Efeito da proteína anticongelante tipo I (AFP I) na criopreservação de embriões e blastómeros de teleósteos

Dissertação de mest., Biologia Marinha, Faculdade de Ciências do Mar e do Ambiente, Universidade do Algarve, 2007Actualmente, a criopreservação de embriões de peixes é um objectivo de grande relevância para as empresas de aquacultura, mas até à data não existem resultados positivos, apesar dos esforços desenvolvidos por vários grupos situados em diferentes países. Uma das principais razões para este acontecimento é a elevada sensibilidade dos embriões à refrigeração, realçando a necessidade de testar diferentes métodos e agentes crioprotectores (CPAs) alternativos, de forma a melhorar a possibilidade de alcançar este fim. Neste trabalho, usou-se a proteína anticongelante tipo I (AFP I) como crioprotector natural. Esta proteína é naturalmente expressa nas espécies de peixes do Árctico, inibindo o crescimento dos cristais de gelo e a recristalização durante o descongelamento. Embriões de Sparus aurata (dourada) foram microinjectados com AFP I em estádios de desenvolvimento diferentes, 2 células e blástula, na interface blastoderme-vitelo e saco vitelino, respectivamente. Embriões controlo, apenas manipulados (picados pela microagulha, mas sem microinjecção) e microinjectados foram submetidos a refrigeração a duas temperaturas diferentes, 0 ºC (1h) e -10 ºC (15min) a partir do estádio de 17 somitos. Estes embriões foram submetidos a -10 ºC em 3M DMSO de forma a evitar a formação de cristais de gelo na solução extracelular. A sobrevivência após refrigeração foi estabelecida como sendo a percentagem de embriões eclodidos. Para estudar a distribuição da AFP I nos embriões microinjectados realizou-se um estudo por microscopia confocal. Os resultados demonstraram que AFP I pode incrementar significativamente a resistência ao frio a 0 ºC, particularmente nos embriões microinjectados em 2 células, apresentando taxas de eclosão próximas de 100%. Este facto encontra-se de acordo com as imagens de microscopia confocal, as quais confirmam a presença da proteína nas células embrionárias e suportam a hipótese de que esta proteína protege as estruturas celulares através da estabilização das membranas. A criopreservação de blastómeros é uma alternativa fiável à criopreservação de embriões. Neste estudo, blastómeros de peixe zebra em 50% epibolia foram submetidos a diferentes tratamentos: (1) PBS 30min TA; (2) 2M DMSO 30min TA e (3) 10mg/ml AFP I em 2M DMSO. A toxicidade dos CPAs e viabilidade celular foi analisada após a criopreservação. A presença de AFP I na solução crioprotectora incrementou significativamente a sobrevivência celular após a vitrificação. A electroporação das células na presença dos CPAs, incluindo AFP I, não conduziu a nenhum melhoramento na sobrevivência celular após vitrificação, tendo um impacto negativo em alguns dos casos estudados. Este estudo demonstra que o uso da proteína AFP v I é vantajoso na criopreservação de blastómeros de peixes, incrementando a resistência ao frio para determinadas temperaturas

Las veedurías mecanismo para combatir la corrupción en Colombia

Artículo de investigaciónEn este trabajo se analizó la protección y blindaje jurídico que cuenta la contratación estatal en Colombia, en varias etapas; desde la selección del contratista, la adjudicacion del contrato hasta la liquidación y cumplimiento de las obligaciones, por medio de las veedurias ciudadanas. Aún cuando existen controles rigurosos en la contratación con el sector público, esta ha sido demarcada notablemente por la corrupción, y es aquí donde se analiza la importancia de la intervención de un organismo de control autónomo e imparcial, tal como las veedurías ciudadanas. Es por esto, que este artículo se refiere específicamente al alcance, estudio y normatividad que cuentan las veedurías en la contratación estatal para combatir la corrupción en Colombia.Proyecto de gradoINTRODUCCIÓN 1. QUE ES UNA VEEDURÍA? 2. LA CONTRATACIÓN ESTATAL EN COLOMBIA 3.INTERVENCIÓN DE LAS VEEDURÍAS EN LAS ETAPAS DE LA CONTRATACIÓN ESTATAL 4. LA RELACIÓN DE LAS VEEDURÍAS CON LA CONTRATACIÓN ESTATAL CONCLUSIONES REFERENCIASPregradoAbogad

Liquid Polymorphism and Density Anomaly in a Lattice Gas Model

We present a simple model for an associating liquid in which polymorphism and density anomaly are connected. Our model combines a two dimensional lattice gas with particles interacting through a soft core potential and orientational degrees of freedom represented through thermal \char`\"{}ice variables\char`\"{} . The competition between the directional attractive forces and the soft core potential leads to a phase diagram in which two liquid phases and a density anomaly are present. The coexistence line between the low density liquid and the high density liquid has a positive slope contradicting the surmise that the presence of a density anomaly implies that the high density liquid is more entropic than the low density liquid

Diffusion anomaly and dynamic transitions in the Bell-Lavis water model

In this paper we investigate the dynamic properties of the minimal Bell-Lavis (BL) water model and their relation to the thermodynamic anomalies. The Bell-Lavis model is defined on a triangular lattice in which water molecules are represented by particles with three symmetric bonding arms interacting through van der Waals and hydrogen bonds. We have studied the model diffusivity in different regions of the phase diagram through Monte Carlo simulations. Our results show that the model displays a region of anomalous diffusion which lies inside the region of anomalous density, englobed by the line of temperatures of maximum density (TMD). Further, we have found that the diffusivity undergoes a dynamic transition which may be classified as fragile-to-strong transition at the critical line only at low pressures. At higher densities, no dynamic transition is seen on crossing the critical line. Thus evidence from this study is that relation of dynamic transitions to criticality may be discarded

The pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, in Portugal: possible introductions and spread routes of a serious biological invasion revealed by molecular methods

The pine wood nematode (PWN), Bursaphelenchus xylophilus, the causal agent of pine wilt disease (PWD), is a major world-wide pathogen and pest of pine, with impacts on forest health, natural ecosystem stability and international trade. In Portugal, PWN was first diagnosed in 1999, the first occurrence also for Europe. The disease was recently detected on the island ofMadeira and in northern Spain. In an attempt to search for more reliable and robust molecular markers that enable the study of intraspecific variability of B. xylophilus from different geographic locations, the intergenic spacer (IGS) region of the 5S rRNA gene and inter-simple sequence repeats (ISSR) analysis were used to determine the genetic relationships among 43 B. xylophilus isolates from Portugal, China, Japan, South Korea and USA. IGS sequence analysis showed that this region can only be used to establish interspecific relationships, since no differences were detected among Portuguese isolates from different geographic locations. Fingerprints obtained with ISSR show high genetic variability among Portuguese isolates, except for the ones obtained prior to 2008. The ISSR dendrogram suggests the spread of the disease inside continental Portugal and to Madeira. Until 2008, B. xylophilus populations found in continental Portugal showed low genetic diversity, pointing to a single introduction, probably from Asia, whereas recent populations from continental Portugal (2009-2010) and Madeira show high genetic diversity, suggesting multiple introductions from different origins

Dynamic Transitions in a Two Dimensional Associating Lattice Gas Model

Using Monte Carlo simulations we investigate some new aspects of the phase diagram and the behavior of the diffusion coefficient in an associating lattice gas (ALG) model on different regions of the phase diagram. The ALG model combines a two dimensional lattice gas where particles interact through a soft core potential and orientational degrees of freedom. The competition between soft core potential and directional attractive forces results in a high density liquid phase, a low density liquid phase, and a gas phase. Besides anomalies in the behavior of the density with the temperature at constant pressure and of the diffusion coefficient with density at constant temperature are also found. The two liquid phases are separated by a coexistence line that ends in a bicritical point. The low density liquid phase is separated from the gas phase by a coexistence line that ends in tricritical point. The bicritical and tricritical points are linked by a critical $\lambda$-line. The high density liquid phase and the fluid phases are separated by a second $\tau$ critical line. We then investigate how the diffusion coefficient behaves on different regions of the chemical potential-temperature phase diagram. We find that diffusivity undergoes two types of dynamic transitions: a fragile-to-strong trans ition when the critical $\lambda$-line is crossed by decreasing the temperature at a constant chemical potential; and a strong-to-strong transition when the $\tau$-critical line is crossed by decreasing the temperature at a constant chemical potential.Comment: 22 page

Liquid polymorphism and density anomaly in a three-dimensional associating lattice gas

We investigate the phase diagram of a three-dimensional associating gas $(ALG)$ model. This model combines orientational ice-like interactions and ``van der Waals'' that might be repulsive, representing, in this case, a penalty for distortion of hydrogen bonds. These interactions can be interpreted as two competing distances making the connection between this model and continuous isotropic soft-core potentials. We present Monte Carlo studies of the $ALG$ model showing the presence of two liquid phase, two critical points and A density anomaly

Vínculo materno infantil y la participación de la madre durante la realización de la punción venosa: la ótica del psicoanálisis

Professionals discuss accompanying mothers' participation during painful procedures as a possibility of care to mother and child, but there is no consensus on this subject. To contribute to this topic, this study addresses the child's needs during venipuncture in a hospital environment and the mother's participation in this procedure, based on authors from psychoanalysis and mother-child bonding.A participação da mãe acompanhante junto à criança durante a realização de procedimentos dolorosos é discutida pelos profissionais como uma possibilidade de cuidado ao binômio, porém, não há consenso quanto a esse tema. Para contribuir com essa discussão, o texto aborda as necessidades da criança durante a realização da punção venosa no ambiente hospitalar e a participação da mãe no procedimento, tendo como base autores da psicanálise e o vínculo na relação mãe e filho.Universidade Federal de São Paulo, Sch Med, Anhembi Morumbi Univ, São Paulo, BrazilSao Camilo Univ Ctr, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Sch Med, Anhembi Morumbi Univ, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Vínculo materno-infantil e participação da mãe durante a realização da punção venosa: a ótica da psicanálise

A participação da mãe acompanhante junto à criança durante a realização de procedimentos dolorosos é discutida pelos profissionais como uma possibilidade de cuidado ao binômio, porém, não há consenso quanto a esse tema. Para contribuir com essa discussão, o texto aborda as necessidades da criança durante a realização da punção venosa no ambiente hospitalar e a participação da mãe no procedimento, tendo como base autores da psicanálise e o vínculo na relação mãe e filho.La participación de la madre acompañante junto al niño durante la realización de procedimientos dolorosos es discutida por profesionales como una posibilidad de cuidado al binomio, pero no hay un consenso sobre este tema. Para contribuir con esta discusión, el texto trata de las necesidades del niño durante la realización de la punción venosa en un ambiente de hospital y la participación de la madre en el procedimiento, tomando como base autores del psicoanálisis y el vínculo madre y hijo.Professionals discuss accompanying mothers' participation during painful procedures as a possibility of care to mother and child, but there is no consensus on this subject. To contribute to this topic, this study addresses the child's needs during venipuncture in a hospital environment and the mother's participation in this procedure, based on authors from psychoanalysis and mother-child bonding