Alteraciones de los polifenoles en la etapa de poscosecha

Si bien algunos compuestos fenólicos pueden ser sintetizados por bacterias y hongos su prevalencia y diversidad se hizo mucho mayor en las plantas superiores. Se considera que sus funciones iniciales estuvieron relacionadas con la adaptación de las plantas a la vida terrestre desde los ambientes acuáticos: la formación de vasos de conducción de agua y sales, la provisión de barreras contra la desecación y la absorción de la radiación ultravioleta. Actualmente, participan en diversos procesos en plantas tales como la regulación hormonal, la defensa, la protección ante el estrés y la comunicación otros organismos. En la actualidad, con más de 8000 estructuras identificadas los polifenoles son los grupos de compuestos secundarios más ubicuos en el reino vegetal. La enorme diversidad de polifenoles se sintetiza gracias a la plasticidad en términos de sustratos posibles, para las enzimas biosintéticas de esta ruta. Otro mecanismo que favorece la generación de compuestos tan diversos a partir de unas pocas enzimas es la formación de complejos multi-enzimáticos. Estos canales metabólicos pueden al variar su conformación sintetizar diferentes polifenoles apartir de un grupo relativamente pequeño de intermediarios comunes.Facultad de Ciencias Exacta

Alteraciones de los polifenoles en la etapa de poscosecha

Si bien algunos compuestos fenólicos pueden ser sintetizados por bacterias y hongos su prevalencia y diversidad se hizo mucho mayor en las plantas superiores. Se considera que sus funciones iniciales estuvieron relacionadas con la adaptación de las plantas a la vida terrestre desde los ambientes acuáticos: la formación de vasos de conducción de agua y sales, la provisión de barreras contra la desecación y la absorción de la radiación ultravioleta. Actualmente, participan en diversos procesos en plantas tales como la regulación hormonal, la defensa, la protección ante el estrés y la comunicación otros organismos. En la actualidad, con más de 8000 estructuras identificadas los polifenoles son los grupos de compuestos secundarios más ubicuos en el reino vegetal. La enorme diversidad de polifenoles se sintetiza gracias a la plasticidad en términos de sustratos posibles, para las enzimas biosintéticas de esta ruta. Otro mecanismo que favorece la generación de compuestos tan diversos a partir de unas pocas enzimas es la formación de complejos multi-enzimáticos. Estos canales metabólicos pueden al variar su conformación sintetizar diferentes polifenoles apartir de un grupo relativamente pequeño de intermediarios comunes.Facultad de Ciencias Exacta

Alteraciones de los polifenoles en la etapa de poscosecha

Si bien algunos compuestos fenólicos pueden ser sintetizados por bacterias y hongos su prevalencia y diversidad se hizo mucho mayor en las plantas superiores. Se considera que sus funciones iniciales estuvieron relacionadas con la adaptación de las plantas a la vida terrestre desde los ambientes acuáticos: la formación de vasos de conducción de agua y sales, la provisión de barreras contra la desecación y la absorción de la radiación ultravioleta. Actualmente, participan en diversos procesos en plantas tales como la regulación hormonal, la defensa, la protección ante el estrés y la comunicación otros organismos. En la actualidad, con más de 8000 estructuras identificadas los polifenoles son los grupos de compuestos secundarios más ubicuos en el reino vegetal. La enorme diversidad de polifenoles se sintetiza gracias a la plasticidad en términos de sustratos posibles, para las enzimas biosintéticas de esta ruta. Otro mecanismo que favorece la generación de compuestos tan diversos a partir de unas pocas enzimas es la formación de complejos multi-enzimáticos. Estos canales metabólicos pueden al variar su conformación sintetizar diferentes polifenoles apartir de un grupo relativamente pequeño de intermediarios comunes.Facultad de Ciencias Exacta

RNA virus detection and identification using techniques based on DNA hybridization

Humanity is constantly confronted with the emergence and reemergence of infectious diseases. Many of them produce large or devastating epidemics, like AIDS (HIV) and Ebola. Others have been long neglected, yet pose immediate threats to global public health as evidences the abrupt emergence of Zika virus in South America and its association with microcephaly in babies. The examples illustrate, that many of these diseases are provoked by RNA viruses. One of the first steps in understanding and eliminating those threats is the development of sensitive and rapid diagnostic methods. A general and relatively rapid method is the direct detection and examination of the agent’s genome. However, the nature of (re)emerging RNA viruses poses a series of very specific problems for the design of such methods. Therefore, a systematic approach was proposed for the design of DNA-hybridization-base methods to detect and characterize RNA viruses that will have both a high sensitivity and a specificity sufficiently broad to detect, per reaction, down to a single copy of any of the possible variants of the viral genome. Following this approach a series of assays were designed, developed or adapted and put into use for detection and characterization of important RNA viruses. One of those viruses is West Nile virus (WNV), which after its explosive introduction into USA become the most widespread flavivirus throughout the world and, consequently, many countries began an intensive monitoring. While existing assay detected predominantly the Lineage 1, in Europa Lineage 2 was expected. Two new RT-qPCR for the detection of both lineages were developed, and reportedly used by independent laboratories. Due to more than 50000 associated deaths per year, the Hepatitis E virus also received an increasing attention to elucidate novel routes of transmission. This virus (especially genotype 3) has the zoonotic potential of transmission from pigs and wild boar to humans. RT-qPCR and nested qPCR for detection and characterization of this virus as well as a methodology for subtyping were developed and the first detected case of subtype 3b in a German wild animal was documented. In addition a novel assay for flaviviruses conformed by a RT-qPCR coupled with a low density DNA microarray was developed, which enabled the identification of WNV in mosquitoes from Greece. A RT-qPCR suitable for surveillance and diagnostic of all known variants of Venezuelan equine encephalitis virus was developed too. A causative agent of hemorrhagic infections, the Ngari virus, was detected and characterized in animal samples from Mauritania. These achievements were supported by the development of software applications for selection and visualization of primers and probes from aligned DNA sequences and for modeling of DNA hybridizations using unaligned sequences. In conclusion a general methodology for rapid development of sensitive diagnostic methods based in DNA-hybridization technics (PCR, sequencing and microarray) was stablished and successful applications are reported.Die Menschheit wird ständig durch das Auftreten neuer und neuartiger Infektionskrankheiten wie HIV (AIDS) und Ebolafieber bedroht, die große und verheerende Epidemien auslösen. Andere wurden lange vernachlässigt, doch stellen sie eine unmittelbare Bedrohung für die öffentliche Gesundheit weltweit dar, wie sie durch das Auftreten des Zika-Virus in Südamerika und seine Assoziation von Neugeborenen mit Mikrozephalie belegt wurde. Viele dieser Krankheiten werden durch RNA-Viren verursacht. Daher ist ein erster Schritt zur Beseitigung solcher Bedrohungen die Entwicklung von sensitiven und schnellen diagnostischen Methoden, wobei in der Regel ein Teil des Genoms direkt detektiert wird. Da die Eigenschaften der RNA-Viren für das Design entsprechender Methoden sehr spezifischen Probleme darstellen, wurde ein systematischer Ansatz mit DNA-Hybridisierungs-basierten Methoden gewählt, mit dem hochsensitiv alle Varianten des viralen Genoms detektieren werden können. Anhand dieses Ansatzes wurden Assays entwickelt oder angepasst und für den Nachweis und die Charakterisierung wichtiger RNA-Viren eingesetzt. Im Rahmen der Arbeit wurde eine RT-qPCR zum Nachweis des West-Nil-Virus (WNV) und seiner Linien 1 und 2 entwickelt. WNV ist weltweit verbreitet und kann beim Menschen zu schweren neurologischen Erkrankungen führen. Daneben wurden RT-qPCR Assays zur Diagnostik von Hepatitis-E-Viren (HEV) und aller Varianten der Venezolanische Pferde-Enzephalomyelitis (VEEV) entwickelt. Das HEV ist, mit weltweit mehr als 50000 Todesfällen im Jahr, der häufigste Erreger akuter Leberentzündungen. Das Virus, insbesondere der Genotyp 3, kommt auch in Deutschland vor, wobei als Hauptwirte Haus- und Wildschweine angesehen werden. Die Subtypisierung der HEV Genotypen 3 wurde aktualisiert und erstmals der Subtyp 3b in einem Wildtier in Europa dokumentiert. VEE ist eine tödlich verlaufende Viruskrankheit der Pferde, die auch auf den Menschen übertragen werden kann. Das Virus wird ebenfalls über Stechmücken übertragen und kommt bislang in Südamerika vor. Zudem konnte mit Hilfe einer RT-qPCR erstmals das Ngarivirus, ein hämorrhagisches Orthobunyavirus, in Ziegen in Mauretanien detektiert und charakterisiert werden. Schließlich wurde ein RT-qPCR Assay entwickelt, der - gekoppelt mit einem DNA-Microarray - Flaviviren spezifisch detektieren und erkennen kann. Mittels diese Assays konnten in Stechmückenproben aus Griechenland WNV der Linie 2 detektiert werden. Diese Ergebnisse wurden durch die Entwicklung von zwei Software-Tools unterstützt: Eines für Visualisierung von DNA-Sequenzalignments zur Selektion von Primern und Sonden und eines für die thermodynamische Modellierung von DNA-Hybridisierungen wobei keine Sequenzalignments notwendig sind. Zusammenfassend konnte mit Hilfe dieser Methodik eine schnelle Entwicklung von sensitiven diagnostischen Methoden, die auf DNA-Hybridisierungstechniken (PCR, Sequenzierung und Microarray) basieren, etabliert und in einer Reihe von Anwendungen erfolgreich eingesetzt werden

Additives and Protein-DNA Combinations Modulate the Humoral Immune Response Elicited by a Hepatitis C Virus Core-encoding Plasmid in Mice

Humoral and cellular immune responses are currently induced against hepatitis C virus (HCV) core following vaccination with core-encoding plasmids. However, the anti-core antibody response is frequently weak or transient. In this paper, we evaluated the effect of different additives and DNA-protein combinations on the anti-core antibody response. BALB/c mice were intramuscularly injected with an expression plasmid (pIDKCo), encoding a C-terminal truncated variant of the HCV core protein, alone or combined with CaCl2, PEG 6000, Freund's adjuvant, sonicated calf thymus DNA and a recombinant core protein (Co.120). Mixture of pIDKCo with PEG 6000 and Freund's adjuvant accelerated the development of the anti-core Ab response. Combination with PEG 6000 also induced a bias to IgG2a subclass predominance among anti-core antibodies. The kinetics, IgG2a/IgG1 ratio and epitope specificity of the anti-core antibody response elicited by Co.120 alone or combined with pIDKCo was different regarding that induced by the pIDKCo alone. Our data indicate that the antibody response induced following DNA immunization can be modified by formulation strategies

Effects of ethylene and 1-MCP on quality maintenance of fresh cut celery

Ethylene is accepted to be a key player in the regulation of climacteric fruit ripening and senescence of leafy vegetables. In contrast, there is still disparity in the literature on the role it may have on quality deterioration of edible petioles. In this work, we evaluated the influence of the ethylene generator 2-chloroethylphosphonic acid (Ethephon) and the ethylene action inhibitor 1-methylcyclopropene (1-MCP) on quality maintenance of fresh cut celery. Commercially mature stalks from self-blanching celery cv. Golden Clause were cut into 2 cm-long slices. Samples from the apical and basal petiole zones were segregated and treated with 2000 mg L−1 2-chloroethylphosphonic acid or with 1 μL L−1 1-MCP. Corresponding slices without any treatment were used as control. Samples were packed and stored for 0, 6, 13 and 20 d at 4 °C and during this period celery visual deterioration (VD), respiration, weight loss and aerobic mesophilic bacteria, yeasts and molds counts were determined. Carotenoids, chlorophylls, phenolics, ascorbic acid, polyphenol oxidase (PPO), sugars, acidity, cell wall content and consumer acceptability were also evaluated. Ethylene had no major effects on weight loss, PPO, phenolic, sugars, acidity, and ascorbic acid. Instead, it increased respiration and accelerated chlorophyll degradation and surface yellowing. These changes were delayed in 1-MCP treated celery, which also maintained lower mesophilic bacteria and yeast counts, showed lower incidence of soft rots. 1-MCP treated celery received higher consumer acceptability scores. The effects were more marked on the samples obtained from the apical region of the petioles. Overall, results reassess the role of ethylene on celery petiole metabolism and indicate that 1-MCP treatments may be useful to supplement the benefits of refrigeration and extend the shelf life of fresh cut self-blanching celery.Fil: Massolo, Juan Facundo. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: González Forte, Lucía del Sol. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Concellón, Analía. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Viña, Sonia Zulma. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Curso Bioquímica y Fitoquímica; ArgentinaFil: Vicente, Ariel Roberto. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Criotecnología de Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Laboratorio de Investigación en Productos Agroindustriales; Argentin