Imunossensor para o diagnóstico da Doença de Alzheimer através da detecção do autoanticorpo Anti-βA42

Alzheimer’s disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease, responsible for the most case of dementia. This work offers a promising solution that seeks the early disease diagnosis through the immunosensor development for autoantibody detection against amyloid beta with 42 amino acids (Aβ42). The immunosensor was built by immobilizing Aβ42 with silk fibroin (SF) on screen-printed carbon electrode and gold interdigited electrode for electrochemical and electrical measurement, respectively. Films containing SF and SF with nonspecific peptide were used as control systems. It was observed that antibody (anti-Aβ42) interaction with the immobilized peptide with SF had a different electrical response than antiβA42 interacted with control systems. The data obtained in the previous measurements were treated using Principal Component Analysis. The impedance spectroscopy tests had better results for the film with Aβ42 peptide on SF, there was more signal variation for each anti-Aβ42 concentration. No specific antibody was tested with these immunosensor and the observed behavior was similar to the control films, confirming its specificity. Cyclic voltammetry and impedance tests were performed on film containing Aβ42 with real samples of serum and cerebrospinal fluid, from healthy people and people with Alzheimer’s disease. The immunosensor with Aβ42 peptide on SF can distinguish the positive samples for AD from negative ones, through impedance analytical method, a system that indicating to be a good detector of autoantibody against amyloid beta, showing high sensitivity, specificity and with potential for AD prognosis in real samples.A doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa progressiva, responsável pela maioria dos casos de demência. Este trabalho traz uma solução promissora que busca o diagnóstico precoce da doença através do desenvolvimento de um imunossensor para detecção de autoanticorpos contra o peptídeo betaamiloide com 42 aminoácidos (βA42). O imunossensor foi construído através da imobilização da βA42 com a fibroína da seda (SF) sobre eletrodos impressos de carbono e eletrodos interdigitados de ouro para medidas eletroquímicas e elétricas, respectivamente. Filmes contendo SF e SF com um peptídeo não específico foram utilizados como controle. Foi observado que o anticorpo (anti-βA42) interagindo com o peptídeo imobilizado com a SF teve resposta elétrica diferente de quando o antiβA42 interagiu com os sistemas controle. Os dados obtidos nas medidas anteriores foram tratados utilizando a ferramenta estatística Análise de Componentes Principais. Os ensaios de espectroscopia de impedância apresentaram melhores resultados para o filme com a βA42 sobre a SF, tendo maior variação do sinal para cada concentração de anti-βA42. Um anticorpo não específico foi testado neste imunossensor e o comportamento observado foi semelhante aos filmes controle, confirmando sua especificidade. Ensaios de voltametria cíclica e impedância foram realizados nos filmes contendo a βA42 com amostras reais de soro e líquido cefalorraquiano de pessoas saudáveis e de portadores da doença de Alzheimer. O imunossensor contendo o peptídeo βA42 sobre a SF conseguiu distinguir as amostras positivas para DA das negativas, através do método analítico de impedância, sistema que indica ser um bom detector dos autoanticorpos contra a beta-amilóide, mostrando alta sensibilidade, especificidade e com potencial de prognóstico da DA em amostras reais.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2020