological interactions of V. Splendidus isolates with the blue mussel. Experimental infections allowed the selection of two isolates affiliated to V. splendidus/V. hemicentroti type strains: a virulent 10/068 1T1 and an innocuous 12/056 M24T1. These two strains were GFP-tagged and validated for their growth characteristics and virulence as genuine models for exposure. V. splendidus 10/068 1T1 is capable to alter different functions of hemocytes including motility, adhesion, internalization, ROS production, phagosome maturation and viability, unlike the avirulent strain. Furthermore, bacterial extracellular products appeared toxic and inhibit cellular responses (internalization and ROS production). Finally, we successfully reproduced experimental infection by water tank cohabitation assays with septic animals. Infection monitoring shows the targeting of gills by bacteria. The second section explores the MXR (MultiXenobiotic Resistance) system functioning in the blue mussel. For the first time, a complete ABCG2 amino acid sequence was established. Molecular characterization shows the presence of the abcg2 transcript in hemocytes and gills and its homology with other proteins from various species. The combination of the fluorescent probes bodipy prazosin and pheophorbide A with specific blockers demonstrate the transporter efflux activity and its heterogeneity in tissues and cells. Moreover, the expression of three ABC transporters (abcb, abcc, abcg2) identified in the blue mussel has been shown to be modulated by chemical contaminants. Mussels exposed to BaP in the laboratory or collected from contaminated mussel beds in the field show upregulated abc transcripts in gills whereas these mRNA undergone a downregulation in hemocytes. Season had also an effect on mRNA levels and interacted with site effects. Only the abcb gene displayed a more abundant mRNA level in gills dissected from animals collected in the more polluted area all over the diachronic study. In conclusion, our results demonstrate the vulnerability of the blue mussel towards a pathogen. The immunotoxic impact of environmental xenobiotics and the precise role of ABC efflux pumps in the immune system of the mussel has yet to be explored

Mécanismes de défense hémocytaires chez Mytilus edulis‎ : interactions avec Vibrio Splendidus sp. et modulation du phénotype MXR par les contaminants environnementaux

Mytilus edulis is a bivalve mollusc representing an economic and ecotoxicological interest. This sentinel species is known for its resistance to chemical and biological contaminants. However, for few years, abnormal mortality events have been reported for farmed blue mussels in France where different Vibrio strains were isolated. The first section of this thesis describes cellular and physiological interactions of V. Splendidus isolates with the blue mussel. Experimental infections allowed the selection of two isolates affiliated to V. splendidus/V. hemicentroti type strains: a virulent 10/068 1T1 and an innocuous 12/056 M24T1. These two strains were GFP-tagged and validated for their growth characteristics and virulence as genuine models for exposure. V. splendidus 10/068 1T1 is capable to alter different functions of hemocytes including motility, adhesion, internalization, ROS production, phagosome maturation and viability, unlike the avirulent strain. Furthermore, bacterial extracellular products appeared toxic and inhibit cellular responses (internalization and ROS production). Finally, we successfully reproduced experimental infection by water tank cohabitation assays with septic animals. Infection monitoring shows the targeting of gills by bacteria. The second section explores the MXR (MultiXenobiotic Resistance) system functioning in the blue mussel. For the first time, a complete ABCG2 amino acid sequence was established. Molecular characterization shows the presence of the abcg2 transcript in hemocytes and gills and its homology with other proteins from various species. The combination of the fluorescent probes bodipy prazosin and pheophorbide A with specific blockers demonstrate the transporter efflux activity and its heterogeneity in tissues and cells. Moreover, the expression of three ABC transporters (abcb, abcc, abcg2) identified in the blue mussel has been shown to be modulated by chemical contaminants. Mussels exposed to BaP in the laboratory or collected from contaminated mussel beds in the field show upregulated abc transcripts in gills whereas these mRNA undergone a downregulation in hemocytes. Season had also an effect on mRNA levels and interacted with site effects. Only the abcb gene displayed a more abundant mRNA level in gills dissected from animals collected in the more polluted area all over the diachronic study. In conclusion, our results demonstrate the vulnerability of the blue mussel towards a pathogen. The immunotoxic impact of environmental xenobiotics and the precise role of ABC efflux pumps in the immune system of the mussel has yet to be explored.Mytilus edulis est un mollusque bivalve de grand intérêt économique et écotoxicologique. Cette espèce sentinelle est connue pour sa résistance aux contaminants chimiques et biologiques. Néanmoins, depuis quelques années la moule bleue est touchée par des mortalités dans les élevages des Pertuis Charentais ayant pour dénominateur commun la présence de bactéries virulentes de type Vibrio. Le premier axe de cette thèse décrit les interactions des isolats de V. Splendidus avec la moule bleue au niveau cellulaire et physiologique. Les infections expérimentales ont permis la sélection de deux isolats bactériens affiliés à V. splendidus/V. hemicentroti : une souche virulente codée 10/068 1T1 et une souche inoffensive codée 12/056 M24T1. Ces deux bactéries ont été marquées à la GFP et validées en tant que modèles authentiques d’exposition à travers leurs caractéristiques de croissance et de virulence. Par ailleurs, V. hemicentroti 10/068 1T1 est capable d’altérer différentes fonctions hémocytaires incluant la motilité, l’adhésion, l’internalisation, la production de ROS, la maturation du phagosome et la viabilité contrairement à la bactérie non virulente. Les produits extracellulaires bactériens semblent être toxiques et inhibent certaines réponses cellulaires (internalisation et production de ROS). Enfin, nous avons reproduis avec succès l’infection des animaux par le pathogène via un modèle expérimental de cohabitation. Le suivi de l’infection montre que V. hemicentroti 10/068 1T1 a pour cible principale les branchies. Le deuxième axe explore le fonctionnement du système MXR (MultiXenobiotic Resistance) chez la moule bleue. La séquence codante complète d’un nouveau transporteur ABCG2 a été établie et la protéine résultante a été identifiée. La caractérisation moléculaire montre la présence du transcrit dans les hémocytes ainsi que dans les branchies et son homologie avec les autres protéines appartenant à diverses espèces. L’utilisation des sondes fluorescentes bodipy prazosin et pheophorbide A, combinées avec des bloqueurs spécifiques, démontre l’activité d’efflux de ce transporteur et son hétérogénéité dans les tissus et cellules. Par ailleurs, il est également démontré que l’expression des trois transporteurs ABC (abcb, abcc, abcg2) identifiés chez la moule bleue est modulée par les contaminants chimiques. Les animaux exposés au BaP au laboratoire ou prélevés sur un terrain contaminé montrent une surexpression des transcrits abc dans les branchies et une sous expression dans les hémocytes. La saisonnalité, sur le terrain, a également un effet sur les niveaux des transcrits et interfère avec les réponses liées aux contaminants. Seul le transporteur abcb exprimé dans les branchies n’est pas affecté par des variations saisonnières et montre une surexpression dans le site contaminé tout au long de l’année. En conclusion, nos résultats démontrent la vulnérabilité de la moule bleue face un pathogène. L'impact immunotoxique des xénobiotiques et le rôle que peuvent jouer les transporteurs ABC dans le fonctionnement du système immunitaire des moules reste à explorer

Vibrio splendidus infection induces dysbiosis in the blue mussel and favors pathobiontic bacteria

International audienceStudies on marine epizootics are often based on the identification of a single pathogen. However, the one-pathogen-one-disease paradigm is not always sufficient to explain the disease, especially since the evidences on the role of microbiota in health and disease. Vibrio splendidus strains have been associated with Mytilus edulis mortality in France. To assess the role of mussel microbiota in the infectious process, we performed experiments combining the investigation of total microflora dynamics during a realistic experimental infection by V. splendidus and the monitoring of mussel survival and the dominance of potential opportunistic bacteria after antibiotic treatment. We found that Vibrio exposure affected the structure and predictive function of the mussel microbiota. Dysbiosis was accompanied with the appearance of a pathobiont dominated by Bacteroidetes and Fusobacteria phyla. The injection of a homogenate of infected organisms increased Mytilus mortality compared to the direct injection of Vibrio while the antibiotic pretreatment reduced the effect of pathogen exposure and mortalities. The decrease of opportunistic bacteria abundance in antibiotic pretreated animals confirmed their implication in pathogenesis. Our findings suggest that mussel disease results from a collaboration between external pathogens and pathobiont bacteria. Therefore, an insight into microbiota functions is needed to a better understanding of pathosystems

Infection dynamics of a V. splendidus strain pathogenic to Mytilus edulis : In vivo and in vitro interactions with hemocytes

The pathogenic strain V. splendidus 10/068 1T1 has previously been reported for its virulence to the blue mussel and for its capacity to alter immune responses. In this study, we expanded the knowledge on hemocyte-pathogen interactions by using in vitro and in vivo assays. V. splendidus 10/068 1T1 severely inhibited cell adhesion and acidic vacuole formation unlike the innocuous phylogenetically related V. splendidus 12/056 M24T1 which had no effect on these cell functions. Furthermore, the virulent bacteria decreased hemocyte viability (59% of viability after 24 h). Infection dynamics were explored by using a model based on water tank cohabitation with septic mussels infected by GFP-tagged V. splendidus 10/068 1T1. Experimental infections were successfully produced (16.6% and 45% mortalities in 3 days and 6 days). The amount of GFP Vibrio in seawater decreased during the experiment suggesting its horizontal transfer from diseased animals to healthy ones. At the same time periods, bacteria were detected in hemocytes and in various organs and caused necrosis especially in gills. Total hemocyte count and viability were affected. Taken together, our results indicate that the pathogen V. splendidus 10/068 1T1 colonizes its host both by bypassing external defense barriers and impairing hemocyte defense activities

Infection dynamics of a V. splendidus strain pathogenic to Mytilus edulis: in vivo and in vitro interactions with hemocytes

International audienc

Multixenobiotic resistance in Mytilus edulis : Molecular and functional characterization of an ABCG2- type transporter in hemocytes and gills

International audienceAmong the cellular protection arsenal, ABC transporters play an important role in xenobiotic efflux in marine organisms. Two pumps belonging to B and C subfamily has been identified in Mytilus edulis. In this study, we investigated the presence of the third major subtype ABCG2/BCRP protein in mussel tissues. Transcript was expressed in hemocytes and with higher level in gills. Molecular characterization revealed that mussel ABCG2 transporter shares the sequence and organizational structure with mammalian and molluscan orthologs. Overall identity of the predicted amino acid sequence with corresponding homologs from other organisms was between 49% and 98%. Moreover, protein efflux activity was demonstrated using a combination of fluorescent allocrites and specific inhibitors. The accumulation of bodipy prazosin and pheophorbide A was heterogeneous in gills and hemocytes. Most of the used blockers enhanced probe accumulation at different levels, most significantly for bodipy prazosin. Moreover, Mrp classical blocker MK571 showed a polyspecificity.In conclusion, our data demonstrate that several ABC transporters contribute to MXR phenotype in the blue mussel including ABCG2 that forms an active pump in hemocytes and gills. Efforts are needed to distinguish between the different members and to explore their single function and specificity towards allocrites and chemosensitizers