Evaluation of Sprague Dawley rats as biomodels to detect damage on DNA in leukocytes of peripheral blood and hepatic cells, by means of the comet assay.

Las rupturas de cadena simple y la formación de sitios lábiles al álcali en el ADN han sido parámetrosampliamente utilizados para la detección de genotoxicidad y han sido demostradas sus implicacionesen enfermedades degenerativas, el cáncer, y recientemente están vinculadas al estrés oxidativo. Esteartículo tuvo como objetivo realizar una comparación en cuanto a la frecuencia espontánea (basal) einducida con ciclofosfamida, de las rupturas de cadena simple y la formación sitios lábiles al álcalis enel ADN de leucocitos de sangre periférica y células hepáticas en ratas Sprague Dawley de ambossexos, mediante el ensayo Comet. Se administraron 10 ratas/sexo/grupo durante 14 días, utilizando ungrupo control negativo (no administrado), dos controles con sustancias vehículo y un control positivoadministrado con ciclofosfamida 50 mg/kg por vía intraperitoneal. Pasado este tiempo se realizo laelectroforesis alcalina de células inviduales en gel de leucocitos de sangre periférica y de las célulashepáticas, para demostrar el posible daño en el ADN. Se concluyó que esta línea de rata constituye unbuen modelo experimental in vivo para demostrar el daño primario en el ADN dado la baja frecuenciaespontánea de los indicadores analizados. Además bajo nuestras condiciones experimentales resultamás factible la utilidad de este biomodelo en las determinaciones de daño en leucocitos de sangreperiférica en ambos sexos.The induction of strand breaks (SB) or alkali-labile sites formation on DNA have been parametersbroadly used for the genotoxicity detection and their implications have been demonstrated indegenerative illnesses, the cancer, and recently linked to the oxidative stress. This article had asobjective to carry out a comparison to the spontaneous basal frequency and induced withcyclophosphamide, the induction of strand breaks or alkali-labile sites formation on DNA ofleukocytes of peripheral blood and hepatic cells of Sprague Dawley rats of both sexes, by means of theComet Assay. We administered 10 rats/sex/group for 14 days, using a negative control group (notadministered), two substance-vehicle controls and positive control cyclophosphamide administeredwith 50 mg/kg, intraperitoneal route. The last time of administered was performed the alkalineelectrophoresis them gel individual cells from leukocytes of peripheral blood and hepatic cells todemonstrate the possible damage to the DNA. These rat line constitute a good in vivo experimental model to demonstrate the primary damage in the DNA given the low spontaneous frequency of theanalyzed indicators. Also under our experimental conditions it is more feasible the biomodels utility inthe determinations of damage in leukocytes of peripheral blood in both sexes

Cell antigenic profile of Leptospira strains isolated in Leon and Chinandega, Nicaragua.

Objetivo. El siguiente trabajo se desarrollo con el objetivo de determinar los perfiles antigénicos celulares que sean reconocidos por el suero de personas vacunados con vax-SPIRAL® de cepas obtenidas de los departamentos de León y Chinandega.Métodos. Se analizaron cepas aisladas de hemocultivos tomadas de casos con sospecha clínica de leptospirosis, determinándose los perfiles antigénicos mediante electroforesis de células enteras y western blotting usando como anticuerpos, sueros provenientes de personas vacunadas con vax-SPIRAL®.Resultados y conclusiones. Se evidenció una gran homología antigénica entre todas las cepas estudiadas. Los resultados del presente estudio sugieren que en los departamentos de León y Chinandega circulan cepas de L. interrogans con un fuerte reconocimiento antigénico frente a sueros provenientes de personas vacunadas con vax-SPIRAL®.Objective.The following work was development with the objective of determining the profiles cellular antigenics that are recognized by the serum of people vaccinated with vax-SPIRAL® of obtained strains of the León and Chinandega departments.Methods. Blood cultures samples were analyzed taken in sharp phase to cases with suspicion leptospirosis clinic, being determined the profiles antigenics by means of electrophoresis of whole cells and western blotting using as antibodies, serums coming from people vaccinated with vax-SPIRAL®.Results and conclusions. A great antigenic homology was evidenced among all the studied strains. The present study results suggest that in León and Chinandega departments circulate L. interrogans strains with a strong antigenic recognition front of serums of people vaccinated with vax-SPIRAL

Impact of changes in cell multiplication stage during the preparation of sensitizing substance of red cells used in the serological diagnosis of leptospirosis.

Introducción: En Cuba desde 1981 se tiene implementada la hemoaglutinación indirecta como técnica diagnostica de Leptospirosis de forma alternativa en ausencia de otras que pueden ser más costosas pero efectivas en los diferentes estadios de la enfermedad. Para el desarrollo de la técnica se hace necesaria la sustancia sensibilizante de eritrocitos (SSE), asumiendo su producción el Instituto Finlay en el año 2009, a partir de una tecnología obsoleta en la etapa de multiplicación celular.Objetivo. El objetivo de este trabajo fue realizar cambios en esta etapa para obtener la SSE con los medios de cultivos disponibles en la planta de producción para el óptimo rendimiento del producto, sin afectar la actividad biológica como parámetro fundamental de calidad.Métodos. Fueron formados 8 grupos experimentales teniendo en cuenta: cepa productora (cepa LABIOFAM y cepa Finlay) medio de cultivo (MK y EMJH) y condiciones de cultivos (estático o agitado).Resultados y conclusión. Se obtuvo como resultado que la mejor variante fue en la que se utilizó la cepa de LABIOFAM, crecimiento en medio MEJH y agitado, con una disminución considerable en el tiempo de obtención de la SSE mediante esta nueva tecnología, con un título consistente con las exigencias de calidad. Permitiendo así comenzar los diferentes diseños de estudios de estabilidad y registro del producto.Introduction: In Cuba since 1981 has implemented the indirect hemagglutination as an alternative technique of Leptospirosis diagnosed, in the absence of others that may be more costly but effective at different stages of the disease. For the development of the technique requires the Erythrocytes Sensitize Substance (ESS), assuming the production Finlay Institute in 2009, from obsolete technology in the process of cell multiplication.Objective: The aim of this study was to make changes at this stage to obtain the ESS with the culture media available at the plant for optimum product performance, without affecting the biological activity as the basic parameter of quality.Methods: Eight experimental groups were formed according to multifactorial design, taking into account: production strain (LABIOFAM or Finlay strain of L. biflexa Patoc I), culture medium (MK and MEJH) and culture conditions (static or agitated).Results and conclusion: We obtained as a result that the best variant was the combination (LABIOFAM strain, growth in MEJH and agitated), with a considerable decrease in the time of the ESS obtaining by means of this new technology, with a consistent title with the demands of quality. This work allowed to use the best variant to begin the different designs of stability studies of the product

Comparison of micronuclei frequency in bone marrow cells of three rat lines

The aim of this paper is to compare the spontaneous and induced with cyclophosphamide micronucleus indexes in bone marrow cells of the Sprague Dawley, Lewis and Wistar rat lines. Five experimental groups were formed (10 animals of each sex and of each line, in every group). The first group was used as the negative control (intact animals), the second one was exposed to oral administration of drugs; other conditions were the same as for the other groups. The third group was treated with 2 % Tween 65 and the fourth group was treated with 0.9 % NaCl. Both substances were administered by oral way to 2 ml/kg during 14 days. The fifth group was treated intraperitoneally with strong mutagen cyclophosphamide in the dose of 50 mg/kg (10 ml/kg in solution), on 48th and 24th hours before euthanasia. The Sprague Dawley line (both sexes) was significantly different from the other lines. Rats of this line had lower index of spontaneous formation of micronuclei, higher index of cyclophosphamide­induced micronucle formation, percent of micronucleated erythrocytes in bone marrow and the index of cytotoxicity. The results obtained make it possible to identify the most appropriate line of rats as model animals for studies of genotoxicity. It will allow also to obtain more accurate estimates of genotoxicity of various substances.Сравнивали спонтанные и индуцированные циклофосфамидом микроядерные индексы в клетках костного мозга трех линий крыс – Sprague Dawley, Льюис и Вистар. Сформировали пять экспериментальных групп (по 10 животных каждого пола и линии в каждой группе). Первую группу использовали в качестве негативного контроля (интактные животные), вторая служила контролем влияния перорального приема препаратов. Все условия содержания были одинаковыми для всех групп животных. Крыс третьей группы обрабатывали 2 % Tween 65, а четвертой группы – 0,9 % NaCl. Оба вещества вводили перорально в дозе 2 мл/кг в течение 14 дней. Животных пятой группы обрабатывали внутрибрюшинно циклофосфамидом в дозе 50 мг/кг (10 мл/кг раствора), за 48 и 24 ч до эвтаназии. Линия Sprague Dawley (оба пола) существенно отличается от других. Крысы этой линии имели низкие показатели спонтанного образования микроядер и высокий индекс при индукции циклофосфамидом, а также процент эритроцитов с микроядрами в костном мозге и индекс цитотоксичности. Полученные результаты позволяют определить наиболее подходящие линии крыс в качестве модельных животных для изучения генотоксичности. Это также позволит получать более точные оценки генотоксичности различных веществ. Порівнювали спонтанні та індуковані циклофосфамідом мікроядерні індекси в клітинах кісткового мозку трьох ліній щурів – Sprague Dawley, Люіс і Вистар.Сформували п’ять експериментальних груп (по 10 тварин кожної статі і лінії в кожній групі). Першу групу використали як негативний контроль (інтактні тварини), друга слугувала контролем впливу перорального прийому препаратів. Всі умови утримання були однаковими для всіх груп тварин. Щурів третьої групи обробляли 2 % Тween 65, а четвертої групи – 0,9 % NaCl. Обидві речовини вводили перорально в дозі 2 мл/кг впродовж 14 днів. Тварин п’ятої групи обробляли внутрішньочеревно циклофосфамідом в дозі 50 мг/кг (10 мл/кг розчину), за 48 і 24 год до евтаназії. Лінія Sprague Dawley (обидві статі) істотно відрізнялась від інших. Щури цієї лінії мали низькі показники спонтанного утворення мікроядер і високий індекс при індукції циклофосфамідом, а також відсоток еритроцитів з мікроядрами в кістковому мозку та індекс цитотоксичності. Отримані результати дозволяють визначити найбільш відповідні лінії щурів як модельних тварин для вивчення генотоксичності. Це також дозволить отримувати точніші оцінки генотоксичності різних речовин

The relationship between method of anastomosis and anastomotic failure after right hemicolectomy and ileo-caecal resection: an international snapshot audit.

BACKGROUND: Anastomosis technique following right sided colonic resection is widely variable and may affect patient outcomes. This study aimed to assess the association between leak and anastomosis technique (stapled versus handsewn) METHODS: This was a prospective, multicentre, international audit including patients undergoing elective or emergency right hemicolectomy or ileo-caecal resection operations over a two-month period in early 2015. The primary outcome measure was the presence of anastomotic leak within 30 days of surgery, using a pre-specified definition. Mixed effects logistic regression models were used to assess the association between leak and anastomosis method, adjusting for patient, disease and operative cofactors, with centre included as a random effect variable. RESULTS: This study included 3208 patients, of whom 78.4% (n=2515) underwent surgery for malignancy and 11.7% (n=375) for Crohn's disease. An anastomosis was performed in 94.8% (n=3041) of patients, which was handsewn in 38.9% (n=1183) and stapled in 61.1% (n=1858) cases. Patients undergoing handsewn anastomosis were more likely to be emergency admissions (20.5% handsewn versus 12.9% stapled) and to undergo open surgery (54.7% versus 36.6%). The overall anastomotic leak rate was 8.1% (245/3041), which was similar following handsewn (7.4%) and stapled (8.5%) techniques (p=0.3). After adjustment for cofactors, the odds of a leak were higher for stapled anastomosis (adjusted odds ratio 1.43, 95% confidence interval 1.04-1.95, p=0.03). DISCUSSION: Despite being used in lower risk patients, stapled anastomosis was associated with an increased anastomotic leak rate in this observational study. Further research is needed to define patient groups in whom a stapled anastomosis is safe. This article is protected by copyright. All rights reserve