DETERMINING THE ROLE OF CDR20291_0493 SPORULATION INITIATION IN CLOSTRIDIUM DIFFICILE

Our lab focuses on the gene regulatory networks of Clostridium difficilesporulation and toxins virulence factors. Spores are the major reason of the disease transmission; this is why it is important to understand how this spores are formed so drugs can be targeted to formation. Our objective is to identify the gene regulatory networks that control sporulation. The candidate target gene we are studying is CDR20291_0493 in C. difficileR20291 strain. We want to understand the role of this gene in sporulation initiation of C.difficile. We first created a mutant of CDR20291_0493 mutant R20291Dto look for sporulation phenotype and we found that the mutant was producing less spores compared to the parent R20291 strain. However, to confirm this phenotype was specific to CDR20291_0493, a complementation was performed, which means giving back CDR20291_0493 to mutant. After the complementation more sporulation was expected however, sporulation did not come back. So now, our question was why sporulation did not come back? It was predicted that CDR20291_0493 and the gene downstream of it CDR20291_0494 are part of an operon, and sporulation is associated to CDR20291_0494. So now we are trying to compliment both CDR20291_0493 and CDR20291_0494 by cloning them in a same vector. Our expectation is that complementation of CDR20291_0493 mutant with both CDR20291_0493 and CDR20291_0494 will rescue the sporulation phenotype.This would confirm our two predictions about them being in an operon and both CDR20291_0493and CDR20291_0494 having a role in sporulation initiation inC.difficile

Suco de uva e farinha de sorgo na elaboração de fermento natural para uso em pão sem glúten: avaliação da aplicação e do possível incremento da capacidade antioxidante

Com o crescimento do diagnóstico de consumidores com distúrbios associados ao glúten, aliado ao crescente interesse da população em geral à dieta sem glúten, cresce a demanda por produtos que se adequem a uma dieta livre dessa proteína. Os produtos de panificação sem glúten, em especial, são um desafio para a indústria, já que em geral apresentam deficiência nas suas propriedades tecnológicas- funcionais, nutricionais e sensoriais. A fermentação natural é uma possível alternativa para a melhoria de tais características, assim com a adição de ingredientes que apresentem propriedades funcionais. Dessa forma, o presente estudo se propôs a desenvolver pão sem glúten com a utilização de um fermento natural a base de sorgo e suco de uva integral, objetivando incrementar seu perfil tecnológico-funcional, nutricional e funcional. Os pães produzidos apresentaram aceitação global acima de 70% e notas acima de 6 em todas as características avaliadas na análise sensorial. Através das análises de compostos fenólicos totais observou-se um aumento de até 54% do teor de compostos fenólicos com o uso de suco de uva tinta no fermento natural, no entanto, esse aumento não se manteve após o processamento dos pães. Os pães elaborados com fermento natural à base de sucos de uva tinta e branca não apresentaram diferença significativa entre si, assim como em comparação com o pão elaborado com água, nos teores de compostos fenólicos totais e na capacidade antioxidante medida via ORAC. Esse fato indica que a estratégia de utilização de suco de uva para o incremento da capacidade antioxidante de pães sem glúten não se mostrou efetiva. No entanto, comparativamente a outros trabalhos reportados pela literatura, os pães desenvolvidos com sorgo e fermentação natural apresentaram valores de capacidade antioxidante superiores à pães sem glúten elaborados com farinha de arroz, assim como, à pães elaborados com farinha de trigo, e também pães elaborados com adição de farinha de sorgo, todos sem uso de fermentação natural.With the growing amount of diagnosis of gluten associated disorders combined with the increasing interest of the population to the gluten-free diet, the demand for products that don’t present this protein is growing. Baking products are a challenge for this industry, since the ingredients used in these preparations present technological, nutritional, and sensory deficiencies. Sourdough fermentation is an alternative to enhance these characteristics, as well as the addition of ingredients that present functional properties. Therefore, this study aims to develop a gluten-free bread using sorghum and grape juice-based sourdough, with the goal of improving its techno-functional, nutritional, and functional characteristics. Breads made had global acceptance over 70% e rated over 6 in all characteristics evaluated in the sensory analysis. Breads produced with grape juice-based sourdoughs did not present significant differences, as well as in comparison with the water-based sourdough bread, in the total phenolic content and antioxidant capacity measured by ORAC. This indicates that the strategy of using grape juice to increase the antioxidant capacity of gluten-free breads was not effective. However, comparing with other studies found in literature, breads made with sorghum and sourdough presented higher antioxidant capacity values than breads made with rice flour, as well as breads made with wheat flour, and breads made with addition of sorghum flour, all without using sourdough

A blood–CSF barrier function controls embryonic CSF protein composition and homeostasis during early CNS development

AbstractIn vertebrates, early brain development takes place at the expanded anterior end of the neural tube, which is filled with embryonic cerebrospinal fluid (E-CSF). Most of the proteins contained within the E-CSF, which play crucial roles in CNS development, are transferred from the blood serum. Two important questions are how E-CSF is manufactured and how its homeostasis is controlled. In this respect, the timing of the blood–CSF barrier formation is controversial. Recently, the concept of a functional dynamic barrier has been introduced. This type of barrier is different from that found in adults and is adapted to the specific requirements and environment of the developing nervous system. In this study, we injected a number of proteins into the outflow of the heart and into the cephalic cavities and examined their transport rate between these two embryo compartments. The results indicated that a functional blood–CSF barrier dynamically controls E-CSF protein composition and homeostasis in chick embryos before the formation of functional choroid plexuses. We also showed that proteins are transferred through transcellular routes in a specific area of the brain stem, close to the ventral mesencephalic and prosencephalic neuroectoderm, lateral to the ventral midline, in particular blood vessels. This study contributes to our understanding of the mechanisms involved in CNS development, as this blood–CSF interface regulates the composition of E-CSF by regulating its specific composition

A padronização brasileira para um conjunto de figuras é comparável à obtida internacionalmente

Snodgrass & Vanderwart (1980) standardized a set of 260 pictures in the USA for use in studies of cognitive processes that employ pictured objects as laboratory analogues of object themselves. Since then similar norms for this set were obtained in Britain, Spain, Japan and Iceland and a larger set of 400 pictures (including the original 260: Cycowicz et al., 1997) was studied in France and Brazil. The present article provides a comparison of the norms obtained in Brazil and internationally. The pattern of correlations among the Brazilian and other standardizations were equivalent to that previously observed: despite pictures being judged to be of similar familiarity and visual complexity (high positive correlations), name agreement was less correlated, possibly due to differences in the languages spoken in each country and/or in the sample size used in each study. Results confirm the adequacy of the Brazilian norms.Snodgrass & Vanderwart (1980) padronizaram um conjunto de 260 figuras nos EUA para uso em pesquisas de processos cognitivos nas quais figuras de objetos são utilizadas como análogos laboratoriais de objetos propriamente ditos. Desde então normas similares foram obtidas no Reino Unido, Espanha, Japão e Islândia, e um conjunto de 400 figuras (incluindo as 260 originais: Cycowicz et al., 1997) foi estudado na França e no Brasil. O presente estudo traz uma comparação das normas obtidas no Brasil e internacionalmente. O padrão de correlações entre as padronizações brasileira e as demais foi equiparável ao previamente descrito: apesar das figuras serem julgadas como tendo familiaridade e complexidade visual similares (correlações positivas elevadas), a consistência de nomeação foi menos correlacionada, possivelmente devido a diferenças nos idiomas de cada pais pesquisado e/ou devido ao tamanho da amostra empregada em cada estudo. Os resultados confirmaram a adequação das normas brasileiras.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de PsicobiologiaUNIFESP, Depto. de PsicobiologiaSciEL

Conjunto de 400 figuras padronizadas para o português: normas de nomeação, familiaridade e complexidade visual para crianças e adultos

The present article provides normative measures for 400 pictured objects (Cycowicz et al., 1997) viewed by Portuguese speaking Brazilian University students and 5-7 year-old children. Name agreement, familiarity and visual complexity ratings were obtained. These variables have been shown to be important for the selection of adequate stimuli for cognitive studies. Children's name agreement was lower than that of adults. The children also failed to provide adequate modal names for 103 concepts, rated drawings as less familiar and less complex, and chose shorter names for pictures. The differences in ratings between adults and children were higher than those observed in the literature employing smaller picture sets. The pattern of correlations among measures observed in the present study was consistent with previous reports, supporting the usefulness of the 400 picture set as a tool for cognitive research in different cultures and ages.Este artigo fornece dados normativos para o Brasil de um conjunto de 400 figuras de objetos (Cycowicz et al., 1997) avaliados por estudantes universitários e crianças de 5-7 anos. Foram obtidos dados referentes à consistência de nomeação, familiaridade com os objetos representados e complexidade visual dos desenhos. Existem evidências de que essas variáveis são importantes para a adequada seleção de estímulos para estudos cognitivos. A consistência de nomeação das crianças foi menor que a dos adultos. Em relação aos adultos, as crianças não conseguiram nomear adequadamente 103 conceitos, avaliaram os desenhos como sendo menos familiares e menos complexos e escolheram nomes mais curtos para as figuras. As diferenças nas avaliações entre adultos e crianças foram mais altas que as observadas na literatura que envolveu conjuntos menores de desenhos. O padrão de correlações entre medidas observadas no presente trabalho são consistentes com relatos anteriores, o que dá suporte à utilidade desse conjunto de 400 figuras como ferramenta para pesquisas cognitivas em diferentes culturas e faixas etárias.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Department of PsychobiologyUNIFESP, Department of PsychobiologySciEL

Alterações na percepção emocional em usuários de cannabis

The knowledge of cognitive changes related to the regular consumption of cannabis is restricted, particularly concerning to emotional changes. In this study it is reviewed how the use of cannabis can lead to neurological and perception alterations, particularly in what concerns to recognizing emotions and threatening situations. Evidence suggest that it occurs desensibilization of perception related to potentially stressing stimuli that may be relevant for psychopathology development and for addiction to this substance.O conhecimento das alterações cognitivas decorrentes do consumo regular de cannabis é deficiente, em particular no que se refere a sua influência de ordem emocional. Neste estudo é revisado como o uso da cannabis pode levar a alterações neurológicas e perceptuais, em especial quanto ao reconhecimento de emoções e de situações ameaçadoras. São encontradas evidências de dessensibilização na percepção de estímulos estressores, fator de relevância potencial nas discussões sobre o desenvolvimento de psicopatologias e dependência da substância

Bioatividade comparativa entre Melia azedarach (Cinamomo)e Azadirachta indica (Nim) : letalidade para larvas de Aedes aegypti

Orientador : José Domingos FontanaDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da Saúde. Programa de Pós-Graduaçao em Ciencias Farmaceuticas, área de concentraçao: InsumosInclui bibliografiaResumo: No Brasil foram registrados 123.948 casos de dengue em 2003. Melia azedarach (cinamomo ou "santa bárbara") e Azadirachta indica (a árvore nim) são plantas meliáceas originárias da Ásia com futuro promissor para o fito-controle de pragas e de ampla distribuição mundial, sendo a primeira muito comum em todo território brasileiro. Apresentam propriedades bioinseticidas inibindo a alimentação e bloqueando crescimentos de insetos, incluindo a etapa fundamental de quitinogênese ou de formação / regeneração do exo-esqueleto durante a muda ou ecdise. Utilizamos extratos etanólicos, metanólicos e clorofórmico-metanólico de caroços de frutos maduros de cinamomo no controle biológico de Aedes aegypti, impedindo a evolução das larvas até a fase adulta, ou seja, impondo letalidade. Extratos equivalentes de Nim também foram ensaiados, normalizando as concentrações dos sólidos totais de todos ensaios em um solvente de menor toxicidade, o etanol, também empregado nos controles. Nestes ensaios de letalidade para as larvas do mosquito-da-dengue os parâmetros explorados foram então a concentração de princípios bioativos das duas meliáceas, por separado, a faixa de temperatura (25°C e 30°C) e ainda a alimentação ou não das larvas (ração padrão) durante o tempo de ação dos fitopesticidas naturais. As leituras foram feitas após 48 horas e determinadas as CL50, CL95 e CL99. Os resultados com M. azedarach (cinamomo) são inéditos e as CL(s) obtidas, muito promissoras tais como as CL50 de 0,035g% e de 0,059g% a 25°C, respectivamente obtidos com extrato etanólico / com alimentação e com extrato clorofórmicometanólico / sem alimentação, este segundo coincidindo em eficiência com o primeiro no caso da adoção de alimentação. O extrato mais polar, metanólico, resultou em letalidade ainda mais pronunciada para as larvas com uma CL50 de 0,014g% a 25°C na ausência de alimento, comparativamente à CL50 de apenas 0,0043g/%, elevando-se a temperatura do ensaio para 30°C, este último o mais expressivo de todos resultados obtidos. Os dados referentes às CL50 para A. indica (nim) estão de acordo com os encontrados na literatura e se situam, na média dos ensaios, abaixo dos valores nesta dissertação obtidos com M. azedarach (cinamomo), com destaque para o extrato etanólico de Nim com uma CL50 a 30°C de 0,017g% no caso de larvas alimentadas. No escopo de viabilizar uma exploração ainda mais racional e preservacionista do cinamomo - até mesmo como um mecanismo de inclusão social para pequenas comunidades sujeitas à febre da dengue - ou seja, a integralidade de uso dos frutos colhidos, a polpa envoltória deles (mesocarpo) foi utilizada, com sucesso, para o cultivo da levedura astaxantinogênica Xanthophyllomyces dendrorhous (antes, Phaffia rhodozyma), cujo pigmento carotenóide oxigenado (astaxantina) é amplamente utilizado em aquicultura e avicultura.Abstract: It has been registered 123.948 cases of dengue in Brazil during 2003. Melia azedarach ("cinnamon" or "santa bárbara) and Azadirachta indica (neem) are meliaceae plants originally from Asia with a promising future for pests phytocontrol and worldwide distribution, the first one being very common in the Brazilian territory. They display bioinsecticide properties through the feed deterrance and blocking insect growth what includes the oustanding step of chitinogenesis, namely the formation / regeneration of the insect exoskeleton during the moult (ecdisis). Ethanolic, methanolic, and chloroformic-methanolic extracts from ripen fruit kernels were used in the biological control of Aedes aegypti, hampering the evolution of larvae till the adult phase imposing their death. Similar extracts from Nim were assayed, too, normalizing the total solids concentration of all extracts but in a less toxic solvent, ethanol, also used in the controls. In these lethality assays to the dengue mosquito the explored parameters were then the concentration of bioactives from both meliaceae (separately), the temperature range (25°C or 30°C), and the larvae feeding or not (standard fodder) during the time course of the action of the natural phytopesticides. Readings were carried out after 48 h for the determination of LC50, LC95, and LC99. Results obtained with M. azedarach ("cinnamon") are original and the respective LC(s), promising as follows: LC50 0.035g% and 0.059% at 25°C, respectively obtained with the ethanolic extract / with feeding and with the chloroformic-methanolic extract / without feeding, the latter in coincidence with the first one in the case of larvae feeding. The most polar extract, methanolic, resulted in a even more marked lethality rate with a LC50 of 0.014g% at 25°C, without feeding, comparatively to a LC50 of only 0.0043g% when the temperature was raised to 30°C, this result being the most effective amongst all. Data obtained for the LC50 from A. indica (neem) were in accordance with the bibliographic references and, on average, below the data herein obtained with M. azederach ("cinnamon"), except for Neem ethanolic extract LC50 0.017g% at 30°C in the case of fed larvae. Aiming at a more rational and preservation-based exploration of the botanical source "cinnamon" - attaining a mechanism of social inclusion for small communities under the risk of dengue fever - namely, a integrate use of the collected fruits, the pulp around (mesocarp) was used, successfully, for the culture of the red yeast Xanthophyllomyces dendrorhous (formerly, Phaffia rhodozyma), whose oxygenated carotenoid pigment (astaxanthin) is widely employed in fish farming and poultry